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腈水合酶底物通道入口调控催化活性的关键氨基酸位点的定位与改造

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食品与发酵工业 2022年第9期48卷 8-13页

作者：张苇苗程中一周丽周哲敏江南大学生物工程学院江苏无锡214122

腈水合酶(nitrile hydratase,NHase,EC 4.***.1.84)是一种催化腈类化合物生成酰胺类化合物的金属酶,工业上用于生物法生产丙烯酰胺和烟酰胺。由于腈类的水合反应是放热反应,工业上对腈水合酶的热稳定性较为关注。该实验室此前通过基因挖... 详细信息

腈水合酶(nitrile hydratase,NHase,EC 4.***.1.84)是一种催化腈类化合物生成酰胺类化合物的金属酶,工业上用于生物法生产丙烯酰胺和烟酰胺。由于腈类的水合反应是放热反应,工业上对腈水合酶的热稳定性较为关注。该实验室此前通过基因挖掘获得了具有高热稳定性的温泉热碱芽孢杆菌(Caldalkalibacillus thermarum TA2.A1)来源的腈水合酶,但其活性与工业生产要求有较大的差距,因此,提高该来源腈水合酶的酶活力具有重要意义。该研究采用分子动力学模拟的方法,通过对β亚基上位于腈水合酶底物通道入口的N47和N181这2个位点进行代表性氨基酸突变,破坏氢键,提高底物通道入口柔性,增强通道入口构象可变性,继而提高酶促反应催化效率。研究得到了最优突变体βN47F,与野生型酶相比,催化丙烯腈的比酶活力提高了2.57倍,且保持了良好的热稳定性,为工业化应用奠定了坚实的基础。

关键词：腈水合酶丙烯酰胺分子动力学模拟酶活力

协同两类腈水合酶高效催化烟酰胺及丙烯酰胺生物合成

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食品与发酵工业 2022年第18期48卷 48-52页

作者：赵凯阳黄微煜蔡宋佳陈员庆吴超城周丽程中一周哲敏江南大学生物工程学院江苏无锡214122

腈水合酶(nitrile hydratase,NHase)可以将腈类物质通过水合作用转化生成更有利用价值的酰胺类化合物,在工业上被用于生产烟酰胺、丙烯酰胺等重要化学品。然而,尚无兼具对底物和产物耐受性高以及催化活性高的腈水合酶,导致底物不能被彻... 详细信息

腈水合酶(nitrile hydratase,NHase)可以将腈类物质通过水合作用转化生成更有利用价值的酰胺类化合物,在工业上被用于生产烟酰胺、丙烯酰胺等重要化学品。然而,尚无兼具对底物和产物耐受性高以及催化活性高的腈水合酶,导致底物不能被彻底利用、酰胺产物的产量受限。该研究协同表达了高催化活性的低分子质量腈水合酶(L-NHase)和高耐受性的高分子质量腈水合酶(H-NHase),并优化两类酶在质粒上的排列位置。其中BAE-BAG菌株对底物、产物的耐受性与H-NHase菌株相仿;在以烟腈或者丙烯腈为底物进行全细胞催化时,该菌株的催化速率与L-NHase菌株相仿,最终烟酰胺产量可达到516 g/L,是目前报道的最高产量;丙烯酰胺产量比原始BAE或BAG菌株提高19.1%以上。该文成功协同两类腈水合酶,同时提高了合成烟酰胺和丙烯酰胺的催化反应速率及产量,对工业应用具有一定的指导意义。

关键词：腈水合酶协同表达烟酰胺丙烯酰胺全细胞催化

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初高中英语教学衔接的实践研究

英语教师 2015年第2期15卷 113-118页

作者：程中一北京师范大学万宁附中 570000

初高中英语衔接教学有助于初中英语知识系统化,培养学生自学能力,有效地使初高中英语衔接起来,为高中教学奠定基础。它是一种快速、高效、易学的教学方法,能为当前师生教学节省时间,有助于学生掌握英语学习规律,从而使学生爱学、乐学,... 详细信息

初高中英语衔接教学有助于初中英语知识系统化,培养学生自学能力,有效地使初高中英语衔接起来,为高中教学奠定基础。它是一种快速、高效、易学的教学方法,能为当前师生教学节省时间,有助于学生掌握英语学习规律,从而使学生爱学、乐学,同时指导学生的学习方法,使他们生动、活波、协调地发展,很快提高了学生综合运用英语的能力,取得了十分优异的成绩。

关键词：衔接教学实践研究教法指导自学能力

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动词和动词词组专项练习

考试(高考试题设计版) 2011年第8期 59-65页

作者：程中一北京市经济技术开发区实验学校

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情态动词专练与解析

文理导航 2008年第8X期 20-23,55页

作者：程中一

2014年高考新题型——语法填空复习应试策略

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考试（高考文科版） 2014年第4期 6-11页

作者：程中一北京二中亦庄学校

高考改革始终坚持"在稳定中求发展"的命题指导思想,命题的基本原则依然是"突出语篇,注重交际,讲究灵活,强调应用"。基于此种原因,2014年高考全国卷样题中删除了历年高考英语的"单句型语言知识题",取而代之的是英语语言知识运用的"对话... 详细信息

高考改革始终坚持"在稳定中求发展"的命题指导思想,命题的基本原则依然是"突出语篇,注重交际,讲究灵活,强调应用"。基于此种原因,2014年高考全国卷样题中删除了历年高考英语的"单句型语言知识题",取而代之的是英语语言知识运用的"对话型语法填空题"。这种新题型的特点是什么?针对这种新题型我们该怎么复习训练呢?一、语法填空的特点语法填空题是给出200字左右的一段短文或对话,段落中给出10个填空。

关键词：新题型高考改革应试策略语言知识对话型高考英语填空题定语从句语境分析并列连词