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不同型别埃博拉病毒的宿主细胞嗜性差异及GP关键影响位点的研究

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不同型别埃博拉病毒的宿主细胞嗜性差异及GP关键影响位点的研究

作者：程诗诗河北大学

学位级别：硕士

目的:埃博拉病毒能够引起一种严重的高病死率疾病,即埃博拉出血热。埃博拉疫情通常从人畜共患传播病例开始,随后可通过直接接触或间接接触受感染的体液或受污染的污染物在人际间传播。多项研究表明,埃博拉病毒具有广泛的跨物种细胞嗜性... 详细信息

目的:埃博拉病毒能够引起一种严重的高病死率疾病,即埃博拉出血热。埃博拉疫情通常从人畜共患传播病例开始,随后可通过直接接触或间接接触受感染的体液或受污染的污染物在人际间传播。多项研究表明,埃博拉病毒具有广泛的跨物种细胞嗜性,果蝠可能是埃博拉病毒的天然宿主,非人类灵长类动物和猪等动物是埃博拉病毒的中间宿主,具体还有哪些潜在的中间宿主有待研究。埃博拉病毒的外膜糖蛋白(GP)是存在于病毒体表面的糖蛋白,其功能主要是介导病毒和细胞受体的结合与膜融合,使病毒进入细胞。有研究表明位于GP蛋白受体结合区内或临近区域的氨基酸突变对埃博拉病毒的感染力和细胞嗜性影响较大。埃博拉病毒有五种主要的型别,了解不同型别埃博拉病毒的宿主范围和影响其宿主范围的GP的关键氨基酸位点对于长期防控埃博拉疫情至关重要。方法:本研究使用细胞培养方法研究携带来自五种型别埃博拉病毒糖蛋白(GP)的两种包装体系(HIV体系及VSV体系)假病毒在15种不同细胞系中的感染性。五种型别的病毒分别为扎伊尔型埃博拉病毒(EBOV)、本迪布焦型埃博拉病毒(BDBV)、雷斯顿型埃博拉病毒(RESTV)、苏丹型埃博拉病毒(SUDV)和塔伊森林型埃博拉病毒(原科特迪瓦病毒,TAFV)。将制备好的假病毒经超速离心后取底层假病毒颗粒,利用免疫印迹法(Western blot,WB)检测GP蛋白进行验证;两种体系的假病毒分别经HIV1-p24酶联免疫吸附试验和荧光定量PCR(q PCR)相对定量后,进行感染性分析,利用单因素方差分析及Tukey事后检验以及SPASS等软件进行统计学分析。为探究EBOV与其它三种型别埃博拉病毒(RESTV、SUDV、TAFV)感染性不同的原因,本研究通过比较EBOV与RESTV、SUDV和TAFV之间的GP氨基酸序列差异,结合不同型别假病毒在不同细胞系上的感染性差异,并进行氨基酸突变,验证突变前后感染性的变化。结果:HIV及VSV两种体系的假病毒感染实验结果均显示,与其它四种病毒相比,BDBV在多个细胞系中的感染性较弱,HIV体系及VSV体系中BDBV在NIH/3T3中RLU均值仅为2319.84及721.06。RESTV、SUDV和TAFV对仓鼠细胞(BHK-21和CHO)、猴细胞(Vero)、猪细胞(PK15和ST)和犬细胞(Cf2TH)的感染能力较强,但EBOV在这些细胞系中的感染能力较弱,表明这三种型别的埃博拉病毒感染模式与EBOV的感染模式不同;而与其它四种型别埃博拉病毒相比,EBOV在包括293T、Huh-7和Hep G2在内的大多数人类细胞系中显示出类似或略高的传染性。由于使用的两种体系方法的结果都较一致,证明本实验的可重复性。通过EBOV与RESTV、SUDV和TAFV之间的GP氨基酸序列比对,发现有23个氨基酸位点在RESTV、SUDV和TAFV中相同而与EBOV不同。EBOV GP不同突变位点假病毒体外感染实验结果显示I129V、A148P、D552N突变显著增强了EBOV假病毒对仓鼠细胞(BHK-21和CHO)、猴细胞(Vero)、猪细胞(PK15和ST)和犬细胞(Cf2TH)的感染性,使其与RESTV、SUDV和TAFV的感染性相似。然而,再进行反向突变进行验证,发现TAFV的N552D和P148A反向突变感染性降低,与EBOV有相似的感染性模式。RESTV和SUDV假病毒中的所有三个反向突变位点都没有显著改变所有细胞系的感染性。又通过体外感染实验发现了EBOV GP N514D和T544I突变的假病毒感染性增高,对应为RESTV GP的D515N和I545T反向突变,发现只有544位反向突变的假病毒感染性降低。结论:综上所述,体外细胞感染实验表明五种型别埃博拉假病毒对人、猴子、仓鼠、小鼠、犬、猪和猫七个物种的各种细胞系都能感染,表明在各种动物中都有传播的风险;不同型别的埃博拉病毒对不同物种细胞的感染性有一定差异:BDBV在各个细胞中感染力最低,五种型别假毒均在小鼠(NIH/3T3)细胞中感染力最低,EBOV在大多数人类细胞系中显示出类似或略高的感染性,SUDV、RESTV和TAFV对仓鼠细胞(BHK-21和CHO)、猴细胞(Vero)、猪细胞(PK15和ST)和犬细胞(Cf2TH)的感染能力较强。GP中,GP1受体结合域的第148位氨基酸和GP2融合环中552和544位氨基酸的替换对病毒的感染性有明显影响。

关键词：埃博拉病毒糖蛋白感染性细胞嗜性 D552N A148P T544I

V2I场景中的双时间尺度网络切片规划技术研究

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V2I场景中的双时间尺度网络切片规划技术研究

作者：高诗航电子科技大学

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北京市地下水中高危害污染物筛选

环境科学 2024年第6期45卷 3142-3152页

作者：杨蕾徐莹余诗航李潇斐李剑北京师范大学水科学研究院地下水污染控制与修复教育部工程中心北京100875

地下水污染物对用水安全和人民健康造成了巨大的威胁.为开展地下水中高危害污染物筛选,改进了传统的危害评价方法,构建了涵盖毒理学优先指数法(Tox Pi),吸收、分布、代谢、排泄(ADME)性质评估法和二模网络分析法的污染物危害评估-筛选-... 详细信息

地下水污染物对用水安全和人民健康造成了巨大的威胁.为开展地下水中高危害污染物筛选,改进了传统的危害评价方法,构建了涵盖毒理学优先指数法(Tox Pi),吸收、分布、代谢、排泄(ADME)性质评估法和二模网络分析法的污染物危害评估-筛选-表征综合体系,针对北京市地下水中非靶检测到的234种疏水性有机污染物(HOCs)开展危害评估和毒害污染物筛选.利用Tox Pi方法筛选出危害潜力排名前20的污染物,在此基础上耦合其ADME性质进一步识别出17种高优先级HOCs,并通过二模网络分析,系统表征了这17种高优先级HOCs作用的基因分子靶点,通过关联性和加权平均度分析最终得到10种高危害的HOCs,并揭示其毒作用类型多集中于内分泌干扰效应、致癌效应以及遗传毒性.研究结果可为我国区域地下水污染物的防治提供技术支撑.

关键词：地下水污染疏水性有机污染物(HOCs) 非靶向筛查技术毒理学优先指数法(Tox Pi) 吸收、分布、代谢、排泄(ADME) 污染物筛选

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基于改进樽海鞘群算法的应急供应链网络规划

基于改进樽海鞘群算法的应急供应链网络规划

作者：程筱航沈阳大学

学位级别：硕士

我国部分地区每年都会存在流感病毒肆虐横行的现象,药品医疗物资供不应求,甚至部分中小学停课等情况时有发生。在突发公共卫生事件中,应急物资供应链的快速响应非常重要,这需要各个环节的协同合作,比如:提前规划,制定应急预案;实时监测... 详细信息

我国部分地区每年都会存在流感病毒肆虐横行的现象,药品医疗物资供不应求,甚至部分中小学停课等情况时有发生。在突发公共卫生事件中,应急物资供应链的快速响应非常重要,这需要各个环节的协同合作,比如:提前规划,制定应急预案;实时监测,多方合作,形成合力;灵活调整,强化物流:优化运输路线,提高物流效率,确保应急物资的快速运输和配送。因此,应急供应链网络规划方案,可以提高应急物资供应链的快速响应能力,为应对突发公共卫生事件提供有力的支持。较其他产品而言,时间是应急物资的首要考虑因素,在此基础上,为节约社会资源以及提高居民生活幸福指数,把总成本及物资分配的相对公平性纳入考虑因素中。本文主要的研究过程如下:(1)考虑到应急供应链概念,构建一个包含多个由供应点、中转点、需求点组成的应急供应链网络规划模型。首先考虑响应总时间,其中包括运输工具的准备时间、运输时间到中转点建立时间等所有时间成本;其次考虑成本问题,包括中转点到需求点的日均运送成本、中转点的日均建设成本以及供应点到中转点的日均运输成本;最后考虑应急物资分配的相对公平性,本文以应急物资供应短缺时产生的惩罚成本进行量化。运用线性加权法,将多目标转化为单目标数值问题,规划应急供应链网络,为管理者提供决策依据。(2)简单介绍樽海鞘群算法(Salp Swarm Algorithm,SSA)的原理起源及其优缺点。针对樽海鞘群算法的内在缺陷和不足,提出了改进樽海鞘群算法(Improved Salp Swarm Algorithm,ISSA),即在SSA的基础上,将非线性自适应惯性权重、坠落机制、透镜成像反学习策略引入SSA算法中。利用惯性权重w更新追随者位置,算法初期具有较大的w,可快速找到全局最优解,而且在多次迭代后,w非线性减小,相对应的每个樽海鞘的搜索步长减小,从而提高了局部优化能力,加快了算法的收敛速度,使算法收敛精度提高;引入坠落机制,保证种群数量不变;引入一种基于镜头成像原理的反学习策略,在解空间寻找反向解,跳出局部最优,以提高SSA的求解效果。为验证ISSA的改进效果,将ISSA应用于不同维度的基准函数,且与PSO算法、WOA算法、MFO算法、SCA算法、GWO算法和原算法SSA算法进行比较分析,其优化结果表明,ISSA所求解的质量、稳定性和算法收敛速度明显提升,优于以上对比算法。(3)以某甲流爆发区的应急物资的供应链网络为研究对象,基于过往案例现实情况,给出应急供应链网络参数信息,用改进樽海鞘群算法求解模型,通过对应急物资灵敏度的分析,体现了系统总成本及应急物资分配相对公平性之间的悖反关系,阐述在管理者完全偏向单个目标与多目标混合求解的区别,说明三个目标不同权重对最低网络响应总时间、最小网络成本和物资分配公平性的影响,分析在不同算法求解目标条件下,改进樽海鞘群算法为最优求解,为管理者决策提供依据。

关键词：应急供应链改进樽海鞘群算法非线性自适应惯性权重应急物资

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神经血管耦合在骨修复中作用的研究进展

上海交通大学学报（医学版） 2024年第3期44卷 373-378页

作者：何姝航郭尚春陶诗聪上海交通大学医学院附属第六人民医院骨科上海200233 上海交通大学医学院附属第六人民医院临床医学院上海200233 上海市四肢显微外科研究所上海200233

骨修复是一个复杂的生理过程,骨内的神经通过释放生物活性分子以及与骨内细胞相互作用等方式调节骨组织再生。近年来,已经有研究尝试基于神经血管耦合进行生物材料设计,取得了有价值的成果。该文对神经与骨组织相互作用,以及利用神经血... 详细信息

骨修复是一个复杂的生理过程,骨内的神经通过释放生物活性分子以及与骨内细胞相互作用等方式调节骨组织再生。近年来,已经有研究尝试基于神经血管耦合进行生物材料设计,取得了有价值的成果。该文对神经与骨组织相互作用,以及利用神经血管耦合设计和制造可用于骨组织再生的生物活性材料的研究进展进行总结和探讨,为充分理解和利用神经血管耦合在骨修复中的功能提供新视角,为骨修复策略的研究及临床治疗提供新的思路。

关键词：神经血管耦合骨修复骨内神经骨组织工程

注意力恢复视角下海珠国家湿地公园游憩空间优化设计研究

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注意力恢复视角下海珠国家湿地公园游憩空间优化设计研究

作者：黄诗程广州大学

学位级别：硕士

城市化的发展使得人们的注意力过度消耗,从而产生心理、生理和认知方面的消极影响。城市中的湿地公园拥有较好的自然条件,为城市居民与自然环境接触提供了便利,但目前缺乏对湿地公园与注意力恢复效益的关注。本文尝试引入注意力恢复理论... 详细信息

城市化的发展使得人们的注意力过度消耗,从而产生心理、生理和认知方面的消极影响。城市中的湿地公园拥有较好的自然条件,为城市居民与自然环境接触提供了便利,但目前缺乏对湿地公园与注意力恢复效益的关注。本文尝试引入注意力恢复理论,采用质性与量化分析相结合的研究方法,探究海珠湿地公园不同类型游憩空间的恢复效能差异,以及游憩空间中具有恢复效能的环境要素,以此为基础,提出湿地公园游憩空间注意力恢复设计策略,并进行海珠国家湿地公园优化设计。本研究首先对以往研究中涉及的恢复性环境、湿地公园、游憩空间和环境心理学基础理论进行梳理,为提取海珠国家湿地公园注意力恢复要素以及游憩空间划分提供理论依据。研究分为两个部分。第一部分为注意力恢复初步影响要素研究。调研结合半结构式访谈,了解公众对海珠湿地公园的恢复需求和对环境的恢复预期,采用扎根理论的三级编码技术对访谈内容进行质性分析,并将编码结果作为注意力恢复初步影响要素合集。第二部分为注意力恢复影响要素提取。根据初步影响要素合集设计要素满意度评价问卷,结合注意力恢复量表进行实地调研,分析不同类型游憩空间对注意力恢复的差异。然后,通过Pearson对各类型游憩空间进行相关性分析,确定各类型游憩空间环境要素与注意力恢复之间的相关关系。继而提取具有相关性的环境要素进一步做回归分析,解析游憩空间产生恢复效益的影响要素和影响效能。结果显示,第一,海珠湿地公园游憩空间注意力恢复环境主要由自然要素、人工要素、感知要素3个核心范畴构成,下分14个主范畴、46个初始概念。第二,不同类型游憩空间注意力恢复效能呈现:观赏游览类空间>休闲放松类空间>主题活动类空间>农业体验类空间>科普教育类空间>管理服务类空间,科普教育类、农业体验类、观赏游览类、休闲放松类、主题活动类、管理服务类6类游憩空间中,具有恢复效能的环境要素类型和数量也存在差异。以此为依据,空间设计将围绕具有恢复效能的要素进行补充和优化,结合注意力恢复理论的四个维度,从整体规划、流线、空间细部进行优化设计。研究结果可以为湿地公园健康景观设计提供新思路,促进公众健康生活场所的建设,引导公众在湿地公园进行观赏游览,提升注意力恢复体验。

关键词：注意力恢复环境要素湿地公园游憩空间海珠湿地

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四川金口河水晶的成因研究

四川金口河水晶的成因研究

作者：程诗渤桂林理工大学

学位级别：硕士

地方特色资源在高中思想政治教学中的应用研究 ——以重庆市开州区为例

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地方特色资源在高中思想政治教学中的应用研究 ——以重庆市开州...

作者：程诗越重庆三峡学院

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末水条斑紫菜对健康C57BL/6J小鼠肠道微生物的影响

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南京农业大学学报 2024年

作者：程诗瑶吴越陈志刚南京农业大学食品科技学院

[目的]本文旨在探究末水条斑紫菜对健康C57BL/6J小鼠肠道微生物及其代谢产物的影响。[方法]对小鼠分别灌胃生理盐水(对照组)、1.15 g·kg-1(低剂量组)和2.30 g·kg-1(高剂量组)剂量的末水条斑紫菜，28 d后取小鼠标本进行病理切片观察、... 详细信息

[目的]本文旨在探究末水条斑紫菜对健康C57BL/6J小鼠肠道微生物及其代谢产物的影响。[方法]对小鼠分别灌胃生理盐水(对照组)、1.15 g·kg-1(低剂量组)和2.30 g·kg-1(高剂量组)剂量的末水条斑紫菜，28 d后取小鼠标本进行病理切片观察、短链脂肪酸含量测定以及肠道菌群16S rDNA高通量测序。[结果]灌胃末水条斑紫菜组小鼠生长性能没有显著性变化，与对照组结肠长度53.50 mm相比，低剂量组小鼠结肠显著增长至65.60 mm，结肠组织病理切片显示，末水条斑紫菜可以增加杯状细胞的数量。通过对结肠内容物中短链脂肪酸含量的测定发现，乙酸、丙酸、正戊酸与异戊酸含量均没有显著变化，低剂量组小鼠结肠内容物中正丁酸含量显著增加，高剂量组小鼠结肠内容物中正丁酸与异丁酸含量均显著增加。经16S rDNA高通量测序小鼠结肠内容物发现，灌胃低剂量与高剂量末水条斑紫菜均降低了微生物物种多样性，增加了厚壁菌门的相对丰度，降低了拟杆菌门的相对丰度。但是肠道中杜氏杆菌属(Dobusiella)相对占比显著增加，Norank＿f＿norank＿o＿Clostridia＿UCG-014、螺杆菌(Helicobacter)等致病菌相对占比减少。[结论]末水条斑紫菜能够促进结肠组织长度变化，调节健康C57BL/6J小鼠肠道菌群，促进有益菌生长以及丁酸的产生，最佳摄入量为1.15 g·kg-1。

关键词：末水条斑紫菜健康C57BL/6J小鼠肠道菌群短链脂肪酸