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晚期糖基化终末产物受体真核表达载体的构建与表达

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南方医科大学学报 2007年第7期27卷 983-986页

作者：李煜生龚小卫程蔚蔚魏洁姜勇南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室广东广州510515

目的构建带HA标签的晚期糖基化终末产物受体真核细胞表达载体。方法采用PCR方法从人cDNA文库中扩增RAGE基因编码区,使用常规酶切、连接方法将其重组至pcDNA3真核表达载体中,对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定。以RAGE/pcDNA3重组质粒... 详细信息

目的构建带HA标签的晚期糖基化终末产物受体真核细胞表达载体。方法采用PCR方法从人cDNA文库中扩增RAGE基因编码区,使用常规酶切、连接方法将其重组至pcDNA3真核表达载体中,对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定。以RAGE/pcDNA3重组质粒为模板,运用突变方法在RAGE氨基末端信号肽后插入HA序列。利用Western blotting在HEK293细胞中对经过测序鉴定的HA-RAGE\pcDNA3重组质粒的表达进行了检测。结果RAGE/pcDNA3重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,HA-RAGE\pcDNA3重组质粒可在HEK293细胞中表达。结论成功构建了带HA标签的RAGE真核细胞表达载体,该载体能在真核细胞中表达,为进一步研究RAGE在细胞信号转导途径中的作用提供了一个重要的工具。

关键词： RAGE 载体构建基因表达

KCNE2的两种突变体I57T和V65M对Kv4.3通道功能的调节

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生物化学与生物物理进展 2008年第2期35卷 180-186页

作者：刘文娟邓鹏程蔚蔚邓建新潘秉兴姜勇刘杰广州南方医科大学病理生理学教研室广东省休克微循环重点实验室广州510515

Mink相关蛋白1(MiRP1)是由KCNE基因家族成员KCNE2编码的具有一个跨膜结构的小分子蛋白质,发生在KCNE2上的相关突变能够引起遗传性长QT间期综合症(long QT syndrome,LQT6),但其机制不明.以往的工作表明,MiRP1调节瞬间外向钾电流(transien... 详细信息

Mink相关蛋白1(MiRP1)是由KCNE基因家族成员KCNE2编码的具有一个跨膜结构的小分子蛋白质,发生在KCNE2上的相关突变能够引起遗传性长QT间期综合症(long QT syndrome,LQT6),但其机制不明.以往的工作表明,MiRP1调节瞬间外向钾电流(transient outward current,Ito)的功能,对维持心电稳定性具有重要的调节作用.在哺乳细胞系COS-7表达系统利用膜片钳全细胞记录方式,研究了两种LQT6相关的突变体I57T和V65M对Kv4.3通道功能的影响,从MiRP1对Ito功能调控的改变探讨LQT6引起心律失常的电生理机制.结果表明,KCNE2与Kv4.3共表达后对通道功能具有明显的调控作用,使通道的激活和失活明显减慢,电压依赖性失活发生正向移位,同时加快Kv4.3通道从失活中的恢复.I57T与Kv4.3共表达的通道,门控动力学以及通道的恢复特性更接近Kv4.3单独表达的通道,表现为丧失KCNE2的功能——"loss of function",而V65M的作用则与之刚好相反,对Kv4.3门控动力学和恢复特性的调节较KCNE2更强,同时,使通道电流密度明显降低,表现为增强KCNE2的功能——"gain of function".由此推论,KCNE2对Ito功能有重要的调节作用,发生在KCNE2基因上的突变,无论是增强(V65M)还是减弱(I57T)KCNE2的功能都可能通过改变Ito在心脏电稳定性中的贡献,从而使心脏在某些条件下发生心律失常.

关键词： KCNE2 瞬间外向钾电流 Kv4.3 长QT间期综合症突变

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做好三级防御不生弱智儿

母血同型半胱氨酸、胱抑素C水平变化对子代先天性心脏病发病的影响

婚育与健康 2015年第10期 28-29页

作者：程蔚蔚中国福利会国际和平妇幼保健院围产科

怀胎十月,一朝分娩,如果生下来的宝宝不健康,比如生下一个先天愚型的"唐氏儿"或唇腭裂宝宝,这对一个家庭将会带来相当的压力.如何才能有效预防新生儿出生缺陷,避免生出不健康的宝宝?准妈妈们一定要重视出生缺陷的"三级预防",做好孕前和... 详细信息

怀胎十月,一朝分娩,如果生下来的宝宝不健康,比如生下一个先天愚型的"唐氏儿"或唇腭裂宝宝,这对一个家庭将会带来相当的压力.如何才能有效预防新生儿出生缺陷,避免生出不健康的宝宝?准妈妈们一定要重视出生缺陷的"三级预防",做好孕前和产前筛查,才能最大限度避免生出不健康的宝宝.

关键词：新生儿出生缺陷弱智儿防御三级预防先天愚型产前筛查健康唇腭裂

来源：评论

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现代妇产科进展 2022年第11期31卷 845-847页

作者：许肖娜吴怡夏缘青叶宝英程蔚蔚上海交通大学附属国际和平妇幼保健院妇产科上海200030 上海交通大学附属国际和平妇幼保健院产前诊断中心上海200030 上海交通大学附属国际和平妇幼保健院超声科上海200030 上海市胚胎源性疾病重点实验室上海200030

目的:探讨母血同型半胱氨酸(HCY)、胱抑素C(Cys C)水平变化对子代先天性心脏病发病的影响。方法:采用病例对照研究,选取2015年1月至2021年12月在上海交通大学附属国际和平妇幼保健院建卡并产检且妊娠中期胎儿超声心动图检查发现胎儿先... 详细信息

目的:探讨母血同型半胱氨酸(HCY)、胱抑素C(Cys C)水平变化对子代先天性心脏病发病的影响。方法:采用病例对照研究,选取2015年1月至2021年12月在上海交通大学附属国际和平妇幼保健院建卡并产检且妊娠中期胎儿超声心动图检查发现胎儿先天性心脏病的单胎孕妇202例(先心病组),同期建卡产检且畸形筛查未提示胎儿存在结构异常的单胎孕妇404例(对照组)。妊娠早期(12~14周)抽取空腹血检查HCY和Cys C水平,比较两组孕妇的HCY和Cys C水平。选取差异有统计学意义的标志物进行logistic回归分析。结果:先心病组的母血HCY及Cys C水平高于对照组,差异有统计学意义[HCY:(4.66±2.35)μmol/L vs (3.81±1.48)μmol/L,Cys C:(0.55±0.11)mg/L vs (0.51±0.10)mg/L,P<0.001]。logistic回归分析结果显示,母血HCY和Cys C是子代发生先天性心脏病的危险因素(OR分别为1.38和47.12,P<0.001)。结论:妊娠期血HCY和Cys C水平升高可能导致子代发生先天性心脏病的风险增加。

关键词：先天性心脏病同型半胱氨酸胱抑素C 危险因素

ERβ介导脱氢表雄酮对成骨细胞的选择性作用

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中华妇产科杂志 2011年第9期46卷 674-677页

作者：王玉东郎虓陶敏芳程蔚蔚上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院妇科 200030 上海交通大学附属第六人民医院妇产科

目的明确ERβ介导脱氢表雄酮（DHEA）对成骨细胞的选择性作用机制。方法构建ERβ沉默表达的pLVTHM—GFP／ERβ-shRNA质粒和ER[3高表达的pWPT-ERβ重组质粒，转染人成骨细胞系hMG63，使hMG63细胞中的ER[3沉默表达（命名为hMG63-shER[3细... 详细信息

目的明确ERβ介导脱氢表雄酮（DHEA）对成骨细胞的选择性作用机制。方法构建ERβ沉默表达的pLVTHM—GFP／ERβ-shRNA质粒和ER[3高表达的pWPT-ERβ重组质粒，转染人成骨细胞系hMG63，使hMG63细胞中的ER[3沉默表达（命名为hMG63-shER[3细胞）和高表达（命名为hMG63-ERβ细胞），分别给予DHEA（1×10^-7mol／L）、加或不加入U0126、依托泊苷作用后，流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡情况；同时利用逆转录PCR技术检测DHEA对hMG63细胞雌激素受体亚型mRNA表达的影响。结果hMG63-ERβ和hMG63-shERβ细胞中ERβ基因的相对表达量分别比hMG63细胞升高7．39倍和降低为17％。DHEA对hMG63-shERβ、hMG63-ERβ和对照细胞hMG63细胞ER[3mRNA的表达有升调节作用，而对ERamRNA的表达无明显影响。与hMG63-shERβ细胞相比，DHEA能明显促进ER[3高表达时（即hMG63-ERβ细胞）和对照细胞hMG63的细胞增殖[增殖指数分别为（81．6±7．6）％、（75．0±5．3）％，P均〈0．05]并拮抗细胞的凋亡[凋亡率分别为（12．2±1．6）％、（14．6±1．5）％，P均〈0．01]，该作用可被U0126部分阻断[增殖指数分别为（33．2±2．0）％、（41．2±2．4）％，凋亡率分别为（40．5±4．3）％、（43．3±4．1）％，P均〈0．05]。结论优势表达的ERB是介导DHEA对成骨细胞选择性作用的主要受体。

关键词：去氢表雄酮雌激素受体β 成骨细胞

双胎妊娠妇女适宜孕期增重及其与妊娠结局的关系

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中华围产医学杂志 2017年第2期20卷 115-119页

作者：张玢琪刘小华程蔚蔚上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院妇产科 200030

目的探讨双胎妊娠妇女适宜孕期增重及其与妊娠结局的关系。方法本研究为回顾性研究。研究对象为2012年1月1日至2015年6月30日在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院分娩的双胎妊娠孕妇。先选择妊娠结局良好，且无妊娠合并症或并... 详细信息

目的探讨双胎妊娠妇女适宜孕期增重及其与妊娠结局的关系。方法本研究为回顾性研究。研究对象为2012年1月1日至2015年6月30日在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院分娩的双胎妊娠孕妇。先选择妊娠结局良好，且无妊娠合并症或并发症的孕妇711例，计算其孕期增重，将这些孕妇的孕期增重的P25-～P75定为适宜孕期增重范围。在此基础上，选择足月双胎、无妊娠合并症的孕妇504例，分析孕期增重范围与妊娠结局的关系。采用t检验、方差分析或x2检验对数据进行统计学分析。结果（1）初步确定双胎足月妊娠孕妇（37孕周）的适宜增重范围为15．3～21．4kg。体重过低[体重指数（body mass index，BMI）〈18．5]、正常体重（≥18．5～〈25．0）和超重肥胖（≥25．0）双胎孕妇孕期增重[M（P25～P75）]分别为18．5（15．8-22．2）、18．3（15．3～21.3）和18．1（14．9～21．5）kg，3组差异无统计学意义（F=0．121，P=0．886）。（2）对504例根据前述适宜孕期增重范围分为增重过低组（低于推荐范围下限）137例，增重正常组（孕期增重在推荐范围内）238例和增重过高组（孕期增重高于推荐范围上限）129例。分析发现，随孕期增重水平增加，新生儿出生体重明显增大『分别为（2626．1±225．8）、（2680．1±237．9）和（2751．9±257．1）g，F=9．189，P〈0．011；双胎出生体重均≥2500g的孕妇所占比例略呈上升趋势，但差异无统计学意义[3组分别为51．1％（70／137）、60．5％（144／238）和64.3％（83／129），x2=5．279，P=0．071]。孕期增重过低组、正常组及过高组相比，妊娠期糖尿病的发病风险呈下降趋势f分别为31．4％（43／137）、14．7％（35／238）和9．3％（12／129），x2=25．144，P〈0．01]，而妊娠期高血压疾病（包括妊娠期高血压和子痫前期）的发病风险差异无统计学意义。504例足月双胎妊娠孕妇中，妊娠期糖尿病患者90例（17．8％），其孕前平均BMI为22．5±2．8，高于非患病孕妇的21．2±2．9（t=3．735，P〈0．01）；妊娠期高血压疾病（包括子痫前期和妊娠期高血压）患者共67例（13．3％），其孕前平均BMI为22．4±2．8，高于未患病孕妇的21．3±2．9（t=2．767，P=0．006）。结论孕前BMI对孕期增重的影响不明显。孕期增重达到或超过推荐的适宜增重范围，且在一定范围内时，能够有效提高新生儿出生体重，且未见增加妊娠期并发症（包括妊娠期糖尿病、妊娠期高血压和子痫前期）的发生风险。

关键词：妊娠双胎体重增长人体质量指数妊娠结局

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胎儿发育异常与表观修饰遗传学

中国产前诊断杂志（电子版） 2008年第1期1卷 7-9页

作者：刘特程蔚蔚上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院上海200030

表观遗传学(epigenetics)是最近发展起来的一个遗传学分支,它是研究生物体不依赖于 DNA 基因型的遗传学,是对普通遗传学的一种补充和发展.异常的表观修饰可导致胚胎发育异常和畸变,引起多种代谢异常疾病.

关键词：从头甲基化共价修饰普通遗传学表观遗传学组蛋白基因组印记等位基因乙酰化胎儿发育异常哺乳动物

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小剂量熟大黄预防妊高征的研究

中华妇产科杂志 1994年第8期29卷 463-464页

作者：张振钧程蔚蔚杨玉美樊效琪王钟鸣上海医科大学扫产科医院

应用小剂量熟大黄（每日７５０ｍｇ），对妊娠中期体重指数＞０．２４，或平均动脉压（ＭＡＰ－２）＞１２ｋＰａ（９０ｍｍＨｇ）者（１４０例，大黄组）进行预防性用药，至分娩前停用，同时设立安慰剂组（１２５例）与对照组（６８例... 详细信息

应用小剂量熟大黄（每日７５０ｍｇ），对妊娠中期体重指数＞０．２４，或平均动脉压（ＭＡＰ－２）＞１２ｋＰａ（９０ｍｍＨｇ）者（１４０例，大黄组）进行预防性用药，至分娩前停用，同时设立安慰剂组（１２５例）与对照组（６８例）。观察妊高征的发生、朋药前后血浆抗轻血酶ＩＩＩ（ＡＴＩＩＩ）、纤维结合蛋白（Ｆｎ）及纤溶酶原活性抑制因子（ＰＡＩ）水平的变化。结果：大黄组发生妊高征者８例（５．７％），低于安慰剂组的发生率（２０．８％），两组比较差异有非常显著意义（Ｐ＜０．０１）。服药９～１０周时，大黄组的血浆Ｆｎ、ＰＡＩ水平明显低于安慰剂组（Ｐ＜０．０５），大黄组朋药前后ＡＴＩＩＩ下降数值明显低于安慰剂组下降的数值（Ｐ＜０．０５）。提示：熟大黄有预防好高征发生的作用，其作用机理与抑制ＰＡＩ括性，降低血管内皮损伤有关。

关键词：大黄预防妊娠高血压综合征

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水中分娩462例临床分析

上海医学 2005年第9期28卷 737-740页

作者：董淑筠金皖玲程蔚蔚汪平上海市长宁区妇幼保健院产科 200051

目的对水中分娩产妇的产程、产道裂伤、出血量、分娩疼痛以及新生儿结局进行分析,以评价水中分娩的减痛效果及安全性。方法2003年3月至2005年6月水中分娩的产妇462例为水中分娩组,均为足月妊娠、单胎、头位、胎心监护正常且无妊娠合并... 详细信息

目的对水中分娩产妇的产程、产道裂伤、出血量、分娩疼痛以及新生儿结局进行分析,以评价水中分娩的减痛效果及安全性。方法2003年3月至2005年6月水中分娩的产妇462例为水中分娩组,均为足月妊娠、单胎、头位、胎心监护正常且无妊娠合并症及并发症。对照组为同期、低危、正常阴道分娩的产妇。比较两组产妇的产程、产道裂伤、出血量、新生儿结局、水中分娩的减痛效果。结果与对照组比较,水中分娩组第一产程及第二产程共缩短19 min,但两组的差异无显著性(P>0.05)。两组产妇产前及产后血红蛋白的差异无显著性(P>0.05)。与对照组未行会阴切开者比较,水中分娩组会阴Ⅰ度裂伤发生率明显高于对照组(P0.05),水中分娩组新生儿入新生儿室治疗率明显高于对照组(P0.05)。结论水中分娩可以减轻产妇的疼痛,减少镇痛药物的使用。对母亲、新生儿未见不良结局。

关键词：水中分娩减痛效果临床分析新生儿结局 Apgar评分分娩产妇产后尿潴留产道裂伤第二产程