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三七总皂苷通过激活PPARα/Nrf2减轻内皮细胞屏障和功能损伤

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右江民族医学院学报 2024年第2期46卷 159-163,169页

作者：祝燕平刘亚芳祝凌丽周兰高磊安庆医药高等专科学校药学院安徽安庆246003

目的研究三七总皂苷(PNS)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的内皮细胞屏障和功能损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法使用OGD/R诱导bEnd.3细胞以建立缺血再灌注损伤模型,同时设立对照组(Control)、模型组(OGD/R)、PNS高剂量组(OGD/R+PNS ... 详细信息

目的研究三七总皂苷(PNS)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的内皮细胞屏障和功能损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法使用OGD/R诱导bEnd.3细胞以建立缺血再灌注损伤模型,同时设立对照组(Control)、模型组(OGD/R)、PNS高剂量组(OGD/R+PNS 400μg/mL)、PPARα抑制剂组(OGD/R+PNS 400μg/mL+PPARαinhibitor)和Nrf2抑制剂组(OGD/R+PNS 400μg/mL+Nrf2 inhibitor)。采用CCK-8检测bEnd.3细胞活性损伤,LDH试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)表达,蛋白印迹法检测ZO-1、claudin-5、occludin表达;采用细胞划痕和细胞侵袭实验检测bEnd.3细胞侵袭和迁移的水平;借助小管形成实验检测bEnd.3细胞小管形成能力。结果PNS通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体α/核因子E2相关因子2(PPARα/Nrf2)信号减轻OGD/R诱导的bEnd.3细胞活性损伤和内皮屏障损伤,抑制细胞迁移和侵袭能力,改善血管生成损伤。结论PNS通过激活PPARα/Nrf2信号减轻OGD/R诱导的内皮细胞屏障和功能损伤。

关键词：脑缺血再灌注三七总皂苷 PPARα 核因子E2相关因子2 内皮细胞屏障

天麻酚性成分对脑缺血过程中血脑屏障保护作用的研究

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天麻酚性成分对脑缺血过程中血脑屏障保护作用的研究

作者：祝燕平云南中医学院

学位级别：硕士

目的：缺血性脑血管病(Ischemic cerebrovascular diseases, ICVD)是死亡率和致残率较高的疾病之一。脑缺血再灌注损伤是ICVD的主要病理过程，再灌注过程中，由于氧化应激反应导致血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)破坏，引起局部或... 详细信息

目的：缺血性脑血管病(Ischemic cerebrovascular diseases, ICVD)是死亡率和致残率较高的疾病之一。脑缺血再灌注损伤是ICVD的主要病理过程，再灌注过程中，由于氧化应激反应导致血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)破坏，引起局部或广泛的通透性增加，导致脑神经继发性损伤。因此，抗氧化应激损伤、保护BBB对脑缺血再灌注损伤的治疗及预后具有重要意义。本实验室前期研究证明天麻乙酸乙酯提取部位具有抗脑缺血作用，并从该部位分离出单体酚性成分1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#、8#。本研究拟以小鼠脑毛细血管内皮细胞株(bEnd.3)及星形胶质细胞(astrocyte)作为血脑屏障研究的模型，从中筛选具有保护BBB的活性成分并探讨其抗氧化应激相关的作用机制，为其进一步开发利用奠定基础。方法： 1．复制血脑屏障氧化损伤模型：BBB主要由血管内皮细胞和星形胶质细胞组成，故本实验以bEnd.3细胞和astrocyte细胞作为血脑屏障模型进行研究，采用国际通用的过氧化氢(H2O2)诱导细胞氧化损伤的方法复制血脑屏障损伤模型。以0.125mM、0.25mM、0.5mM、0.75mM H2O2诱导bEnd.3细胞和astrocyte损伤4h;再以0.5mM H2O2诱导bEnd.3细胞损伤1h、2h、4h、6h，以检测LDH泄漏率筛选H2O2诱导bEnd.3细胞和astrocyte细胞氧化损伤的最佳条件。 2．天麻乙酸乙酯提取部位保护血脑屏障活性成分的筛选：以筛选的H2O2诱导氧化损伤最佳条件测定天麻乙酸乙酯提取部位酚性成分1#-8#对bEnd.3细胞LDH泄漏率的影响，探讨天麻活性成分1#-8#对血脑屏障中的血管内皮细胞的作用，初步筛选出具有保护BBB的活性成分。 3．天麻活性成分保护血管内皮细胞bEnd.3作用机制的研究课题来源：基于脑内分布的天麻酚性成分对缺血性脑损伤神经保护及机制的研究（81160514） 3.1天麻活性成分对血管内皮细胞增殖的影响：利用Alamar blue法检测天麻活性成分对bEnd.3细胞是否具有促进生长的作用，探讨其对血管内皮细胞增殖的影响。 3.2用Western-blot(WB)法和细胞免疫荧光法检测天麻活性成分对bEnd.3中紧密连接蛋白claudin-1, claudin-5, occludin含量的变化;并用WB法检测Nrf2/ARE通路中Nrf2, HO-1, NQO1含量变化;探讨天麻活性成分保护bEnd.3的作用机制。 4．天麻活性成分保护星形胶质细胞的作用及作用机制研究 4.1以测定LDH泄漏率观察天麻活性成分对氧化应激诱导astrocyte损伤的保护作用。 4.2以Western-blot法测定天麻活性成分对正常星型胶质细胞和H2O2诱导的星型胶质细胞氧化损伤状态下Nrf2及其下游蛋白BDNF, HO-1, NQO1表达的影响，探讨天麻活性成分保护星型胶质细胞的作用机制。结果： 1．天麻乙酸乙酯提取部位酚性成分对血脑屏障中血管内皮细胞的保护作用及机制 1.1H2O2诱导bEnd.3细胞损伤的LDH泄漏率与正常组比，0.25mM、0.5mM、0.75mM H2O2诱导bEnd.3细胞损伤4h，差异有统计学意义(P＜0.01);0.5mM H2O2诱导bEnd.3细胞损伤6h差异有统计学意义(P＜0.01)。故以0.5mM H2O2作用于细胞4h作为H2O2造成bEnd.3细胞损伤最佳条件。 1.2天麻酚性成分1#、2#、4#、7#的不同浓度(15μg/ml,25μg/ml,50μg/ml, C4:100μg/ml)对H2O2诱导bEnd.3细胞损伤的LDH泄漏率无影响。天麻酚性成分3#、5#、6#的不同浓度(12.5μg/ml,25μg/ml,50μg/ml)及天麻酚性成分8#不同浓度(5μg/ml,10μg/ml,20μg/ml)可降低H2O2诱导bEnd.3细胞损伤的LDH泄漏率，差异有统计学意义(P<0.01)。 1.3天麻酚性成分3#、5#对bEnd.3细胞增殖有一定的促进作用，酚性成分6#、8#未见有促进细胞生长的作用。 1.4与正常组比，天麻酚性成分5#可增加bEnd.3细胞中紧密连接蛋白claudin-1, claudin-5, occludin和Nrf2/ARE通路中Nrf2, HO-1, NQO1蛋白的表达，且claudin-5, occludin, Nrf2, HO-1表达差异有统计学意义(P＜0.05)。天麻酚性成分3#、6#对bEnd.3中claudin-5, occludin, Nrf2, HO-1, NQO1表达无明显影响。 2．天麻乙酸乙酯提取部位酚性成分对血脑屏障中星形胶质细胞的保护作用 2.1H2O2诱导

关键词：酚性成分小鼠脑毛细血管内皮细胞株星型胶质细胞血脑屏障氧化损伤

思维导图在《全国导游基础知识》教学中的应用研究

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思维导图在《全国导游基础知识》教学中的应用研究

作者：祝燕平广东技术师范学院

学位级别：硕士

思维导图(Mind Mapping)是英国著名脑思维学者Tony Buzan在上世纪60年代所提出的一种记笔记的方法,后来发展为一种发散性思维的表现方式。它借助文字、线条、颜色、图片等形式,运用左右脑全脑思维,能把大量繁琐的信息变成具有颜色的、... 详细信息

思维导图(Mind Mapping)是英国著名脑思维学者Tony Buzan在上世纪60年代所提出的一种记笔记的方法,后来发展为一种发散性思维的表现方式。它借助文字、线条、颜色、图片等形式,运用左右脑全脑思维,能把大量繁琐的信息变成具有颜色的、高度组织的、便于记忆的图,是一种高效的学习和工作方式。在国外,思维导图被广泛运用于教育、科技、商业等各个方面。本世纪初,思维导图被介绍到中国。自2004年起,在我国教育界掀起了巨大的波澜,之后被广泛运用到中小学基础教育和高等教育领域,却鲜有人将其运用到中等职业教育教学中。笔者作为一名中职学校旅游专业教师,长期担任《全国导游基础知识》等课程的教学。该课程涉及面广、知识庞杂,是专业基础课,也是全国导游资格证必考科目。近年来,由于中职生源质量不断下降,《全国导游基础知识》教学中的矛盾愈发突出。基于教学现状和思维导图的特征与功能,本研究将思维导图引入《全国导游基础知识》的日常教学,并通过三轮行动研究,运用调查法、访谈法、观察法、实物分析法等研究方法,对思维导图对全国导游基础教学中的功能进行了初步检验。本研究以促进学生学习为指导思想,根据教学内容和实践设计教学方案,把思维导图教学法作为教学的主要手段。实践研究表明:思维导图教学法促进了学生的学习积极性,有利于学生进行导游基础知识的建构和记忆,较好地训练了学生的思维和语言,是学生进行小组合作学习的有效工具。本课题的研究视角为《全国导游基础知识》等考证教材提供了可借鉴的学习方法,有利于学生学习技能的提升,有利于促进课堂教学质量的提高。

关键词：思维导图全国导游基础知识应用行动研究

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简述装饰织物吸声隔音性能的应用与研究

产业用纺织品 2000年第6期18卷 24-26页

作者：祝燕平于伟东东华大学上海200051

装饰织物的功能性日益为人们所关注 ,有关其吸声隔音性能的实际应用和理论研究亦均有报道。本文针对装饰织物吸声隔音的基本原理和应用作一简述。

关键词：装饰织物多孔材料吸声隔声应用

思维导图在《全国导游基础知识》复习中的应用探究

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现代职业教育 2017年第11期 68-69页

作者：祝燕平广州市南沙区岭东职业技术学校

《全国导游基础知识》是一门涉及历史、地理、民族、宗教、建筑、风物特产等多学科知识的课程,知识点多且零散,不利于学生记忆和运用。用思维导图来复习导游基础知识,可以建立知识之间的逻辑联系,复习效率明显提高,并且还指出了思维导... 详细信息

《全国导游基础知识》是一门涉及历史、地理、民族、宗教、建筑、风物特产等多学科知识的课程,知识点多且零散,不利于学生记忆和运用。用思维导图来复习导游基础知识,可以建立知识之间的逻辑联系,复习效率明显提高,并且还指出了思维导图用于复习的适用范围。

关键词：思维导图全国导游基础知识复习

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议中式铺床方法及其效果

旅游纵览（下半月） 2017年第5期 96-96,99页

作者：祝燕平岭东职业技术学校

中式铺床是酒店客房服务过程中最基本的一项技能。在教育系统和酒店行业内,都会主办全国性的中式铺床项目比赛。本文结合行业比赛和职业院校比赛的规范要求、酒店中式铺床技能操作、学生参赛训练经验等,总结和评析了中式铺床操作的不同... 详细信息

中式铺床是酒店客房服务过程中最基本的一项技能。在教育系统和酒店行业内,都会主办全国性的中式铺床项目比赛。本文结合行业比赛和职业院校比赛的规范要求、酒店中式铺床技能操作、学生参赛训练经验等,总结和评析了中式铺床操作的不同方法、效果及其反思。

关键词：床单床上用品枕头套酒店客房被子职业院校左手大赛右手操作手法开单凸线枕芯套边

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思维导图辅助学生导游词背诵的方法及例析

亚太教育 2015年第33期 139-140页

作者：祝燕平广州市南沙区岭东职业技术学校

旅游专业学生背诵导游词缺乏有效方法和良好的习惯,导致导游考证失败。针对这一问题,笔者在教学中尝试用思维导图辅助学生背诵导游词,受到学生认可,取得一定效果。

关键词：思维导图导游词背诵

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议中式铺床方法及其效果

旅游纵览 2017年第10期 96-96页

作者：祝燕平岭东职业技术学校

中式铺床是酒店客房服务过程中最基本的一项技能。在教育系统和酒店行业内,都会主办全国性的中式铺床项目比赛。本文结合行业比赛和职业院校比赛的规范要求、酒店中式铺床技能操作、学生参赛训练经验等,总结和评析了中式铺床操作的不同...

关键词：

对羟基苯甲醛对血脑屏障的保护作用及机制研究

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中国中药杂志 2018年第5期43卷 1021-1027页

作者：祝燕平李欣杜瑶张璐冉利周宁娜云南中医学院药理教研室云南昆明650500 安庆医药高等专科学校药学系安徽安庆246052

脑缺血过程中由氧化应激导致血脑屏障（BBB）的破坏是引起继发性脑损伤的重要病理反应，该研究目的是探讨天麻酚性成分对羟基苯甲醛（p-hydroxybenzaldehyde，p-HBA）对BBB的保护作用及相关机制。BBB主要由血管内皮细胞和星形胶质细胞... 详细信息

脑缺血过程中由氧化应激导致血脑屏障（BBB）的破坏是引起继发性脑损伤的重要病理反应，该研究目的是探讨天麻酚性成分对羟基苯甲醛（p-hydroxybenzaldehyde，p-HBA）对BBB的保护作用及相关机制。BBB主要由血管内皮细胞和星形胶质细胞组成，故该实验以小鼠脑微细血管内皮细胞株（bEnd．3）和星形胶质细胞（astrocyte，Ast）作为BBB模型进行研究。用H2O2诱导bEnd．3和Ast氧化应激的方法复制BBB损伤模型。采用不同浓度H2O2（0．125，0．25，0．5，0．75mmol·L^-1）诱导bEnd．3和Ast损伤4h；再用0．5mmol·L^-1H202诱导bEnd．3及Ast损伤1，2，4，6h，检测乳酸脱氢酶（LDH）漏出率以筛选H2O2诱导细胞氧化损伤的最佳条件。不同浓度P-HBA（12．5，25，50mg·L^-1）干预后，检测bEnd．3和Ast细胞LDH漏出率；采用Westernblot法检测正常bEnd.3和Ast以及H2O2诱导损伤后Ast细胞中Nrf2，HO-1和NQ01蛋白表达量的变化；采用免疫荧光法和Westernblot法检测p-HBA对bEnd．3中紧密连接蛋白claudin-5和occludin表达的影响。结果显示，0．5rnmol·L^-1H202诱导bEnd．3和Ast损伤4h为最佳条件。不同浓度p-HBA均可降低H2O2诱导bEnd．3和Ast损伤后细胞LDH的漏出率；可增加bEnd．3中claudin-5，occludin，Nrt2，HO-1及NQ01蛋白的表达量；可增加Ast及H2O2诱导损伤后Ast中Nrf2，HO-1和NQ01蛋白表达量。结果提示，p-HBA可保护氧化应激诱导的BBB损伤，其机制与增加bEnd．3紧密连接蛋白claudin-5，OC-cludin的表达及激活bEnd-3和Ast细胞中抗氧化应激Nrt2／ARE通路、增强细胞内源性抗氧化能力有关。

关键词：血脑屏障氧化损伤小鼠脑微细血管内皮细胞株星形胶质细胞对羟基苯甲醛