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嗜肺军团菌momp基因疫苗的制备及其免疫原性研究

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国际检验医学杂志 2016年第11期37卷 1449-1452页

作者：窦娇莹杨志伟甘肃省中医院检验科兰州730050 宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系银川750004

目的构建真核重组质粒GFP-momp作为核酸疫苗,已构建的原核重组质粒pET-momp表达的蛋白作为蛋白疫苗,二者联合免疫BALB/c雌性小鼠,观察其免疫原性。方法 (1)以嗜肺军团菌DNA作为模板,扩增得到momp基因,并克隆至pEGFP-C1载体获得重组质粒G... 详细信息

目的构建真核重组质粒GFP-momp作为核酸疫苗,已构建的原核重组质粒pET-momp表达的蛋白作为蛋白疫苗,二者联合免疫BALB/c雌性小鼠,观察其免疫原性。方法 (1)以嗜肺军团菌DNA作为模板,扩增得到momp基因,并克隆至pEGFP-C1载体获得重组质粒GFP-momp。鉴定正确后,将其转染到NIH3T3细胞,利用荧光显微镜观察GFP-momp的表达。(2)选取BALB/c雌性小鼠60只,平均分为4组,即磷酸盐缓冲液(PBS)组(A组)、空质粒pEGFP-C1组(B组)、DNA疫苗组(C组)、联合疫苗组(D组)。以重组质粒GFP-momp作为DNA疫苗,重组质粒GFP-momp和MOMP蛋白作为联合疫苗,第1天A组肌肉注射PBS 50μL,B组注射pEGFP-C1 50μg,C、D组各注射GFP-momp50μg;第14天各组以相同剂量追加免疫1次;第21天A、B、C组用相同剂量再追加免疫1次,D组注射10μg纯化的MOMP蛋白。借助对各试验组小鼠的抗体水平、脾淋巴细胞增殖活性、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性等指标的动态检测,来评价DNA疫苗与蛋白疫苗的免疫原性。结果扩增出831bp的momp基因,构建重组质粒GFP-momp,转染入NIH3T3细胞并在细胞内表达出绿色荧光蛋白。在淋巴细胞增殖试验中:A组和B组比较差异无统计学意义(P>0.05);C组和D组淋巴细胞增殖活性均高于B组,差异有统计学意义(P0.05);C、D两组均高于B组,差异有统计学意义(P0.05);C、D两组均高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);D组杀伤活性高于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建momp基因的真核表达载体并在NIH3T3细胞中得到表达,并进一步得出嗜肺军团菌momp基因诱导产生的DNA疫苗和DNA-蛋白疫苗均能产生细胞免疫和体液免疫,具有免疫原性。

关键词：嗜肺军团菌 momp基因疫苗

新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测阳性质控品的制备及效果评价

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中国生物制品学杂志 2021年第6期34卷 709-711,720页

作者：周思彤王永胜田卫花魏曼李莎莎窦娇莹甘肃省中医院检验科甘肃兰州730050

目的制备新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测室内阳性质控品,探讨自制质控品的可行性,并进行效果评价。方法收集第三方检测试剂盒中的阳性对照品,用置有正常人鼻咽试子的病毒保存液制成稀释液,倍比稀释,实时荧光定量PCR法检测ORFlab基因的Ct... 详细信息

目的制备新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测室内阳性质控品,探讨自制质控品的可行性,并进行效果评价。方法收集第三方检测试剂盒中的阳性对照品,用置有正常人鼻咽试子的病毒保存液制成稀释液,倍比稀释,实时荧光定量PCR法检测ORFlab基因的Ct值,取ORFlab基因Ct值约为31、34的稀释浓度分别作为高值质控品(nCov-H)和低值质控品(nCov-L),大量制备。小量分装后于-80℃冻存,评价质控品的均一性和稳定性。结果自制新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测室内阳性质控品均一性良好,不同保存温度下稳定性良好,可在-80℃保持稳定至少6个月,反复冻融3次后仍在控。结论自制新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测室内阳性质控品制备过程简单,均一性及稳定性良好,可作为商品质控的替代品用于临床检测。

关键词：新型冠状病毒阳性质控品核酸荧光定量PCR

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新生儿遗传代谢病筛查现状与进展

甘肃医药 2024年第6期43卷 488-490页

作者：刘芙蓉窦娇莹王兴甘肃省妇幼保健院甘肃兰州730050 甘肃省中医院甘肃兰州730050

遗传代谢病是一组种类繁多、临床症状复杂的疾病,常累及神经系统等,对患者造成不可逆伤害,许多遗传代谢病一旦发病往往危及患者生命。新生儿疾病筛查是预防和降低遗传代谢病发生的有效手段,通过对危害严重的先天性疾病、遗传代谢缺陷病... 详细信息

遗传代谢病是一组种类繁多、临床症状复杂的疾病,常累及神经系统等,对患者造成不可逆伤害,许多遗传代谢病一旦发病往往危及患者生命。新生儿疾病筛查是预防和降低遗传代谢病发生的有效手段,通过对危害严重的先天性疾病、遗传代谢缺陷病进行早期筛查,以达到早发现、早诊治的目的,避免或减轻疾病的危害。本文对新生儿遗传代谢病筛查的历史发展、我国新生儿遗传代谢病筛查现状及发展进行综述。

关键词：新生儿遗传代谢病筛查

甘南地区婴幼儿末梢血血常规参考范围调查分析

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甘肃医药 2023年第1期42卷 49-50,57页

作者：窦娇莹刘芳李振国王兴甘肃省中医院甘肃兰州730050 甘南州妇幼保健院甘肃甘南747000 甘肃省妇幼保健院甘肃兰州730050

目的:探讨甘南藏族自治州婴幼儿末梢血血常规参考范围。方法:选择2018年1月至2021年8月于甘南州妇幼保健院儿童保健门诊查体的1930例婴幼儿,采集婴幼儿末梢血检测血常规,记录红细胞、红细胞平均体积、红细胞压积、平均红细胞血红蛋白量... 详细信息

目的:探讨甘南藏族自治州婴幼儿末梢血血常规参考范围。方法:选择2018年1月至2021年8月于甘南州妇幼保健院儿童保健门诊查体的1930例婴幼儿,采集婴幼儿末梢血检测血常规,记录红细胞、红细胞平均体积、红细胞压积、平均红细胞血红蛋白量、平均血红蛋白浓度、血红蛋白浓度、白细胞、血小板8个主要指标的检测结果,建立当地婴幼儿群体的参考范围;按婴幼儿性别、民族分组,比较各组间8项指标差异性。结果:甘南高原地区婴幼儿血常规8项指标的参考范围分别为:红细胞(3.25~5.87)×10^(12)/L,红细胞平均体积(61.50~109.20)fL,红细胞压积(29.02~57.70)%,平均红细胞血红蛋白量(18.42~38.00)pg,平均血红蛋白浓度(293.00~365.00)g/L,血红蛋白浓度(90.20~201.00)g/L,白细胞(3.50~22.95)×10^(9)/L,血小板(111.00~565.40)×10^(9)/L;按性别分组,男性婴幼儿组红细胞平均体积略低于女性婴幼儿组,平均血红蛋白浓度略高于女性婴幼儿组(P<0.05);按民族分组,藏族婴幼儿组红细胞低于汉族婴幼儿组,而红细胞平均体积、平均红细胞血红蛋白量、平均血红蛋白浓度、白细胞、血小板均值都高于汉族婴幼儿组(P<0.05)。结论:甘南高原地区婴幼儿末梢血血常规多个指标存在性别和民族差异性,按性别、民族分类建立当地婴幼儿末梢血血常规参考范围,能更好地为临床诊断提供参考依据。

关键词：甘南地区婴幼儿血常规参考范围

嗜肺军团菌momp原核重组质粒的构建和表达

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宁夏医科大学学报 2011年第11期33卷 1016-1018,1022页

作者：窦娇莹曹秀琴杨志伟宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系银川750004 宁夏医科大学生育力保持省部共建教育部重点实验室银川750004

目的构建嗜肺军团菌momp原核重组质粒,并纯化重组蛋白。方法以嗜肺军团菌LP1型DNA为模板,PCR扩增得到momp基因,定向克隆至原核载体PET32a(+)中,经酶切及测序鉴定正确后,转化入大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导并用SDS-PAGE电泳进行分析,其产... 详细信息

目的构建嗜肺军团菌momp原核重组质粒,并纯化重组蛋白。方法以嗜肺军团菌LP1型DNA为模板,PCR扩增得到momp基因,定向克隆至原核载体PET32a(+)中,经酶切及测序鉴定正确后,转化入大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导并用SDS-PAGE电泳进行分析,其产物用亲和层析法进行纯化。结果扩增出831bp的momp基因,构建重组质粒pET-momp,诱导表达及纯化出50KD的蛋白。结论成功构建momp基因的原核表达载体并得到高效表达。

关键词：嗜肺军团 momp基因表达纯化

早产、低体重、高胆红素血症新生儿血液中氨基酸和肉碱浓度水平分析

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甘肃医药 2024年第7期43卷 600-603页

作者：窦娇莹王兴郝胜菊唐建明刘芙蓉甘肃省中医院甘肃兰州730050 甘肃省妇幼保健院甘肃兰州730050

目的:探讨新生儿早产、低体重、高胆红素血症等因素对其体内氨基酸谱和肉碱水平的影响。方法:选择2020年1月1日至2022年12月31日我院新生儿加强护理中心的新生儿为研究对象,根据新生儿出生时的胎龄、体重和胆红素水平,分为早产极低体重... 详细信息

目的:探讨新生儿早产、低体重、高胆红素血症等因素对其体内氨基酸谱和肉碱水平的影响。方法:选择2020年1月1日至2022年12月31日我院新生儿加强护理中心的新生儿为研究对象,根据新生儿出生时的胎龄、体重和胆红素水平,分为早产极低体重组、早产低体重组、足月低体重组和高胆红素血症组,并随机选取同期正常新生儿作为对照组,采集干血斑滤纸片样品进行串联质谱(LC-MS/MS)分析,比较检测的11种氨基酸和16种肉碱浓度变化情况。结果:(1)合并早产、低体重的新生儿与正常对照组比较,除C3DC/C4OH、C4、C10外,其余指标均有统计学差异(P<0.05)。与正常对照组比较,LEU、C2在早产极低体重组中降低,在早产低体重组中升高,C4DC/C5OH在早产极低体重组中升高,早产低体重组降低。(2)足月低体重组与正常对照组比较,MET、GLY、CIT、ORN、C0、C2、C8升高,C12降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(3)高胆红素组与正常对照组比较,CIT、TYR、ORN、ARG升高,酰基肉碱除C14、C16、C18均升高,ALA降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:新生儿早产、低体重、高胆红素因素会影响多种氨基酸和肉碱水平的变化,故实验室对串联质谱遗传代谢病筛查结果的判断应结合新生儿病史,降低新生儿遗传代谢病的误诊和漏诊发生率。

关键词：早产低体重高胆红素血症串联质谱

甘肃道地中药大黄、黄芩对多重耐药菌的抑菌活性

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西部中医药 2014年第5期27卷 5-7页

作者：梁勤乔登嫣马小明罗向霞李喜香周思彤窦娇莹甘肃省中医院甘肃兰州730050

目的:观察甘肃道地中药材大黄、黄芩的体外抑菌活性,为临床中药治疗耐药菌感染提供参考。方法:采用煎煮法制备大黄、黄芩中药原液,用肉汤稀释法测定两种药液对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的... 详细信息

目的:观察甘肃道地中药材大黄、黄芩的体外抑菌活性,为临床中药治疗耐药菌感染提供参考。方法:采用煎煮法制备大黄、黄芩中药原液,用肉汤稀释法测定两种药液对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的最小抑菌浓度。结果:大黄对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的最小抑菌浓度分别为250 mg/mL和125 mg/mL。黄芩对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的最小抑菌浓度为250 mg/mL;对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌未见明显抑菌作用。结论:大黄、黄芩对临床常见的多重耐药菌有不同程度的抑菌活性,且大黄的抑菌活性优于黄芩;大黄对金黄色葡萄球菌抑菌活性优于大肠埃希菌。

关键词：大黄黄芩多重耐药菌抑菌

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兰州地区健康人群静脉血细胞参考值调查

国际检验医学杂志 2015年第23期36卷 3372-3373,3377页

作者：梁勤周思彤罗向霞阎晓霞窦娇莹黎媛媛李国铎刘旭琴甘肃省中医院检验科甘肃兰州730050

目的通过对兰州地区1 880例健康人静脉血细胞参数的调查研究,建立该地区静脉血细胞各项参数的参考范围。方法采用回顾分析法,用Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪进行血细胞26项参数分析,观察参考值的变化。结果各项参数中,除血小板(PLT... 详细信息

目的通过对兰州地区1 880例健康人静脉血细胞参数的调查研究,建立该地区静脉血细胞各项参数的参考范围。方法采用回顾分析法,用Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪进行血细胞26项参数分析,观察参考值的变化。结果各项参数中,除血小板(PLT)、血红蛋白(Hb)等个别参数接近正态分布,其余均为偏态分布;白细胞6项参数中除中性粒细胞(N)百分比和淋巴细胞(L)百分比外,其余各项参数男女95%置信区间(CI)差异有统计学意义(P0.05);多项参数的95%CI与目前沿用的参考范围比较差异较大。结论 95%CI与原参考范围存在较大差异,原参考范围缺乏准确性和适用性,有必要科学、合理地建立地区性的血细胞参考值范围。

关键词：兰州地区健康人群血细胞参数参考区间

产业集聚、能源效率能否有效推进“双碳”目标实现?

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河南大学学报(社会科学版) 2025年第1期 21-28+152-153页

作者：丁煜莹高志刚新疆财经大学经济学院新疆科技学院经济学院

实现双碳目标是中国当前的重要任务之一，如何借助第二产业集聚减少能源消耗、提高能源效率来助力“碳达峰、碳中和”具有重要现实意义。基于中国2000-2019年30个省份面板数据的实证结果表明：产业集聚与碳排放呈倒“U”型关系，东部和... 详细信息

实现双碳目标是中国当前的重要任务之一，如何借助第二产业集聚减少能源消耗、提高能源效率来助力“碳达峰、碳中和”具有重要现实意义。基于中国2000-2019年30个省份面板数据的实证结果表明：产业集聚与碳排放呈倒“U”型关系，东部和中部地区产业集聚与碳排放关系与基准结果一致，且中部地区比东部地区更早跨过拐点实现碳减排，西部地区产业集聚与碳排放呈显著负相关；且经验证，能源效率在产业集聚与碳排放中发挥中介传导作用。为保证“双碳”目标实现，应优化产业布局，充分发挥产业集聚的碳减排效应；合理制定能源政策，引导能源产业有序发展；注重创新技术研发，搭建创新协作平台，发挥技术创新在碳减排中的推动作用。

关键词：产业集聚能源效率碳排放中介作用