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血浆蛋白纯化技术的研究

血浆蛋白纯化技术的研究

作者：秦宗华暨南大学

学位级别：硕士

离子交换色谱是主要依赖于不同蛋白分子与交换剂结合力不同，而进行的一种简单、快速有效的用于蛋白分离纯化的技术，具有高容量、低成本的优点。动物血浆(血清)中含有种类丰富的蛋白质，这些蛋白质对于维持机体的生理活动具有重要意义... 详细信息

离子交换色谱是主要依赖于不同蛋白分子与交换剂结合力不同，而进行的一种简单、快速有效的用于蛋白分离纯化的技术，具有高容量、低成本的优点。动物血浆(血清)中含有种类丰富的蛋白质，这些蛋白质对于维持机体的生理活动具有重要意义。本研究主要通过Q Sepharose–XL强阴离子交换色谱技术，结合分子排阻色谱等建立对血浆中免疫球蛋白、白蛋白以及抗凝血酶等进行分离纯化的方法。动物血清中免疫球蛋白和白蛋白的等电点分别约为7.8和4.8，根据它们等电点的较大差别，采用pH分段洗脱方式，利用Q Sepharose–XL强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱同时分离纯化这两种蛋白。对纯化后的蛋白进行活性检测，证明所纯化的免疫球蛋白和白蛋白都保持正常的生物活性。蛋白质含量测定说明免疫球蛋白的纯化回收率达到95%以上，而白蛋白的回收率大于90%。该法简便快速，可同时从动物血清中纯化出保持生物活性的免疫球蛋白和白蛋白，纯化效率高。以市场上购买的精氨酸激酶为抗原进行动物免疫，利用Q Sephrose-XL强阴离子交换色谱从高免疫兔血清中纯化精氨酸激酶的多克隆抗体，再分别采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和间接酶联免疫法进行纯度和活性的检测。纯化出的多克隆抗体具有纯度高、活性强的特点，这对于未来多克隆抗体的研究具有深远意义。血浆中抗凝血酶是体内最重要的抗凝血物质，正常含量一般维持在150mg/L00mg/L水平。本研究分别采用肝素钠亲和色谱和Q Sephrose-XL强阴离子交换色谱对血浆中抗凝血酶粗提液进行分离纯化。通过SDS-PAGE进行目标蛋白分子量和纯度检测，得出分子量约为58KDa，与标准抗凝血酶样品分子量大小相符，且纯度较高。

关键词：血浆白蛋白免疫球蛋白抗凝血酶离子交换色谱亲和色谱分子排阻色谱纯化

强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱纯化血清中免疫球蛋白和白蛋白

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色谱 2012年第8期30卷 851-855页

作者：秦宗华陈婷李任强暨南大学生物工程学系广东省分子免疫与抗体工程重点实验室广东广州510632

动物血清中免疫球蛋白和白蛋白的等电点分别约为7.8和4.8,根据它们等电点的较大差别,利用Q Sepha-roseTM-XL强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱同时分离纯化这2种蛋白。以0.02mol/L pH 8.0的Tris-HCl缓冲液平衡离子交换色谱柱并将已稀释1... 详细信息

动物血清中免疫球蛋白和白蛋白的等电点分别约为7.8和4.8,根据它们等电点的较大差别,利用Q Sepha-roseTM-XL强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱同时分离纯化这2种蛋白。以0.02mol/L pH 8.0的Tris-HCl缓冲液平衡离子交换色谱柱并将已稀释10倍的高免疫的兔血清上样,采用pH分段洗脱。在pH 6.0时以0.3mL/min低流速洗脱得到高纯度的免疫球蛋白,继续在pH 4.0时洗脱,再辅以Sephadex G-75分子排阻色谱可获得纯度大于95%的白蛋白。对纯化后的蛋白进行活性检测,证明所纯化的免疫球蛋白和白蛋白都保持正常的生物活性。蛋白质含量测定说明免疫球蛋白的纯化回收率达到95%以上,而白蛋白的纯化回收率大于90%。该法简便快速,可同时从动物血清中纯化出保持生物活性的免疫球蛋白和白蛋白,纯化效率高。

关键词：阴离子交换色谱分子排阻色谱免疫球蛋白白蛋白动物血清纯化

利用牵出技术分析与虾主要过敏原相互作用的蛋白质

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中国生物工程杂志 2012年第11期32卷 81-85页

作者：沈梓粤吕哲秦宗华李任强暨南大学生物工程学系广东省分子免疫与抗体工程重点实验室广州510632

目的:应用牵出技术研究与虾主要过敏原相互作用的蛋白质。方法:将纯化的虾主要过敏原原肌球蛋白偶联在用环氧氯丙烷活化的载体Sepharose-4B上作为配基并制成层析柱,以过敏原为饵蛋白从虾过敏患者血清中钓出与之相互作用的蛋白质。结果:S... 详细信息

目的:应用牵出技术研究与虾主要过敏原相互作用的蛋白质。方法:将纯化的虾主要过敏原原肌球蛋白偶联在用环氧氯丙烷活化的载体Sepharose-4B上作为配基并制成层析柱,以过敏原为饵蛋白从虾过敏患者血清中钓出与之相互作用的蛋白质。结果:SDS-PAGE和间接ELISA检测显示,由过敏原牵出的蛋白质至少有两种,分别是抗原特异性IgE和IgG,这说明虾过敏反应除了是由IgE所介导外,IgG也在其中起到一定的作用。结论:实验所采用的牵出技术是一个快速且有效的研究蛋白质相互作用的方法,其基于免疫亲和层析原理。

关键词：牵出技术虾过敏原蛋白质相互作用

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磷化氢高仓中层横探管杀虫初探

粮油仓储科技通讯 1997年第2期13卷 30-30,33页

作者：秦宗华四川丰都新城省粮食储备库 648200

我库是80年代后期修建的新仓,装粮线4.5m,最高为5m。由于PH_3的理化性质决定其扩散渗透性均有一定范围,一般扩散渗透距离不超过3m。为此储粮高度超过3m时,粮堆内部各部位PH_3有效浓度分布不均,杀虫效果差,往往造成重复熏蒸,这既增大了药... 详细信息

我库是80年代后期修建的新仓,装粮线4.5m,最高为5m。由于PH_3的理化性质决定其扩散渗透性均有一定范围,一般扩散渗透距离不超过3m。为此储粮高度超过3m时,粮堆内部各部位PH_3有效浓度分布不均,杀虫效果差,往往造成重复熏蒸,这既增大了药量,增强了害虫抗性。

关键词：粮仓高仓中层横探管磷化氢杀虫

高吸水率玄武岩在即平高速公路路面工程中的运用

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山东交通科技 2008年第2期 38-40,43页

作者：贺炯法秦宗华青岛市高速公路管理处胶南分处山东青岛266400 青岛交通工程监理咨询有限公司山东青岛266071

介绍了高吸水率玄武岩在高速公路路面上面层配合比设计中的应用,其混合料路用性能可以达到规范要求。

关键词：玄武岩高吸水率配合比设计生产配合比设计

新媒体背景下饲料产品网络营销的优势及信息宣传策略

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中国饲料 2024年第14期 113-116页

作者：宗华信阳职业技术学院河南信阳464000

新媒体的出现给饲料产品的营销方式带来了变革和挑战。面对新媒体营销的诸多优势,传统线下营销方式已难以满足饲料企业的发展需求,因此,需要建立起一套全新的网络营销体系。本文从饲料产品网络营销的角度出发,探讨了新媒体背景下饲料产... 详细信息

新媒体的出现给饲料产品的营销方式带来了变革和挑战。面对新媒体营销的诸多优势,传统线下营销方式已难以满足饲料企业的发展需求,因此,需要建立起一套全新的网络营销体系。本文从饲料产品网络营销的角度出发,探讨了新媒体背景下饲料产品网络营销的优势及信息宣传策略,力求借助新媒体中的海量用户群体和市场影响力提高饲料品牌的知名度,实现饲料产品的促销。

关键词：新媒体饲料产品网络营销信息宣传

固定甘氨酸制备阳离子交换树脂及其吸附金属离子性能的研究

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化学与生物工程 2012年第12期29卷 43-47页

作者：吕哲沈梓粤秦宗华李任强暨南大学生物工程学系广东广州510632

利用环氧氯丙烷活化法将甘氨酸固定于Sephadex G-25凝胶上制备弱酸性阳离子交换树脂。通过树脂对水中Ca2+和Mg2+的静态吸附、动态吸附和解吸等实验,探讨了金属离子溶液初始浓度、树脂pH值和流速等对树脂吸附Ca2+和Mg2+的影响以及再生条... 详细信息

利用环氧氯丙烷活化法将甘氨酸固定于Sephadex G-25凝胶上制备弱酸性阳离子交换树脂。通过树脂对水中Ca2+和Mg2+的静态吸附、动态吸附和解吸等实验,探讨了金属离子溶液初始浓度、树脂pH值和流速等对树脂吸附Ca2+和Mg2+的影响以及再生条件。结果表明,环氧氯丙烷活化法固定甘氨酸制备阳离子交换树脂的偶联率为12mg·g-1;树脂对Ca2+和Mg2+有良好的吸附/解吸性能,室温下,对Ca2+和Mg2+的静态饱和吸附量分别为7.59mg·g-1和6.16mg·g-1,而动态饱和吸附量则分别达到10.83mg·g-1和8.80mg·g-1。该树脂交换柱较好的操作条件如下:以pH值为8.5的0.05mol·L-1 Tris-HCl溶液作为平衡液,上样流速1mL·min-1;以pH值为1.5的1mol·L-1 NaCl-HCl溶液作为洗脱液,流速0.5mL·min-1。该树脂性能稳定,再生效果好,可重复多次使用。

关键词：甘氨酸阳离子交换树脂 Ca2+ 和Mg2+ 吸附再生

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硅钙石碳化制备高性能材料的研究

硅钙石碳化制备高性能材料的研究

作者：徐宗华盐城工学院

学位级别：硕士

CO引起的温室气体效应是全球必须解决的问题,利用CO是解决该问题的最优选择。硅酸盐水泥生产排放出大量的CO,占全球排放总量的约7%。为此,本课题组曾发明了一种以硅钙石3Ca O·2Si O2（CS）为主要矿物的硅钙石水泥,该水泥制备时CO排放少... 详细信息

CO引起的温室气体效应是全球必须解决的问题,利用CO是解决该问题的最优选择。硅酸盐水泥生产排放出大量的CO,占全球排放总量的约7%。为此,本课题组曾发明了一种以硅钙石3Ca O·2Si O2（CS）为主要矿物的硅钙石水泥,该水泥制备时CO排放少,硬化时能大量吸收CO,具有显著的低碳节能特征。但是,该水泥制品的开发研究较少。本文针对传统硅酸盐水泥抗折强度低,传统水泥发泡材料导热系数高的瓶颈问题,主要开展了CS碳化制备高抗折强度材料和低导热泡沫混凝土隔热材料两方面研究,以推进硅钙石水泥走向应用。以CS为原料,以碳化时调控形成文石晶须为策略,开展了CS碳化制备高抗折强度材料的研究。主要开展了晶型调控剂二缩三乙二醇（TEG）的掺量变化对文石形成及其对力学强度的影响,并利用QXRD、TG-DSC、SEM-EDS等方法,分析和观察了碳化过程中的物相变化。结果表明,最佳反应条件为:TEG/CS摩尔比为0.1、反应压力0.1 MPa,反应温度70℃,在此条件下,水泥净浆中文石晶须生成量可达最大值,为硬化浆体含量的35%,水泥砂浆碳化1、7天的抗折强度分别为3.0 MPa、9.6 MPa,相比参比样对应提高了50%、95.9%。抗压强度分别为9.2 MPa、60.8 MPa,相比参比样对应提高了31.4%、60%。碳化7天时固结CO的量为28.4%。分析表明分析结果表明,抗折强度的提高是由于水泥浆中文石晶须的生长形成了交错的三维空间结构。使CS碳化硬化试块具有高的抗折强度。基于CS碳化产物含高热传导介质少的特质,开展了CS制备低导热泡沫混凝土的研究。主要开展了研究水灰比、发泡剂（HO）和稳泡剂（硬质酸钙）掺量的变化对CS发泡水泥性能的影响,其中发泡剂掺量对CS泡沫混凝土性能影响最大。并利用QXRD、TG-DSC、SEM-EDS等方法,分析和观察了碳化过程中的物相变化。结果表明:水灰比为0.55、双氧水掺入量为8%、硬质酸钙掺入量为2%时为最优制备条件。在此条件下,泡沫混凝土的性能分别为导热系数为0.058 W/（m·K）、干体积密度为307 kg/m、抗压强度为0.95 MPa。碳化3天时固结CO的量为13.6%。分析表明碳酸化养护的主要产物为方解石,这是主要的力学强度来源。低导热特征的原因可归因于碳化产物的含水量低,因此导热系数较低,使CS发泡混凝土具有优良的隔热性能。

关键词：低碳水泥 CO2捕获抗折强度发泡混凝土

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基于主题意义的初中英语单元作业设计

中小学英语教学与研究 2024年第4期 72-76页

作者：全燕晶宗华上海市曹杨第二中学附属学校上海市曹杨第二中学

基于主题意义设计初中英语单元作业有利于学生核心素养的融合发展。针对作业设计碎片化、孤立化、浅层化的问题,本文提出“整合性、关联性、发展性”的作业设计原则,形成“提炼主题、制定目标、设计作业”的设计路径,提出单元作业设计... 详细信息

基于主题意义设计初中英语单元作业有利于学生核心素养的融合发展。针对作业设计碎片化、孤立化、浅层化的问题,本文提出“整合性、关联性、发展性”的作业设计原则,形成“提炼主题、制定目标、设计作业”的设计路径,提出单元作业设计的实施方法:创设作业大情境,链接课内课外,激活主题意义;构建单元知识结构,链接课时作业,探究主题意义;基于单元大任务,链接生活实际,升华主题意义。

关键词：初中英语单元作业主题意义