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纳洛酮对缺氧心肌细胞保护作用的实验研究

纳洛酮对缺氧心肌细胞保护作用的实验研究

作者：秦宇红中国人民解放军军医进修学院

学位级别：硕士

目的大量临床和实验研究均已证明纳洛酮在心肌缺血再灌注损伤中对心肌有保护作用，可以改善心肌能量代谢，稳定溶酶体膜，抑制中性粒细胞释放超氧阴离子、抗心律失常等，但对细胞凋亡及炎性介质的影响未见报导。本研究从凋亡和坏死后... 详细信息

目的大量临床和实验研究均已证明纳洛酮在心肌缺血再灌注损伤中对心肌有保护作用，可以改善心肌能量代谢，稳定溶酶体膜，抑制中性粒细胞释放超氧阴离子、抗心律失常等，但对细胞凋亡及炎性介质的影响未见报导。本研究从凋亡和坏死后炎症两个方面观察了纳洛酮对缺氧心肌细胞的保护作用。方法本研究分为两部分：细胞培养研究部分和动物实验部分。细胞培养研究：取乳兔心室肌细胞培养传一代后分成三组，每组至少3瓶细胞：正常对照组、缺氧组(单纯缺氧／复氧)、用药组(缺氧／复氧加纳洛酮干预，终浓度5uM)，后两组又按不同缺氧／复氧时间分为后三个亚组：缺氧2小时组;缺氧2小时／复氧2小时组;缺氧2小时／复氧4小时组。然后用流式细胞仪检测缺氧／复氧后不同时间点的细胞线粒体膜电位变化及凋亡情况。另设缺氧2小时／复氧16小时组，用TUNEL法检测细胞凋亡。动物实验部分：22只新西兰大白兔随机分为缺血／再灌注组，8只，结扎冠状动脉左前降支1小时／开放4.5小时;治疗组，8只，结扎冠状动脉左前降1小时／开放4.5小时，于结扎同时静注纳洛酮，0.4mg／kg;假手术组，6只，手术过程同前，动脉穿线后不结扎。测缺血／再灌注组和治疗组再灌注4.5小时缺血区心肌IL-8含量;测各组动脉结扎前及再灌注4.5小时后的血清IL-8含量;测各组再灌注4.5小时后的血清6-Keto-PGF1a／TXB的含量。结果细胞培养部分：1．缺氧后，缺氧组、用药组的线粒体膜电位均低于对照组(P≤0.01);用药组线粒体膜电位高于缺氧组(P≤0.01)。2．缺氧2小时内线粒体膜电位的下降幅度较小，大幅度的下降发生在复氧期。缺氧组的线粒体膜电位的大幅度下降发生在复氧头2小时内;用药组则发生在复氧2～4小时。3．复秦宇红砚卜卜毕业论义纳洛酮对缺氧心肌细胞保护作用的实验研究一中文摘要氧4小时末，缺氧组的凋亡百分比明显高于对照组和用药组呼＜0刀1八而用药组与对照组比较无明显差异。同样情况也见于坏死比率。缺氧组内凋亡百分比明显高于坏死比率o叼刀5人4．缺氧 2小时／复氧 16小时，缺氧组的细胞凋亡(T［JNEL法)百分比同样明显多于对照组和用药组0＜O．01人动物实验部分：缺血 1小时／再灌注4．5小时毕，1．治疗组的缺血区心肌血流量明显高于再灌注组0刃刀1入2．治疗组缺血区心肌组织IL—8含量明显低于再灌注组;3．再灌注前，各组间血清IL—8含量无差异;再灌注后，再灌注组IL一8含量明显升高o1．01人且显著高于治疗组和假手术组0刃刀1)：治疗组、假手术组再灌注前、后无差异。4．再灌注后，再灌注组血清TXBZ含量明显高于假手术组和治疗组(P＜0＊1);6－Ket。－NFI旷＊＊＊比值则较后二者明显降低(P＜0刀1)。结论：1．缺氧／复氧可通过诱导家兔心室肌细胞线粒体膜电位丧夫从而导至细胞凋亡和坏死;凋亡是缺氧／复氧早期细胞死亡的主要表现形式。2．早期应用纳洛酮可明显延缓缺氧／复氧后线粒体膜电位的下降，从而减少缺氧／复氧后细胞凋亡和坏死的发生。3．纳洛酮可以降低家兔心肌缺血／再灌注后缺血区心肌及血清中炎症介质的含量，降低局部炎症反应的程度。因此纳洛酮可以通过抑制凋亡和坏死后炎症两个方面对缺氧／复氧心肌细胞产生保护作用。

关键词：纳洛酮心肌培养细胞缺氧/复氧线粒体膜电位凋亡炎性因子

阿替普酶静脉溶栓对急性心肌梗死患者心肌损伤标志物及心功能的影响

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广东医学 2017年第Z1期38卷 256-258页

作者：耿二冬秦宇红北京大学国际医院急诊科北京102206

目的观察阿替普酶对急性心肌梗死患者心肌损伤标志物及心功能的影响。方法选择急性ST段抬高型心肌梗死患者92例为研究对象,根据入院时间先后顺序随机分为观察组和对照组各46例,对照组给予尿激酶静脉溶栓治疗,观察组使用阿替普酶治疗,比... 详细信息

目的观察阿替普酶对急性心肌梗死患者心肌损伤标志物及心功能的影响。方法选择急性ST段抬高型心肌梗死患者92例为研究对象,根据入院时间先后顺序随机分为观察组和对照组各46例,对照组给予尿激酶静脉溶栓治疗,观察组使用阿替普酶治疗,比较两组心肌损伤标志物、心功能、再通率及心血管事件发生率。结果观察组血清N末端脑钠肽前体、肌酸激酶同工酶、心肌钙蛋白含量均明显低于对照组(t=11.408、14.933、10.816,P0.05)。结论阿替普酶静脉溶栓治疗有助于降低急性心肌梗死患者血清心肌损伤标志物表达水平,改善心功能,且安全有效。

关键词：急性心肌梗死静脉溶栓阿替普酶心肌损伤标志物心功能

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妊娠合并急性肾绞痛的诊治进展

中国急救医学 2020年第1期40卷 81-84页

作者：王士杰秦宇红北京大学国际医院急诊科北京102206

妊娠合并急性肾绞痛是孕妇急诊就诊最常见的非产科原因之一,疼痛、感染增加了孕妇早产和流产的发生风险,由于妊娠期的特殊性,常规检查手段和治疗方式并不都适合于孕妇,早期的快速诊断及合理地选择正确的治疗方式,是目前急诊科、泌尿外... 详细信息

妊娠合并急性肾绞痛是孕妇急诊就诊最常见的非产科原因之一,疼痛、感染增加了孕妇早产和流产的发生风险,由于妊娠期的特殊性,常规检查手段和治疗方式并不都适合于孕妇,早期的快速诊断及合理地选择正确的治疗方式,是目前急诊科、泌尿外科和产科共同关注的问题.本文结合文献,对妊娠合并急性肾绞痛的流行病学、发生机制、诊断和处理措施进行了概述,以期为临床诊治妊娠期合并急性肾绞痛提供参考.

关键词：妊娠肾绞痛诊断治疗

缺氧心肌细胞线粒体膜电位及细胞凋亡与纳洛酮的保护效应(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第8期11卷 1573-1576页

作者：秦宇红李天德沈洪解放军总医院心内科北京市100853 解放军总医院急诊科北京市100853

背景:研究证明缺血/再灌注损伤可诱导心肌细胞凋亡,再灌注后线粒体膜电位的丧失是细胞凋亡发生的必然途径。如果能保护线粒体膜电位则可能减少细胞凋亡。目的:观察纳洛酮对乳鼠心室肌细胞缺氧/复氧后线粒体膜电位及细胞凋亡的影响,研究... 详细信息

背景:研究证明缺血/再灌注损伤可诱导心肌细胞凋亡,再灌注后线粒体膜电位的丧失是细胞凋亡发生的必然途径。如果能保护线粒体膜电位则可能减少细胞凋亡。目的:观察纳洛酮对乳鼠心室肌细胞缺氧/复氧后线粒体膜电位及细胞凋亡的影响,研究其对缺氧心肌细胞的保护效应。设计:观察对比实验。单位:解放军总医院心内科。材料:心肌细胞凋亡检测实验于2004-12在解放军总医院病理生理实验室完成。选用新生乳鼠10只;心肌细胞腺粒体膜电位检测实验于2006-03在同一实验室完成,选用新生乳鼠20只。实验动物均由解放军总医院动物中心提供。盐酸纳洛酮注射液(0.4g/L),北京四环药厂产品,批号0206272;最低必需培养液(Dulbecco,DEME),Gibco公司;平衡盐溶液(PBS)、小牛血清,SIGMA公司。方法:将当日生乳鼠,局部碘酒酒精消毒后胸骨正中开胸,取心尖前1/3心室肌进行细胞培养。培养4d后选择细胞生长情况良好的培养瓶(细胞数>106/瓶)分为3组:对照组(正常培养)、缺氧组(缺氧/复氧)、纳洛酮组(缺氧/复氧加纳洛酮干预)。其中,对照组3瓶细胞,缺氧组和纳洛酮组各15瓶细胞。缺氧组和纳洛酮组又根据缺氧、复氧时间不同分为3个时间点:缺氧2h/复氧0h;缺氧2h/复氧2h;缺氧2h/复氧4h,每个时间点5瓶细胞。缺氧组:换预先充过体积分数0.95N2+体积分数0.05的CO2气体的体积分数0.01小牛血清DEME培养液,培养瓶内也用体积分数0.95N2+体积分数0.05的CO2气体充入置换其中的空气,密封后37℃孵育;达规定时间后换正常条件下(体积分数0.95空气+体积分数0.05的CO2)孵育。纳洛酮组:缺氧/复氧处理同上,同时加入盐酸纳洛酮,使培养液中药物终浓度达5μmol/L(加药容积≤总培养液的0.5%)。对照组不进行缺氧/复氧及用药处理,滴等量生理盐水,作为各组的缺氧0h/复氧0h时间点。干预后,以荧光染色-流式细胞仪检测缺氧/复氧后不同时间心肌细胞的线粒体膜电位变化及凋亡情况。主要观察指标:①缺氧组与纳洛酮组各时间点线粒体膜电位变化情况;②各组在缺氧2h/复氧4h细胞存活、凋亡、坏死水平比较。结果:①缺氧后,缺氧组、纳络酮组细胞的线粒体膜电位均下降。各时间点纳络酮组细胞线粒体膜电位均高于缺氧组(P<0.01)。线粒体膜电位的大幅度下降不是发生在细胞缺氧期,而是复氧期。②缺氧2h/复氧4h,缺氧组细胞的凋亡、坏死比率分别为(9.88±0.98)%和(5.10±0.29)%,明显高于纳络酮组[(2.41±0.52)%和(3.56±0.56)%,P<0.01]。缺氧组内细胞凋亡发生率明显高于坏死发生率(P<0.05)。结论:早期应用纳洛酮可明显减轻和延缓心室肌细胞缺氧/复氧后线粒体膜电位的下降并减少细胞凋亡和坏死的发生。

关键词：纳洛酮缺氧线粒体膜电位细胞凋亡缺血再灌注

体外诱导成人脂肪间充质干细胞分化为心肌样细胞(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第37期11卷 7494-7497页

作者：陈光辉夏菁秦宇红解放军总医院心内科实验室北京市100853

背景:目前对脂肪间充质干细胞在临床应用前还有许多问题需要解决,如脂肪间充质干细胞是否可以分化为完全意义上的心肌细胞,是否具备心肌细胞所特有的功能。如何提高脂肪间充质干细胞向心肌细胞的分化率,如何提高在移植后的归巢和存活率... 详细信息

背景:目前对脂肪间充质干细胞在临床应用前还有许多问题需要解决,如脂肪间充质干细胞是否可以分化为完全意义上的心肌细胞,是否具备心肌细胞所特有的功能。如何提高脂肪间充质干细胞向心肌细胞的分化率,如何提高在移植后的归巢和存活率等问题的解决对于指导干细胞的临床应用有重要的意义。目的:观察体外培养并诱导成人脂肪间充质干细胞分化为心肌样细胞。设计:随机对照观察。单位:解放军总医院心内科实验室。材料:脂肪取自解放军总医院普外科腹部手术患者(均知情同意);IMDM(Hyclon公司),Ⅰ型胶原酶(Gibco公司),5-aza(Sigma),抗心肌特异性肌钙蛋白T(TnT)多克隆抗体(福建迈新生物技术公司),抗CD44、抗CD45、抗CD34、HLA2DR、Ⅷ因子单克隆抗体、抗结蛋白(Desmin),抗α-横纹肌肌动蛋白、抗肌球蛋白重链购自北京中杉金桥生物技术有限公司,DAB染色剂由北京中杉金桥生物技术有限公司提供,RT-PCR试剂盒由Invitrogen公司提供,心房利钠肽放免试剂盒(中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所)。方法:实验于2005-03/2006-04在解放军总医院心内科实验室完成。细胞培养:采用消化法和贴壁培养法分离培养脂肪间充质干细胞。干预及检测:对第3代细胞进行细胞表面分子CD44,CD13,CD105,CD45,CD34,HLA-DR,factorⅧ的免疫细胞化学鉴定,并用5-氮杂胞苷(5-aza)进行诱导,于诱导后第7,14,21,28天采用RT-PCR法检测心肌化基因GATA4和Nkx2.5的表达,应用放射免疫法测定心房利钠肽含量。主要观察指标:①细胞表面标志鉴定结果。②心肌化基因GATA4和Nkx2.5的表达。③心房利钠肽含量。结果:①细胞表面标志鉴定:原代细胞CD13、CD44、CD105阳性表达,CD45、CD34、HLA2DR、Ⅷ因子阴性表达。诱导后7d,所有细胞Desmin,α-横纹肌肌动蛋白、抗肌球蛋白重链和抗心肌特异性肌钙蛋白T呈阴性反应,大多数细胞CD44阳性表达。诱导后14d少量细胞出现Desmin、α-横纹肌肌动蛋白和抗肌球蛋白重链抗原阳性表达,TnT阴性表达,部分细胞CD44呈阳性表达。诱导后21d,多数细胞Desmin、α-横纹肌肌动蛋白、抗肌球蛋白重链和抗心肌特异性肌钙蛋白T呈阳性反应,CD44呈阴性表达。②心肌化基因GATA4和Nkx2.5的表达:诱导后14d出现GATA4和Nkx2.5cDNA的表达。③心房利钠肽含量:诱导后14d心房利钠肽含量为(0.022±0.01)ng/L,与诱导后7d比较差异无显著性(P>0.05),诱导后21d和诱导后28d分别为(7.92±0.21)和(8.12±0.50)ng/L,与诱导后7d比较差异均有显著性(P0.05)。结论:成人脂肪组织中含有间充质干细胞,且可在5-氮杂胞苷诱导21d后分化为心肌样细胞。

关键词：脂肪间充质干细胞心肌细胞转化体外诱导

眼睑痉挛患者静息态功能磁共振分数低频振幅的研究

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中华神经科杂志 2016年第8期49卷 615-619页

作者：赵诚诚罗曙光韦静银琼杨荣杏杨璐雷毅武秦宇红广西医科大学第一附属医院神经内科南宁530021

目的研究眼睑痉挛患者静息态下脑功能活动与健康对照组的差异，探讨眼睑痉挛的发病机制。方法收集24例眼睑痉挛患者和24名健康对照，采用两样本t检验比较两组间功能磁共振分数低频振幅的差异，将患者差异脑区的分数低频振幅算法（frac... 详细信息

目的研究眼睑痉挛患者静息态下脑功能活动与健康对照组的差异，探讨眼睑痉挛的发病机制。方法收集24例眼睑痉挛患者和24名健康对照，采用两样本t检验比较两组间功能磁共振分数低频振幅的差异，将患者差异脑区的分数低频振幅算法（fractional amplitude of low-frequency fluctuation，fALFF）值分别与眼睑痉挛程度、焦虑自评量表（SAS）及抑郁自评量表（SDS）评分结果进行相关分析。结果眼睑痉挛组fALFF值升高脑区主要位于左侧中央后回、双侧辅助运动区及左侧小脑前叶，而双侧内侧额上回、双侧内侧和旁扣带回、右侧角回、双侧楔前叶fALFF值低于健康对照组（t＝-5.2495～5.3675，均P〈0.01，高斯随机理论的多重比较校正）。眼睑痉挛患者中，差异脑区fALFF值与眼睑痉挛程度、SAS及SDS评分无相关性。结论感觉及辅助运动区的异常及小脑、默认网络均直接或间接参与眼睑痉挛的发病。

关键词：眼睑痉挛磁共振成像静息态

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无偿献血者血液报废的原因及其预防策略

深圳中西医结合杂志 2017年第20期27卷 66-68页

作者：秦宇红梅州市中心血站广东梅州514000

目的:探究无偿献血者血液报废的原因以及预防的策略。方法:对梅州市中心血站2014年1月至2016年12月无偿献血血液报废原因予以统计分析,并制定出相应的预防策略。结果:全血以及红细胞报废因素中,谷丙转氨酶(ALT)、乙肝表面抗原(HBsAg)、... 详细信息

目的:探究无偿献血者血液报废的原因以及预防的策略。方法:对梅州市中心血站2014年1月至2016年12月无偿献血血液报废原因予以统计分析,并制定出相应的预防策略。结果:全血以及红细胞报废因素中,谷丙转氨酶(ALT)、乙肝表面抗原(HBsAg)、抗-丙型肝炎病毒(HCV)、抗-人免疫缺陷病毒(HIV)及抗-梅毒螺旋体抗体(TP)、破袋不合格是致使全血及红细胞报废的首要因素;而在血浆报废因素中,ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP、重度乳糜血浆、破袋不合格是致使血浆报废的首要因素,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:在无偿献血工作中,对献血者加强献血前的宣传教育,并为其提供相应的咨询服务,严格执行采血前征询、初筛工作,并在后续工作中严格按照规定予以操作,能够有效降低血液报废率,避免造成血液资源的浪费。

关键词：无偿献血者血液报废预防

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论区域活动中数学思想的渗透

新课程(中) 2009年第12期 8-9页

作者：秦宇红福建省泉州市鲤城区第一幼儿园

著名心理学家皮亚杰认为:儿童的发展是在其自身与周围环境相互作用的过程中获得的,学习离不开动作和活动;他还认为幼儿获得的数学概念只有通过教师教学一条途径是错误的,相反,儿童的数学知识是在自己独立的、自发的活动中逐渐掌握

关键词：幼儿数学数学思想数学教育

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16层螺旋CT对胡桃夹现象的研究

16层螺旋CT对胡桃夹现象的研究