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人细小病毒B19VP2蛋白的优势表达与抗原活性检测

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人细小病毒B19VP2蛋白的优势表达与抗原活性检测

作者：祝丙华中国人民解放军军事医学科学院

学位级别：硕士

研究目的：人细小病毒B19(Human parvovirus B19)与人类多种疾病发生有密切关系，可引起特发性血小板减少性紫癜、急性再生障碍性贫血、幼年类风湿关节炎、过敏性紫癜等多种疾病，并可造成胎儿水肿、死胎、流产和先天畸形，给患者... 详细信息

研究目的：人细小病毒B19(Human parvovirus B19)与人类多种疾病发生有密切关系，可引起特发性血小板减少性紫癜、急性再生障碍性贫血、幼年类风湿关节炎、过敏性紫癜等多种疾病，并可造成胎儿水肿、死胎、流产和先天畸形，给患者生命和健康造成严重影响。B19病毒基因组主要编码两种结构蛋白VP1(85KDa)和VP2(58KDa)以及一种非结构蛋白NS(77KDa)。VP1和VP2均具有抗原性，能刺激机体产生相应的IgM和IgG抗体，可用于B19病毒感染的诊断。免疫功能正常儿童感染B19病毒后可产生特异性抗体，B19-VP2-IgM阳性提示近期感染或急性感染，发病后3天即可检出，2-3周达高峰，持续2-3个月，适用于B19病毒感染的早期诊断。但由于B19病毒抗原来源困难，国内相关的血清学检测试剂很少，临床诊断大都采用昂贵的国外进口ELISA试剂盒。分子生物学技术的发展使得许多病毒衣壳蛋白能够在体外进行基因重组表达，这也为解决B19病毒抗原来源难的问题开辟了一条新的途径。本研究通过对B19病毒VP2序列的生物信息学分析，选定VP2片段中4354-4662bp(309bp，351-454位氨基酸)表面易得性较高的片段作为研究对象，利用分子生物学方法获得VP2基因片段及重组的VP2蛋白，再利用ELISA方法对该重组蛋白的生物学功能进行初步分析。研究内容与结果：

关键词： B19病毒 VP2蛋白基因工程抗原性

血清骨硬化蛋白、成纤维细胞因子-23、可溶性CD40配体联合检测对维持性血液透析并发心血管事件的预测价值

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安徽医药 2023年第2期27卷 291-296页

作者：陈东蒋知新张洁祝丙华中国人民解放军第305医院肾脏内科北京100017 中国人民解放军第305医院中心实验室北京100017 中国人民解放军第305医院感染控制科北京100017

目的探讨血清骨硬化蛋白(SOST)、成纤维细胞因子-23(FGF-23)、可溶性CD40配体(sCD40L)联合检测对维持性血液透析(MHD)病人并发心血管事件的预测价值。方法选取2017年1月至2019年3月中国人民解放军第305医院收治的行MHD的149例病人作为... 详细信息

目的探讨血清骨硬化蛋白(SOST)、成纤维细胞因子-23(FGF-23)、可溶性CD40配体(sCD40L)联合检测对维持性血液透析(MHD)病人并发心血管事件的预测价值。方法选取2017年1月至2019年3月中国人民解放军第305医院收治的行MHD的149例病人作为研究对象,根据MHD病人有无心血管事件发生将其分为未发生组和发生组,另选取同期128例健康体检者设为对照组。比较各组SOST、FGF-23、sCD40L,找出影响MHD病人并发心血管事件的危险因素。结果MHD病人心血管事件发生率为33.56%,发生组年龄(59.11±10.74)岁、血肌酐(Scr)(849.07±156.81)μmol/L及血清SOST(119.83±22.78)pmol/L、FGF-23(569.07±92.84)ng/L、sCD40L(119.49±23.86)μg/L水平均高于未发生组和对照组,均差异有统计学意义(P<0.05),未发生组Scr(753.73±112.06)mol/L及血清SOST(86.23±16.05)pmol/L、FGF-23(439.14±78.02)ng/L、sCD40L(82.02±15.53)μg/L水平均高于对照组,均差异有统计学意义(P<0.05);MHD病人血清SOST水平与钙(Ca)呈正相关(P<0.05),血清FGF-23水平与磷(P)呈正相关(P<0.05);年龄大、收缩压高、透析时间长、高水平的尿酸(UA)、血肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、三酰甘油(TG)与高水平的SOST、FGF-23、sCD40L均为是影响MHD病人并发心血管事件的危险因素(P<0.05);血清SOST、FGF-23、sCD40L水平联合预测MHD病人并发心血管事件的灵敏度和曲线下面积(AUC)分别为98.00%和0.96,均高于单一指标评价(P<0.01)。结论血清SOST、FGF-23、sCD40L水平升高均是MHD病人并发心血管事件的危险因素,以上三项指标均对MHD病人并发心血管事件有较好的预测价值,但三者联合预测时的价值更高。

关键词：肾透析/并发症骨硬化蛋白成纤维细胞因子-23 可溶性CD40配体心血管事件

加味真武汤通过调控miR-377表达水平对糖尿病肾病的影响

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国际泌尿系统杂志 2023年第2期43卷 322-326页

作者：陈东孟元祝丙华张洁中国人民解放军第305医院肾脏内科北京100017 首都医科大学附属北京中医医院肾病科北京100010 中国人民解放军第305医院感染控制北京100017

目的探讨加味真武汤通过调控miR-377表达水平对糖尿病肾病(DN)细胞炎症水平和免疫功能的影响及分子机制.方法选取40只SPF级雄性大鼠,对其中30只大鼠进行腹腔注射链脲佐菌素,建立大鼠DN模型,并随机分为模型对照组、加味真武汤低剂量组... 详细信息

目的探讨加味真武汤通过调控miR-377表达水平对糖尿病肾病(DN)细胞炎症水平和免疫功能的影响及分子机制.方法选取40只SPF级雄性大鼠,对其中30只大鼠进行腹腔注射链脲佐菌素,建立大鼠DN模型,并随机分为模型对照组、加味真武汤低剂量组、加味真武汤高剂量组,每组各10只.同时设置空白对照组(10只).建立HK-2细胞的DN模型,分为miR-NC+DN组(将miR-NC转染至建模后的HK-2细胞)、miR-377+DN组(将miR-377转染至建模后的HK-2细胞)、anti-miR-NC+DN组(将anti-miR-NC转染至建模后的HK-2细胞)、an-ti-miR-377+DN组(将anti-miR-377转染至建模后的HK-2细胞)、加味真武汤+miR-NC+DN组(将miR-NC转染至建模后的HK-2细胞,再用高剂量加味真武汤处理)、加味真武汤+miR-377+DN 组(将miR-377转染至建模后的HK-2细胞,再用高剂量加味真武汤处理).采用实时荧光定量PCR检测miR-377表达水平;采用酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)水平;采用流式细胞仪检测CD4^(+)、CD8^(+)和Th1水平.结果与空白对照组比较,模型对照组的TNF-α、IL-6、IL-8、CD4^(+)、miR-377水平升高,CD8^(+)和Th1水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.001);与模型对照组比较,加味真武汤低剂量组、加味真武汤高剂量组的TNF-α、IL-6、IL-8、CD4^(+)、miR-377水平降低,CD8^(+)和Th1水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.001).与miR-NC+DN组比较,miR-377+DN组的TNF-α、IL-6、IL-8水平以及CD4^(+)水平升高,CD8^(+)和Th1水平降低(均P<0.001);与anti-miR-NC+DN组比较,anti-miR-377+DN组的TNF-α、IL-6、IL-8水平以及CD4^(+)水平降低,CD8^(+)和Th1水平升高(均P<0.001).与加味真武汤+miR-NC+DN组比较,加味真武汤+miR-377+DN组的TNF-α、IL-6、IL-8水平以及CD4^(+)水平降低,CD8^(+)和Th1水平升高(均P<0.001).结论加味真武汤通过抑制miR-377表达减轻DN细胞炎症水平,增强患者的免疫功能,值得临床推广应用.

关键词：糖尿病肾病微小RNA-377 加味真武汤

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心率变异性临床应用的研究进展

实用心电学杂志 2022年第2期31卷 137-143页

作者：曹文静张金萍马建新祝丙华南方医科大学第二临床医学院广东广州510000 中国人民解放军第三〇五医院北京100032

心率变异性(heart rate variability,HRV)是评价心脏自主神经活动最常用的无创方法之一。HRV下降是预测冠心病患者死亡的独立危险因素,在评估原发性高血压、糖尿病、睡眠呼吸暂停综合征、抑郁症及新型冠状病毒肺炎等疾病方面也有一定的... 详细信息

心率变异性(heart rate variability,HRV)是评价心脏自主神经活动最常用的无创方法之一。HRV下降是预测冠心病患者死亡的独立危险因素,在评估原发性高血压、糖尿病、睡眠呼吸暂停综合征、抑郁症及新型冠状病毒肺炎等疾病方面也有一定的临床应用价值。本文系统阐述了HRV的研究背景、调节机制、分析方法及其相关临床应用的研究进展,并展望了今后的研究方向。

关键词：心率变异性自主神经系统冠心病心血管疾病呼吸系统疾病糖尿病抑郁症新型冠状病毒肺炎

95例医务人员接种新冠灭活疫苗后特异性抗体分析

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中华医院感染学杂志 2022年第22期32卷 3497-3501页

作者：刘梦颖梁雪梅林虎华翔江继平蒋知新曾刚祝丙华张金萍解放军第三○五医院耳鼻咽喉头颈外科北京100017 解放军第三○五医院医务部北京100017 北京科兴中维生物技术有限责任公司北京102629

目的分析95例医务工作者接种新型冠状病毒(2019-nCoV)灭活疫苗后,血液中免疫抗体结果,探讨新冠灭活疫苗接种后抗体的产生规律和特征。方法收集2020年10月-2021年7月解放军第305医院完成两剂新冠灭活疫苗注射后第30、65、91天、6个月、9... 详细信息

目的分析95例医务工作者接种新型冠状病毒(2019-nCoV)灭活疫苗后,血液中免疫抗体结果,探讨新冠灭活疫苗接种后抗体的产生规律和特征。方法收集2020年10月-2021年7月解放军第305医院完成两剂新冠灭活疫苗注射后第30、65、91天、6个月、9个月时95例医务工作者的静脉血样本,采用化学发光免疫分析检测新冠病毒免疫球蛋白(Ig)M、IgG、中和抗体和总抗体滴度,动态分析抗体检测结果,确定抗体免疫持久性及影响因素、相关性等。结果在注射两针新冠灭活疫苗后第30天几乎全部受试者均产生了IgG、中和抗体和总抗体,部分受试者仍保留较高水平的IgM抗体;其中,吸烟可影响总抗体的产生,而低体质量组可产生更多的IgG抗体,当超过60 kg后,无统计学差异;而在接下来的检测时间点,四种抗体的滴度均有下降,至9个月时,除IgG外其他抗体阳性率已不足50%。结论注射两针新冠灭活疫苗后可产生相应的特异性IgM、IgG、中和抗体和总抗体,但随着时间进展,抗体滴度明显降低,抗体阳性率下降,机体保护作用下降。因此,建议接种过两剂新冠灭活疫苗6个月后再次接种加强针疫苗,以提高对新型冠状病毒的自体免疫力。

关键词：新型冠状病毒灭活疫苗抗体免疫持久性影响因素

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基于大数据传染病监测预警研究进展

中国公共卫生 2016年第9期32卷 1276-1279页

作者：祝丙华王立贵孙岩松宋宏彬解放军疾病预防控制所传染病控制中心北京100071

近年来,传染病监测预警已成为传染病防控的重点和热点研究问题,传统传染病监测系统在一定程度上对于传染病防控起到了很好的预警作用,但存在监测范围局限、预警时间滞后等不足之处。随着信息技术的发展,以及传染病数据的大量增长,以大... 详细信息

近年来,传染病监测预警已成为传染病防控的重点和热点研究问题,传统传染病监测系统在一定程度上对于传染病防控起到了很好的预警作用,但存在监测范围局限、预警时间滞后等不足之处。随着信息技术的发展,以及传染病数据的大量增长,以大数据分析为基础的传染病监测预警研究正逐步成为研究焦点。本文详细介绍基于网络、社会和自然因素、医疗、病原监测等不同大数据来源的传染病监测预警系统,综述各系统优势和不足及未来发展趋势。

关键词：大数据传染病监测预警

某医院老年患者泌尿系感染病原菌分布及其耐药性研究

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中国消毒学杂志 2014年第8期31卷 832-834页

作者：郭燕菊陈倩祝丙华王茹解放军第305医院北京100017

目的研究住院老年患者泌尿系感染病原菌分布及耐药性变迁,为指导临床合理使用抗菌药物提供依据。方法通过病原学标本分离鉴定技术和药敏试验方法,对某医院527例住院老年病人泌尿系感染尿标本进行了监测与分析。结果从527例泌尿系感染的... 详细信息

目的研究住院老年患者泌尿系感染病原菌分布及耐药性变迁,为指导临床合理使用抗菌药物提供依据。方法通过病原学标本分离鉴定技术和药敏试验方法,对某医院527例住院老年病人泌尿系感染尿标本进行了监测与分析。结果从527例泌尿系感染的老年患者中段尿中检出病原菌共527株,其中大肠埃希菌占32.1%、铜绿假单胞菌和肠球菌分别为12.7%和12.1%,居前三位。所分离出的革兰阴性杆菌对阿米卡星、头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南及美罗培南敏感;肠球菌对替考拉宁及万古霉素敏感。已经检出耐万古霉素的屎肠球菌。结论革兰阴性杆菌在老年泌尿系感染中占绝对优势,不同菌种对抗菌药物耐药率差别较大,合理使用抗菌药物对有效控制感染及避免耐药菌株的产生尤为关键。

关键词：老年患者泌尿系感染病原菌耐药性

医院重点科室医护人员鼻前庭病原菌携带情况调查

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中国消毒学杂志 2015年第4期32卷 351-353页

作者：王茹陈倩祝丙华王会中解放军第305医院北京100017

目的研究医院部分重点科室医护人员鼻咽部携带致病菌的情况,以加强医院感染的预防与控制。方法采用涂抹采样和细菌分离鉴定方法,对某医院重症监护病房、手术室等部分重点科室65名医护人员鼻咽携带致病菌进行检测。结果从65例医护人员鼻... 详细信息

目的研究医院部分重点科室医护人员鼻咽部携带致病菌的情况,以加强医院感染的预防与控制。方法采用涂抹采样和细菌分离鉴定方法,对某医院重症监护病房、手术室等部分重点科室65名医护人员鼻咽携带致病菌进行检测。结果从65例医护人员鼻咽部标本中共分离病原菌29株。重症监护病房医护人员分离率为66%,居首位。分离的主要致病菌有金黄色葡萄球菌、肠杆菌科、非发酵菌等。分离出多重耐药菌有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌。结论该医院重点科室医务人员鼻咽部普遍携带病原菌,且存在多重耐药菌,应加强医护人员病原菌携带率及其耐药性监测。

关键词：医务人员鼻咽部致病菌携带多重耐药菌监测

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金黄色葡萄球菌医院感染与耐药性调查

中国消毒学杂志 2013年第9期30卷 830-831,835页

作者：王茹陈倩祝丙华郭燕菊王会中解放军第305医院北京100017

目的了解金黄色葡萄球菌医院感染状况及其耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供参考依据。方法通过临床调查和病人标本病原学检验方法,对某部队医院住院患者金黄色葡萄球菌感染情况进行调查。结果在调查期间,从该医院住院病人标本中检出... 详细信息

目的了解金黄色葡萄球菌医院感染状况及其耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供参考依据。方法通过临床调查和病人标本病原学检验方法,对某部队医院住院患者金黄色葡萄球菌感染情况进行调查。结果在调查期间,从该医院住院病人标本中检出金黄色葡萄球菌210株,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)131株,占62.4%。有62.4%的金黄色葡萄球菌分离自病人痰液标本,表明以呼吸道感染为主。金黄色葡萄球菌感染患者主要分布于重症监护病房(ICU)、呼吸科和神内科。所有检出的金黄色葡萄球菌均对万古霉素和利奈唑胺敏感,只对青霉素和红霉素的耐药率较高。结论该医院金黄色葡萄球菌感染者主要分布于重症病房,MRSA检出率较高,耐药日益严重。

关键词：金黄色葡萄球菌医院感染抗菌药物耐药性