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青贮玉米来源黑附球菌的鉴定、致病性测定及生防药剂筛选

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甘肃农业大学学报 2024年

作者：倪如原常建萍刘钟歌赵永宝祁鹤兴青海大学农牧学院

【目的】为明确引起青贮玉米病害的附球菌属真菌种类及其致病性，筛选防治其的高效生防药剂。【方法】本研究采用组织分离法从具有典型病斑的青贮玉米叶片上分离、纯化菌株，通过划伤和菌丝涂抹两种方法测定致病性，结合形态特征以及分... 详细信息

【目的】为明确引起青贮玉米病害的附球菌属真菌种类及其致病性，筛选防治其的高效生防药剂。【方法】本研究采用组织分离法从具有典型病斑的青贮玉米叶片上分离、纯化菌株，通过划伤和菌丝涂抹两种方法测定致病性，结合形态特征以及分子生物学方法对病原菌进行鉴定；并利用菌丝生长抑制法和皿内对峙培养法测定10种生物杀菌剂对病原菌的抑菌作用。【结果】结果表明，经形态特征和基因序列分析将17株分离菌株鉴定为黑附球菌（Epicoccum nigrum），其菌落呈圆形，初为白色，后期呈橙色或褐色，部分菌落中央呈橘色或橙色，外缘白色或浅黄色；致病性测定发现黑附球菌对青海省7个主栽青贮玉米品种均有致病性，其中青贮玉米'金穗3'较感病，17株病原菌均可侵染该品种。仿生物提取物类供试药剂中阿维菌素抑菌效果最好， EC50最低，为0.767 mg/L，蛇床子素的抑制作用次之，EC50为2.639 mg/L，氨基寡糖素的抑菌效果最差，EC50为425.433 mg/L；拮抗菌类供试药剂中枯草芽孢杆菌对病原菌的抑制效果最好，100倍-1600倍稀释液抑菌带宽度都在7 mm以上。【结论】本研究初步明确青海省青贮玉米附球菌属真菌主要为黑附球菌，具有较强致病性，补充黑附球菌在中国的地理分布，为青贮玉米病害诊断及综合防治提供基础。

关键词：青贮玉米叶斑病黑附球菌致病性杀菌剂

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青海天然草地植物锈病种类及地理分布研究

草地学报 2024年

作者：郑开福严虎祁鹤兴李晶晶王海春刘凯唐炳民芦光新青海大学农牧学院青海省林业工程监理中心有限公司青海省草原总站

为明确青海天然草地植物锈病种类和地理分布特征，采用路线调查法按照区域尺度布设样点进行发病植物标本的采集和病原菌的分离，根据孢子形态特征和核糖体转录间隔区（Internal transcribed spacer，ITS）序列对病原菌进行鉴定，并对其... 详细信息

为明确青海天然草地植物锈病种类和地理分布特征，采用路线调查法按照区域尺度布设样点进行发病植物标本的采集和病原菌的分离，根据孢子形态特征和核糖体转录间隔区（Internal transcribed spacer，ITS）序列对病原菌进行鉴定，并对其地理分布特征进行分析。结果表明：10个县域25种植物上有锈病发生，祁连县发病植物种类最多，翻白委陵菜（Potentilla sibbaldia）锈病分布最广；锈菌形态学鉴定为柄锈菌属（Puccinia）、胞锈菌属（Phragmidium）和单胞锈菌属（Uromyces）3个属；委陵菜多胞锈菌（Phragmidium potentillae）在调查县域中发生频次最高，Puccinia atra发生频次最低，苍耳柄锈（Puccinia arenariae）、委陵菜多胞锈菌（Phragmidium potentillae）生态位宽度较大，适于在大多数生境中生存，Puccinia atra生态位宽度最小，属于狭适性物种。

关键词：青海天然草地锈病地理分布

机动车与被撞行人保护研究——基于行人碰撞保护机动车发盖铰链区设计解决方案

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质量与标准化 2015年第11期 54-56页

作者：祁鹤兴贺春桃于峰上汽集团商用车技术中心上海机动车检测中心

行人保护是汽车安全的重要内容。根据GTR行人保护试验要求,建立了行人保护头型冲击及整车有限元模型。对于HIC值较大的发盖铰链区域进行仿真模拟碰撞,分析头部加速度的时间历程,并提出了改进方案。对于改进的方案进行了仿真验证和试验,... 详细信息

行人保护是汽车安全的重要内容。根据GTR行人保护试验要求,建立了行人保护头型冲击及整车有限元模型。对于HIC值较大的发盖铰链区域进行仿真模拟碰撞,分析头部加速度的时间历程,并提出了改进方案。对于改进的方案进行了仿真验证和试验,验证了优化方案的合理性和可行性。

关键词：行人保护发盖铰链区域头部冲击仿真试验研究

青贮玉米亚隔孢壳叶斑病菌的分离鉴定及其致病性分析

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分子植物育种 2023年

作者：常建萍倪如原贺晨邦窦启福刘钟歌祁鹤兴青海大学农牧学院青海大学农林科学院青海省贵南县林业站

为明确青贮玉米来源亚隔孢壳属真菌种类及其致病性，本研究通过病原菌菌落和分生孢子形态特征，结合多基因(ITS， LSU和β-tubulin)序列比对分析，对44株病原菌进行分类鉴定，并通过喷雾和离体划伤接种法对其致病性进行分析。结果表明... 详细信息

为明确青贮玉米来源亚隔孢壳属真菌种类及其致病性，本研究通过病原菌菌落和分生孢子形态特征，结合多基因(ITS， LSU和β-tubulin)序列比对分析，对44株病原菌进行分类鉴定，并通过喷雾和离体划伤接种法对其致病性进行分析。结果表明，44株分离菌株为亚隔孢壳叶斑病菌(Didymella glomerata)，致病性测定结果表明44株菌株都能侵染青贮玉米‘铁研53’和‘金顿313’，引起叶斑病。将亚隔孢壳叶斑病菌分别与青贮玉米叶斑病菌交链格孢(Alternaria alternata)、麦根腐平脐蠕孢(Bipolaris sorokiniana)和玉米生平脐蠕孢(B. zeicola)进行混合接种，发现致病性相较于单独接种明显增强。本研究初步明确青海省青贮玉米亚隔孢壳属真菌种类及其致病性，补充亚隔孢壳属真菌在中国的地理分布，为后续开展病害诊断提供基础。

关键词：青贮玉米叶斑病亚隔孢壳属致病性

宁夏灵武白芨滩自然保护区苦豆子内生放线菌研究

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宁夏灵武白芨滩自然保护区苦豆子内生放线菌研究

2014年中国植物保护学会学术年会

作者：祁鹤兴高媛顾沛雯宁夏大学农学院

对宁夏灵武白芨滩自然保护区苦豆子内生放线菌进行遗传多样性和抑菌活性研究。从宁夏灵武白芨滩自然保护区植被、土壤类型等不同的6个样区采集健康苦豆子样品30份,采用组织匀浆法从苦豆子植株的根、茎、叶和种子中共分离得到内生放线菌...

对宁夏灵武白芨滩自然保护区苦豆子内生放线菌进行遗传多样性和抑菌活性研究。从宁夏灵武白芨滩自然保护区植被、土壤类型等不同的6个样区采集健康苦豆子样品30份,采用组织匀浆法从苦豆子植株的根、茎、叶和种子中共分离得到内生放线菌111株。根据培养性状、菌落、孢子等形态特征和16S rDNA序列分析对分离菌株进行鉴定。之后以12种植物病原真菌为靶标菌,对111株苦豆子内生放线菌进行了抗菌活性筛选;采用皿内对峙培养法培养7天左右观察结果。111株内生放线菌分属于链霉菌属(Streptomyces)、拟诺卡式菌属(Nocardiopsis)、普劳斯氏菌属(Prauserella)、Actinophytocola、微杆菌属(Microbacterium)、束丝放线菌属(Actinosynnema)、嗜热油菌属(Thermoleophilum)、糖霉菌属(Glycomyces)和糖丝菌属(Saccharothrix)9个属,其中,链霉菌属(Streptomyces)和拟诺卡式菌属(Nocardiopsis)为优势属。12株内生放线菌具有较高的抑菌活性,占总菌株数10.8%,菌株YWZKDS对番茄枯萎病菌的抑菌带宽度最高,为15.30mm。根据形态特征和16S rDNA基因序列系统发育分析,菌株YWZKDS与Streptomyces scabiei亲缘关系最近,序列相似性为99.1%。由本试验可知,苦豆子内生放线菌具有丰富的遗传多样性,并且对12种植物病原真菌具有较好的抑菌活性。

关键词：

来源： cnki会议评论

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龙羊峡水库土壤真菌多样性及生防菌株筛选

微生物学通报 2024年第9期51卷 3468-3483页

作者：杨闰艳马有海辛承伟张秩伟祁鹤兴青海大学农牧学院青海西宁810016

【背景】龙羊峡水库是黄河源区重要的湖泊湿地之一,具有巨大的水量调节功能。【目的】探究龙羊峡水库土壤真菌多样性并筛选生防菌株,丰富高寒湖泊湿地真菌资源,为后续开发生防制剂提供基础材料。【方法】从龙羊峡水库岸边采集土壤样本10... 详细信息

【背景】龙羊峡水库是黄河源区重要的湖泊湿地之一,具有巨大的水量调节功能。【目的】探究龙羊峡水库土壤真菌多样性并筛选生防菌株,丰富高寒湖泊湿地真菌资源,为后续开发生防制剂提供基础材料。【方法】从龙羊峡水库岸边采集土壤样本10份,采用稀释涂板分离法进行真菌的分离,采用形态学和分子生物学方法鉴定真菌,并使用对峙培养法筛选生防菌株。【结果】共分离得到104株真菌,经鉴定发现分别属于光黑壳属(Preussia)、木霉属(Trichoderma)、链格孢属(Alternaria)、枝孢霉属(Cladosporium)、平脐蠕孢属(Bipolaris)、假裸囊菌属(Pseudogymnoascus)和青霉属(Penicillium)等23属真菌,其中光黑壳属和木霉属菌株个数最多,分别是21株和19株,分离频率是20.19%和18.27%;枝葡萄孢属(Botryotrichum)、韦斯特壳属(Westerdykella)、小球腔菌属(Leptosphaeria)、节菱孢属(Arthrinium)、齿梗孢属(Scolecobasidium)、孢子丝菌属(Sporothrix)、四枝孢属(Tetracladium)和隐囊菌属(Aphanoascus)菌株个数最少,均为1株,分离频率为0.96%。从104株土壤真菌中筛选得到19株木霉属真菌对青海省主要农作物8种病原真菌具有较强的抑菌效果,抑菌率在51.6%−73.5%之间;10株光黑壳属、4株假裸囊菌属、3株枝孢霉属、2株平脐蠕孢属、各1株节菱孢属、小球腔菌属、韦斯特壳属、青霉属和翅孢壳属(Emericellopsis)真菌通过抗生作用发挥抑菌效果,对8种病原真菌的抑菌带最大宽度均≥10 mm,抑菌效果较好。【结论】龙羊峡水库土壤真菌资源丰富,具有较好的开发和利用价值。

关键词：龙羊峡水库湿地真菌多样性生防菌株

青贮玉米近壳多胞叶斑病菌的分离鉴定及其致病性分析

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草地学报 2024年第11期32卷 3400-3407页

作者：常建萍倪如原贺晨帮芦光新刘钟歌来有鹏祁鹤兴青海大学农牧学院青海西宁810016 青海大学农林科学院青海西宁810016

为分析青贮玉米来源近壳多胞菌属种类及其致病性,本研究采集疑似病叶,对病原菌进行分离纯化,结合病原菌菌落和子囊孢子形态特征以及核糖体转录间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)、核糖体小亚基(Ribosomal small subunit,SSU)和... 详细信息

为分析青贮玉米来源近壳多胞菌属种类及其致病性,本研究采集疑似病叶,对病原菌进行分离纯化,结合病原菌菌落和子囊孢子形态特征以及核糖体转录间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)、核糖体小亚基(Ribosomal small subunit,SSU)和翻译延伸因子(Translation elongation factor,TEF-1α)序列联合分析,鉴定分离自青贮玉米叶斑病样本的近壳多胞菌属种类,明确其有性生殖类型,通过划伤接种和喷雾接种对其致病性进行分析。结果表明,分离得到的40株病原菌为颖枯近壳多胞菌(Parastagonospora nodorum),并只扩增出1种交配型基因片段,为MAT1交配型;颖枯近壳多胞菌可通过室内诱导产生有性后代,有性生殖类型为同宗配合;致病性测定结果表明40株菌株能侵染7个品种的青贮玉米引起叶斑病。本研究初步明确青海省青贮玉米来源近壳多胞菌属真菌种类及其致病性,为后续青贮玉米病害准确识别及综合防治提供理论依据。

关键词：青贮玉米颖枯近壳多胞菌叶斑病致病性

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青贮玉米蠕形菌生物学特性及杀菌剂筛选

青海农林科技 2023年第3期 1-7页

作者：常建萍李博祁鹤兴青海大学农牧学院青海西宁810016

为理清青贮玉米蠕形菌生物学特性及筛选出防治该类病害的有效药剂,本研究测定不同氮、碳源和pH值对青贮玉米6种蠕形菌菌丝生长的影响及8种杀菌剂对蠕形菌的抑菌作用。结果表明,供试氮源中的酵母提取物、蛋白胨、酶水解酪蛋白和酸水解酪... 详细信息

为理清青贮玉米蠕形菌生物学特性及筛选出防治该类病害的有效药剂,本研究测定不同氮、碳源和pH值对青贮玉米6种蠕形菌菌丝生长的影响及8种杀菌剂对蠕形菌的抑菌作用。结果表明,供试氮源中的酵母提取物、蛋白胨、酶水解酪蛋白和酸水解酪蛋白对6种蠕形菌的生长具有明显的促进作用,供试碳源中甘露醇、蔗糖、淀粉、葡萄糖、麦芽糖和乳糖对6种蠕形菌的生长具有最明显的促进作用。6株菌株在pH值为4~11都可生长,pH值为4、5、9时MH-41(穗状弯孢菌)、CJZ-8(大斑突脐孢菌)、DT-68(新月弯孢菌)和GDX-65(麦根腐平脐蠕孢菌)菌丝生长速率最快。药剂试验表明,50%咯菌腈可湿性粉剂、50%苯醚甲环唑悬浮剂、25%硅唑·咪鲜胺水乳剂和25%吡唑醚菌酯悬浮剂对6种蠕形菌的抑制效果较好。

关键词：青贮玉米蠕形菌生物学特性杀菌剂筛选

产PK和NRP类抗生素苦豆子内生放线菌分子筛选及抗生素类型鉴定

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微生物学通报 2016年第3期43卷 583-592页

作者：祁鹤兴赵映珺李鹏高媛徐全智顾沛雯宁夏大学农学院宁夏银川750021 中国农业大学植物病理学系农业部植物病理学重点实验室北京100193 宁夏大学省部共建天然气转化国家重点实验室培育基地宁夏银川750021

【目的】从19株苦豆子内生拮抗放线菌中筛选PKSⅠ、PKSⅡ和NRPS基因阳性菌株,并对其产抗生素种类进行初步鉴定,为苦豆子内生放线菌资源的合理开发和利用提供理论依据。【方法】分别以PKSⅠ、PKSⅡ和NRPS基因引物对19株拮抗菌株进行特异... 详细信息

【目的】从19株苦豆子内生拮抗放线菌中筛选PKSⅠ、PKSⅡ和NRPS基因阳性菌株,并对其产抗生素种类进行初步鉴定,为苦豆子内生放线菌资源的合理开发和利用提供理论依据。【方法】分别以PKSⅠ、PKSⅡ和NRPS基因引物对19株拮抗菌株进行特异性扩增,筛选阳性菌株;以7种抗生素标准样品为对照,采用TLC和HPLC法对阳性菌株所产抗生素类型进行鉴定。【结果】PKSⅠ、PKSⅡ和NRPS基因阳性菌株率分别为47.4%、10.5%和21.1%;9株内生放线菌发酵液中各有1个峰的洗脱时间与麦迪霉素的洗脱时间一致,菌株NDZKDS69的发酵液中有4个峰的洗脱时间分别与麦迪霉素、乙酰螺旋霉素、替考拉宁和土霉素标准样品的洗脱时间一致。【结论】苦豆子内生放线菌中链霉菌属(Strepomyces)菌株是大环内脂类、芳香环类和非核糖体多肽类抗生素的丰富菌源;分子指纹图谱和化学指纹图谱检测结果一致,且建立的TLC和HPLC法检测抗生素的方法简便、快捷、灵敏、重复性良好。

关键词：苦豆子内生放线菌聚酮合酶非核糖体多肽合成酶分子筛选高效液相色谱