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结缔组织生长因子在大鼠移植心脏急性排斥反应期的表达(英文)

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中南大学学报（医学版） 2008年第5期33卷 425-431页

作者：袁运长夏振坤章庆春尹邦良中南大学湘雅二医院胸心外科长沙410011 广东省心血管病研究所广州510080

目的:检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在大鼠移植心脏急性排斥期(acute rejection,AR)的表达,并探讨其与移植心脏心肌纤维化的关系。方法:取Wister大鼠16只作为供体,取SD大鼠16只作为受体,进行腹部异位心... 详细信息

目的:检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在大鼠移植心脏急性排斥期(acute rejection,AR)的表达,并探讨其与移植心脏心肌纤维化的关系。方法:取Wister大鼠16只作为供体,取SD大鼠16只作为受体,进行腹部异位心脏移植,采用10 mg/(kg.d)环孢霉素A,40 mg/(kg.d)骁悉和3 mg/(kg.d)甲泼尼龙三联免疫抑制疗法,2周后取其中10例移植心脏标本作为实验组,10例健康Wister大鼠心脏标本作为对照组(normal heart,NH)。采用HE及van Gieson染色观察心肌病理形态、心脏血管狭窄程度;并进行纤维化的半定量评分。采用免疫组化半定量方法检测CTGF在心脏组织中的表达,并分析其与心肌纤维化的相关性。结果:移植心脏血管壁及心肌间质组织内有大量粒细胞浸润,呈典型的急性排斥反应期改变;移植心脏血管内膜及大量纤维组织增生,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);CTGF在移植心脏组织中有明显表达,且主要表达于血管壁及心肌损伤部位,而正常心脏无表达,CTGF灰度值为(AR vs NH:103.52±6.42 vs.182.61±8.72,P<0.05)。CTGF灰度值与移植心脏纤维化显著负相关(r=-0.734,P<0.01)。结论:CTGF在急性移植心脏组织中有明显表达且可能与移植心脏心肌纤维化相关。

关键词：急性排斥反应结缔组织生长因子纤维化心脏移植

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大鼠异位心脏移植模型的改进及组织学研究

中国临床解剖学杂志 2007年第5期25卷 571-574页

作者：洪朝王电军章庆春刘建新中南大学湘雅三医院胸心外科湖南长沙410013 广东省心血管病研究所广州510100

目的:在Ono模型基础上,建立简单、可靠的大鼠腹腔异位心脏移植模型。方法:以Wister大鼠为供体,SD大鼠为受体,改良建立大鼠腹腔异位心脏移植模型,分为3组:正常Wister大鼠作为对照组;移植后亚急性排斥反应组(术后2周);移植后慢性排斥反应... 详细信息

目的:在Ono模型基础上,建立简单、可靠的大鼠腹腔异位心脏移植模型。方法:以Wister大鼠为供体,SD大鼠为受体,改良建立大鼠腹腔异位心脏移植模型,分为3组:正常Wister大鼠作为对照组;移植后亚急性排斥反应组(术后2周);移植后慢性排斥反应组(术后8周)。分组喂养后按规定时间收获心脏标本进行组织形态学观察。结果:手术成功率为87.5%。其中麻醉过深死亡2例,疑青霉素过敏死亡1例,术中出血过多死亡4例。供心移植吻合时间(24.3±7.6)min,供心冷缺血时间(34.5±8.2)min,腹部触诊移植心脏搏动时间(16.8±7.4)d。组织形态学观察示:移植心脏心肌组织内有大量粒细胞浸润;随着移植后时间延长,CAV逐渐加重,冠脉数量减少,心肌萎缩并心肌纤维化发生。结论:改良Ono模型建立的心脏移植模型具有简单、可靠的优点。收获的移植心脏标本在组织形态学上反映了CAV和心肌纤维化发生、发展的过程,为研究心脏移植后相关疾病提供理想的组织标本。

关键词：鼠心脏移植模型组织学

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研究大鼠移植心脏组织中能量代谢模式的变化

中华器官移植杂志 2007年第10期28卷 577-581页

作者：章庆春尹海辉尹邦良尹倪肖学钧广东省人民医院医学研究中心广东省心血管病研究所广州510080 中南大学湘雅医院烧伤科中南大学湘雅二医院胸心外科

目的分析大鼠移植心脏组织中与能量代谢相关酶的变化,探讨移植后心脏能量代谢模式的转变。方法建立大鼠心脏移植的Ono模型,采用蛋白质组学技术比较同基因移植组(供、受者均为Lewis大鼠)与异基因移植组(供者为Lewis大鼠,受者为Wistar大鼠... 详细信息

目的分析大鼠移植心脏组织中与能量代谢相关酶的变化,探讨移植后心脏能量代谢模式的转变。方法建立大鼠心脏移植的Ono模型,采用蛋白质组学技术比较同基因移植组(供、受者均为Lewis大鼠)与异基因移植组(供者为Lewis大鼠,受者为Wistar大鼠)心脏移植后2周和8周时心脏组织中的蛋白质变化;通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法分析获得肽质量指纹图谱,经Matrix Science查询软件搜索获得匹配的蛋白质。结果同基因移植组与异基因移植组比较,发现了65个差异表达的蛋白质,其中与心肌能量代谢相关的酶有18个。结论异基因心脏移植后心肌能量代谢发生转变,线粒体三羧酸循环发生障碍,但线粒体电子传递和ATP跨线粒体外膜的跨膜转运能力增强,糖酵解增加,脂肪酸的氧化利用增强,支链氨基酸的氧化受抑制。

关键词：大鼠心脏移植能量代谢蛋白质组

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改良的大鼠左肺原位移植模型

中华器官移植杂志 2007年第2期28卷 92-94页

作者：王电军章庆春刘建新袁运长尹邦良中南大学湘雅三医院胸心外科长沙410013 中南大学湘雅二医院胸心外科

目的在建立大鼠左肺原位移植模型中采用一种新的缝合方法。方法左肺原位移植模型的供、受者均为SD大鼠。为了使肺静脉张开便于吻合，左肺移植期间持续进行供肺肺动脉低压灌注4℃的低钾右旋糖苷（LPD）液；采用连续外翻褥式缝合法吻合... 详细信息

目的在建立大鼠左肺原位移植模型中采用一种新的缝合方法。方法左肺原位移植模型的供、受者均为SD大鼠。为了使肺静脉张开便于吻合，左肺移植期间持续进行供肺肺动脉低压灌注4℃的低钾右旋糖苷（LPD）液；采用连续外翻褥式缝合法吻合支气管膜部、肺静脉、肺动脉，快速进行左肺原位移植。术后采用环孢素A＋霉酚酸酯＋甲泼尼龙三联免疫抑制方案。术后4周，开胸阻断11例存活大鼠的右侧肺门，检测阻断前及阻断后的动脉血氧分压和动脉血二氧化碳分压。结果 55例SD大鼠左肺移植成功，平均吻合时间为（36．2±9．6）min，手术成功率为91．7％。1周存活率为70．9％；2周存活率为50．9％；4周存活率为21．8％。术后发生肺动脉栓塞1例，于术后第3d死亡，其余受者均未发现吻合口狭窄及栓塞。阻断右侧肺门前与阻断后15min动脉血气比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论大鼠左肺原位移植模型中采用新的缝合方法，具有简单有效、实用可靠的优点。

关键词：肺移植大鼠动物模型

转染VEGF_(165)基因的自体成肌细胞治疗心肌梗死的实验研究

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中南大学学报（医学版） 2012年第7期37卷 682-688页

作者：庄炜李莉章庆春林国强邓震宇中南大学湘雅医院心胸外科长沙410008 中南大学湘雅医院重症医学科长沙410008 安徽省立医院心血管外科合肥230001

目的:将体外培养、纯化并转染VEGF165基因的新西兰兔自体骨骼肌成肌细胞植入心肌梗死区,观测转染VEGF165基因的成肌细胞移植对改善梗死区心肌血运重建和心功能的影响。方法:采用pcDNA3.1-VEGF165和pcDNA3.1质粒转染经体外培养及纯化的... 详细信息

目的:将体外培养、纯化并转染VEGF165基因的新西兰兔自体骨骼肌成肌细胞植入心肌梗死区,观测转染VEGF165基因的成肌细胞移植对改善梗死区心肌血运重建和心功能的影响。方法:采用pcDNA3.1-VEGF165和pcDNA3.1质粒转染经体外培养及纯化的新西兰兔自体骨骼肌成肌细胞。结扎兔冠状动脉致局部心肌梗死后2周,分别于心肌梗死区移植转染VEGF165基因成肌细胞(实验组,n=8)和空载体成肌细胞(对照组,n=8),4周后观察心肌梗死边缘区毛细血管密度、植入细胞的形态鉴定和心功能改善情况。结果:成功将pcDNA3.1-VEGF165和pcDNA3.1质粒转染体外培养的兔自体骨骼肌成肌细胞,成肌细胞移植后能在梗死区种植成活、分化。实验组细胞移植区域的毛细血管密度较对照组高(P<0.05)。经Buxco系统有创心功能测定显示:实验组较对照组的左心室等容收缩期室内压最大上升速率[+dp/dtmax,(1607.23±102.67)mmHg/s vs(1217.77±89.91)mmHg/s]和左心室等容舒张期室内压最大下降速率[-dp/dtmax,(1535.09±81.34)mmHg/s vs(1174.58±91.50)mmHg/s]均有所改善。结论:转染VEGF165的成肌细胞能改善心肌梗死区域的血液供应,增加心肌收缩力,改善心功能。

关键词： VEGF165 成肌细胞细胞移植心肌梗死

基质金属蛋白酶-8在急性StanfordA型主动脉夹层中的表达及临床意义

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安徽医科大学学报 2014年第3期49卷 330-333页

作者：王峦严中亚章庆春宋晓蓉安徽医科大学附属省立医院心脏外科合肥230001

目的探讨基质金属蛋白酶-8(MMP-8)在急性Stanford A型主动脉夹层中的表达及临床意义。方法 30例急性Stanford A型主动脉夹层患者为实验组,30例同期接受单纯主动脉瓣置换的患者为对照组,采用ELISA法、Western blot法、免疫组化法等检测MM... 详细信息

目的探讨基质金属蛋白酶-8(MMP-8)在急性Stanford A型主动脉夹层中的表达及临床意义。方法 30例急性Stanford A型主动脉夹层患者为实验组,30例同期接受单纯主动脉瓣置换的患者为对照组,采用ELISA法、Western blot法、免疫组化法等检测MMP-8在实验组和对照组血浆及升主动脉壁中的表达。结果主动脉夹层患者血浆中MMP-8的表达[(106.51±28.27)ng/ml]明显高于对照组[(25.65±12.95)ng/ml],差异有统计学意义(P<0.05);实验组升主动脉中层病变显著,炎性细胞浸润夹层边缘。弹性纤维与胶原纤维层变性、排列紊乱、破碎、崩解。其主动脉壁中层MMP-8大量表达。而对照组主动脉壁结构完整,弹性纤维与胶原纤维排列紧密有序,无中层退行性变。MMP-8在其主动脉中层仅少量表达或不表达。结论 MMP-8在病变的升主动脉中层内高表达,在正常的弹性纤维层低表达,提示其在主动脉疾病的发生发展中可能发挥作用。

关键词：急性Stanford A主动脉夹层基质金属蛋白酶细胞外基质

热休克蛋白27和糖调节蛋白78分布异常对心脏移植后血管病变的影响

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中华实验外科杂志 2013年第8期30卷 1571-1573页

作者：雷虹尹海辉章庆春严中亚安徽省立医院心脏外科合肥230001

目的观察移植后心脏组织中热休克蛋白27（HSP27）和糖调节蛋白78（GRP78）的组织分布，探讨移植后心脏血管病变（CAV）的发病机制。方法建立大鼠同基因（n=8）和异基因（n=8）心脏移植的Ono模型，采用免疫组织化学法[链霉菌抗生物素蛋白... 详细信息

目的观察移植后心脏组织中热休克蛋白27（HSP27）和糖调节蛋白78（GRP78）的组织分布，探讨移植后心脏血管病变（CAV）的发病机制。方法建立大鼠同基因（n=8）和异基因（n=8）心脏移植的Ono模型，采用免疫组织化学法[链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（sP）法]验证移植后心脏组织中HSP27和GRP78的组织分布。结果同基因植组，HSP27和GRP78在心脏组织内均匀分布；异基因移植组，HSP27和GRP78在环血管周围心肌组织中高表达（2．24±0．36比1．04±0．10，P〈0．01；1．51±0．12比0．85±0．30，P〈0．05），而在增生的冠状动脉组织内几乎不表达（2．24±0．36比0．25±0．08，P〈0．01；1．51±0．12比0．16±0．10，P〈0．01）。结论HSP27和GRP78在异基因移植后心脏组织中分布不均，导致冠状动脉组织无力对抗免疫损伤，诱发血管平滑肌细胞过度增殖可能是CAV发生、发展的重要原因。

关键词：心脏移植血管病变热休克蛋白27 糖调节蛋白78

孵育温度对丁二醇改性处理戊二醛鞣制的牛心包生物瓣膜防钙化性能及热皱缩温度的影响

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中国临床康复 2005年第19期9卷 106-107页

作者：胡野荣章庆春龚光甫周新民中南大学湘雅二医院胸心外科湖南省长沙市410011

目的:探讨2,3-丁二醇不同孵育温度改性处理戊二醛鞣制的牛心包对其防钙化性能及热皱缩温度的影响。方法:实验于2003-06/12在中南大学湘雅二医院胸心外科实验室完成。收集1～3岁新鲜黄牛心包8个,将每个牛心包均分成5份,共分成5组,分别置... 详细信息

目的:探讨2,3-丁二醇不同孵育温度改性处理戊二醛鞣制的牛心包对其防钙化性能及热皱缩温度的影响。方法:实验于2003-06/12在中南大学湘雅二医院胸心外科实验室完成。收集1～3岁新鲜黄牛心包8个,将每个牛心包均分成5份,共分成5组,分别置入4℃,20℃,30℃,40℃的纯2,3-丁二醇溶液孵育改性60d,对照组置入4℃的3g/L戊二醛Hepe缓冲液中,每组8份试片。选择刚离乳SD雄性大鼠8只,SD大鼠背部作两个纵形切口,将经过处理的同一牛心包来源的5份心包试片植入切口,第1个纵形切口两侧各1片,第2个纵形切口两侧及下部各1片,相距≥2cm,植入牛心包试片60d后,取出各组试片,用原子吸收火焰法检测组织钙含量,并观察牛心包试片热皱缩温度。结果:8只SD大鼠所获全部标本进入结果分析。①组织钙含量检测结果:20℃,30℃和40℃丁二醇组组织钙含量相似,但明显低于对照组和4℃丁二醇组犤(8.18±7.22),(21.56±26.53),(3.24±2.57),(138.36±69.23),(192.83±2.86)mg/g,(P=0.002～0.016)犦。②热皱缩温度检测结果:20℃,30℃及40℃丁二醇组明显低于对照组及4℃丁二醇组犤(83.31±0.46)℃,(82.96±0.33)℃,(82.44±0.42)℃,(83.75±0.46)℃,(83.67±0.41)℃,(P<0.05)犦;40℃丁二醇组明显低于20℃丁二醇组(P<0.001)。结论:2,3-丁二醇的不同孵育温度改性处理戊二醛鞣制的牛心包,其中4℃组防钙效果最差,20℃,30℃,40℃组均具有明显的防钙化效果,三者之间无明显差异。热皱缩温度随着孵育温度的升高而降低。但改变幅度不是很大。均高于80℃,改性后的牛心包在生理温度下不会发生组织热皱缩。

关键词：心包牛温度丁烯二醇类

结缔组织生长因子在大鼠心脏移植慢性排斥反应中的表达及意义(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第31期12卷 6191-6195页

作者：袁运长夏振坤王电军章庆春尹邦良中南大学湘雅二医院心胸外科湖南省长沙市410011 中南大学湘雅三医院心胸外科湖南省长沙市410013 广东省心血管病研究所广东省广州市510080

背景：慢性排斥反应限制了心脏移植患者的长期存活．有报道结缔组织生长因子因其与细胞增殖和胶原合成有关，似乎参与了此过程。目的：假设结缔组织生长因子在大鼠心脏移植慢性排斥反应中发挥作用，实验拟验证其表达与心脏慢性排斥反应... 详细信息

背景：慢性排斥反应限制了心脏移植患者的长期存活．有报道结缔组织生长因子因其与细胞增殖和胶原合成有关，似乎参与了此过程。目的：假设结缔组织生长因子在大鼠心脏移植慢性排斥反应中发挥作用，实验拟验证其表达与心脏慢性排斥反应病理过程的关系。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007—04／08在中南大学湘雅二医院动物实验中心完成。材料：取20只Wistar大鼠作为供体，20只SD大鼠作为受体，制作腹部异位心脏移植模型20例次；另选择10只Wistar大鼠作为对照。方法：大鼠腹部异位心脏移植术后，给予环孢素A、霉酚酸酯和甲泼尼龙三联免疫抑制治疗。移植后2．8周分别按随机数字表法麻醉后处死10只受体大鼠．取心脏；10只Wistar大鼠心脏作为对照。主要观察指标：采用苏木精-伊红染色及Van Gieson染色观察心肌病理形态、心肌血管密度及心脏血管狭窄程度：并进行心肌纤维化半定量评分。采用免疫组织化学法检测心肌组织结缔组织生长因予蛋自的表达：并分析结缔组织生长因子表达与慢性排斥反应过程中心肌血管病变及纤维化的相关性。结果：①术后8周移植心脏血管狭窄程度、心肌纤维化评分及结缔组织生长因子蛋白表达量明显高于术后2周及正常心脏（P〈0．05-0．01）；术后8周移植心脏血管密度低于正常心脏（P〈0．05）；结缔组织生长因子在正常心脏基本没有表达。②心肌组织结缔组织生长因子蛋白表达灰度值与心肌纤维化、血管狭窄程度均呈负相关（r=0．734，-0．713，P〈0．01），表明结缔组织生长因子表达与心肌纤维化及血管狭窄程度呈正相关。结论：结缔组织生长因子在有心肌血管病变的移植心畦心肌组织中表达增强，其表达与心肌纤维化和心肌血管病变形成有关，在心肌移植排斥反应的病理过程中起重要作用。

关键词：心脏移植结缔组织生长物质心内膜心肌纤维化症移植物排斥器官移植