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孔雀石绿生态毒理学与水产品污染控制技术研究进展

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环境与健康杂志 2008年第7期25卷 654-657页

作者：林群梁旭方王琳程炜轩暨南大学生命科学技术学院基因与发育室广东广州510632

孔雀石绿曾在水产养殖中被广泛使用。近年来,由于经孔雀石绿处理过的水产品具有很强的残留毒性,引起了人们的高度关注。笔者对孔雀石绿及其代谢产物在生物体内的代谢分布过程、毒性、致毒机制、检测方法及去除方法作了详细介绍,并对水... 详细信息

孔雀石绿曾在水产养殖中被广泛使用。近年来,由于经孔雀石绿处理过的水产品具有很强的残留毒性,引起了人们的高度关注。笔者对孔雀石绿及其代谢产物在生物体内的代谢分布过程、毒性、致毒机制、检测方法及去除方法作了详细介绍,并对水产品养殖中存在的问题及安全养殖技术进行探讨,使人们对孔雀石绿及其潜在危害性有了更深入的了解,并为水产品的安全养殖提供可靠的研究资料。

关键词：孔雀石绿水产品生态毒理学安全

微囊藻毒素降解酶基因cDNA部分序列的克隆及检测分析

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生态科学 2013年第2期32卷 183-188页

作者：梁旭方白小丽程炜轩何珊沈丹华中农业大学水产学院武汉430070

微囊藻毒素降解酶(Microcystinase,MlrA)是在自然环境中微囊藻毒素(Microcystin,MC)降解过程中起重要作用的酶。通过PCR方法从水体中扩增MlrA基因cDNA部分序列,序列长342 bp,编码113个氨基酸(GenBank号:FJ972202),PCR方法系统性检测不... 详细信息

微囊藻毒素降解酶(Microcystinase,MlrA)是在自然环境中微囊藻毒素(Microcystin,MC)降解过程中起重要作用的酶。通过PCR方法从水体中扩增MlrA基因cDNA部分序列,序列长342 bp,编码113个氨基酸(GenBank号:FJ972202),PCR方法系统性检测不同季节环境中水体、鱼体MlrA的存在情况。结果表明,克隆的序列与日本学者Saito所公布的***-1、Y2菌株的MlrA基因同源性高达96%和89%,与挪威Sphingomonas ***-3962、澳大利亚Sphingopyxis ***21菌株的MlrA基因同源性分别为95%和94%,确定所获为鞘氨醇单胞菌菌株中的MlrA基因cDNA部分序列。同时对不同季节环境水体和部分鱼体MlrA基因的检测时,发现在水华发生的四月及五月,水体和所检测的鱼体中MlrA基因结果显示为阳性,而所检测的其余6个月份的全部水样以及7月和10月检测的鱼样,结果均呈阴性。

关键词：微囊藻毒素 MlrA基因基因克隆水体、鱼体基因检测

精氨酸对尼罗罗非鱼生长、脂肪蓄积、血清生化指标及肝脏多胺代谢途径相关基因表达的影响

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饲料工业 2021年第10期42卷 16-22页

作者：程炜轩许国焕张丽李薇印遇龙广东省科学院微生物研究所广东广州510070 华南应用微生物国家重点实验室广东广州510070 广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 广东省科学院广东广州510070 广东碧德生物科技有限公司广东广州510663 华中农业大学水产学院湖北武汉430070

为探明精氨酸对尼罗罗非鱼生长、脂肪蓄积、血清生化指标及肝脏多胺代谢途径相关基因表达量的影响。采用单因素试验设计,对初始体重20 g左右的尼罗罗非鱼(Oreochromis nilotica)分别投喂精氨酸含量为2.21%(对照组,CL组)、3.58%(低精氨酸... 详细信息

为探明精氨酸对尼罗罗非鱼生长、脂肪蓄积、血清生化指标及肝脏多胺代谢途径相关基因表达量的影响。采用单因素试验设计,对初始体重20 g左右的尼罗罗非鱼(Oreochromis nilotica)分别投喂精氨酸含量为2.21%(对照组,CL组)、3.58%(低精氨酸组,LA组)和4.46%(高精氨酸组,HA组)的饲料进行为期60 d的饲喂试验,评价尼罗罗非鱼的生长指标。酶法测定血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)、胆汁酸(TBA),索氏抽提法测量肌肉脂肪含量(MFC)和肝脏脂肪含量(LFC),定量RT-PCR方法检测肝脏多胺代谢途径相关基因表达量。结果表明:各处理组间尼罗罗非鱼的末均重、增重率、特定生长率、饲料系数和成活率均无显著性差异(P>0.05)。HA组的尼罗罗非鱼肝体比、肥满度均显著高于CL组、LA组(P0.05)。因此,饲喂30 d时,高精氨酸含量饲料饲喂尼罗罗非鱼可减少其肝脏脂肪蓄积、保护肝脏和减少血清脂肪含量,60 d后,可增加其肝脏脂肪蓄积、对肝脏造成一定损伤和提高血清脂肪含量。多胺代谢途径在精氨酸调节尼罗罗非鱼肝脏脂肪代谢过程中起重要作用。

关键词：尼罗罗非鱼多胺代谢途径脂肪生长

精氨酸对尼罗罗非鱼肝细胞多胺代谢途径相关基因表达的影响

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饲料工业 2020年第20期41卷 61-64页

作者：程炜轩许国焕张丽李薇印遇龙广东省科学院微生物研究所广东广州510070 广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 华南应用微生物国家重点实验室广东广州510070 广东碧德生物科技有限公司广东广州510663

研究旨在观察精氨酸对尼罗罗非鱼肝脏细胞多胺及脂肪酸代谢的影响以及多胺与一氧化氮途径在调控脂肪代谢过程中是否存在相互干扰。使用胰蛋白酶消化法分离尼罗罗非鱼(Oreo⁃chromis nilotica)肝脏细胞,进行低浓度(LA)与高浓度(HA)精氨酸... 详细信息

研究旨在观察精氨酸对尼罗罗非鱼肝脏细胞多胺及脂肪酸代谢的影响以及多胺与一氧化氮途径在调控脂肪代谢过程中是否存在相互干扰。使用胰蛋白酶消化法分离尼罗罗非鱼(Oreo⁃chromis nilotica)肝脏细胞,进行低浓度(LA)与高浓度(HA)精氨酸孵育,然后分别加入鸟氨酸脱羧酶(ODC)抑制剂DFMO以及一氧化氮酶(NOS)抑制剂L-NMMA,测定多胺代谢以及脂肪代谢相关基因的表达量。结果显示,HA处理下,ODC、脂肪酸合成酶(FAS)基因表达量显著下调(P<0.05);DFMO处理下,ODC基因表达量显著上调(P<0.05),而乙酰辅酶A羧化酶(ACC)以及DFMO-LA组亚精胺/精胺-N1-乙酰基转移酶(SSAT)显著下调(P<0.05);L-NMMA处理下,ODC与肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT1)基因表达量显著下调(P<0.05),而SSAT显著上调(P<0.05)。结果表明,高精氨酸浓度对于尼罗罗非鱼脂肪酸合成有抑制作用。多胺途径与一氧化氮途径在精氨酸调控尼罗罗非鱼脂肪代谢的过程中存在相互干扰。

关键词：尼罗罗非鱼多胺代谢途径脂肪细胞

水库鲮和罗非鱼谷胱甘肽转移酶基因表达量与水中蓝藻含量的关系

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华中农业大学学报 2012年第3期31卷 364-370页

作者：李玺洋梁旭方程炜轩瞿春梅张进华中农业大学水产学院武汉430070

采用荧光定量的方法对不同季节广州显岗水库鲮(Cirrhinus molitorella)和尼罗罗非鱼(Oreochro-mis niloticu)肝脏中去毒酶基因谷胱甘肽转移酶GST基因的表达情况,并结合不同季节鱼类摄入蓝藻量进行研究,旨在了解鱼体中GST基因的表达量与... 详细信息

采用荧光定量的方法对不同季节广州显岗水库鲮(Cirrhinus molitorella)和尼罗罗非鱼(Oreochro-mis niloticu)肝脏中去毒酶基因谷胱甘肽转移酶GST基因的表达情况,并结合不同季节鱼类摄入蓝藻量进行研究,旨在了解鱼体中GST基因的表达量与水体中蓝藻含量的内在联系。结果表明,4月份水库蓝藻暴发,也是鲮和尼罗罗非鱼摄食产毒蓝藻量最多的月份。GST基因的表达情况是:4月份鲮GST基因表达量比其他月份低,可能与鲮对有毒蓝藻的敏感性和耐受力有关,4月份尼罗罗非鱼GSTA及GSTR2表达量最高;其他月份,鲮GSTT表达量最高,而GSTK表达量较低,尼罗罗非鱼GSTA及GSTR2表达量相对较低。结果表明鲮GSTT在去毒过程中起重要作用,但作为环境检测的生物标记,仅适用于环境中藻毒素较低的情况。尼罗罗非鱼GSTA和GSTR2的表达量与食物中的产毒蓝藻生物量多少成正比,因此,尼罗罗非鱼GSTA及GSTR2可作为环境中藻毒素的生物标记,且尼罗罗非鱼可摄入大量有毒蓝藻,通过GST基因去除有毒蓝藻毒性,可用于生物控藻,改善水质。

关键词：鲮尼罗罗非鱼产毒蓝藻谷胱甘肽S转移酶生物标记

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微囊藻毒素与孔雀石绿对唐鱼游泳行为的影响

生态毒理学报 2009年第4期4卷 524-529页

作者：程炜轩梁旭方王琳林小涛暨南大学生命科学技术学院广州510632

鱼类行为能准确地反映环境变化,并且随着污染物浓度的变化而发生改变.采用人工饲养的方法,以对环境毒素敏感的唐鱼(Tanichthys albonubes)作为指示生物,检测了其行为对水体中微囊藻毒素和孔雀石绿的反应.结果表明,唐鱼对0.2μg·L-1的... 详细信息

鱼类行为能准确地反映环境变化,并且随着污染物浓度的变化而发生改变.采用人工饲养的方法,以对环境毒素敏感的唐鱼(Tanichthys albonubes)作为指示生物,检测了其行为对水体中微囊藻毒素和孔雀石绿的反应.结果表明,唐鱼对0.2μg·L-1的微囊藻毒素即有明显的行为反应,摆尾频率和游泳速度均在30min后显著下降;0.5μg·L-1微囊藻毒素处理下,摆尾频率和游泳速度均在15min后显著下降.0.5mg·L-1孔雀石绿处理下,游泳速度在30min后显著下降,而摆尾频率则无显著性变化.初步推断,以对毒素敏感的唐鱼行为作为标记,用以监测水环境安全是可行的.

关键词：微囊藻毒素孔雀石绿唐鱼行为反应

微囊藻毒素和脂多糖对鲢鱼和草鱼肝脏去毒相关基因活体诱导表达的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2009年第1期30卷 111-116页

作者：王琳梁旭方刘秀霞程炜轩郁颖暨南大学生物工程学系广东广州510632

采用50μg.(kg体质量)-1的微囊藻毒素-LR(MC-LR)、2 mg.(kg体质量)-1的脂多糖(LPS)和50μg.(kg体质量)-1MC-LR+2 mg.(kg体质量)-1LPS分别活体腹腔注射鲢鱼、草鱼,采用实时荧光定量PCR方法测定MC-LR和LPS对鲢鱼、草鱼肝脏alpha-谷胱甘肽S... 详细信息

采用50μg.(kg体质量)-1的微囊藻毒素-LR(MC-LR)、2 mg.(kg体质量)-1的脂多糖(LPS)和50μg.(kg体质量)-1MC-LR+2 mg.(kg体质量)-1LPS分别活体腹腔注射鲢鱼、草鱼,采用实时荧光定量PCR方法测定MC-LR和LPS对鲢鱼、草鱼肝脏alpha-谷胱甘肽S-转移酶(GSTA)、rho-谷胱甘肽S-转移酶(GSTR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和解偶联蛋白2(UCP2)等去毒相关基因活体诱导表达的影响.结果表明,鲢鱼、草鱼GSTA和GSTR的不同诱导变化除与两种淡水鱼类对毒素的耐受性相关外,还与毒素剂量、诱导时间等因素相关.LPS对GSTA和GSTR基因组成型、诱导型的不同作用,可能与调制因子LPS对不同生态习性淡水鱼类肝脏GST基因表达水平的调制作用不同有关.UCP2与GPX也分别在抑制过量ROS发生方面与肝脏抗氧化胁迫等方面起重要作用.

关键词：微囊藻毒素-LR 脂多糖可溶性谷胱甘肽S-转移酶谷胱甘肽过氧化物酶解偶联蛋白2 诱导表达实时荧光定量PCR 淡水鱼类

斑马鱼和鲢对微囊藻毒素与孔雀石绿的行为反应

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水生态学杂志 2009年第5期2卷 36-40页

作者：程炜轩梁旭方王琳林小涛暨南大学生命科学技术学院广东广州510632

鱼类行为能准确地反映环境变化,并且随着污染物浓度的变化而发生改变,因此将毒素敏感鱼类的行为作为标记,用以监测环境是可行的。用人工饲养、对环境毒素敏感的斑马鱼(Daniorerio)和对环境毒素有较强吸收能力的鲢(Hypophtha lmichthys m... 详细信息

鱼类行为能准确地反映环境变化,并且随着污染物浓度的变化而发生改变,因此将毒素敏感鱼类的行为作为标记,用以监测环境是可行的。用人工饲养、对环境毒素敏感的斑马鱼(Daniorerio)和对环境毒素有较强吸收能力的鲢(Hypophtha lmichthys molitrix)作为指示生物,检测其行为对水体中微囊藻毒素(MC)和孔雀石绿(MG)的反应。结果表明,斑马鱼和鲢在2μg/LMC浸泡下未出现显著的行为反应,而在5μg/L的MC浸泡下,斑马鱼摆尾频率在10min后、移动速度在40min后显著性下降;鲢的摆尾频率与移动速度均在40min后显著性下降;0.5mg/LMG处理下,斑马鱼未出现显著性行为变化,而鲢摆尾频率与移动速度均在35min后显著性下降。

关键词：微囊藻毒素孔雀石绿斑马鱼鲢行为反应

鳜鱼两种谷胱甘肽S-转移酶基因cDNA的克隆与分析

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生态毒理学报 2009年第4期4卷 537-543页

作者：程炜轩梁旭方李观贵王琳杨宇晖暨南大学生命科学技术学院广州510632

鳜鱼(Siniperca chuatsi)是我国著名的肉食性鱼类,容易成为环境毒素的富集体.论文从分子水平上分析了鳜鱼去毒过程中起关键作用的谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因的结构及进化上的地位,采用RT-PCR及RACE法,分离、克隆得到了鳜鱼肝脏可溶性al... 详细信息

鳜鱼(Siniperca chuatsi)是我国著名的肉食性鱼类,容易成为环境毒素的富集体.论文从分子水平上分析了鳜鱼去毒过程中起关键作用的谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因的结构及进化上的地位,采用RT-PCR及RACE法,分离、克隆得到了鳜鱼肝脏可溶性alpha型(GSTA)和rho型(GSTR)基因cDNA全序列.结果表明,鳜鱼肝脏GSTA、GSTR全长分别为1052bp、935bp,其中5′-UTR分别为118bp、55bp,3′-UTR分别为262bp、202bp,分别编码223、225个氨基酸.系统分析结果显示:鳜鱼GSTA与GSTR在进化树上的位置与其分类所处的位置基本吻合.

关键词：谷胱甘肽S-转移酶基因克隆序列分析鳜鱼