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GFP转基因小鼠骨髓CD34～+细胞移植促进全横断大鼠脊髓修复的研究

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GFP转基因小鼠骨髓CD34～+细胞移植促进全横断大鼠脊髓修复的研究

作者：程昊钰昆明医学院

学位级别：硕士

[目的] 探讨采用两种方法体外培养、纯化骨髓CD34细胞之间的区别，和脊髓全横断SD大鼠模型在骨髓CD34细胞移植术后，CD34细胞在脊髓中的迁移、分布情况，以及骨髓CD34细胞移植术后脊髓功能的恢复情况。证明骨髓CD34细胞移植对损伤脊髓... 详细信息

[目的] 探讨采用两种方法体外培养、纯化骨髓CD34细胞之间的区别，和脊髓全横断SD大鼠模型在骨髓CD34细胞移植术后，CD34细胞在脊髓中的迁移、分布情况，以及骨髓CD34细胞移植术后脊髓功能的恢复情况。证明骨髓CD34细胞移植对损伤脊髓修复的作用。 [方法] 取绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)转基因小鼠骨髓细胞，分别采用12h首次全量换液收集悬浮细胞(分离培养)和始终混合培养两种方法进行体外培养，在免疫荧光显微镜下观察两组细胞的生长情况，计数细胞。采用免疫细胞化学染色法进行CD34单克隆抗体鉴定。将经CD34单克隆抗体鉴定后的CD34细胞移植入脊髓全横断大鼠脊髓横断处尾侧。术后密切观察大鼠后肢运动功能恢复情况，分别在术后1周、2周、4周和8周行BBB评分检测大鼠后肢运动功能的恢复，同时行灌注、取材、切片(片厚10μm)，荧光显微镜下观察绿色荧光细胞的迁移、分布情况;用免疫组化法检测CD34细胞的存活及迁移。 [结果] 1、分离培养组细胞生长情况较好，不同时间段细胞形态及数目不同，培养7d时免疫组化法可见细胞涂片中的绿色荧光细胞中CD34

关键词：骨髓 CD34+细胞移植脊髓全横断功能修复

重组人促红细胞生成素治疗化疗相关性贫血的临床研究

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肿瘤 2009年第1期29卷 58-60页

作者：梁进毕清沈丽达程昊钰云南省肿瘤医院化疗中心昆明650118

目的:探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)治疗化疗相关性贫血的临床疗效。方法:将62例肿瘤相关性贫血患者按化疗时间顺序分成治疗组和对照组,治疗组接受2个周期的化疗,并于每1个周期化疗结束48h后给予rh... 详细信息

目的:探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)治疗化疗相关性贫血的临床疗效。方法:将62例肿瘤相关性贫血患者按化疗时间顺序分成治疗组和对照组,治疗组接受2个周期的化疗,并于每1个周期化疗结束48h后给予rhEPO 12000u皮下注射,3次/周,连续3周,共用6周。对照组仅接受2个周期的化疗。2组的辅助治疗相同。于第2个周期的rhEPO治疗结束后评价疗效。结果:rhEPO治疗6周后,治疗组的血红蛋白水平、血细胞比容较治疗前有明显上升,差异有统计学意义(P<0.01);患者的疲劳感减轻、活动耐力提高,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。对照组化疗前后血红蛋白水平、血细胞比容的变化不明显。结论:rhEPO能改善化疗相关性贫血,提高肿瘤患者的生活质量。

关键词：肿瘤促红细胞生成素化学疗法贫血并发症生活质量

流式细胞术监测异基因造血干细胞移植后AML微小残留病的预后分析

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中国实验血液学杂志 2018年第1期26卷 239-244页

作者：郝启张书芹张冬梅王静波赵杰程昊钰航天中心医院血液科北京100049

目的:探讨流式细胞术(FCM)评价异基因造血干细胞移植术(allo-HSCT)后的急性髓系白血病(AML)微小残留病(MRD)预后的价值。方法:选取2012年4月到2016年9月收入本科室符合条件的allo-HSCT后的AML(M3除外)患者82例(入选条件为allo-HSCT后FC... 详细信息

目的:探讨流式细胞术(FCM)评价异基因造血干细胞移植术(allo-HSCT)后的急性髓系白血病(AML)微小残留病(MRD)预后的价值。方法:选取2012年4月到2016年9月收入本科室符合条件的allo-HSCT后的AML(M3除外)患者82例(入选条件为allo-HSCT后FCM定期监测骨髓MRD,未出现阳性事件者随访满2年),其中男50例,女32例,平均年龄27.27(2-57)岁;按照FAB分型,在82例中M0/M1 2例,M2 51例,M4/M5 24例,M6 5例。根据患者初发时的白血病相关免疫表型(LAIP),选取相应的抗体组合。结果:82例allo-HSCT后的AML患者(骨髓形态学均处于完全缓解状态)中检测到20例患者(24.39%)MRD,阳性率平均为1.64(0.10-4.91)%。在随访过程中,20例MRD阳性者中16例骨髓复发(复发率80%),其中1例伴髓外复发;62例骨髓MRD阴性者4例骨髓复发(复发率6.45%),2例髓外复发。MRD阳性组平均无白血病生存(LFS)时间为15.19±3.99个月,中位LFS为10±3.84个月;MRD阴性组平均LFS时间为53.50±1.69个月(P<0.001)。MRD阳性组平均总生存(OS)时间为22.52±5.72个月,中位OS为18±3.27个月;MRD阴性组平均OS时间为42.86±2.83个月(P=0.008)。结论:对处于形态学完全缓解的allo-HSCT后AML患者,FCM定期监测骨髓MRD结果与其复发率、LFS及OS时间密切相关。与MRD阴性组相比,MRD阳性组复发率显著增加,LFS及OS明显减低。

关键词：急性髓系白血病微小残留病变流式细胞术异基因造血干细胞移植

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造血干细胞移植术后合并韦尼克脑病4例

中国实验血液学杂志 2018年第3期26卷 880-885页

作者：薛松袁磊程昊钰殷宇明顾江英张维婕王静波航天中心医院血液科北京100049

目的:提高对造血干细胞移植(HSCT)术后不常见的神经系统并发症-韦尼克脑病(WE)的临床表现、诊断和治疗的认识及掌握。方法:回顾分析自2016年1月至2017年1月在航天中心医院血液科接受HSCT治疗,术后诊断WE的4例病例的临床特点,诊疗经过以... 详细信息

目的:提高对造血干细胞移植(HSCT)术后不常见的神经系统并发症-韦尼克脑病(WE)的临床表现、诊断和治疗的认识及掌握。方法:回顾分析自2016年1月至2017年1月在航天中心医院血液科接受HSCT治疗,术后诊断WE的4例病例的临床特点,诊疗经过以及预后随访。结果:4例确诊WE病例约占同期移植患者的3%,其中男性3例,女性1例,年龄为8-20岁,2例AML,2例ALL。4例中仅1例具有典型的眼颤,共济失调和全脑功能障碍的三联征,所有病例均早期表现为神志模糊和语言障碍。头颅CT平扫均阴性,无提示意义。头颅MRI检查显示,3例具有典型部位(丘脑、第四脑室底、第三脑室和中脑导水管)结构异常病变,另1例仅在乳头体发现病变。全部病例确诊后均接受每日100 mg的维生素B_1肌内注射治疗,分别于治疗后2 d、不详、3 d、4 d后症状改善,2周内全部病例神经系统症状获得完全缓解,随访7-12个月后均未见WE复发。结论:造血干细胞移植后发生神经系统症状,鉴别诊断需考虑WE的可能性,尽早给予维生素B1补充治疗以避免漏诊误诊,从而降低死亡率。

关键词：韦尼克脑病造血干细胞移植并发症神经系统

粒细胞集落刺激因子在急性髓系白血病治疗中的应用进展

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临床荟萃 2011年第7期26卷 637-641页

作者：曹红花程昊钰云南省肿瘤医院血液科云南昆明650118

粒细胞集落刺激因子（granulocyte colonysti mulating factor,G-CSF）主要用于各种粒细胞减少症的治疗,如放疗、化疗引起的粒细胞减少、再生障碍性贫血等,还用于干细胞移植、抗感染等治疗。

关键词：白血病,急性,髓系粒细胞集落刺激因子肿瘤治疗方案复发阿糖胞苷

异基因造血干细胞移植治疗合并中枢神经系统白血病48例疗效分析

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中华血液学杂志 2019年第7期40卷 578-583页

作者：费新红顾江英殷宇明程昊钰张维婕张书芹赵杰王静波航天中心医院血液科北京100049

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗合并中枢神经系统白血病(CNSL)患者的疗效.方法对2012年5月至2017年12月收治的48例合并CNSL患者进行回顾性分析.结果①全部48例患者中,男38例,女10例,中位年龄20(6~48)岁;急性淋巴细胞白血... 详细信息

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗合并中枢神经系统白血病(CNSL)患者的疗效.方法对2012年5月至2017年12月收治的48例合并CNSL患者进行回顾性分析.结果①全部48例患者中,男38例,女10例,中位年龄20(6~48)岁;急性淋巴细胞白血病(ALL)22例,急性髓系白血病(AML)21例,慢性髓性白血病(CML)5例.移植前骨髓完全缓解(CR)19例(CR组),未缓解(NR)29例(NR组).②预处理方案:成人采用以全身照射(TBI)为主方案,其中6例患者联合全脑全脊髓放疗,2例患者联合射波刀治疗;儿童患者采用改良伊达比星(IDA)联合Bu-Cy(白消安+环磷酰胺)方案.③48例患者均顺利植活,粒细胞植活中位时间为14(10~23)d,血小板植活的中位时间为16(6~78)d.④移植后28天评估骨髓,48例患者均达CR,经DNA检测证实均为完全供者嵌合状态.⑤中位随访时间为14(2~69)个月,28例患者存活,10例复发,其中CNSL复发3例.移植前CR组、NR组allo-HSCT后1年总生存(OS)率分别为(77.3±10.0)%、(57.6±9.3)%(P=0.409),无病生存率(DFS)分别为(71.2±11.0)%、(53.9±9.5)%(P=0.386).ALL、AML组移植后1年OS率分别为(54.2±10.7)%、(80.1±8.9)%(P=0.200),DFS率分别为(49.2±10.8)%、(75.0±9.7)%(P=0.190).结论 allo-HSCT治疗CNSL是安全、有效的.

关键词：白血病中枢神经系统全身照射造血干细胞移植

EB病毒特异细胞毒T淋巴细胞治疗造血干细胞移植术后伴急性移植物抗宿主病的EBV感染的临床分析

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中国实验血液学杂志 2018年第5期26卷 1515-1522页

作者：王静波袁磊程昊钰费新红顾江英薛松贺俊宝张维婕北京大学航天中心医院血液科北京100049

目的:研究EBV特异杀伤T淋巴细胞(EBV-CTL)治疗造血干细胞移植术后合并急性移植物抗宿主病的EBV感染的疗效和安全性。方法:回顾性分析北京大学航天中心医院血液科2015年1月至2017年5月31日接受EBV-CTL输注治疗异基因造血干细胞移植后EBV... 详细信息

目的:研究EBV特异杀伤T淋巴细胞(EBV-CTL)治疗造血干细胞移植术后合并急性移植物抗宿主病的EBV感染的疗效和安全性。方法:回顾性分析北京大学航天中心医院血液科2015年1月至2017年5月31日接受EBV-CTL输注治疗异基因造血干细胞移植后EBV感染12例的临床特征,疗效和安全性指标。结果:12例移植后接受EBV-CTL治疗的病例中,9例未接受利妥昔单克隆抗体治疗,4例发展为移植后淋巴细胞增殖性疾病(PTLD)(含3例使用利妥昔单克隆抗体病例)。出现EBV感染中位时间47(22-71)d,CTL输注前抗病毒治疗中位时间10(8-33)d,开始CTL治疗中位时间为移植后59(34-86)d。43例次细胞输注过程顺利,无相关不良事件发生,未见原有GVHD加重。第1疗程结束后9例获得CR,1例获得PR,2例获得NR,治疗后复发4例。第2疗程结束时复发4例均获得再次CR,PR病例最终仍未获得CR,移植后5个月死于GVHD。2例NR中仅1例获得CR,另1例仍处于NR,移植后5个月死于移植相关感染。4例PTLD病例均获得PTLD治愈。结论:初步结果显示,异基因造血干细胞移植术后合并急性移植物抗宿主病的EBV感染接受EBV-CTL治疗具有较好的安全性,但是其疗效仍需要进一步临床深入研究和证实。

关键词： EB病毒感染细胞毒T淋巴细胞造血干细胞移植急性移植物抗宿主病

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造血干细胞的可塑性及其临床应用的研究进展

国外医学（内科学分册） 2005年第5期32卷 200-202,223页

作者：程昊钰何明生云南省第一人民医院血液科云南昆明650032

造血干细胞(HSC)是具有高度自我更新能力和多向分化潜能的造血前体细胞。研究证明:HSC不仅可以分化为造血细胞,而且还可以向非造血细胞的方向分化,如肝脏细胞、心肌细胞、神经组织细胞、血管内皮细胞等。HSC这种向在发育上无关的其它系... 详细信息

造血干细胞(HSC)是具有高度自我更新能力和多向分化潜能的造血前体细胞。研究证明:HSC不仅可以分化为造血细胞,而且还可以向非造血细胞的方向分化,如肝脏细胞、心肌细胞、神经组织细胞、血管内皮细胞等。HSC这种向在发育上无关的其它系列的细胞类型分化的特性称为可塑性。本文就HSC可塑性及其在临床应用方面的研究进展作一综述。

关键词：造血干细胞横向分化可塑性

纯化供者CD34~+细胞输注治疗单倍型造血干细胞移植后移植物功能不良12例临床分析

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中华血液学杂志 2018年第10期39卷 828-832页

作者：费新红贺俊宝程昊钰殷宇明张维婕张书芹王筱璨王静波航天中心医院血液科

目的观察输注纯化供者CD34~+细胞治疗单倍型造血干细胞移植后移植物功能不良的疗效和安全性。方法对2014年1月至2018年3月期间接受供者纯化CD34~+细胞治疗的12例单倍型造血干细胞移植后移植物功能不良患者进行回顾性分析。结果 12例患... 详细信息

目的观察输注纯化供者CD34~+细胞治疗单倍型造血干细胞移植后移植物功能不良的疗效和安全性。方法对2014年1月至2018年3月期间接受供者纯化CD34~+细胞治疗的12例单倍型造血干细胞移植后移植物功能不良患者进行回顾性分析。结果 12例患者中男9例、女3例,中位年龄26(14～54)岁;急性淋巴细胞白血病4例,急性髓系白血病5例,慢性髓性白血病2例,慢性粒-单核细胞白血病1例。分选产物CD34~+细胞纯度为92.0%(44.0%～97.0%),回收率为55.0%(45.0%～96.7%),回输CD34~+细胞的中位数为1.9(0.9～4.4)×10~6/kg,CD3~+细胞中位数为0.6(0.3～2.0)×10~4/kg。中性粒细胞恢复中位时间为18(14～39)d,血小板恢复中位时间为29(16～153)d,红细胞恢复中位时间为60(9～124)d。12例患者输注过程中未发生严重不良反应,10例获得完全缓解,1例患者获得部分缓解,1例患者无效,未发生重症感染和重度GVHD。结论回输供者纯化CD34~+细胞是单倍型造血干细胞移植后植入功能不良的一种安全、有效治疗方法。

关键词： CD34~+细胞移植物功能不良异基因造血干细胞移植移植物抗宿主病