检索结果-南通市图书馆

优化密码沙眼衣原体主要外膜蛋白基因的设计合成与表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山东大学学报（医学版） 2005年第1期43卷 5-8,12页

作者：郑燕赵蔚明王红周亚滨栾怡齐眉程轶喆贾继辉于修平山东大学医学院病原生物学研究所山东济南250012

目的:设计合成优化密码沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因,克隆构建优化密码MOMP(HuMOMP)基因的真核表达质粒及EGFP-HuMOMP融合基因表达质粒。方法:利用软件分析比较鼠肺炎沙眼衣原体(MoPn)与人类等哺乳动物基因组密码子使用的差异,根... 详细信息

目的:设计合成优化密码沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因,克隆构建优化密码MOMP(HuMOMP)基因的真核表达质粒及EGFP-HuMOMP融合基因表达质粒。方法:利用软件分析比较鼠肺炎沙眼衣原体(MoPn)与人类等哺乳动物基因组密码子使用的差异,根据所得数据对MOMP基因进行优化设计与合成。双酶切pUC-HuMOMP质粒,游离HuMOMP片段,定向克隆入pcDNA3的相应位点,构建重组真核表达质粒pcDNA3-HuMOMP;双酶切游离pcDNA3-HuMOMP中的HuMOMP片段,定向克隆入pEGFP-C1的相应位点,构建重组真核表达质粒pEGFP-HuMOMP;pEGFP-HuMOMP质粒体外脂质体转染COS-1细胞,24h后观察荧光蛋白的表达。结果:合成的HuMOMP基因全长1125bp,经DNA测序无误。酶切鉴定pcDNA3-HuMOMP及pEGFP-HuMOMP质粒获得预期分子量DNA片段。EGFP-HuMOMP融合基因在COS-1细胞中获得明显表达,表达产物定位于胞浆。结论:设计合成的优化密码HuMOMP基因能够在哺乳动物细胞中成功表达。

关键词：衣原体,沙眼基因,MOMP 基因表达遗传密码

促进乳头状瘤病毒L1蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2006年第6期26卷 516-520页

作者：王红赵蔚明齐眉周亚滨栾怡程轶喆于修平山东大学医学院医学微生物学教研室济南250012

目的探讨促进乳头状瘤病毒(PV)晚期基因L1的蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的途径及可能的机制。方法分别将含人源化优化密码BPVL1-GFP融合基因(HL1-GFP)和野生型BPVL1-GFP融合基因(WL1-GFP)的真核表达质粒体外单独转染或与tRNAser真核表达... 详细信息

目的探讨促进乳头状瘤病毒(PV)晚期基因L1的蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的途径及可能的机制。方法分别将含人源化优化密码BPVL1-GFP融合基因(HL1-GFP)和野生型BPVL1-GFP融合基因(WL1-GFP)的真核表达质粒体外单独转染或与tRNAser真核表达质粒共转染人角质形成细胞HaCAT,荧光显微镜及Western blot方法观察L1-GFP融合蛋白的瞬时表达情况。半定量RT-PCR分析不同PV L1基因mRNA的表达。BALB／c小鼠股四头肌内分别接种野生型、优化密码L1 DNA疫苗,同时将L1 DNA疫苗与tRNAser真核表达质粒混合后接种小鼠,观察诱导产生的体液免疫反应。结果野生型WL1-GFP融合基因在HaCAT细胞中未能有效表达,优化密码HL1-GFP基因在HaCAT细胞中的蛋白表达水平明显增强;但两者在mRNA水平差异无统计学意义。WL1-GFP与tRNAser真核表达质粒共转染细胞中L1蛋白的表达较单独转染WL1-GFP基因时增强。动物DNA免疫结果表明,优化密码HL1 DNA疫苗接种可使小鼠特异性L1中和抗体水平明显升高;而野生型WL1 DNA疫苗接种组小鼠仅产生低滴度的L1抗体,WL1 DNA疫苗与tRNAser真核表达质粒混合接种使小鼠的L1抗体水平增加。结论优化密码能显著促进乳头状瘤病毒晚期基因L1在哺乳动物细胞中的表达和DNA疫苗的免疫反应;补充外源tRNAser基因能够提高野生型L1基因的蛋白表达和DNA疫苗诱导的体液免疫应答。

关键词：乳头状瘤病毒 L1基因 tRNA 蛋白表达 DNA免疫

密码修饰可增强沙眼衣原体MOMP DNA质粒免疫小鼠的免疫应答

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2006年第1期26卷 92-96页

作者：郑燕赵蔚明王红周亚滨栾怡齐眉程轶喆唐伟于晗杨熙山东大学医学院微生物学教研室加拿大曼尼托巴大学医学微生物系

目的探讨密码修饰对沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因表达和DNA质粒免疫的影响。方法根据人类密码子使用偏好对鼠肺炎沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis mouse pneumoni-tis)MOMP基因进行优化修饰,设计合成人源化MOMP基因(HuMOMP)。构... 详细信息

目的探讨密码修饰对沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因表达和DNA质粒免疫的影响。方法根据人类密码子使用偏好对鼠肺炎沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis mouse pneumoni-tis)MOMP基因进行优化修饰,设计合成人源化MOMP基因(HuMOMP)。构建以pcDNA3为载体的含HuMOMP及含野生型MOMP基因(WtMOMP)的真核表达质粒。瞬时转染COS-1细胞,Western blot方法比较HuMOMP基因及WtMOMP基因在哺乳动物细胞中的蛋白表达水平。DNA质粒肌内免疫BALB/c小鼠,检测小鼠血清特异性抗体、DTH和淋巴细胞增殖反应,比较优化密码MOMP基因和野生型MOMP基因DNA质粒免疫的免疫效果。结果人工合成HuMOMP基因,成功构建重组真核表达质粒pcDNA3-HuMOMP及pcDNA3-WtMOMP。转染细胞Western blot结果显示,HuMOMP基因的蛋白表达水平明显高于WtMOMP基因。ELISA结果表明,HuMOMP DNA质粒免疫组小鼠血清特异性IgG抗体有所升高;细胞免疫检测结果显示,HuMOMP DNA质粒免疫组小鼠足垫肿胀程度增强、淋巴细胞增殖实验刺激指数(SI)增高,两者与WtMOMP DNA质粒免疫组相比P<0.05,差异均有统计学意义。结论人源化密码修饰能够增强沙眼衣原体MOMP基因在哺乳动物细胞中的蛋白表达及DNA质粒免疫小鼠的免疫反应,这对于新型衣原体DNA疫苗的研究具有重要意义。

关键词：沙眼衣原体 MOMP 密码子蛋白表达 DNA质粒免疫

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

“医学微生物学”课程思政建设初探

科教导刊 2021年第25期 99-101,105页

作者：王红齐眉刘娟唐伟程轶喆山东大学基础医学院病原生物系山东济南250012

开展课程思政建设是推动教学改革、实现高质量人才培养目标的根本要求。文章主要介绍了课程组近年来立足于医学微生物学课程特点进行的课程思政教学实践和探索,包括提高教师课程思政意识和能力、挖掘课程思政元素、优化实践路径,健全评... 详细信息

开展课程思政建设是推动教学改革、实现高质量人才培养目标的根本要求。文章主要介绍了课程组近年来立足于医学微生物学课程特点进行的课程思政教学实践和探索,包括提高教师课程思政意识和能力、挖掘课程思政元素、优化实践路径,健全评价体系等内容。

关键词：医学微生物学课程思政医学教育

密码修饰可增强沙眼衣原体MOMP DNA疫苗的免疫反应

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

密码修饰可增强沙眼衣原体MOMP DNA疫苗的免疫反应

人巨细胞病毒感染致血管内皮细胞损伤机制的研究

第6次全国微生物学与免疫学大会

作者：郑燕赵蔚明王红栾怡周亚滨齐眉贾继挥程轶喆于修平山东大学医学院微生物学教研室

目的沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)主要外膜蛋白(major outer membrane protein, MOMP)是沙眼衣原体疫苗研究的首要靶抗原。本研究在分析沙眼衣原体全基因组编码序列密码使用偏爱性的基础上,设计合成了人源化优化密码沙眼衣原体... 详细信息

目的沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)主要外膜蛋白(major outer membrane protein, MOMP)是沙眼衣原体疫苗研究的首要靶抗原。本研究在分析沙眼衣原体全基因组编码序列密码使用偏爱性的基础上,设计合成了人源化优化密码沙眼衣原体MOMP基因,构建相应的真核表达载体,探讨密码修饰对CT-MOMP基因表达和DNA疫苗免疫原性的影响。方法利用软件分析比较CT与人类等哺乳动物基因组密码子使用差异,根据人类密码子使用偏好对CT-MOMP基因进行优化修饰,设

关键词：沙眼衣原体基因 MOMP 密码子蛋白表达 DNA免疫

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

山东大学学报（医学版） 2007年第11期45卷 1081-1084页

作者：王凤吴建敏周亚滨李树英程轶喆齐眉唐伟王红刘娟于晗实验畸形学教育部重点实验室山东大学医学院微生物学教研室济南250012

目的观察人巨细胞病毒(HCMV)感染对人血管内皮细胞氧化应激的影响及对血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)和糖基化终产物受体(RAGE)时序性表达的影响,研究HCMV感染致动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法用HCMV感染血管内皮细胞,用激光共聚焦显微... 详细信息

目的观察人巨细胞病毒(HCMV)感染对人血管内皮细胞氧化应激的影响及对血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)和糖基化终产物受体(RAGE)时序性表达的影响,研究HCMV感染致动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法用HCMV感染血管内皮细胞,用激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ROS)的改变;采用RT-PCR方法检测不同感染时段细胞VCAM-1及RAGEmRNA的表达。结果HCMV感染血管内皮细胞后,HCMV组荧光强度显著高于对照组(P0.05)。感染0 h时,RAGEmRNA有基础水平的表达,4 h开始升高,8 h时表达水平明显升高,随感染时间延长,表达量逐渐增高,感染24 h时达高峰,48 h开始回落,仍维持在较高的水平,各时段与0 h比较,均有统计学意义(P<0.01)。结论HCMV感染血管内皮细胞后能够增强氧化应激,促进VCAM-1及RAGE的mRNA表达,并且呈时间依赖性。HCMV有可能通过增强氧化应激、上调VCAM-1及RAGE的表达介导血管内皮细胞的炎症反应,促进动脉粥样硬化的发生、发展。

关键词：巨细胞病毒脐静脉活性氧血管细胞粘附分子-1 糖基化终产物受体

E型沙眼衣原体MOMP基因重组质粒的构建与表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山东大学学报（医学版） 2005年第11期43卷 985-988页

作者：吕慧赵蔚明郑燕王红周亚滨齐眉栾怡程轶喆于晗杨熙于修平山东大学医学院微生物学教研室山东济南250012 加拿大曼尼托巴大学医学微生物系

目的:构建E型沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)基因重组真核表达质粒pVAX1-MOMP,为探索安全的E型CtDNA疫苗奠定基础。方法:根据Genebank中E型CtMOMP基因序列设计引物,用高保真PCR方法从E型Ct基因组DNA中扩增得到约1.1kb的MOMP片段,克隆... 详细信息

目的:构建E型沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)基因重组真核表达质粒pVAX1-MOMP,为探索安全的E型CtDNA疫苗奠定基础。方法:根据Genebank中E型CtMOMP基因序列设计引物,用高保真PCR方法从E型Ct基因组DNA中扩增得到约1.1kb的MOMP片段,克隆至pcDNAII载体,测序后亚克隆至表达载体pVAX1,构建卡那霉素抗性真核重组表达质粒pVAX1-MOMP,并以重组质粒转染COS-1细胞进行表达,用Westernblotting方法鉴定表达产物。结果:从E型Ct基因组DNA中扩增出特异的MOMP基因片段,酶切鉴定及DNA序列测定证实pVAX1-MOMP重组质粒构建正确,能在COS-1细胞内表达,表达产物能与抗MOMP单克隆抗体特异性结合。结论:成功构建E型沙眼衣原体MOMP真核表达质粒pVAX1-MOMP,并在真核细胞内获得表达。

关键词：衣原体沙眼基因表达基因 MOMP

优化密码对牛乳头瘤病毒L1基因粘膜免疫的增强作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海免疫学杂志 2003年第6期23卷 396-399页

作者：王红赵蔚明周亚滨贾继辉栾怡齐眉程轶喆于修平山东大学医学院微生物学教研室济南250012

为探讨优化密码对牛乳头瘤病毒 1型主要晚期基因 (BPV1L1)免疫原性的影响 ,分别将含野生型和优化密码的人源化BPV1L1基因的真核表达质粒转入减毒沙门菌S BRD5 0 9后 ,通过滴鼻、阴道免疫、静脉注射、腹腔注射等途径免疫小鼠 ,经VLPELIS... 详细信息

为探讨优化密码对牛乳头瘤病毒 1型主要晚期基因 (BPV1L1)免疫原性的影响 ,分别将含野生型和优化密码的人源化BPV1L1基因的真核表达质粒转入减毒沙门菌S BRD5 0 9后 ,通过滴鼻、阴道免疫、静脉注射、腹腔注射等途径免疫小鼠 ,经VLPELISA方法测定抗L1构象性抗体产生 ,MTT法观察诱导的特异性细胞免疫反应。抗体检测结果显示 ,经粘膜免疫途径 ,与含有野生型L1基因的表达质粒pcDNA3WBPVL1相比 ,含优化密码L1基因的pcDNA3HBPVL1诱导产生的SIgA、IgG明显升高 ,而细胞免疫反应无明显差异。表明优化密码能促进乳头瘤病毒晚期基因L1诱导的体液免疫反应 ,减毒沙门菌是PVL1DNA疫苗粘膜免疫的有效载体。

关键词：乳头瘤病毒因基 Ll 密码减毒沙门菌 DNA疫苗

济南地区献血者中人疱疹病毒8型(HHV-8)IgG抗体的检测及相关危险因素分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山东大学学报（医学版） 2006年第4期44卷 328-331页

作者：齐眉赵蔚明周亚滨栾怡卞继锋王红程轶喆刘娟唐伟于晗山东大学医学院微生物学教研室山东济南250012

目的:了解人疱疹病毒8型(HHV-8)在济南地区不同献血者中的感染情况,并对其与年龄、性别、HBV、HCV、梅毒螺旋体的相关性进行统计学分析。方法:以HHV-8 ORF K8.1合成多肽为抗原,采用ELISA方法检测献血者血清中相应IgG水平。结果:520份血... 详细信息

目的:了解人疱疹病毒8型(HHV-8)在济南地区不同献血者中的感染情况,并对其与年龄、性别、HBV、HCV、梅毒螺旋体的相关性进行统计学分析。方法:以HHV-8 ORF K8.1合成多肽为抗原,采用ELISA方法检测献血者血清中相应IgG水平。结果:520份血清中抗HHV-8 ORFK8.1抗体的总体检出率为5.962%(31/520),有随年龄增加而增高的趋势,但与性别、HBV、HCV、梅毒螺旋体的相关性无统计学意义。结论:济南地区献血者中有一定比率的HHV-8感染。采取措施,防止HHV-8经输血传播具有一定的现实意义。

关键词：献血者人疱疹病毒8型免疫球蛋白G