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miRNA-429对人乳腺癌Bcap37细胞生物学行为的调控及相关研究

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miRNA-429对人乳腺癌Bcap37细胞生物学行为的调控及相关研究

作者：秦科宇第二军医大学

学位级别：硕士

一、研究背景和目的乳腺癌是一种异质性的疾病,居女性肿瘤相关死亡率第二位,包括了大量各种不同的临床特征。在过去的十年中,大量研究证实乳腺癌可分为多个分子亚型:luminal A亚型、luminal B亚型、HER2过表达亚型、基底细胞样亚型和正... 详细信息

一、研究背景和目的乳腺癌是一种异质性的疾病,居女性肿瘤相关死亡率第二位,包括了大量各种不同的临床特征。在过去的十年中,大量研究证实乳腺癌可分为多个分子亚型:luminal A亚型、luminal B亚型、HER2过表达亚型、基底细胞样亚型和正常细胞样亚型或更多分子亚型[1,2]。其中,Luminal亚型的基因表达主要与雌激素受体(ER)和/或孕激素受体(PR)阳性的表达相关;HER2过表达亚型表现为HER2受体的过表达以及邻近基因17q12–21的扩增;基底样亚型是由基底/肌上皮标记表达来定义且普遍缺乏ER、PR和HER2的表达。重要的是,不同分子亚型有特定的m RNA表达谱,这些特定的m RNA表达谱部分归因于不同的mi RNA的表达[3]。有研究通过将乳腺癌与癌旁组织进行对比,揭示了乳腺癌组织中mi RNA失调的普遍模式,提示了在乳腺癌的发展中mi RNA失调的重要性[4]。mi R-429属于一个mi RNA家族,该家族包括mi R-200c、mi R-141、mi R-200b和mi R-200a[5]。mi R-429在生物体内发挥着正常的生物学功能[6,7],特异性地表达于人类胚胎干细胞中[8],但同时其异常表达也参与影响肿瘤干细胞和各种肿瘤的功能[9-13],但其在乳腺癌中的表达情况及功能情况尚未见报道。本研究中,我们发现在人乳腺癌Bcap37细胞系中mi R-429的表达低,进一步的研究表明mi R-429的过表达促进人乳腺癌Bcap37细胞的增殖和迁移,进而促进乳腺癌的发展和转移。二、研究方法1.利用Realtime-PCR探针法检测人乳腺癌细胞系BT20、BT474、Bcap37、SK-BR-3、MCF7、T-47D和MDA-MB-231中mi R-429的表达情况,从中选择出mi R-429表达最低的细胞系;2.通过Hsa-mi R-429过表达慢病毒和对照病毒转染Bcap37乳腺癌细胞,建立稳定过表达mi R-429的人乳腺癌细胞系Bcap37及其对照细胞系;3.利用RT-PCR探针法检测过表达mi R-429的人乳腺癌细胞系Bcap37及其对照细胞系中mi R-429的表达情况,确定转染效率;4.稳定过表达mi R-429的人乳腺癌细胞系Bcap37及其对照细胞系分别采用MTT法、划痕实验、Transwell实验等方法观察表达mi R-429后对人乳腺癌细胞系Bcap37增殖、迁移、转移能力等生物学特性的影响;5.利用Realtime-PCR探针法检测稳定过表达mi R-429的人乳腺癌细胞系Bcap37及其对照细胞系对Shp2、FBXW11、GLI3、RAP1B、CSNK1G3、MAP3K5、MAP4K3、PPM1B等基因相关m RNA转录水平的影响。三、研究结果1.利用Realtime-PCR探针法检测结果显示:mi R-429在乳腺癌细胞系都有不同程度表达,BT20和T47D细胞系表达量最高,BT474、、SK-BR-3、MCF7和MDA-MB-231细胞系表达量相当,而mi R-429在Bcap37细胞中表达量最低;2.将hsa-mi R-429过表达慢病毒感染人乳腺癌Bcap37细胞,经筛选后得到hsa-mi R-429过表达Bcap37稳转细胞株。利用Realtime-PCR探针法检测结果显示,与对照组相比,hsa-mi R-429过表达稳转Bcap37细胞株中mi R-429的表达水平显著增加;***法检测Mi R-429过表达处理对细胞增值的影响。培养24h、48h、72h后,Bcap37细胞过表达Mi R-429组的在490nm处的吸光度均明显高于与对照组,说明mi R-429能显著促进Bcap37细胞的增殖;4.划痕实验显示,与对照组相比,hsa-mi R-429过表达稳转Bcap37细胞株的迁移能力显著增强;Transwell细胞迁移实验得到与上述类似的结果;5.乳腺癌相关基因转录的差异:hsa-mi R-429过表达稳转Bcap37细胞株中Shp2的相对表达水平高于对照组,而FBXW11、GLI3、RAP1B、CSNK1G3、MAP3K5、MAP4K3、PPM1B等基因相关m RNA转录水平均低于对照组。四、结论目前研究表明,mi RNA与家族性乳腺癌、雌激素相关受体、HER2、乳腺癌的复发转移以及相关化学治疗耐药等密切相关。本研究旨在研究mi R-429对乳腺癌细胞生物学功能的影响。通过过表达mi R-429探究了mi R-429对人乳腺癌Bcap37细胞功能的影响。与之前的大多数研究基本一致,我们发现mi R-429上调后能显著促进人乳腺癌Bcap37细胞的增殖;同时与对照的细胞相比,无论是划痕实验还是transwell实验,过表达mi R-429的Bcap37细胞具有

关键词： miRNA-429 乳腺癌细胞增殖细胞迁移

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超声引导在乳腺外科手术活检中的应用49例

中国现代普通外科进展 2016年第12期19卷 963-964页

作者：秦科宇胡薇解放军第四五七医院普通外科湖北武汉430014 第二军医大学附属长海医院甲乳外科上海200433

对比乳腺肿瘤常规手术活检与超声引导开放式手术活检的临床效果。选取2014年8月—2015年6月第二军医大学附属长海医院单侧、单发女性乳腺肿瘤患者98例,随机分为常规手术活检组与超声引导开放式手术活检组,并对其临床及手术相关指标进行... 详细信息

对比乳腺肿瘤常规手术活检与超声引导开放式手术活检的临床效果。选取2014年8月—2015年6月第二军医大学附属长海医院单侧、单发女性乳腺肿瘤患者98例,随机分为常规手术活检组与超声引导开放式手术活检组,并对其临床及手术相关指标进行分析。常规手术活检组与超声引导开放式手术活检组患者年龄、乳腺肿瘤大小差异无统计学意义(P>0.05);而两组切口长度[(2.62±0.06)cm比(2.28±0.11)cm]、手术时间[(22.52±0.46)min比(18.82±0.66)min]、疼痛等级[(2.46±0.09)比(1.64±0.12)]差异有统计学意义(P<0.05)。超声引导开放式手术活检较常规手术活检具有切口小、手术时间短、疼痛轻的优势,在乳腺外科医生培训中,采用超声引导活检有利于专科医师的快速成长。

关键词：超声引导乳腺肿瘤活检

平片无张力疝修补术治疗腹股沟巨大嵌顿疝23例临床分析

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中华疝和腹壁外科杂志（电子版） 2012年第1期6卷 71-72页

作者：黄国稳秦科宇解放军第四五七医院普外科

腹股沟嵌顿疝是普外科常见的急腹症之一，巨大嵌顿疝也不少见，巨大嵌顿疝合并肠梗阻、坏死、穿孔是常见并发症，处理不及时可危急生命。急诊手术行复位、高位结扎及一期无张力疝修补常可减轻患者痛苦，又避免了再次手术，还减轻了患者... 详细信息

腹股沟嵌顿疝是普外科常见的急腹症之一，巨大嵌顿疝也不少见，巨大嵌顿疝合并肠梗阻、坏死、穿孔是常见并发症，处理不及时可危急生命。急诊手术行复位、高位结扎及一期无张力疝修补常可减轻患者痛苦，又避免了再次手术，还减轻了患者的经济负担，具有非常重要的临床意义。我院2006年8月至2010年6月共收治腹股沟疝246例，其中巨大嵌顿疝23例，均急诊行平片无张力疝修补术治疗，现总结如下。

关键词：平片无张力疝修补术腹股沟嵌顿疝临床分析治疗急诊手术常见并发症高位结扎再次手术

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60例肺结核合并糖尿病患者的临床分析

中国继续医学教育 2018年第6期10卷 70-72页

作者：秦科宇高亮常州市第三人民医院肺科江苏常州213000

目的研究肺结核合并糖尿病患者的临床疗效。方法选取我院2015年12月—2017年12月收治的60例肺结核合并糖尿病患者(观察组)和同期在我院治疗单纯肺结核患者60例(对照组)为研究对象,两组患者均给予临床常规抗结核药物治疗,观察组患者给予... 详细信息

目的研究肺结核合并糖尿病患者的临床疗效。方法选取我院2015年12月—2017年12月收治的60例肺结核合并糖尿病患者(观察组)和同期在我院治疗单纯肺结核患者60例(对照组)为研究对象,两组患者均给予临床常规抗结核药物治疗,观察组患者给予饮食控制和血糖控制,比较两组患者的临床疗效。结果观察组患者痰菌转阴率、空洞闭合率及病灶明显吸收率分别为76.67%(46/60)、63.33%(38/60)、71.67%(43/60);对照组患者痰菌转阴率、空洞闭合率及病灶明显吸收率分别为96.67%(58/60)、91.67%(55/60)、95.00%(57/60),两组相比,差异有统计学意义(χ~2=10.38,13.81,11.76,P<0.05)。结论肺结核合并糖尿病患者由于病情较为复杂,在临床治疗过程中的临床疗效低于单纯肺结核患者,临床治疗过程中需积极控制血糖,尽早治疗,延长结核治疗时间,以提高临床疗效。

关键词：肺结核糖尿病临床疗效

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肺结核并发呼吸衰竭的临床分析

中国继续医学教育 2018年第7期10卷 73-75页

作者：高亮秦科宇常州市第三人民医院肺科江苏常州213000

目的研究肺结核并发呼吸衰竭患者的临床治疗效果。方法选取本院2013年12月—2017年12月收治的45例肺结核合并呼吸衰竭患者为研究对象,所有患者均采用常规抗结核治疗和呼吸衰竭治疗。结果 45例肺结核合并呼吸衰竭患者治疗后,38例患者呼... 详细信息

目的研究肺结核并发呼吸衰竭患者的临床治疗效果。方法选取本院2013年12月—2017年12月收治的45例肺结核合并呼吸衰竭患者为研究对象,所有患者均采用常规抗结核治疗和呼吸衰竭治疗。结果 45例肺结核合并呼吸衰竭患者治疗后,38例患者呼吸衰竭症状好转,7例患者死亡,其中3例患者死于呼吸衰竭,2例患者死于肝衰竭,2例患者死于循环衰竭。治疗后,患者PaCO_2、PaO_2水平与治疗前相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肺结核合并呼吸衰竭患者的死亡率较高,一旦发病则需及时采取有效的措施治疗,减少死亡率。

关键词：肺结核呼吸衰竭临床分析并发症

结节性甲状腺肿合并甲状腺癌的临床诊断与治疗效果分析

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世界最新医学信息文摘 2019年第95期19卷 44-45页

作者：吴纯东秦科宇刘建君中国人民解放军空降兵军医院普外科

目的探讨结节性甲状腺肿合并甲状腺癌的临床诊断与治疗。方法选取于2015年1月至2017年1月在本院收治的病理学诊断为结节性甲状腺肿合并甲状腺癌患者47例,回顾性总结分析临床诊断、治疗方法及疗效。结果超声联合CT检测的诊断准确率为89.3... 详细信息

目的探讨结节性甲状腺肿合并甲状腺癌的临床诊断与治疗。方法选取于2015年1月至2017年1月在本院收治的病理学诊断为结节性甲状腺肿合并甲状腺癌患者47例,回顾性总结分析临床诊断、治疗方法及疗效。结果超声联合CT检测的诊断准确率为89.36%,明显高于超声及CT增强检查,有显著性统计学意义(P<0.01)。所有患者均为单侧癌,发生在左侧有22例(46.8%),发生于右侧有25例(53.19%)。滤泡状腺癌13例(27.66%),乳头状腺癌29例(61.7%)。髓样癌1例(2.13%),未分化癌2例(4.26%),鳞状细胞癌1例(2.13%),肉瘤样变1例(2.13%)。47例患者临床症状治愈31例(65.96%),好转13例(27.66%),无效3例(6.38%),总有效率93.62%。术后随访3、6、12个月,均未出现明显并发症。结论结节性甲状腺肿合并甲状腺癌可以运用超声联合CT进行早期诊断,同时利用术前甲状腺穿刺细胞学检查,或者术中病理学检查制定合理手术方案,提高手术疗效,改善预后,降低术后复发率。

关键词：结节性甲状腺肿合并甲状腺癌超声检查 CT扫描手术治疗

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甲状腺癌根治术中应用纳米碳悬液的临床分析

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第11期 60-62页

作者：秦科宇吴纯东高雁鹏袁青解放军95829部队医院湖北武汉430012

研究分析甲状腺癌根治术患者的治疗中应用纳米碳悬液所发挥的临床效果。方法选取我院普外科2022年1月至2022年12月收治的120例甲状腺癌患者,根据术式以对照组(单纯甲状腺癌根治术治疗)与观察组(甲状腺癌根治术中应用纳米碳悬液治疗)进... 详细信息

研究分析甲状腺癌根治术患者的治疗中应用纳米碳悬液所发挥的临床效果。方法选取我院普外科2022年1月至2022年12月收治的120例甲状腺癌患者,根据术式以对照组(单纯甲状腺癌根治术治疗)与观察组(甲状腺癌根治术中应用纳米碳悬液治疗)进行分组研究,从而评价纳米碳悬液对于甲状腺癌根治术的效用。结果较之于对照组,观察组治疗后的血钙以及甲状旁腺激素受影响的水平更低,同时中央区淋巴结清扫数目更多,让手术的用时得到缩短,控制整体上的出血量,P0.05。结论甲状腺癌根治术中应用纳米碳悬液的效果显著,能更好地保护甲状旁腺(减少对血钙与血清甲状旁腺激素的影响),还能提高淋巴结清扫效果,并且减少并发症,值得推广。

关键词：甲状腺癌根治术纳米碳悬液临床效果

微RNA-429调控人乳腺癌Bcap37细胞系的增殖和迁移能力

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中华乳腺病杂志（电子版） 2015年第2期9卷 16-20页

作者：秦科宇李恒宇许鹿盛湲第二军医大学附属长海医院甲乳外科上海200433

目的通过在人乳腺癌Bcap37细胞系中过表达miRNA-429,检测miRNA-429对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法用miRNA-429过表达慢病毒及无miRNA-429过表达作用的空白慢病毒分别感染人乳腺癌Bcap37细胞后,建立稳定转染细胞株作为实验组和... 详细信息

目的通过在人乳腺癌Bcap37细胞系中过表达miRNA-429,检测miRNA-429对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法用miRNA-429过表达慢病毒及无miRNA-429过表达作用的空白慢病毒分别感染人乳腺癌Bcap37细胞后,建立稳定转染细胞株作为实验组和对照组,利用实时PCR探针法检测两组miRNA-429的表达水平;运用MTT法检测miRNA-429对乳腺癌Bcap37细胞增殖的影响;利用划痕实验及Transwell细胞迁移实验检测miRNA-429对人乳腺癌Bcap37细胞迁移能力的影响。两组以上的数据采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验;两组数据采用t检验;具有多个时间点的组间比较采用重复测量资料的方差分析。结果感染miRNA-429过表达慢病毒后,实验组细胞株中的miRNA-429表达水平较之于对照组细胞株明显上调(2.88±0.02比1.00±0.05,t=10.33,P=0.009);过表达miRNA-429后,实验组细胞增殖能力较之于对照组增强(t=11.95,P=0.000),划痕实验和Transwell实验均显示实验组细胞的迁移能力较之于对照组明显增强[(605±23)个比(365±21)个,t=13.30,P=0.001]。结论过表达miRNA-429可显著增加人乳腺癌Bcap37细胞的增殖和迁移能力。

关键词：乳腺肿瘤微RNAs 细胞增殖细胞运动

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全甲状腺切除术治疗双侧甲状腺癌的效果分析

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第6期 57-60页

作者：吴纯东秦科宇刘建君高雁鹏解放军95829部队医院湖北武汉430012

全甲状腺切除术治疗双侧甲状腺癌的效果分析。方法在2019年1月至2022年1月中选取到院进行治疗的双侧甲状腺癌患者共48例,随机分组,分别提供次全切手术治疗(对照组)、全甲状腺切除术治疗(观察组):定位到病灶位置后观察大小并拟定切除大... 详细信息

全甲状腺切除术治疗双侧甲状腺癌的效果分析。方法在2019年1月至2022年1月中选取到院进行治疗的双侧甲状腺癌患者共48例,随机分组,分别提供次全切手术治疗(对照组)、全甲状腺切除术治疗(观察组):定位到病灶位置后观察大小并拟定切除大小,按照患者情况确定切除范围,在完成切除后将喉返神经、甲状旁腺等组织进行遮盖缝合。n24。对比分析临床效果。结果两组手术时间、术中出血量差异小(P>0.05)。与对照组相比,观察组住院时间、术后镇痛时间均偏长,疗效偏高,不良反应偏低,生活质量偏高,各项睡眠质量评分高(P<0.05)。结论研究表明,在治疗甲状腺疾病时,通过使用化疗来降低爆发的易感性,有完全干预选择的患者和在甲状腺治疗中时间和出血差异较低的两组患者可以实现症状减轻。显著减少了患者的切口面积和术后疼痛,缩短了手术时间和住院时间。在术后并发症方面,手术维持了更多的正常组织,减少了甲状腺功能损伤,患者有完整的临床表现,ADS功能,术后声带嘶哑等急性并发症。但是所有的甲状腺切除手术都完全切断了炉缸,疾病的发病率也降低了。

关键词：全甲状腺切除术双侧甲状腺癌并发症