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类钙调蛋白PlCML25调控芍药远缘杂交花粉生长的功能研究

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类钙调蛋白PlCML25调控芍药远缘杂交花粉生长的功能研究

作者：华超河南农业大学

学位级别：硕士

芍药（Paeonia lactiflora）为芍药科芍药属多年生草本植物。芍药具有丰富多样的花型和绚丽多彩的花色,因芍药在五月盛开,其美艳绝伦,被赋予了“五月花神”的雅称。我国芍药种植面积大,是世界上供给芍药的主要国家,主要用于布置专类花... 详细信息

芍药（Paeonia lactiflora）为芍药科芍药属多年生草本植物。芍药具有丰富多样的花型和绚丽多彩的花色,因芍药在五月盛开,其美艳绝伦,被赋予了“五月花神”的雅称。我国芍药种植面积大,是世界上供给芍药的主要国家,主要用于布置专类花坛、花境等观赏方面和药用。因多年连续栽培和我国社会的不断进步,人们对芍药花的多样性要求越来越高。远缘杂交是花卉种质创新的重要方法,已经在植物种质创新领域取得不俗的成绩。然而,已有研究发现芍药属在进行远缘杂交时,会出现严重的杂交不亲和现象。这一现象的出现,其中一个重要的原因是花粉无法在柱头内正常生长。花粉作为植物繁殖的关键部分,其正常生长和发育对于成功完成受精过程至关重要。进一步研究发现,类钙调素蛋白（Calmodulin Like Protein,CML）在花粉管生长过程中发挥着重要作用。相关研究表明,拟南芥中At CML24、At CML25和甘蓝中Bo CML49都对花粉管生长具有重要作用。为探索在芍药中CML基因对远缘杂交育种的功能,本研究结合芍药转录组数据、牡丹基因组数据和拟南芥基因组数据筛选出一个PlCML25基因,为了更深入地研究其特性和功能,对该基因进行了克隆操作、生物学功能分析和异源转化至模式植物进行功能验证,主要研究结果如下:1、基于芍药转录组数据、牡丹基因组数据和拟南芥基因组数据,筛选出一个CML基因,命名为PlCML25。该基因CDS为579 bp,编码192个氨基酸,含有2对EF手型（EF-hand domain）结构域。PlCML25蛋白分子量为21.4k Da,理论等电点4.35,为稳定蛋白;脂溶指数71.04,总平均亲水性值-0.444,属于亲水性蛋白质;不存在跨膜结构及信号肽;无规则卷曲是该蛋白二级结构中主要构成元件;该蛋白以丝氨酸磷酸化为主;亚细胞定位预测蛋白定位于细胞质。2、通过染色体步移法（Genome Walking）,成功地克隆出了PlCML25的启动子序列。分析发现它含有多种响应元件,这些元件赋予了启动子对不同环境信号的敏感性。其中,赤霉素响应元件和生长素响应元件暗示PlCML25基因可能影响植物的细胞伸长、分裂和分化等过程。3、为探究PlCML25基因对植物生长的影响,成功构建植物过表达载体pcambia2300-GFP,利用花序浸染法和叶盘法分别异源转化拟南芥和烟草,经PCR鉴定成功获得高表达的转基因拟南芥T3代7个株系,转基因烟草T0代4个株系。经过对转PlCML25基因拟南芥及其对照植株的生长特性进行观察,发现与野生型（WT）植株相比,转PlCML25基因的植株生长速度加快,相同生长时期植株高度与莲座叶叶片比野生型拟南芥发育要好,但转基因植株的结实率却出现了降低的现象。对转PlCML25基因烟草及对照的生长特性观察发现,OE-PlCML25相比于WT植株叶片具有不规则形态,推测该基因可能与叶片形态建成相关。4、利用酵母双杂交技术进行PlCML25互作蛋白的筛选,毒性检测和自激活试表明含有PlCML25诱饵质粒无毒性且没有自激活现象。通过酵母双杂成功筛选出8个与PlCML25蛋白可能存在相互作用的阳性蛋白,分析发现这8个蛋白各自在多个生物过程中发挥着关键作用,如在响应钙离子、ABA信号通路等方面发挥着重要作用,其中VDAC维持胞内钙稳态的作用十分关键,且VDAC分子上具Ca2+结合位点。因此,通过芍药转录组筛选出3个VDAC蛋白并进行克隆,成功构建于p GADT7载体,与p GBKT7-PlCML25进行酵母点对点验证。结果表明PlVDAC2-2与PlVDAC3与PlCML25具有互作关系。推测PlCML25通过与PlVDAC2-2、PlVDAC3共同调控Ca2+进而对芍药属杂交亲和性产生影响。

关键词：芍药属远缘杂交不亲和 PlCML25 启动子基因功能验证酵母双杂

新时代农村基本养老服务高质量发展研究 ——以河北省Z县为例

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新时代农村基本养老服务高质量发展研究 ——以河北省Z县为例

作者：武华超河北大学

学位级别：硕士

新时代推进高质量发展成为适应我国社会发展目标转变的必然要求,而人口老龄化是社会发展过程中的必然趋势,也是我国今后较长一段时间内的基本国情,这意味着新时代推进老龄工作高质量发展的重要性会更加突出。农村是我国新时代推动高质... 详细信息

新时代推进高质量发展成为适应我国社会发展目标转变的必然要求,而人口老龄化是社会发展过程中的必然趋势,也是我国今后较长一段时间内的基本国情,这意味着新时代推进老龄工作高质量发展的重要性会更加突出。农村是我国新时代推动高质量发展的短板,在推动高质量发展过程中理应坚持农村发展优先,而基本养老服务作为开展老龄工作的重要基础,在推动老龄工作高质量发展方面理应坚持基本养老服务高质量发展优先。因此,开展新时代农村基本养老服务高质量发展研究具有重要意义,既有利于充实新时代高质量发展的理论研究,也有利于为新时代农村老龄工作开展提供现实方向,最终实现全体老年人享有基本养老服务的目标。首先在梳理新时代高质量发展理论内涵的基础上,将更高质量、更有效率、更加公平、更可持续、更为安全的内涵要求应用到基本养老服务领域,总结出我国基本养老服务高质量发展的五个目标维度,即质量维度、效率维度、公平维度、可持续维度以及安全维度,以此构建出新时代基本养老服务高质量发展的分析框架,明确新时代基本养老服务高质量发展的目标要求。其次选取河北省Z县农村地区为研究对象,以其基本养老服务的供需现状为研究内容,通过问卷调查、实地访谈等方式获取Z县农村地区基本养老服务供需现状的具体数据,并通过样本的描述性统计分析和交叉表分析等方法对其进一步分析。最后将调研结果与新时代基本养老服务高质量发展分析框架中的具体目标要求进行对照,分维度地探讨当前Z县农村基本养老服务发展存在问题及原因,并从五个方面提出实现新时代农村基本养老服务高质量发展的路径:一是完善养老服务制度,推进基本养老服务更高质量的发展;二是丰富养老服务模式,推进基本养老服务更有效率的发展;三是夯实农村养老基础,推进基本养老服务更加公平的发展;四是增强农村的吸引力,推进基本养老服务更可持续的发展;五是加强安全管理工作,推进基本养老服务更为安全的发展。

关键词：农村基本养老服务高质量发展

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常识辅助细粒度数据增强方法

计算机工程与应用 2024年第6期60卷 214-221页

作者：李华超康彬王磊南京邮电大学物联网学院南京210003 南京邮电大学通信与信息工程学院南京210003

数据增强的代表性研究主要针对ImageNet等常规分类数据集展开。考虑到细粒度识别数据集中测试样本类内及类间关联性与常规分类数据集差异明显,因此针对细粒度识别的数据增强方法尚待深入研究。为此,从细粒度识别任务以及数据集的特殊属... 详细信息

数据增强的代表性研究主要针对ImageNet等常规分类数据集展开。考虑到细粒度识别数据集中测试样本类内及类间关联性与常规分类数据集差异明显,因此针对细粒度识别的数据增强方法尚待深入研究。为此,从细粒度识别任务以及数据集的特殊属性入手提出基于常识辅助的细粒度语义图块混合策略。所提方法利用常识知识挖掘样本标签间潜在关联,以此为基础设计结构化图像混合策略的多支路卷积神经网络结构,使图像混合过程更关注目标的细微差异。通过大量性能测试可验证所提方法的性能明显优于主流的基于图像混合的数据增强方法。同时,通过实验验证,所提出的常识知识有助于多种基于混合图像类的数据增强模型性能提升。

关键词：数据增强常识图谱多支路卷积神经网络

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面向6G的端到端语义通信系统关键技术研究

面向6G的端到端语义通信系统关键技术研究

作者：熊华超北京邮电大学

学位级别：硕士

天然产物环丁烯型高异黄酮和Lifitegrast中间体的不对称合成研究

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天然产物环丁烯型高异黄酮和Lifitegrast中间体的不对称合成研究

作者：王华超西北农林科技大学

学位级别：硕士