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抗草甘膦基因(EPSPS)的克隆与功能验证
抗草甘膦基因(EPSPS)的克隆与功能验证
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作者:
程海刚
新疆农业大学
学位级别:硕士
5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶EPSPS是莽草酸途径中的一个关键酶,是许多抗生素、除草剂作用的首选靶标酶。草甘膦是一种广谱型灭生性除草剂,植物中EPSP合成酶的过量表达或某些活性位点氨基酸的突变对高剂量的草甘膦有较强的耐受性...
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5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶EPSPS是莽草酸途径中的一个关键酶,是许多抗生素、除草剂作用的首选靶标酶。草甘膦是一种广谱型灭生性除草剂,植物中EPSP合成酶的过量表达或某些活性位点氨基酸的突变对高剂量的草甘膦有较强的耐受性。本实验根据EPSP合成酶基因的保守序列设计一对简并引物,以青麻(Abutilon Theophrasti Medic)的总DNA为模板进行PCR扩增,克隆出epsps基因的部分DNA片段,长度为1446bp,利用Trizol Reagent改良RNA提取方法提取青麻RNA,以青麻的总RNA为反转录的模板,采用RACE技术克隆、拼结出了青麻epsps基因的全长cDNA序列。该序列长为1886bp,5′UTR长64bp,3′UTR长280bp,3′端有ployA尾巴,G+C含量44.80%,编码了523个氨基酸。同源比较该段序列所编码的氨基酸序列可以发现EPSP合成酶有较高的保守性,与欧洲山毛榉、水稻、拟南芥、菜豆的同源性分别为81%、81%、76%、74%。利用点突变技术对所获epsps基因进行定点(E515Q)突变。成功地将epsps基因构建到酵母胞内表达载体pPIC3.5K和植物表达载体PBI121上,利用电击法转化酵母及农杆菌介导法转化烟草,转基因酵母在草甘膦压力下筛选出耐受性较好的菌株,标记为ATME-4-M和ATME-9证明了所获基因具有生物学功能。转基因烟草在生根培养基中获得了烟草小苗。
关键词:
epsps
青麻
RT-PCR
RACE
表达载体
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基于MTO-MTS的钢厂合同计划方法
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系统工程理论与实践
2008年 第11期28卷 85-93页
作者:
张涛
程海刚
张玥杰
宋健海
上海财经大学信息管理与工程学院
上海200433
复旦大学计算机科学与工程系
上海市智能信息处理重点实验室上海210433
上海宝信软件股份有限公司
上海201900
建立了基于MTO-MTS的钢厂合同计划的整数规划模型,模型同时考虑库存余材匹配和生产计划,以提前/拖期惩罚、交货时间窗内拖后惩罚、生产费用、库存匹配费用、合同违约惩罚总额最小为目标.根据模型特点,构造了对非可行解进行启发式修复的...
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建立了基于MTO-MTS的钢厂合同计划的整数规划模型,模型同时考虑库存余材匹配和生产计划,以提前/拖期惩罚、交货时间窗内拖后惩罚、生产费用、库存匹配费用、合同违约惩罚总额最小为目标.根据模型特点,构造了对非可行解进行启发式修复的改进粒子群算法求解策略.仿真实验首先对参数设置进行分析,然后对多组数据进行了结果分析,并在相同条件下,对比了本文模型与分阶段考虑库存匹配/合同计划方法的实验结果,验证了本文模型和算法的有效性.
关键词:
面向订单
面向库存
合同计划
粒子群算法
碾合整数规划
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粘类小麦CMS育性基因分布区研究
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麦类作物学报
2011年 第6期31卷 1007-1013页
作者:
郭艳萍
程海刚
张改生
张慧成
西北农林科技大学陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室/小麦育种教育部工程研究中心
陕西杨凌712100
宝鸡市农业科学研究所
陕西岐山722400
为更有效地选育小麦不育系的高恢复系,以8个粘类小麦细胞质雄性不育系(Cytoplasmic malesterility,CMS)为测验种,对310份来自国内外不同地区的普通小麦品种及亲本材料对粘类小麦CMS系的育性恢保关系进行调查,并采用聚类分析法研究了粘...
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为更有效地选育小麦不育系的高恢复系,以8个粘类小麦细胞质雄性不育系(Cytoplasmic malesterility,CMS)为测验种,对310份来自国内外不同地区的普通小麦品种及亲本材料对粘类小麦CMS系的育性恢保关系进行调查,并采用聚类分析法研究了粘类小麦CMS育性基因的地区分布。结果表明:(1)高恢复能力的品种在中国春麦区和南方冬麦区的分布比例均超过50%,具有保持性的品种在加拿大分布最多,我国北方冬麦区次之,春麦区分布最少。(2)不同地区品种恢复度存在差异。(3)将48个普通品种聚为3类:第1类品种对粘类CMS的平均恢复度均低于20%,属全不育和高不育类型;第2类品种的平均恢复度在20%~55%范围内,基本属于半不育类型;第3类品种的平均恢复度均大于55%,属高可育和全可育类型。(4)对不育系进行聚类:90-110核背景下,K型和V型聚为一类,Ven型和B型聚为一类;224核型下V型和B型聚为一类,再和K型聚为一类,与Ven型距离最远;相同细胞质背景下,90-110和224两种核型分别在一定水平上被分为2个类别。
关键词:
小麦
粘类CMS
育性基因
分布区
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GPS测高的限制性与可行性研究
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新疆有色金属
2009年 第A02期32卷 81-82页
作者:
程海刚
新疆国地测绘工程有限责任公司
乌鲁木齐830063
阐述了GPS测高受相位整周模糊度解算、多路径效应电离层、潮汐和天线高等因素的影响,以及在各个因素影响下所采取的相应改进措施,同时也说明了GPS测高在几个领域方面的应用。
阐述了GPS测高受相位整周模糊度解算、多路径效应电离层、潮汐和天线高等因素的影响,以及在各个因素影响下所采取的相应改进措施,同时也说明了GPS测高在几个领域方面的应用。
关键词:
GPS测量精度
拟合
高程
静态测量
实时动态
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线辣椒新品种宝椒二号的选育
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中国种业
2011年 第2期 59-60页
作者:
辛鑫
史卫中
程海刚
陕西省宝鸡市农业科学研究所
岐山722400
线辣椒属茄科一年生作物,是陕西省主要栽培的辣椒品种之一。长期以来,由于农户在自繁自育过程中缺乏选留种技术、栽培措施不当,致使该品种出现严重的退化现象,出现了许多性状不一的类型;另外,其他辣椒品种的引进种植后所引起的自然杂交...
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线辣椒属茄科一年生作物,是陕西省主要栽培的辣椒品种之一。长期以来,由于农户在自繁自育过程中缺乏选留种技术、栽培措施不当,致使该品种出现严重的退化现象,出现了许多性状不一的类型;另外,其他辣椒品种的引进种植后所引起的自然杂交也是该品种退化的原因之一。
关键词:
新品种
线辣椒
选育
辣椒品种
栽培措施
一年生作物
留种技术
自繁自育
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基于外挂式锚链舱的锚泊系统分析
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船舶物资与市场
2022年 第10期30卷 7-9页
作者:
曾志威
程海刚
周成
无锡东方船研高性能船艇工程有限公司
江苏无锡214082
针对传统在船体舱室内的锚链舱布置,会严重占用内河游览船首甲板观光面积,以及影响客舱观光视域的问题,以武汉300客位纯电动船的锚泊系统为研究对象,结合内河游览船锚泊系统布置原则,给出本船锚链舱不能布置在船体舱室内的原因,并提出...
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针对传统在船体舱室内的锚链舱布置,会严重占用内河游览船首甲板观光面积,以及影响客舱观光视域的问题,以武汉300客位纯电动船的锚泊系统为研究对象,结合内河游览船锚泊系统布置原则,给出本船锚链舱不能布置在船体舱室内的原因,并提出外挂式锚链舱方案,在此基础上结合锚泊系统设计所需考虑的因素,得到了最佳甲板凸台面积和客舱观光视域。结果表明,外挂式锚链舱能够解决首部尖瘦型船舶的内河游览船锚泊系统布置。
关键词:
外挂式锚链舱
甲板凸台
立式锚绞盘
锚链筒
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基于Rhino的游览船上建线型分析
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船舶物资与市场
2022年 第9期30卷 10-12页
作者:
曾志威
程海刚
周成
无锡东方船研高性能船艇工程有限公司
江苏无锡214082
为高度还原特定效果图中的内河游览船外观造型,以上海40 m纯电动客船的上建线型为研究对象,提出基于Rhino的游览船上建线型分析。结合内河游览船构建上建线型过程中需要考虑的问题,采用三维软件Rhino建模,研究特殊造型的空间轮廓线构造...
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为高度还原特定效果图中的内河游览船外观造型,以上海40 m纯电动客船的上建线型为研究对象,提出基于Rhino的游览船上建线型分析。结合内河游览船构建上建线型过程中需要考虑的问题,采用三维软件Rhino建模,研究特殊造型的空间轮廓线构造方法;结合幕墙玻璃及栏杆的安装工艺,得到逼近效果图的上建造型和满足生产放样的上建线型。测试结果表明,提出的方法能够解决游览船复杂上建外观造型的高度还原问题,为后续船体生产放样工作提供了更加详细的信息。
关键词:
内河游览船
Rhino
上建线型
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异丙酚复合瑞芬太尼对老年高血压手术患者麻醉的临床效果观察
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世界最新医学信息文摘
2016年 第35期16卷 98-98页
作者:
刘哲锋
程海刚
新疆库车县人民医院
目的:探讨并研究异丙酚复合瑞芬太尼对老年高血压手术患者麻醉的临床效果。方法:选取我院自2014年6月至2015年8月收治的需进行手术的老年高血压患者150例作为临床研究对象,采用随机数字表法将其分为两组,每组75例。试验组采用浓度为2ug...
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目的:探讨并研究异丙酚复合瑞芬太尼对老年高血压手术患者麻醉的临床效果。方法:选取我院自2014年6月至2015年8月收治的需进行手术的老年高血压患者150例作为临床研究对象,采用随机数字表法将其分为两组,每组75例。试验组采用浓度为2ug/ml异丙酚和2ug/ml瑞芬太尼进行麻醉维持,对照组采用浓度为2ug/ml异丙酚和2ug/ml芬太尼对患者进行麻醉维持,比较两组的镇静效果、手术中降压药的使用量以及术后苏醒时间。结果:与对照组相比,试验组的镇静效果明显优于对照组,且苏醒时间与降压药使用量均明显减少,试验组效果优于对照组,两组比较差异有统计学意义,P<0.05。结论:采用异丙酚复合瑞芬太尼对老年高血压手术患者进行麻醉,临床效果较明显,值得在临床上广泛应用。
关键词:
异丙酚
瑞芬太尼
老年高血压
麻醉
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关中西部林下魔芋高产栽培技术
关中西部林下魔芋高产栽培技术
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科技创新与扶贫攻坚——陕西省农作物学会第二届会员代表大会暨2019年学术年会
作者:
程海刚
刘晓婷
陕西省宝鸡市农业科学研究院
魔芋产业是关中西部适宜发展产业之一,近几年,通过项目引导,政府扶持,加工企业辐射带动,魔芋产业成为了关中西部地区特别是秦岭北麓至渭河一带农民增收的支柱产业。本文从对关中西部地区发展魔芋产业现状及存在问题进行调查分析,总结出...
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魔芋产业是关中西部适宜发展产业之一,近几年,通过项目引导,政府扶持,加工企业辐射带动,魔芋产业成为了关中西部地区特别是秦岭北麓至渭河一带农民增收的支柱产业。本文从对关中西部地区发展魔芋产业现状及存在问题进行调查分析,总结出一种林下魔芋高产栽培技术,充分利用本地林地资源,促进关中西部地区魔芋产业健康持续发展。
关键词:
关中西部
魔芋
发展现状
林下栽培
来源:
cnki会议
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宝椒2号——鲜食及制酱的辣椒新品种
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蔬菜
2011年 第7期 32-33页
作者:
辛鑫
史卫中
程海刚
陕西省宝鸡市农业科学研究所
722400
宝椒2号是陕西省宝鸡市农业科学研究所从自育的线椒优良品种宝椒1号的自然变异单株中系统选育而成的,2010年11月11日通过陕西省农作物品种审定委员会鉴定。它是一个早熟、优质、高产、抗性强、鲜食和制酱兼用的线椒优良新品种,深受广...
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宝椒2号是陕西省宝鸡市农业科学研究所从自育的线椒优良品种宝椒1号的自然变异单株中系统选育而成的,2010年11月11日通过陕西省农作物品种审定委员会鉴定。它是一个早熟、优质、高产、抗性强、鲜食和制酱兼用的线椒优良新品种,深受广大种植户青睐。
关键词:
优良新品种
制酱
鲜食
农作物品种审定委员会
农业科学研究所
辣椒
系统选育
变异单株
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