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牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及发病机理的研究

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牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及发病机理的研究

作者：秦佳晨河南农业大学

学位级别：硕士

子宫内膜炎是引起母牛不孕症的主要疾病之一，该病主要是由于分娩时或产后子宫内病原微生物的感染引起。据统计由子宫内膜炎引起的不孕症占疾病性不孕的60%～70%。在国外有资料表明，奶牛子宫内膜炎的发病率在30～40%左右。我国奶牛子... 详细信息

子宫内膜炎是引起母牛不孕症的主要疾病之一，该病主要是由于分娩时或产后子宫内病原微生物的感染引起。据统计由子宫内膜炎引起的不孕症占疾病性不孕的60%～70%。在国外有资料表明，奶牛子宫内膜炎的发病率在30～40%左右。我国奶牛子宫内膜炎的发病率约为20～50%左右。母牛发生子宫内膜炎后可使产犊间期延长、产奶量下降、死淘率增加、治疗费用增加及治疗期间奶源的废弃。然而子宫内膜炎患病牛在不同的地区从子宫内容物中所分离的病原菌种类及各种细菌所占的比例不尽相同。本研究对平顶山地区某奶牛场子宫内膜炎患病牛和郏县红牛子宫内容物中的细菌进行分离鉴定、药物敏感性试验和昆明小鼠的致病性试验;根据样品中细菌分离率的高低、细菌的耐药情况并结合致病性试验结果共选择5株细菌进行昆明小鼠子宫内膜炎病例模型的复制;通过小鼠子宫组织的病理切片和透射电镜观察子宫组织及其组织中细胞的损伤情况来揭示子宫内膜炎的发病机理。1、郏县红牛及奶牛子宫内膜炎患病牛子宫内容物中细菌的分离与鉴定：通过对某奶牛场确诊的29头临床型子宫内膜炎患病牛子宫内容物进行分离培养、纯化、鉴定，结果共分离出细菌18种（52株）。其中以蜡样芽孢杆菌、奥斯陆莫拉菌、大肠埃希菌、链球菌、苏云金芽孢杆菌为主。同时，我们对没有子宫内膜炎临床症状的21头郏县红牛进行子宫内容物样品的采集，并对其进行分离、纯化、鉴定。结果共分离出细菌14种（43株），其中以蜡样芽孢杆菌、大肠埃希菌、产吲哚金黄杆菌、浅黄金色单胞菌、奥斯陆莫拉菌等为主。在所分离的14种细菌中有10种细菌均与奶牛子宫内膜炎患病牛所分离到的病原菌相一致。此外，从郏县红牛子宫内容物中所分离细菌的革兰氏染色结果来看，革兰氏阳性菌有23株（占53.5%），革兰氏阴性菌有20株（占46.5%），两者均与奶牛子宫内膜炎患牛相一致。2、药物敏感性试验：为了研究所分离细菌对药物的敏感程度，在常用的各类药物中选择了24种药物的标准品，采用微量肉汤稀释法，测得了所分离细菌对24种药物的敏感性。在奶牛样品中所分离的18种细菌对环丙沙星、恩诺沙星、氟苯尼考及氯霉素均较为敏感。表皮葡萄球菌对四环素、土霉素、金霉素产生了耐药性而对多西环素仍具有敏感性说明该细菌对四环素类药物还未产生完全交叉耐药性。所有细菌对阿莫西林、氨苄西林均产生了较高的耐药性。甚至大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、玫瑰色库克菌、棒状杆菌属、脑膜脓毒性金黄杆菌对－内酰胺酶抑制剂（克拉维酸）均产生了耐药性。在郏县红牛样品中所分离的14种细菌对环丙沙星、恩诺沙星、四环素、多西环素、氯霉素、氟本尼考、替米考星均较为敏感，所有细菌除乳房链球菌（为中介）外均对阿莫西林、氨苄西林存在较高的耐药。3、致病性试验：针对奶牛子宫内膜炎患病牛和郏县红牛子宫内容物中所分离的细菌进行了致病性试验。采集细菌的新鲜纯培养物0.5mL接种于昆明小鼠腹腔中，观察并记录小鼠的发病致死情况。结果显示：在郏县红牛样品中所分离的蜡样芽孢杆菌、滕黄微球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌和奶牛样品中所分离的大肠埃希菌、脑膜脓毒性金黄杆菌、停乳链球菌、苏云金芽孢杆菌、产吲哚金黄杆菌等，在腹腔攻毒后2d内均可使昆明小鼠致死，特别是郏县红牛样品中的大肠埃希菌在腹腔攻毒后2～3h即可使昆明小鼠致死。4、昆明小鼠子宫内膜炎病例模型的建立：根据样品中细菌分离率的高低、细菌的耐药性情况以及致病性的强弱共选择5株细菌建立昆明小鼠子宫内膜炎病例模型。在子宫内接种细菌3d后将试验组小鼠处死，取子宫进行细菌分离，结果表明：各模型组从子宫内分离到所接种的细菌，同时在脾脏、肝脏中也可分离到所接种的细菌;生理盐水对照组和空白对照组均未分离到细菌。子宫组织病理切片和电镜观察表明：①各造模组小鼠HE染色结果显示子宫黏膜上皮细胞变性、坏死、脱落，毛细血管充血，子宫内膜及子宫肌层有大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润，以及部分造模组肌纤维排紊乱、松散、肌肉的断裂。②各造模组小鼠子宫组织的超微结构观察表明多数细胞中均可见到胞质内有大量空泡状结构、细胞核膜与细胞质出现裂隙、细胞核内的空泡以及凋亡小体的出现。③生理盐水对照组和空白对照组HE染色结果观察和透射电镜的超微结构观察结果显示子宫组织各层结构均接近正常，组织中的细胞结构也保持较好的完整性。根据以上试验结果可以初步判断郏县红牛样品中的蜡样芽孢杆菌、大肠埃希菌和奶牛子宫内膜炎患病牛样品中蜡样芽孢杆菌、大肠埃希菌和表皮葡萄球菌均可引起昆明小鼠急性子宫内膜炎。昆明小鼠子宫内膜炎稳定的模型以及模型在临床上的治疗试验等后续工作仍需进一步的研究。

关键词：郏县红牛奶牛子宫内膜炎分离鉴定药敏试验致病性试验透射电镜

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提高哺乳仔猪成活率的关键措施

养殖与饲料 2020年第9期19卷 30-32页

作者：秦佳晨河南省洛阳高新技术产业开发区畜牧兽医防疫检疫中心河南洛阳471000

仔猪哺乳期作为养猪生产的关键起步阶段,也是整个生猪饲养周期中最脆弱最容易受到外界因素影响而引发大批死亡的阶段。因此,要特别重视哺乳仔猪的饲养管理,实施精细化护理,为顺利过渡到保育期打下基础。为此,本文详细介绍了哺乳仔猪的... 详细信息

仔猪哺乳期作为养猪生产的关键起步阶段,也是整个生猪饲养周期中最脆弱最容易受到外界因素影响而引发大批死亡的阶段。因此,要特别重视哺乳仔猪的饲养管理,实施精细化护理,为顺利过渡到保育期打下基础。为此,本文详细介绍了哺乳仔猪的生理特点和生长规律,从妊娠母猪的饲养管理和仔猪的精细化管理2个方面阐述了提高仔猪成活率的关键措施,以期为养猪场户提供参考。

关键词：哺乳仔猪成活率关键措施

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“瘦肉精”监管的难点及措施

当代畜牧 2021年第8期50卷 69-70页

作者：秦佳晨河南省洛阳高新技术产业开发区畜牧兽医防疫检疫中心 471000

近年来,我国居民生活水平大幅提升,人民群众对畜产品的需求也持续增加。如何加强对"瘦肉精"的监管,保障畜产品质量安全己成为当下热门的话题。目前,畜产品质量安全的监管形势仍然严峻,特别是违法添加"瘦肉精"等问题在日常监管过程中依... 详细信息

近年来,我国居民生活水平大幅提升,人民群众对畜产品的需求也持续增加。如何加强对"瘦肉精"的监管,保障畜产品质量安全己成为当下热门的话题。目前,畜产品质量安全的监管形势仍然严峻,特别是违法添加"瘦肉精"等问题在日常监管过程中依然存在。笔者深入分析了"瘦肉精"的监管难点,并总结了加强监管的有效措施,旨在为做好畜产品质量安全监管工作提供借鉴与参考。

关键词：瘦肉精畜产品质量安全监管

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保育猪的饲养管理技术要点

当代畜牧 2020年第6期49卷 1-3页

作者：秦佳晨河南省洛阳高新技术产业开发区畜牧兽医防疫检疫中心 471000

保育猪是仔猪断奶后独立生长的开端。保育猪生长速度很快。如何让仔猪保持良好的体况,充分发挥生产性能,对育肥期的快速生长和增重有至关重要的作用。笔者从保育猪的生理特点和营养需要为切入点,着重介绍了保育期仔猪饲养管理技术要点,... 详细信息

保育猪是仔猪断奶后独立生长的开端。保育猪生长速度很快。如何让仔猪保持良好的体况,充分发挥生产性能,对育肥期的快速生长和增重有至关重要的作用。笔者从保育猪的生理特点和营养需要为切入点,着重介绍了保育期仔猪饲养管理技术要点,以期为提高生猪养殖的经济效益提供帮助。

关键词：保育猪饲养管理技术要点

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猪链球菌病的临床特征和防治措施

当代畜牧 2015年第7期44卷 7-9页

作者：秦佳晨河南省洛阳市高新区畜牧防疫检疫中心 471000

随着畜牧业蓬勃的发展,猪链球菌病的发病率和死亡率仍然很高。猪链球菌病的临诊症状表现较为复杂,再加上当下猪病的混合感染较为严重,猪链球菌病多以继发的方式与其它传染病混合感染,这些都给猪链球菌病的诊断、治疗以及平时的预防提出... 详细信息

随着畜牧业蓬勃的发展,猪链球菌病的发病率和死亡率仍然很高。猪链球菌病的临诊症状表现较为复杂,再加上当下猪病的混合感染较为严重,猪链球菌病多以继发的方式与其它传染病混合感染,这些都给猪链球菌病的诊断、治疗以及平时的预防提出了更高的要求。笔者针对猪链球菌病的流行病学特征、临诊症状、诊断、治疗及当下猪链球菌病暴发的原因进行了详尽的阐述与分析,最后提出了猪链球菌病的综合防控措施,以期能够为相关研究学者及畜牧养殖者防控该病提供一定的借鉴和启发。

关键词：猪链球菌病临诊症状暴发原因防控措施

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当前非洲猪瘟防控的有效措施与难点

当代畜牧 2020年第5期49卷 51-53页

作者：秦佳晨程辉洛阳高新技术产业开发区畜牧兽医防疫检疫中心河南洛阳471000 长垣市农业农村局河南新乡453400

自2018年8月3日我国发生首例非洲猪瘟疫情后,全国陆续发生了多起非洲猪瘟疫情,至今仍有散发性疫情发生,防控形势依然十分严峻。非洲猪瘟病毒已形成了较大的污染面,短期内难以彻底清除。该病尚无疫苗和有效治疗药物;因此,要采取综合性防... 详细信息

自2018年8月3日我国发生首例非洲猪瘟疫情后,全国陆续发生了多起非洲猪瘟疫情,至今仍有散发性疫情发生,防控形势依然十分严峻。非洲猪瘟病毒已形成了较大的污染面,短期内难以彻底清除。该病尚无疫苗和有效治疗药物;因此,要采取综合性防控措施阻断病原的传入和传播。本文分析了非洲猪瘟防控的综合措施和防控难点等问题,以期为非洲猪瘟防控的一线工作人员和广大养殖者提供参考。

关键词：非洲猪瘟有效措施防控难点

规模化奶牛场子宫内膜炎病原菌的分离鉴定、药物敏感性试验及其致病性分析

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河南畜牧兽医（综合版） 2015年第12期36卷 3-6页

作者：秦佳晨王新庄洛阳市高新区畜牧防疫检疫中心河南洛阳471000 河南农业大学牧医工程学院

通过调查平顶山市某规模化奶牛场奶牛子宫内膜炎的病原菌及其耐药性，为下一步建立子宫内膜炎病例模型和研究奶牛子宫内膜炎的病因及发病机理提供基础。该试验采用细菌分离培养和微生物鉴定系统对所采集的样品进行细菌分离培养、纯化、... 详细信息

通过调查平顶山市某规模化奶牛场奶牛子宫内膜炎的病原菌及其耐药性，为下一步建立子宫内膜炎病例模型和研究奶牛子宫内膜炎的病因及发病机理提供基础。该试验采用细菌分离培养和微生物鉴定系统对所采集的样品进行细菌分离培养、纯化、鉴定；同时采用微量稀释法测定所分离细菌的药物敏感性，最后通过昆明小鼠腹腔接种进行致病性试验。结果表明：从29份样品中共分离到18种细菌，它们均对阿莫西林、氨苄西林存在较高的耐药性，对环丙沙星、恩诺沙星、氟苯尼考均表现敏感，而对其他药物的敏感性各种细菌间存在较大差异性；通过致病性试验可知所分离的18种细菌中致病性最强的分别是大肠埃希菌、脑膜脓毒性金黄杆菌、停乳链球菌、苏云金芽孢杆菌、产吲哚金黄杆菌，且它们均分离于产后两月后患病牛的样品中。

关键词：奶牛子宫内膜炎病原菌药敏试验致病性试验

乡村振兴视域下西北地区城乡融合发展水平测度及影响效应

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农村经济与科技 2024年第19期35卷 210-213页

作者：秦佳晨刘双双青海大学青海西宁810016

乡村振兴战略的实施对西北地区城乡融合发展有明显促进作用。和谐的城乡关系能促进乡村高质量发展,城乡融合对乡村振兴有重要推动作用。为了探索乡村振兴战略的实施对西北地区5个省份城乡融合发展的影响作用,利用2012—2021年间的西北5... 详细信息

乡村振兴战略的实施对西北地区城乡融合发展有明显促进作用。和谐的城乡关系能促进乡村高质量发展,城乡融合对乡村振兴有重要推动作用。为了探索乡村振兴战略的实施对西北地区5个省份城乡融合发展的影响作用,利用2012—2021年间的西北5省的省级面板数据,采用固定效应模型,从整体水平上实证分析西北地区的乡村振兴战略实施对城乡融合发展水平的影响,利用耦合协调模型从时间序列上对各省的融合情况进行具体测度。研究结果显示,回归结果的拟合系数R2为0.785 5,说明整体拟合效果较好。耦合协调结果显示乡村振兴指数与城乡融合指数存在明显的线性关系,呈明显的正向作用关系。横向比较看,各省份的耦合协调水平呈现出明显的地区差异;纵向比较看,西北地区各省的耦合协调发展总体来看存在向上发展的态势,但增长速度较为缓慢,部分省份呈现出曲折上升的阶段性特点。所以在西北地区应将实施乡村振兴战略的内生要求与新型城镇化战略城乡融合协同治理推进。

关键词：乡村振兴城乡融合推-拉理论耦合协调度固定效应模型

成熟培养时间对家猫卵母细胞孤雌激活胚发育的影响

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西南大学学报（自然科学版） 2012年第6期34卷 57-63页

作者：邬静何俊丹邓立新任卫青秦佳晨吕婧玉王新庄河南农业大学牧医工程学院郑州450002 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

为筛选出最佳体外成熟时间,以乙醇联合6-DMAP激活验证成熟时间对家猫卵母细胞成熟的影响.将家猫卵母细胞分别体外成熟28h,32h和36h后,采用10%无水乙醇激活3min,6-DMAP培养4h,再移入胚胎体外培养液中培养;第二天观察卵裂率,第六天结束培... 详细信息

为筛选出最佳体外成熟时间,以乙醇联合6-DMAP激活验证成熟时间对家猫卵母细胞成熟的影响.将家猫卵母细胞分别体外成熟28h,32h和36h后,采用10%无水乙醇激活3min,6-DMAP培养4h,再移入胚胎体外培养液中培养;第二天观察卵裂率,第六天结束培养并用H33342染色,观察不同成熟时间的激活胚胎发育情况.结果表明:成熟32h组的卵母细胞激活率最高,显著高于28h组(60.42%vs 43.16%,0.010.05);经孤雌激活的卵母细胞没有发育至囊胚的,32h组桑椹胚率最高达到15.63%,与其他两组差异不具有统计学意义(7.36%和10.78%,p>0.05).结论:家猫卵母细胞体外成熟培养32h,成熟效果最好.

关键词：孤雌激活卵母细胞囊胚