检索结果-南通市图书馆

高产洛伐他汀紫色红曲霉的分离与ITS分子鉴定

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中国药学杂志 2024年第3期59卷 220-226页

作者：王琼晓齐方圆鲍博涵孙庆妹秦路平朱波浙江中医药大学药学院杭州310053

目的筛选高产洛伐他汀的紫色红曲霉菌种,为红曲产业发展提供菌种参考。方法收集红曲资源12份,采用传统分离法进行红曲霉的分离,结合形态学与ITS测序进行菌种鉴定,进一步选取紫色红曲霉菌株,采用高效液相色谱法(HPLC)测定其代谢产物中总... 详细信息

目的筛选高产洛伐他汀的紫色红曲霉菌种,为红曲产业发展提供菌种参考。方法收集红曲资源12份,采用传统分离法进行红曲霉的分离,结合形态学与ITS测序进行菌种鉴定,进一步选取紫色红曲霉菌株,采用高效液相色谱法(HPLC)测定其代谢产物中总洛伐他汀[包括内酯式洛伐他汀((C_(24)H_(36)O_(5)))和酸式洛伐他汀((C_(24)H_(38)O_(6)))]的含量,用SPSS25.0软件进行方差分析。结果从12个产地中共分离得到红曲霉属(Monascussp.)菌株35株,其中23株鉴定到种,包括紫色红曲霉(***)11株,红色红曲霉(***)10株,橙色红曲霉(***)2株。11株紫色红曲霉菌株发酵产物中洛伐他汀含量存在显著差异(P<0.05),其中SM-1菌株总洛伐他汀含量最高,达(4.652±0.001)mg·g^(-1);其次为M4-1、F1-3,分别为(2.903±0.033)(3.108±0.009)mg·g^(-1),最低菌株为M4-5,仅有(2.712±0.014)mg·g^(-1)。结论市售红曲米发酵所用红曲霉繁杂;筛选得到一株高产洛伐他汀的菌株SM-1,可作为红曲米发酵的备选菌株。

关键词：红曲霉分离和分子鉴定洛伐他汀菌种筛选

基于肠道菌群探究一贯煎多糖的结构及改善小鼠肝纤维化作用

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中草药 2024年第4期55卷 1110-1123页

作者：魏霞王星星方勤勤徐莹秦路平刘平刘伟吴建军浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 上海中医药大学附属曙光医院药学部国家中医药管理局中药制剂三级实验室上海201203 上海中医药大学附属曙光医院肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

目的探究一贯煎多糖(YGJP-W)的基本结构特征以及其改善四氯化碳(CCl4)诱导小鼠肝纤维化的活性,分析YGJP-W抗肝纤维化活性与其调节肠道菌群结构变化关系。方法采用水提醇沉和弱阴离子交换色谱制备一贯煎多糖组分YGJP-W,依次采用苯酚-硫... 详细信息

目的探究一贯煎多糖(YGJP-W)的基本结构特征以及其改善四氯化碳(CCl4)诱导小鼠肝纤维化的活性,分析YGJP-W抗肝纤维化活性与其调节肠道菌群结构变化关系。方法采用水提醇沉和弱阴离子交换色谱制备一贯煎多糖组分YGJP-W,依次采用苯酚-硫酸法、间羟基联苯法、BCA蛋白定量分析试剂盒、高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)、FT-IR、离子色谱仪及扫描电镜法(scanning electron microscope,SEM)对一贯煎多糖的总糖含量、糖醛酸含量、蛋白含量、相对分子质量分布、官能团、单糖组成及形貌特征进行表征,采用CCl4诱导的小鼠模型,检测YGJP-W(50、100 mg/kg)干预3周后的小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及肝组织羟脯氨酸水平,并通过HE染色和天狼猩红染色观察肝脏组织学变化,评价YGJP-W改善肝纤维化活性;采用16S rDNA测序技术评价YGJP-W对小鼠肠道菌群的影响;采用抗生素联合YGJP-W干预,评价YGJP-W是否通过调节肠道菌群发挥药效作用。结果YGJP-W总得率为11.60%,总糖质量分数为92.48%,至少由相对分子质量为1.74×10^(5)和5.6×10^(3)的2种多糖组成,单糖组成包含半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖,其物质的量比为1.0∶2.8∶1.4∶1.6。YGJP-W干预3周后,能够显著改善CCl4引起的肝功能异常、肝组织病理损伤、胶原沉积和纤维化。YGJP-W在改善肝纤维化的同时能够引起小鼠肠道菌群结构变化,在门水平上,YGJP-W显著性降低拟杆菌门丰度[(57.4±14.6)%vs(79.3±8.1)%,P3,P3,P<0.01)。抗生素联合YJGP-W干预,YJGP-W抗肝纤维化的活性显著减弱。结论多糖类成分YJGP-W是一贯煎抗肝纤维化的重要物质基础,YJGP-W发挥抗肝纤维化的作用可能与其调控肠道菌群相关。

关键词：一贯煎多糖肝纤维化 16S rRNA基因测序肠道菌群

UPLC-Q-TOF-MS代谢组学探讨巴戟天环烯醚萜苷抗类风湿关节炎及并发骨丢失的机制

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中国中药杂志 2024年第2期49卷 453-460页

作者：沈燚孙艺琦李鹤鸣张泉龙赵琦明徐金龙秦路平张巧艳浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 福建中医药大学药学院福建福州350108 中国人民解放军联勤保障部队第九六九医院内蒙古呼和浩特010051

探讨巴戟天环烯醚萜苷(Morinda officinalis iridoid glycosides,MOIG)对类风湿关节炎大鼠足肿胀和骨丢失的治疗作用,并结合超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)血清代谢组学分析其潜在的作用机制。应用牛Ⅱ型胶原诱... 详细信息

探讨巴戟天环烯醚萜苷(Morinda officinalis iridoid glycosides,MOIG)对类风湿关节炎大鼠足肿胀和骨丢失的治疗作用,并结合超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)血清代谢组学分析其潜在的作用机制。应用牛Ⅱ型胶原诱导类风湿关节炎模型大鼠(typeⅡcollagen-induced rheumatoid arthritis rats,CIA),CIA造模成功后,灌胃给药8周,每周根据足肿胀程度进行关节炎指数评价,ELISA法检测血清骨代谢生化指标,Masson染色观察CIA大鼠股骨微结构,UPLC-Q-TOF-MS检测血清代谢产物的变化,主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)筛选血清样品潜在生物标志物,通过KEGG数据库分析构建相关代谢通路。结果表明CIA大鼠的关节炎指数、血清IL-6水平和血清骨代谢相关指标骨钙素(osteocalcin,OCN)、Ⅰ型胶原C端肽(C-telopeptide of typeⅠcollagen,CTX-Ⅰ)、脱氧吡啶啉(deoxypyridinoline,DPD)和抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)水平显著增加,骨保护素(osteoprotegerin,OPG)与核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)的比值显著降低,关节骨组织结构和软骨破坏;MOIG治疗显著降低CIA大鼠的关节炎评分,减轻关节足趾肿胀,逆转血清骨代谢生化指标的变化,改善关节骨组织和软骨的微结构。非靶向代谢组学结果显示CIA大鼠血清中有24个代谢物发生变化;与正常组比较,CIA大鼠有13个与RA相关的显著变化的代谢物,主要涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢;与CIA模型组比较,MOIG治疗大鼠有15个代谢物显著回调,主要涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,牛磺酸和亚牛磺酸代谢,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成。因此,MOIG可能通过调控氨基酸代谢减轻CIA大鼠足肿胀,改善软骨和骨组织微结构的破坏。

关键词：巴戟天环烯醚萜苷类风湿关节炎代谢组学 UPLC-Q-TOF-MS 氨基酸代谢

升麻三萜皂苷对破骨细胞形成分化的影响及机制研究

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中草药 2024年第12期55卷 4032-4044页

作者：宋子乐张奇胡思婧张泉龙徐金龙邱明华张巧艳韩婷秦路平浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 中国人民解放军联勤保障部队第九六九医院内蒙古呼和浩特010051 中国科学院昆明植物研究所云南昆明650201 中国人民解放军海军军医大学药学院上海200433

目的探究升麻三萜皂苷(Cimicifuga triterpene saponins)对破骨细胞形成分化和骨吸收功能的影响,并基于网络药理学探讨其作用机制。方法采用CCK-8法测定升麻三萜皂苷阿克特素、升麻环氧醇苷、升麻醇对骨髓巨噬细胞(bone marrow macropha... 详细信息

目的探究升麻三萜皂苷(Cimicifuga triterpene saponins)对破骨细胞形成分化和骨吸收功能的影响,并基于网络药理学探讨其作用机制。方法采用CCK-8法测定升麻三萜皂苷阿克特素、升麻环氧醇苷、升麻醇对骨髓巨噬细胞(bone marrow macrophages,BMMs)增殖活性的影响;抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrateresistant acid phosphatase,TRAP)染色测定破骨细胞数目;磷酸苯二钠法测定破骨细胞的TRAP活性;鬼笔环肽染色观察破骨细胞F-actin环的形成;甲苯胺蓝染色检测破骨细胞在牛皮质骨骨片上形成的骨吸收陷窝;Western blotting分析破骨细胞标志基因和蛋白的表达。采用GeneCards和DisGeNET数据库获取破骨细胞功能的靶点,应用Cytoscape 3.7.1软件,采用蛋白互作的方式,筛选升麻三萜皂苷调控破骨细胞功能的核心靶点,并采用DAVID 6.8对核心靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。结果升麻三萜皂苷对BMMs增殖无显著影响,升麻三萜皂苷阿克特素、升麻环氧醇苷、升麻醇均可减少破骨细胞的数目,抑制破骨细胞TRAP活性和F-actin环的形成,显著抑制破骨细胞活化T细胞核因子1(nuclear factor of activated T cells 1,NFATc1)、原癌蛋白Fos(oncogene Fos,c-Fos)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)和组织蛋白酶(cathepsin K,CTSK)的表达(P<0.05、0.01),减少破骨细胞在骨片上形成的骨吸收陷窝的面积(P<0.01)。网络药理学分析表明升麻三萜皂苷主要通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路调控破骨细胞的骨吸收功能。结论升麻三萜皂苷通过MAPK通路抑制BMMs诱导的破骨细胞的形成分化和骨吸收,可为抗骨质疏松新药的研发提供先导化合物。

关键词：升麻三萜皂苷阿克特素升麻环氧醇苷升麻醇破骨细胞网络药理学丝裂原活化蛋白激酶通路

基于CiteSpace的雷公藤红素知识图谱分析

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中草药 2024年第11期55卷 3789-3804页

作者：温乐乐叶梓江丽洁胡琳娜孔伟华王璐沈晓霞刘巨钊秦路平崔琦浙江中医药大学药学院浙江杭州311402 西湖大学浙江杭州310030

目的对近年来雷公藤红素相关研究现状及研究热点进行可视化分析,为今后该领域的研究和理论发展提供建设性的参考。方法检索中国知网(CNKI)和Web of Science(WOS)自2000年1月1日-2023年6月30日发表的雷公藤红素的相关文献,应用CiteSpace ... 详细信息

目的对近年来雷公藤红素相关研究现状及研究热点进行可视化分析,为今后该领域的研究和理论发展提供建设性的参考。方法检索中国知网(CNKI)和Web of Science(WOS)自2000年1月1日-2023年6月30日发表的雷公藤红素的相关文献,应用CiteSpace 6.1.R4软件对作者、机构合作网络,关键词共现、聚类、突现、时间线以及高被引文献进行可视化分析。结果与雷公藤红素相关的文献检索结果分别纳入674和1147篇中、英文文献,发文量总体呈阶梯式上升趋势。中文核心作者为张振海、陈彦、瞿鼎,外文核心作者为Gao Wei、Su Ping、Huang Luqi;国内外机构合作较为频繁,关于雷公藤红素的国内外研究主要集中在药理作用、给药系统、生物合成等方面。结论雷公藤红素近20年来研究热度不断上升,抗肿瘤、抗炎、抗肥胖等药理作用成为雷公藤红素的主流研究热点,给药系统、生物合成等将是雷公藤红素未来新的研究方向。

关键词：雷公藤红素文献计量学 CiteSpace 数据挖掘抗肿瘤抗炎抗肥胖给药系统生物合成

骆驼乳、牛乳、山羊乳中蛋白质和脂肪酸成分的比较

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食品科学 2024年第16期45卷 161-168页

作者：刘燕温嘉和赵子慧俞阳王藤剑赵婉璐赵林张巧艳秦路平张泉龙浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 新疆新驼乳业有限公司新疆阿克苏843600

采用凝胶电泳法和气相色谱法比较骆驼乳、牛乳和山羊乳在蛋白质和脂肪酸两方面的差异。电泳结果显示:不同产地骆驼乳粉乳蛋白成分比例存在差异,生产工艺对其乳蛋白和乳脂球膜蛋白的组成比例均有显著影响;骆驼乳、牛乳和山羊乳蛋白成分... 详细信息

采用凝胶电泳法和气相色谱法比较骆驼乳、牛乳和山羊乳在蛋白质和脂肪酸两方面的差异。电泳结果显示:不同产地骆驼乳粉乳蛋白成分比例存在差异,生产工艺对其乳蛋白和乳脂球膜蛋白的组成比例均有显著影响;骆驼乳、牛乳和山羊乳蛋白成分存在显著差异,其中骆驼乳不含β-乳球蛋白和αs1-酪蛋白,而牛乳和山羊乳中不含免疫球蛋白G2(immunoglobulin G2,IgG2)和IgG3,因此凝胶电泳法可用于骆驼乳中掺牛乳、山羊乳的鉴别分析。气相色谱检测结果显示:骆驼乳和羊乳中均检出31种脂肪酸,牛乳检出29种脂肪酸;骆驼乳中短链脂肪酸较牛乳和山羊乳少,而大部分长链脂肪酸含量显著高于牛乳和山羊乳。脂肪酸主成分分析结果显示,不同物种乳类脂肪酸差异明显,并且掺假骆驼乳与骆驼乳可明显区分,可用于掺加牛乳、山羊乳的骆驼乳中脂肪酸的鉴别分析。

关键词：骆驼乳凝胶电泳法气相色谱法蛋白质脂肪酸

同方期刊数据库

覆盆子化学成分的分离鉴定及其新型大麻素2型受体激动剂的筛选和抗骨质疏松作用评价

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中草药 2024年第2期55卷 386-401页

作者：陈昌伦胡思婧朱丽丽姚璐蒙王星星张安娜张巧艳秦路平吴建军浙江中医药大学药学院浙江杭州311402

目的以大麻素2型受体(cannabinoid receptor type 2,CB2R)为靶点,从补肾中药覆盆子中分离、鉴定、筛选得到具有激动CB2R的激动剂,并探讨其抗骨质疏松作用的机制。方法以激动CB2R活性为导向进行分离并筛选,采用正相硅胶柱色谱、凝胶柱... 详细信息

目的以大麻素2型受体(cannabinoid receptor type 2,CB2R)为靶点,从补肾中药覆盆子中分离、鉴定、筛选得到具有激动CB2R的激动剂,并探讨其抗骨质疏松作用的机制。方法以激动CB2R活性为导向进行分离并筛选,采用正相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、大孔树脂、重结晶和半制备型高效液相色谱对二氯甲烷层和醋酸乙酯层浸膏进行分离,结合化合物理化性质和核磁共振波谱对分离得到的化合物进行结构鉴定。通过双荧光素酶方法筛选出具有可特异性激动CB2R的化合物,并通过测定转染CB2R的人胚胎肾细胞HEK293-CB2内环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,c AMP)积聚水平和CB2R蛋白表达情况来验证筛选的化合物对CB2R的特异性激动活性,最后评价筛选得到的化合物对破骨细胞骨代谢方面的调节作用。结果以激动CB2R为活性导向进行分离和筛选,共得到24个化合物,分别鉴定为山柰酚(1)、木犀草苷(2)、银椴苷(3)、金丝桃苷(4)、橙皮素(5)、刺芒柄花素(6)、槲皮素(7)、对羟基苯甲酸(8)、迷迭香酸(9)、对羟基苯甲酸乙酯(10)、水杨酸(11)、没食子酸(12)、咖啡酸(13)、原儿茶酸(14)、鞣花酸(15)、香草酸(16)、loliolide(17)、对羟基苯甲酸甲酯(18)、ethyl dioxindole-3-acetate(19)、苦莓苷F1(20)、科罗索酸(21)、委陵菜酸(22)、山楂酸(23)、野鸦椿酸(24)。双荧光素酶筛选体系从24个化合物中筛选得到2个新的CB2R激动剂(化合物5和8)。c AMP和蛋白免疫印迹表明筛选得到化合物5和8对CB2R具有特异性激动活性和较好的亲和力,可显著抑制破骨细胞的活性并影响其骨吸收功能。结论化合物2、5、6、9、13、14、17、19为首次从中药覆盆子中分离得到。2个新的CB2R激动剂(化合物5和8)能特异性地激动CB2R并增加CB2R蛋白的表达,抑制给药刺激后HEK293-CB2细胞内c AMP的积累;以CB2R依赖性对破骨细胞功能的正常发挥产生影响。

关键词：掌叶覆盆子大麻素2型受体激动剂抗骨质疏松橙皮素对羟基苯甲酸甲酯木犀草苷刺芒柄花素

仙茅苔黑酚龙胆二糖苷调控NF-κB/Nrf2通路抑制破骨细胞氧化应激及其骨吸收的研究

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中草药 2024年第3期55卷 822-831页

作者：李鹤鸣刘梦琴虞艳玮沈燚杜金蔓胡思婧徐金龙张泉龙秦路平张巧艳浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 福建中医药大学药学院福建福州350108 中国人民解放军联勤保障部队第九六九医院内蒙古自治区呼和浩特010051

目的探讨仙茅苔黑酚龙胆二糖苷(orcinol gentiobioside,OGB)对氧化应激诱导的破骨细胞(osteoclasts,OCs)的作用及机制。方法可溶性核因子-κB受体活化因子配体(soluble receptor activator of nuclear factor-κB ligand,sRANKL)联合H_(2)O_(2)诱导RAW264.7细胞,建立氧化应激诱导的OCs模型;CCK-8法检测OCs活力;抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色测定OCs的数目;磷酸苯二钠法测定OCs的TRAP活性;免疫荧光法观察OCs的Factin环结构和形态,以及p65和核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的核转位;ELISA法测定OCs相关的生化指标;Western blotting检测骨吸收关键蛋白及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和Nrf2通路相关蛋白的表达。结果OGB显著抑制氧化应激诱导的OCs的形成和分化(P<0.01),并抑制TRAP活性、F-actin环的形成及其骨吸收作用(P<0.05、0.01),下调骨吸收关键蛋白c-Fos、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP9)的表达(P<0.05、0.01),降低活性氧(reactive oxygen species,ROS)和还原型辅酶II(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)的活性(P<0.05、0.01),增加抗氧化酶血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(gamma-glutamyl cysteine synthetase,γ-GCS)的活性(P<0.05、0.01),增强OCs中Nrf2的表达和核转位,抑制肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)的募集、核因子-κB抑制因子α(inhibitor of NF-κB-α,IκBα)的降解,并阻止p65的磷酸化和核转位(P<0.05)。结论OGB能够通过调控NF-κB和Nrf2通路,抑制氧化应激诱导的OCs形成分化和骨吸收作用。

关键词：仙茅苔黑酚龙胆二糖苷破骨细胞氧化应激核因子-κB通路核因子E2相关因子2通路

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中医药院校生药学实验教学改革与实践

中医药管理杂志 2024年第1期32卷 6-8页

作者：汪红孙艺琦俞冰秦路平仇凤梅浙江中医药大学浙江杭州311403

为了提升中医药院校药学专业学生学习生药学的兴趣,发挥其主观能动性,达到教学目标,对生药学实验课程教学内容、形式、考核方式等进行了改革,建立了涵盖课程内容体系,点面结合、传统与现代相结合的新的实验课程体系,改革效果良好,可以... 详细信息

为了提升中医药院校药学专业学生学习生药学的兴趣,发挥其主观能动性,达到教学目标,对生药学实验课程教学内容、形式、考核方式等进行了改革,建立了涵盖课程内容体系,点面结合、传统与现代相结合的新的实验课程体系,改革效果良好,可以推广使用。

关键词：中医药院校生药学实验教学改革