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毛兰素通过Akt抑制膀胱癌细胞5637增殖

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中国实验方剂学杂志 2022年第3期28卷 76-82页

作者：杨凤娟周萍程潭张天禹曾常春谭宁桂林医学院基础医学院广西桂林541199 桂林医学院附属医院广西桂林541001 深圳市龙华区中心医院广东深圳518110

目的:探讨蛋白激酶B(Akt)过表达对毛兰素抑制人膀胱癌细胞5637增殖作用的影响及相关机制。方法:运用慢病毒载体建立5637细胞Akt稳定过表达株,并进行如下分组,以空载体感染5637细胞作为空白组,Akt组,空载体加药组(毛兰素62.5μg·L^(-1))... 详细信息

目的:探讨蛋白激酶B(Akt)过表达对毛兰素抑制人膀胱癌细胞5637增殖作用的影响及相关机制。方法:运用慢病毒载体建立5637细胞Akt稳定过表达株,并进行如下分组,以空载体感染5637细胞作为空白组,Akt组,空载体加药组(毛兰素62.5μg·L^(-1)),Akt加药组(毛兰素62.5μg·L^(-1));采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法测定细胞活性;通过克隆形成实验检测各组5637细胞克隆形成情况;进行流式细胞术检测,评价细胞周期分布情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化(p)-Akt,Akt,p21蛋白表达;进行糖摄取测定实验和乳酸分泌实验,检测5637细胞糖酵解情况。结果:与空白组比较,毛兰素可以抑制膀胱癌5637细胞的增殖(P<0.05),过表达Akt能部分逆转毛兰素对膀胱癌5637细胞的增殖抑制作用(P<0.05)。与空白组比较,毛兰素可以抑制膀胱癌5637细胞的克隆形成(P<0.05),过表达Akt能部分逆转毛兰素对膀胱癌5637细胞的克隆形成抑制作用(P<0.05)。与空白组比较,毛兰素能诱导膀胱癌5637细胞DNA合成前期(G1期)阻滞(P<0.05),过表达Akt能逆转毛兰素对5637细胞的周期阻滞作用(P<0.05)。与空白组比较,毛兰素可以促进p21蛋白表达并抑制p-Akt,Akt蛋白表达(P<0.05),过表达Akt能够逆转毛兰素对p21蛋白表达的上调作用(P<0.05)。与空白组比较,毛兰素能抑制膀胱癌细胞5637的葡萄糖摄取和乳酸分泌(P<0.05),过表达Akt能够逆转毛兰素对5637细胞糖酵解的抑制作用(P<0.05)。结论:毛兰素对膀胱癌细胞5637增殖具有抑制作用,可以促进p21表达并抑制p-Akt的表达;Akt过表达可逆转毛兰素对膀胱癌细胞5637的增殖抑制作用。提示Akt在毛兰素抑制5637细胞增殖过程中发挥着重要作用,为毛兰素应用于膀胱癌治疗提供了新的靶向依据。

关键词：毛兰素膀胱癌细胞增殖蛋白激酶B(Akt) 糖酵解

新混合式教学模式在医学研究生解剖学课程中的应用

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教师 2023年第30期 117-119页

作者：欧叶涛李厚忠程潭黄毅于兰桂林医学院广西桂林541199

新混合式教学模式的核心词汇是“新”与“混合”。其中,“新”是针对现代信息技术语境而言,即伴随“互联网+”概念产生的“技术+教育”趋势;“混合”则是不同维度的教学时空、教学理念呈现的教育合力,对于解剖学课程而言,即线上自主学... 详细信息

新混合式教学模式的核心词汇是“新”与“混合”。其中,“新”是针对现代信息技术语境而言,即伴随“互联网+”概念产生的“技术+教育”趋势;“混合”则是不同维度的教学时空、教学理念呈现的教育合力,对于解剖学课程而言,即线上自主学、线下集中教、线下实操、线上答疑四个维度的相互混合。为提高学生的自主学习与实践能力,提升临床医学的教学质效,文章拟结合解剖学课程探讨新混合式教学模式的构建思路与具体实施,助力医学专业学生学习效果的提升和核心素养的培养,为我国培养更多高素质医学人才。

关键词：新混合式教学医学研究生解剖学模式构建

阿仑膦酸钠对IL-1β体外诱导培养的大鼠膝关节软骨细胞影响的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2011年第1期25卷 50-55页

作者：王哲彦王文雅张柳田发明程潭杨林华北煤炭医学院病理教研室河北唐山063000 华北煤炭医学院附属医院骨外科成都大学医护学院药理教研室

目的二膦酸盐类药物可抑制骨重塑,通过观察阿仑膦酸钠(alendronate,ALN)对IL-1β体外诱导培养的大鼠膝关节软骨细胞的影响,探讨ALN治疗骨性关节炎(osteoarthritis,OA)的可行性。方法取15只1月龄SPF级SD大鼠(雌雄不限,体重100～150g)膝... 详细信息

目的二膦酸盐类药物可抑制骨重塑,通过观察阿仑膦酸钠(alendronate,ALN)对IL-1β体外诱导培养的大鼠膝关节软骨细胞的影响,探讨ALN治疗骨性关节炎(osteoarthritis,OA)的可行性。方法取15只1月龄SPF级SD大鼠(雌雄不限,体重100～150g)膝关节软骨,体外培养软骨细胞并传至第3代。倒置相差显微镜下观察细胞形态并进行鉴定。将第3代软骨细胞分为3组:空白对照组(A组)软骨细胞用常规DMEM完全培养液培养5d;IL-1β诱导组(B组)软骨细胞以10ng/mL重组人IL-1β培养2d后更换为常规DMEM完全培养液培养3d;IL-1β诱导后加ALN培养组(C组)软骨细胞以10ng/mL重组人IL-1β培养2d后更换为浓度为1×10-6mol/L的ALN培养3d。培养后取各组细胞进行免疫细胞化学染色及实时PCR检测,观察细胞中Ⅱ型胶原(collagen typeⅡ,ColⅡ)、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase13,MMP-13)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平。结果甲苯胺蓝染色示培养的细胞呈异染性,证实为软骨细胞。免疫细胞化学染色显示:A、B、C组ColⅡ表达积分吸光度(IA)值分别为15.3770±0.5718、5.4632±0.4504、10.2907±0.4992,C组高于B组,但低于A组,差异有统计学意义(P0.05);β-catenin表达IA值分别为4.3903±0.5519、11.7999±0.3487、6.6117±0.3818,C组低于B组,但高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实时PCR检测示,C组ColⅡmRNA表达高于B组,MMP-13及β-catenin的mRNA表达低于B组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);ColⅡ和β-catenin mRNA表达高于A组,MMP-13mRNA表达低于A组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ALN可能通过抑制IL-1β诱导的大鼠膝关节软骨细胞中ColⅡ的降解并下调MMP-13及β-catenin因子的表达,对软骨细胞具有一定的保护作用。

关键词：骨性关节炎阿仑膦酸钠软骨细胞 Ⅱ型胶原基质金属蛋白酶13 β-连环蛋白大鼠

大鼠膝关节不稳定骨性关节炎软骨与软骨下骨组织微观结构的变化

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中国矫形外科杂志 2012年第3期20卷 267-270页

作者：程潭张柳张英泽李强河北医科大学石家庄050017 河北联合大学附属医院骨外科唐山063000

[目的]观察大鼠膝关节经前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transection,ACLT)造成关节不稳定情况下,其关节软骨与软骨下骨骨组织微结构的变化。[方法]20只3个月龄雄性SD大鼠按体重随机分为对照组与实验组,每组10只动物。实... 详细信息

[目的]观察大鼠膝关节经前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transection,ACLT)造成关节不稳定情况下,其关节软骨与软骨下骨骨组织微结构的变化。[方法]20只3个月龄雄性SD大鼠按体重随机分为对照组与实验组,每组10只动物。实验组切断右膝关节前交叉韧带,对照组只暴露前交叉韧带而不切断,术后12周处死所有动物并取材。取右肢股骨远端膝关节于70%酒精固定后脱钙6周,石蜡包埋切片,经HE染色及Masson染色,普通光学显微镜观察摄片,采用图像分析系统做定量分析;取右肢胫骨膝关节于70%酒精固定后不脱钙做硬组织包埋切片,行Van Kossa染色后,定量分析软骨下骨组织微观结构变化。[结果]术后12周后大体观察发现,实验组关节面较对照组明显失去光泽,呈颗粒感,部分软骨面破溃,关节面周围可见骨赘形成;实验组关节软骨HE及Masson染色着色不均,软骨细胞排列紊乱,且实验组Mankin评分结果显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组软骨下骨组织微结构较对照组改变明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]ACLT术导致膝关节不稳定,在此情况下对大鼠膝关节软骨形态及软骨下骨组织微结构造成显著破坏,若不能及时采取干预措施,将加速膝关节功能退变进程。

关键词：前交叉韧带切断关节软骨微观结构组织形态学计量学

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仙灵骨葆预防卵巢切除大鼠的腰椎间盘退变

中国组织工程研究与临床康复 2010年第15期14卷 2722-2726页

作者：李震张柳穆树林李强程潭田发明华北煤炭医学院附属医院河北省唐山市063000 河北医科大学河北省石家庄市050017

背景:仙灵骨葆主要成分为黔岭淫羊藿、补骨脂、断续等组成,临床上常被用于治疗骨质疏松症。目的:验证仙灵骨葆对去卵巢大鼠椎间盘退变预防作用并探讨其作用机制。方法:3月龄雌性SD大鼠被随机均分为3组。双侧卵巢切除+仙灵骨葆组切除双... 详细信息

背景:仙灵骨葆主要成分为黔岭淫羊藿、补骨脂、断续等组成,临床上常被用于治疗骨质疏松症。目的:验证仙灵骨葆对去卵巢大鼠椎间盘退变预防作用并探讨其作用机制。方法:3月龄雌性SD大鼠被随机均分为3组。双侧卵巢切除+仙灵骨葆组切除双侧卵巢后,250mg/(kg?d)仙灵骨葆灌胃,1次/d,连续用药12周。假手术组暴露卵巢但不切除;双侧卵巢切除+盐水组切除双侧卵巢后给予等量生理盐水。以上3组均于术后3个月处死,并于处死前10d和4d分别给予四环素和钙黄绿素双荧光标记。取L2椎体进行骨形态计量学分析,L4～L5腰椎及椎间盘进行VG特殊染色及采用免疫组织化学检测椎间盘基质金属蛋白酶13的表达,观察椎间盘的病理学改变并根据组织学评分系统对腰椎间盘的退变程度(LVD)进行评分。结果与结论:①腰椎骨量:双侧卵巢切除+盐水组显著低于假手术组及双侧卵巢切除+仙灵骨葆组(P<0.05)。②腰椎间盘评分:双侧卵巢切除+盐水组组显著高于假手术组及双侧卵巢切除+仙灵骨葆组(P<0.05)。③免疫组织化学:双侧卵巢切除+盐水组与双侧卵巢切除+仙灵骨葆组、假手术组比较大鼠椎间盘中基质金属蛋白酶13表达显著升高(P<0.05)。结果表明,仙灵骨葆可预防去卵巢大鼠腰椎间盘的退变,其作用机制可能包括维持椎体骨量及微观结构、抑制终板退变从而改善椎间盘的生物力学环境和营养供应,同时降低椎间盘中基质金属蛋白酶13的表达,抑制基质的降解。

关键词：卵巢切除椎间盘退变免疫组织化学仙灵骨葆基质金属蛋白酶13 骨组织工程

阿仑膦酸钠对前交叉韧带切断大鼠关节软骨退变的影响

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中国矫形外科杂志 2010年第14期18卷 1200-1204页

作者：李强张柳李震穆树林程潭田发明华北煤炭医学院附属医院骨科河北唐山063000

[目的]观察阿仑膦酸钠(alendronate,ALN)对前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transac-tion,ACLT)后骨关节炎模型大鼠膝关节软骨和软骨下骨的影响。[方法] 24只3个月龄雌性SD大鼠按体重随机分为假手术组(Sham,n=8)、手术组(A... 详细信息

[目的]观察阿仑膦酸钠(alendronate,ALN)对前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transac-tion,ACLT)后骨关节炎模型大鼠膝关节软骨和软骨下骨的影响。[方法] 24只3个月龄雌性SD大鼠按体重随机分为假手术组(Sham,n=8)、手术组(ACLT+NS,n=8)及给药组(ACLT+ALN,n=8),术后ALN组给予阿仑膦酸钠20μg.kg-1.2 d-1皮下注射,连续给药12周;ACLT组则给予等剂量无菌生理盐水。股骨远端软骨下骨骨密度和胫骨近端骨组织形态计量学分析,通过关节软骨Mankin评分和MMP-13免疫组化染色观察关节软骨的退变和软骨基质的降解程度。[结果] (1)ACLT+NS组股骨内侧髁骨密度显著低于Sham组和ACLT+ALN组(P<0.05);(2)ACLT+ALN组的胫骨近端骨量显著高于ACLT+NS组(P<0.05);(3)ACLT+ALN组的关节软骨Mankin评分和MMP-13免疫组化染色平均积分光密度显著低于ACLT+NS组(P<0.05)。[结论]阿仑膦酸钠20μg.kg-1.2 d-1皮下注射12周可以预防ACLT大鼠关节软骨退变,其作用机制可能与下调MMP-13的表达和增加软骨下骨骨量有关。

关键词：骨关节炎阿仑膦酸钠软骨下骨骨组织形态计量学 MMP-13

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兔实验性骨性关节炎早期软骨下骨板的变化

解剖学报 2012年第4期43卷 540-544页

作者：程潭张柳赵小林李彬河北医科大学第三医院骨外科石家庄050017 河北联合大学附属医院骨外科河北唐山063000

目的观察兔膝骨性关节炎软骨下骨板与关节软骨之间联系,同时探讨应用降钙素手段干预软骨下骨板对骨性关节炎中关节软骨保护作用。方法雄性日本大耳白兔随机分为3组,每组8只。对照组动物暴露右膝关节前交叉韧带而不予切断;模型组与实验... 详细信息

目的观察兔膝骨性关节炎软骨下骨板与关节软骨之间联系,同时探讨应用降钙素手段干预软骨下骨板对骨性关节炎中关节软骨保护作用。方法雄性日本大耳白兔随机分为3组,每组8只。对照组动物暴露右膝关节前交叉韧带而不予切断;模型组与实验组行右膝关节前交叉韧带切断术,术后实验组给予5 IU/(kg.d)降钙素皮下注射,模型组给予等量生理盐水,于术后8周处死所有动物并取材。关节软骨采用HE染色及Mankin评分、Von Gieson染色和基质金属蛋白酶-13免疫组织化学检测,软骨下骨板采用Von Kossa染色方法进行组织形态计量学分析。结果软骨组织形态学HE及Von Gieson染色显示,模型组关节软骨明显损伤,Mankin评分结果显示,模型组评分显著高于对照组和实验组(P<0.05),实验组评分显著高于对照组(P<0.05);免疫组织化学染色及半定量分析表明,模型组基质金属蛋白酶-13表达显著高于对照组和实验组(P<0.05);模型组软骨下骨板形态被破坏,与对照组和实验组比较差异显著(P<0.05)。结论前交叉韧带切断诱导的骨性关节炎兔膝关节软骨与软骨下骨板组织结构同时被破坏,软骨下骨板与关节软骨间存在紧密关系,降钙素早期干预软骨下骨板,能够保护软骨下骨板组织形态结构,对关节软骨起到部分保护作用,延缓骨性关节炎病理进程。

关键词：骨性关节炎前交叉韧带切断关节软骨软骨下骨板降钙素免疫组织化学兔

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辛伐他汀对去卵巢大鼠股骨骨折愈合的影响

中国新药与临床杂志 2010年第7期29卷 511-515页

作者：田发明张柳穆树林李震李强程潭河北医科大学河北石家庄050017 华北煤炭医学院附属医院骨科河北唐山063000

目的研究辛伐他汀对去卵巢大鼠股骨干骨折愈合的影响。方法 40只雌性、12周龄SD大鼠随机分成4组,每组10只。A组仅暴露腹腔,不切除卵巢,其余3组行卵巢切除,C、D组同时制备股骨干中段横行骨折模型。术后D组大鼠给予辛伐他汀5 mg·kg^(-1)... 详细信息

目的研究辛伐他汀对去卵巢大鼠股骨干骨折愈合的影响。方法 40只雌性、12周龄SD大鼠随机分成4组,每组10只。A组仅暴露腹腔,不切除卵巢,其余3组行卵巢切除,C、D组同时制备股骨干中段横行骨折模型。术后D组大鼠给予辛伐他汀5 mg·kg^(-1)灌胃,隔日1次,其余各组给予生理盐水。于术后5 wk处死大鼠,测量右股骨整体骨密度(tBMD)、远端骨密度(dBMD)和中段骨密度(mBMD),观察C、D组大鼠骨折愈合情况以及骨形成蛋白2(BMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 D组较C组骨痂量相对较多,骨折线模糊;B组tBMD和dBMD明显低于A组,D组mBMD明显高于C组,差异均有显著意义(P0.05)。D组与C组比较,板层骨形成增加,骨痂组织BMP-2、VEGF的表达均增高(P<0.05)。结论辛伐他汀可促进去卵巢大鼠股骨骨折愈合,其机制可能与上调骨痂组织BMP-2、VEGF的表达,加快编织骨向板层骨的转化相关。

关键词：骨质疏松骨折愈合辛伐他汀骨形态发生蛋白质类血管内皮生长因子类