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巴氏蘑菇多糖对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞MAPK信号转导通路的作用研究

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巴氏蘑菇多糖对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞MAPK信号转导通路的作用...

作者：程菲儿山西农业大学

学位级别：硕士

[目的]研究巴氏蘑菇多糖(Agaricus Blazei Murrill polysaccharide, ABMP) 对巨噬细胞MAPK信号转导通路的影响,探讨ABMP的免疫调节机制。[方法](1)4000、2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、15.62、7.8125、 3.906、1.953 μg/mL的ABMP作用巨噬细胞RAW 264.724 h,运用MTT法检测ABMP对巨噬细胞RAW 264.7增殖作用的效果。(2)不同浓度ABMP及脂多糖(LPS,阳性对照)作用巨噬细胞RAW264.76 h;更换含有ABMP和LPS的细胞培养液作用24 h。然后分别收集细胞,提取细胞内总RNA,采用实时荧光定量法(RT-PCR)测定巨噬细胞JNK、ERK、p38 mRNA表达量;提取巨噬细胞全细胞蛋白,采用蛋白免疫印迹western blot测定蛋白JNK1/2、ERK1/2、p38及其磷酸化蛋白的含量。[结果](1)采用浓度分别为4000、2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、 15.62、7.8125、3.906、1.953 μg/mL的ABMP对小鼠巨噬细胞RAW 264.7进行孵育,24 h后通过MTT对其细胞活力进行检测。结果表明,ABMP对RAW 264.7巨噬细胞的抑制率随着浓度的增加而逐渐升高,最适细胞生长浓度为1000μg/mL。同时,进行了三种抑制剂浓度的筛选,结果发现,处理组与对照组相比,当NK、ERK和p38抑制剂浓度分别大于6.25 μmol、20 μmol和6.25 μmol时对细胞的抑制作用明显增强。(2)加500 μg/mL、1000μg/mL、2000μg/mL等不同浓度的ABMP的培养基培养RAW 264.7小鼠巨噬细胞1 h,再用含有不同浓度ABMP和终浓度为1μg/mL LPS的培养基共同培养细胞,培养6 h,收集细胞并检测相关基因的mRNA相对表达量。结果表明：不同浓度的ABMP均能极显著的抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞JNK、ERK、p38 mRNA的相对表达量,在ABMP浓度为1000 μg/mL时,各个基因的抑制率最大,说明ABMP能够抑制LPS诱导的RAW 264.7小鼠巨噬细胞中JNK、ERK、p38 mRNA的表达。(3)以β-actin作为内参进行校正,蛋白免疫印迹结果显示,ABMP浓度在500-2000 μg/mL范围内,对LPS诱导下的小鼠巨噬细胞RAW 264.7 MAPK信号通路蛋白均有一定的抑制作用,并且对磷酸化蛋白的效果较为明显。其中,当ABMP浓度为1000 μg/mL时,对蛋白JNK、p-JNK、ERK1/2、p38抑制效果最为显著。当多糖浓度为500 μg/mL时,对蛋白p-ERK、p-p38抑制效果最为显著。[结论]BMP可促进巨噬细胞RAW 264.7细胞增殖,并通过MAPK信号转导通路调节巨噬细胞RAW 264.7的免疫功能,JNK、ERK、p38均是ABMP作用的分子靶点。

关键词：巴氏蘑菇多糖 MAPK信号通路巨噬细胞RAW264.7 磷酸化

原花青素和原儿茶酸对淀粉消化酶的联合抑制作用

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食品工业科技 2024年第20期45卷 105-113页

作者：张静焦洁帆云少君冯翠萍程菲儿山西省卫生健康委监督检查中心山西太原030045 山西农业大学食品科学与工程学院山西太谷030801

淀粉是人体获取能量主要来源,原花青素(Procyanidin,PC)和原儿茶酸(protocatechuic acid,PCA)等天然产物能够控制淀粉的消化,从而达到降低餐后血糖的效果。本文通过抑制率测定、Lineweaver-Burk双倒数图法、紫外光谱、荧光淬灭、等效线... 详细信息

淀粉是人体获取能量主要来源,原花青素(Procyanidin,PC)和原儿茶酸(protocatechuic acid,PCA)等天然产物能够控制淀粉的消化,从而达到降低餐后血糖的效果。本文通过抑制率测定、Lineweaver-Burk双倒数图法、紫外光谱、荧光淬灭、等效线图解法和傅里叶红外光谱研究了PC和PCA对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制效果。结果表明:PC对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制的IC_(50)值分别为0.0524和0.0106 mg/mL,PCA分别为1.9426和1.0667 mg/mL,PCA表现出更好的抑制能力;Lineweaver-Burk双倒数图法表明PC和PCA对α-淀粉酶的抑制为混合型抑制,对α-葡萄糖苷酶的抑制分别为非竞争性抑制和竞争性抑制。与α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的结合主要依靠疏水键和氢键,通过改变酶氨基酸残基微环境,进一步改变酶结构。复配比例为1:21时对α-葡萄糖苷酶的抑制效果最优,1:37时对α-淀粉酶的抑制效果最优。两物质复配比例为1:21时CI小于1,对α-葡萄糖苷酶表现出协同抑制作用;复配比例为1:37时CI小于1,对α-淀粉酶表现出协同抑制作用。本研究揭示了PC和PCA复合使用对淀粉消化酶的抑制作用机制,为开发天然降糖膳食补充剂作为健康食品辅料或药物开发提供一定理论基础。

关键词：原花青素原儿茶酸 α-淀粉酶 α-葡萄糖苷酶抑制作用

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荞麦在食品相关领域研究态势分析

食品工业科技 2018年第5期39卷 337-342,347页

作者：程菲儿李雅刘芳王敏西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学图书馆杨陕西陵712100

基于WoS、CNKI数据库,通过科学计量学的方法,采集了1992~2016年间荞麦研究相关的中外文文献,运用知识图谱分析了国内外荞麦研究进展,揭示了该领域发展脉络及知识结构、核心研究单位,总结了该领域研究现状、热点及发展趋势。以此为荞麦... 详细信息

基于WoS、CNKI数据库,通过科学计量学的方法,采集了1992~2016年间荞麦研究相关的中外文文献,运用知识图谱分析了国内外荞麦研究进展,揭示了该领域发展脉络及知识结构、核心研究单位,总结了该领域研究现状、热点及发展趋势。以此为荞麦相关领域的科研工作者提供研究思路与方向,同时为科学管理者决策提供数据参考。

关键词：荞麦知识图谱技术 WoS数据库 CNKI数据库

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次食营养与健康的关系研究

科技与生活 2012年第15期 224-225页

作者：程菲儿同济大学上海200092

饮食健康逐渐被人们所重视。食物中包含了各种各样的营养物质，我们通过合理摄取各种各样的食物可以获得营养，维持我们的生命与身体健康。本文将从营养学的角度分析我们分析日常饮食中的化学成分和人体对这些化学成分的需求度，帮助大... 详细信息

饮食健康逐渐被人们所重视。食物中包含了各种各样的营养物质，我们通过合理摄取各种各样的食物可以获得营养，维持我们的生命与身体健康。本文将从营养学的角度分析我们分析日常饮食中的化学成分和人体对这些化学成分的需求度，帮助大家合理膳食，改善身体质量，预防疾病，达到提高健康体质和生活质量的目的。

关键词：食物营养成分营养素饮食健康合理膳食

D-手性肌醇改善高脂诱导肝脏胰岛素抵作用机制研究

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D-手性肌醇改善高脂诱导肝脏胰岛素抵作用机制研究

高脂膳食模式下脂肪酸构成对大鼠肝脏胰岛素水平、铁含量及铁代谢相关基因表达的影响

中国食品科学技术学会第十七届年会

作者：程菲儿王敏西北农林科技大学

本研究以荞麦D-手性肌醇为研究对象,从体内和体外两方面进行研究,探究其对葡萄糖摄取以及血糖稳态的调控作用,并在此基础上,从DAG介导的PI3K/AKT胰岛素信号通路及糖异生方面,深入探讨D-手性肌醇对糖代谢的调控作用及潜在分子机制。结果... 详细信息

本研究以荞麦D-手性肌醇为研究对象,从体内和体外两方面进行研究,探究其对葡萄糖摄取以及血糖稳态的调控作用,并在此基础上,从DAG介导的PI3K/AKT胰岛素信号通路及糖异生方面,深入探讨D-手性肌醇对糖代谢的调控作用及潜在分子机制。结果表明,D-手性肌醇在发生胰岛素抵抗的体外和体内模型中均能通过DAGPKC-PI3K/AKT途径改善小鼠肝脏胰岛素抵抗,进而发挥其稳定血糖的作用。本研究揭示荞麦和豆类等富含D-手性肌醇的植物是潜在、可开发的预防以上多种慢性疾病的资源。

关键词： D-手性肌醇肝脏胰岛素抵抗 DAG-PKCε 转录组测序

来源： cnki会议评论

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中国食品学报 2023年第8期23卷 154-164页

作者：程菲儿申姣姣张娜宁杨皓瑜何丽霞云少君冯翠萍山西农业大学食品科学与工程学院山西太谷030801

目的:基于胰岛素-铁代谢交互作用探讨膳食脂肪酸构成对肝脏糖水平的影响。方法:21日龄清洁级雄性SD大鼠60只,随机分为:对照组、15%大豆油组(15%SO)、15%猪油组(15%PO)、15%橄榄油组(15%OO)、15%鱼油组(15%FO)及1∶1 SO∶FO组。首先以气... 详细信息

目的:基于胰岛素-铁代谢交互作用探讨膳食脂肪酸构成对肝脏糖水平的影响。方法:21日龄清洁级雄性SD大鼠60只,随机分为:对照组、15%大豆油组(15%SO)、15%猪油组(15%PO)、15%橄榄油组(15%OO)、15%鱼油组(15%FO)及1∶1 SO∶FO组。首先以气相色谱法测定油脂脂肪酸构成,之后以不同油脂干预大鼠13周,测定其肝脏葡萄糖、胰岛素含量,检测血红蛋白、血清铁、铁蛋白以及肝脏中的铁含量,以普鲁士蓝染色观测肝脏组织铁沉积情况,以实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测大鼠肝脏组织铁代谢关键基因的表达量。结果:SO中n-6不饱和脂肪酸含量为46.37%,FO中n-3不饱和脂肪酸含量为37.55%,PO中饱和脂肪酸含量为24.78%,OO中单不饱和脂肪酸含量为36.39%。各组大鼠肝脏中葡萄糖含量无明显差异,而1∶1 SO∶FO组大鼠肝脏胰岛素水平显著低于对照组及15%SO组(P<0.05)。各组大鼠血红蛋白及铁蛋白含量无显著性差异,而15%SO组血清铁含量最高且显著高于对照组及1∶1 SO∶FO组(P<0.05)。与对照组相比,15%PO组肝脏铁含量显著性升高(P<0.05)。普鲁士蓝染色结果显示,15%SO组和15%PO组棕褐色颗粒增多。铁代谢相关基因检测结果表明,与对照组相比,15%SO组和15%PO组铁调素(Hep)基因表达显著降低(P<0.05);15%SO组和15%PO组膜铁转运蛋白(Fpn1)基因的表达量显著性低于其它各高脂组(P<0.05)。与对照组相比,15%FO组二价金属转运蛋白1(DMT-1)基因的表达量显著性升高(P<0.05),15%PO组转铁蛋白受体2(TfR2)基因的表达量显著性降低(P<0.05)。结论:相较于15%SO,15%1∶1 SO∶FO可以抑制机体血清铁水平增高及肝脏铁的沉积,进而抵御胰岛素敏感性的降低;15%OO及15%FO对肝脏铁沉积无明显影响,而15%PO则可以引起肝脏的铁沉积,提示适量的补充鱼油对于肝脏糖、铁代谢具有一定的改善作用。

关键词：膳食脂肪酸葡萄糖胰岛素铁代谢

广叶绣球菌多糖对小鼠CD8^(+)T细胞介导的免疫应答调控机制

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菌物学报 2023年第5期42卷 1163-1174页

作者：贺楷雄程艳芬云少君程菲儿曹谨玲冯翠萍山西农业大学食品科学与工程学院山西太谷030801

研究广叶绣球菌多糖(polysaccharides,SLPs)对小鼠CD8^(+)T细胞活化、增殖分化以及效应阶段的影响,探索广叶绣球菌多糖对CD8^(+)T细胞的免疫应答调控机制。通过腹腔注射环磷酰胺溶液(80mg/kg)构建免疫低下小鼠模型,灌胃广叶绣球菌多糖(... 详细信息

研究广叶绣球菌多糖(polysaccharides,SLPs)对小鼠CD8^(+)T细胞活化、增殖分化以及效应阶段的影响,探索广叶绣球菌多糖对CD8^(+)T细胞的免疫应答调控机制。通过腹腔注射环磷酰胺溶液(80mg/kg)构建免疫低下小鼠模型,灌胃广叶绣球菌多糖(低、中和高剂量分别为100、200和400 mg/kg),连续饲养20 d后处死,取脾脏和胸腺。血细胞分析仪测定血常规;MTT检测脾T淋巴细胞的扩增能力;流式细胞术分析脾脏CD8^(+)T细胞表面CD28、CTLA-4和PD1以及树突状细胞表面MHCⅠ、CD80和PD-L1的表达量;ELISA测定外周血中TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-10、穿孔素及颗粒酶B的含量;RT-PCR测定脾脏Psmb9、Psmd9、TAP1、TAP2、IFN-γ、IL-2、JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、SOCS-3和Blimp-1的mRNA表达量;Westernblot测定pJAK2/JAK2、pSTAT3/STAT3和Blimp-1的蛋白表达量。试验表明广叶绣球菌多糖高剂量组脾脏指数显著升高,外周血中红细胞、白细胞、淋巴细胞、单核细胞和血小板的含量显著升高(P<0.05或P<0.01);多糖中、高剂量组脾T淋巴细胞的扩增能力显著增强(P<0.05);中、高剂量组CD8^(+)T细胞含量显著降低,CD8^(+)T细胞表面PD-1分子含量显著降低,树突状细胞表面PD-L1分子含量显著降低、MHCⅠ细胞含量显著升高(P<0.05或P<0.01);多糖高剂量组TNF-α、IFN-γ、IL-2、穿孔素和颗粒酶B的含量显著升高(P<0.05或P<0.01),IL-10的含量显著降低(P<0.05);中、高剂量组Psmb9、Pmsd9、TAP1、TAP2和Blimp-1的mRNA含量显著升高(P<0.05或P<0.01),JAK1、JAK2、STAT1和STAT3的mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05或P<0.01)。多糖中高剂量组Blimp-1蛋白表达量显著升高(P<0.05),多糖组与阳性对照组趋势一致。因此,认为广叶绣球菌多糖能够调节MHCⅠ类抗原加工呈递分子,并通过JAK2/STAT3信号通路促进CD8^(+)T细胞的活化、增殖分化和效应杀伤过程,从而调控CD8^(+)T细胞的免疫应答,起到改善小鼠免疫低下的作用。

关键词：广叶绣球菌多糖免疫调控 CD8^(+)T细胞树突状细胞 JAK2/STAT3

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杏鲍菇多肽生物活性的研究

食品工业科技 2014年第17期35卷 347-350页

作者：程菲儿赵宇宏赵凡张晓宝窦世宏冯翠萍山西农业大学食品科学与工程学院山西太谷030801

以杏鲍菇多肽为原料,以清除DPPH·、O-2·等自由基、抑制脂质过氧化、抑菌和乳化特性为指标对其生物功能进行研究。结果表明,在实验浓度范围内,杏鲍菇多肽对DPPH·的清除率为85.94%、O-2·的清除率为80.66%,脂质过氧化抑制率为45.57%;... 详细信息

以杏鲍菇多肽为原料,以清除DPPH·、O-2·等自由基、抑制脂质过氧化、抑菌和乳化特性为指标对其生物功能进行研究。结果表明,在实验浓度范围内,杏鲍菇多肽对DPPH·的清除率为85.94%、O-2·的清除率为80.66%,脂质过氧化抑制率为45.57%;同时多肽具有很好的乳化稳定性,其在2%浓度时,乳化稳定性可达206;此外其对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌有较强的抑制作用,抑菌率分别为57.7%、55.5%、87.1%。

关键词：杏鲍菇多肽清除自由基脂质过氧化乳化性抑菌

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酶解杏鲍菇调味酱在香肠中的应用

中国食品工业 2022年第21期 74-78,83页

作者：程菲儿裴文宏冯翠萍山西农业大学食品科学与工程学院山西太原030001

本文研究了酶解杏鲍菇调味酱在香肠中的应用。将杏鲍菇调味酱以1.5%、3.0%、4.5%、6.0%的添加量加入香肠中,通过pH值、保水性、色差、TVB-N值、TBARS值和挥发性风味物质的测定结果,确定杏鲍菇调味酱在香肠中的最适添加量。将其应用在肉... 详细信息

本文研究了酶解杏鲍菇调味酱在香肠中的应用。将杏鲍菇调味酱以1.5%、3.0%、4.5%、6.0%的添加量加入香肠中,通过pH值、保水性、色差、TVB-N值、TBARS值和挥发性风味物质的测定结果,确定杏鲍菇调味酱在香肠中的最适添加量。将其应用在肉制品加工中,改善肉制品品质,为延长杏鲍菇产业链,提高附加值提供支持。

关键词：酶解杏鲍菇酱香肠风味物质