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CIK细胞联用树突状细胞治疗恶性肿瘤的进展

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中国现代药物应用 2015年第12期9卷 265-267页

作者：祁秋干纪娜王远东南方医科大学中西医结合肿瘤中心胸外科 510315 南方医科大学中西医结合肿瘤中心妇瘤科 510315

放化疗是继手术之后临床治疗恶性肿瘤的常用方法 ,而近年来对于肿瘤辅助治疗的细胞介导过继性免疫疗法是目前临床研究热点。采用免疫疗法能够有效改善患者免疫功能,并对消除残余病灶、骨髓净化具有显著疗效。近年来通过对淋巴因子的深... 详细信息

放化疗是继手术之后临床治疗恶性肿瘤的常用方法 ,而近年来对于肿瘤辅助治疗的细胞介导过继性免疫疗法是目前临床研究热点。采用免疫疗法能够有效改善患者免疫功能,并对消除残余病灶、骨髓净化具有显著疗效。近年来通过对淋巴因子的深入研究证实细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)是一种新型具有广谱杀瘤特性的非主要组织相容性复合体(MHC)限制性免疫效应细胞,其应用效果在肿瘤的免疫治疗中具有重要的应用价值,而树突状细胞(DC)作为机体内主要的抗原呈递细胞,可参与并诱导抗原特异性细胞毒(CTL)反应,并可通过对胰岛B细胞的作用参与体液免疫应答。近年来对于CIK细胞联用DC细胞治疗恶性肿瘤的临床疗效被临床所认可,能够有效解除恶性肿瘤患者T细胞无能现象,具有较好的辅助协同抗肿瘤作用。

关键词：细胞因子诱导杀伤细胞树突状细胞恶性肿瘤研究进展

慢病毒载体介导IL-24基因转导人骨髓间充质干细胞的实验研究

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中国肺癌杂志 2013年第1期16卷 7-11页

作者：祁秋干周清华李印李伟强陈霏秦建军天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室天津市肺癌研究所天津医科大学总医院天津300052 郑州大学附属肿瘤医院胸外科郑州450005 中山大学干细胞与组织工程中心广州510080

背景与目的以人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)作为抑癌基因IL-24的细胞载体的研究目前未见报道。应用Gateway法构建共表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green uorescentprotein,EGFP)基因和IL-24基因的慢病毒载体,探讨其对hBMSCs的转导情况,为今后肿瘤的基因治疗奠定基础。方法应用DNA重组技术构建含有IL-24和EGFP基因的慢病毒表达载体,并与慢病毒包装系统(ViraPowerTMLentiviralPackaging Mix)共转染293FT细胞,收集上清,纯化浓缩,测定重组病毒的滴度。取重组慢病毒感染hBMSCs,通过嘌呤霉素筛选并纯化hBMSCs,应用实时荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)及ELISA法分别检测hBMSCs中IL-24mRNA及IL-24蛋白水平的表达情况。结果成功构建了共表达IL-24和EGFP基因的重组慢病毒载体,经包装、纯化及浓缩,病毒滴度为7.25×107PFU/mL。重组慢病毒转导hBMSCs后,通过筛选获得纯化,转导效率可达到100%。qPCR检测示:转导组IL-24mRNA表达明显高于未转导组(P<0.05);ELISA法检测显示转导组hBMSCs上清液IL-24蛋白表达40g/L,未转导组为阴性。结论构建的携带IL-24基因的重组慢病毒载体可有效转导hBMSCs,表达IL-24蛋白。

关键词：人骨髓间充质干细胞 IL-24 EGFP 基因转导慢病毒载体

应用RT-PCR分析食管癌组织中lrig1基因的表达

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第四军医大学学报 2007年第15期28卷 1380-1382页

作者：闫尧马军唐芙爱达嘎祁秋干李印郑州大学第二附属医院消化内科河南郑州450014 青海大学附属医院胸心外科青海西宁810008 河南省肿瘤医院胸外科河南郑州450008

目的:观察lrig1基因在食管鳞癌中的表达及意义.方法:采用RT-PCR检测36例食管鳞状细胞癌癌组织、相应的癌旁组织和远癌组织中lrig1 mRNA的表达情况.PCR产物经凝胶电泳,比较3种组织中lrig1与GAPDH条带的灰度值之比,半定量分析lrig1 mRNA... 详细信息

目的:观察lrig1基因在食管鳞癌中的表达及意义.方法:采用RT-PCR检测36例食管鳞状细胞癌癌组织、相应的癌旁组织和远癌组织中lrig1 mRNA的表达情况.PCR产物经凝胶电泳,比较3种组织中lrig1与GAPDH条带的灰度值之比,半定量分析lrig1 mRNA的表达水平.结果:36例食管癌组织中有15例(42%)lrig1 mRNA检测到阳性表达,21例(58%)lrig1 mRNA表达缺失,其阳性表达率低于相应的癌旁组织(92%)和远癌组织(100.0%,P0.05).结论:lrig1 mRNA在食管癌组织中存在表达缺失和低表达,提示lrig1基因在食管癌的发生发展中可能具有抑癌基因的作用.

关键词： 1rigl基因食管肿瘤 mRNA 逆转录聚合酶链反应

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食管鳞癌中zac基因的表达及临床意义

第四军医大学学报 2007年第19期28卷 1793-1795页

作者：祁秋干马军达嘎闫尧唐芙爱李印青海大学附属医院胸心外科青海西宁810008 郑州大学第二附属医院消化内科河南郑州450014 河南省肿瘤医院胸外科河南郑州450008

目的:观察zac基因在食管癌中的表达及意义.方法:采用RT-PCR检测36例食管鳞状细胞癌组织,相应的癌旁组织和远癌组织中zac mRNA的表达情况.PCR产物经凝胶电泳,比较3种组织中zac与GAPDH条带的灰度值之比,半定量分析zac mRNA的表达水平.结果... 详细信息

目的:观察zac基因在食管癌中的表达及意义.方法:采用RT-PCR检测36例食管鳞状细胞癌组织,相应的癌旁组织和远癌组织中zac mRNA的表达情况.PCR产物经凝胶电泳,比较3种组织中zac与GAPDH条带的灰度值之比,半定量分析zac mRNA的表达水平.结果:36例食管癌组织中有14例(38.9%)zac mRNA检测到阳性表达,22例(61.1%)zac mRNA表达缺失,其阳性表达低于相应的癌旁组织(85.5%)和远癌组织(100.0%,P0.05).结论:zac mRNA在食管癌组织中存在表达缺失和低表达,说明zac基因在食管癌的发生发展中可能具有抑癌基因作用,可能与食管癌的转移密切相关.

关键词： zac基因食管肿瘤 mRNA 逆转录多聚酶链反应

人骨髓间充质干细胞表达外源性IL-24基因对肺癌细胞A549增殖的影响

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中国现代医学杂志 2014年第9期24卷 11-16页

作者：祁秋干周清华李印陈霏秦建军天津医科大学总医院肺部肿瘤外科天津300052 郑州大学附属肿瘤医院胸外科河南郑州450005 中山大学干细胞与组织工程中心广东广州510080

目的探讨以人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)为基因治疗载体表达外源性IL-24对肺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。方法分离培养hBMSCs,并通过流式细胞术鉴定。慢病毒介导IL-24基因转染hBMSCs,构建表达外源性基因IL-24的hBMSCs(hBMSCs-IL-24),qPC... 详细信息

目的探讨以人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)为基因治疗载体表达外源性IL-24对肺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。方法分离培养hBMSCs,并通过流式细胞术鉴定。慢病毒介导IL-24基因转染hBMSCs,构建表达外源性基因IL-24的hBMSCs(hBMSCs-IL-24),qPCR及ELISA法检测hBMSCs-IL-24中IL-24基因mRNA及蛋白表达。CCK-8法检测hBMSCs-IL-24分泌的外源性IL-24对肺癌细胞A549增殖活性的影响。AnnexinV-PI检测hBMSCs-IL-24对A549细胞凋亡的影响。结果慢病毒介导的外源基因IL-24成功转染hBMSCs(hBMSCs-IL-24),其IL-24基因在mRNA及蛋白水平均有明显表达。hBMSCs-IL-24分泌的外源性IL-24蛋白显著抑制肺癌细胞A549的增殖并促进其凋亡。结论 hBMSCs-IL-24能够在mRNA及蛋白水平表达外源性IL-24基因,IL-24蛋白能显著抑制肺癌细胞A549的增殖,促进凋亡。

关键词：人骨髓间充质干细胞 A549肺癌细胞 IL-24 增殖

LGR4通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进宫颈鳞癌增殖

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妇产与遗传（电子版） 2023年第3期13卷 12-16页

作者：纪娜曾朝阳祁秋干南方医科大学中西医结合医院妇科广州510000 南方医科大学中西医结合医院胸外科广州510000

目的探讨LGR4基因在宫颈鳞癌增殖中发挥的作用及分子机制。方法利用小干扰siRNA(包括siLGR4和siNC)转染宫颈鳞癌Siha和Caski细胞,采用RT-qPCR技术检测其干扰效果,采用MTT检测细胞的增殖情况,采用Western blot检测宫颈鳞癌细胞Wnt/β-cat... 详细信息

目的探讨LGR4基因在宫颈鳞癌增殖中发挥的作用及分子机制。方法利用小干扰siRNA(包括siLGR4和siNC)转染宫颈鳞癌Siha和Caski细胞,采用RT-qPCR技术检测其干扰效果,采用MTT检测细胞的增殖情况,采用Western blot检测宫颈鳞癌细胞Wnt/β-catenin信号通路及下游周期因子的表达情况。结果siLGR4的干扰效果较好,MTT实验提示LGR4干扰后可抑制宫颈鳞癌细胞增殖能力,Western blot实验证实LGR4干扰后可抑制Wnt/β-catenin信号通路及下游周期因子的表达。结论LGR4可通过调控Wnt/β-catenin信号通路及下游周期因子促进宫颈鳞癌细胞增殖,有望成为宫颈鳞癌的潜在分子标志物及治疗靶点。

关键词： LGR4 宫颈鳞癌增殖

脐血间充质干细胞治疗严重性系统性红斑狼疮的临床疗效初探

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2014年第3期4卷 6-9页

作者：祁秋干纪娜史强祁岩超南方医科大学中西医结合医院肿瘤中心广州510315 广州友好医院生物中心

目的探讨脐血间充质干细胞对严重性系统性红斑狼疮（SLE）的治疗效果。方法从健康产妇足月分娩的脐带血（UCB）中分离单个核细胞、培养制备间充质干细胞（MSCs）。MSCs培养到第三代时,取样UCB-MSCs,用流式细胞术进行性质鉴定显示：UCB-M... 详细信息

目的探讨脐血间充质干细胞对严重性系统性红斑狼疮（SLE）的治疗效果。方法从健康产妇足月分娩的脐带血（UCB）中分离单个核细胞、培养制备间充质干细胞（MSCs）。MSCs培养到第三代时,取样UCB-MSCs,用流式细胞术进行性质鉴定显示：UCB-MSCs高表达CD29,CD90;不表达CD34和CD45。收集生长良好的第三代UCBMSCs。（5.0-6.0）×10^7个细胞加入100ml含1﹪人血白蛋白的生理盐水中,静脉滴注;每天1次,6-10d,一疗程;3-6个月后再用第2疗程。结果通过UCB-MSCs输注,使现有方法治疗无效的2例严重性系统性红斑狼疮患者的症状完全恢复。第1例SLE伴严重狼疮肾,狼疮脑10年,双下肢水肿,皮肤坏疽,溃疡深达骨面,剧痛难眠1年。经治医生动员她截肢保命。UCB-MSCs治疗后10d,病情明显好转,双下肢水肿几乎全部消退。治疗6个月后,11处坏疽、溃疡的疮面10个疮面基本愈合。10个月后患者的坏疽,溃疡的疮面全部愈合,能自由活动,进入正常生活。第2例SLE伴狼疮肾,狼疮脑4年,一年来贫血严重,靠每周输血维持生命。UCB-MSCs治疗二个疗程后,咳嗽,呕吐症状明显好转,浮肿和双侧胸腔积液消失,各项检查指标基本正常,不需要输血治疗。恢复休学多年的学习生活。二者均随访8年,病情稳定,没发现复发症状。结论 UCB-MSCs治疗2例严重性红斑狼疮,取得一定的疗效;这种新的技术可望成为治疗严重性系统性红斑狼疮的辅助疗法。

关键词：脐血干细胞移植红斑狼疮,系统性

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微创手术治疗成年人动脉导管未闭41例

中国医师进修杂志 2010年第20期33卷 34-35页

作者：马福刚宋和平邵铁良祁秋干李鹏飞河南省平顶山市第一人民医院胸外科 467000

目的探讨成年人动脉导管未闭（PDA）患者微创治疗的安全术式及应用价值。方法1997年2月至2008年10月41例成年人PDA患者采用胸壁小切口，结扎线从胸降主动脉后方转移法进行微创手术治疗。结果41例均获成功，复查心脏超声无残余分流，随... 详细信息

目的探讨成年人动脉导管未闭（PDA）患者微创治疗的安全术式及应用价值。方法1997年2月至2008年10月41例成年人PDA患者采用胸壁小切口，结扎线从胸降主动脉后方转移法进行微创手术治疗。结果41例均获成功，复查心脏超声无残余分流，随访未见导管再通。结论微创手术具有损伤小、出血少、安全性高、疼痛轻、恢复快等优点，符合外科微创原则，适宜治疗成年人PDA患者。

关键词：外科手术微创性动脉导管未闭成年人治疗

电视胸腔镜下手术治疗纵隔肿瘤的临床效果观察

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中国实用医药 2015年第18期10卷 46-47页

作者：祁秋干唐海波雷艳黄伟华梁红光王远东南方医科大学中西医结合医院胸外科 510315

目的对比电视胸腔镜手术与传统开胸手术治疗纵隔肿瘤的临床疗效。方法行手术治疗的纵隔肿瘤患者46例,采用随机数表法将其分为观察组与对照组,每组23例,对照组患者采取传统开胸手术切除治疗,观察组患者采用电视辅助胸腔镜手术治疗,比较... 详细信息

目的对比电视胸腔镜手术与传统开胸手术治疗纵隔肿瘤的临床疗效。方法行手术治疗的纵隔肿瘤患者46例,采用随机数表法将其分为观察组与对照组,每组23例,对照组患者采取传统开胸手术切除治疗,观察组患者采用电视辅助胸腔镜手术治疗,比较两组患者手术用时、术中出血量、住院时间、引流时间及术后并发症发生情况。结果观察组患者术中出血量、手术用时、住院时间、术后引流时间及并发症发生率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者术后及术后近期无死亡病例出现。结论电视胸腔镜下手术治疗纵隔肿瘤具有低医源性损伤、安全、并发症发生率低的优点,并且患者术后康复较快、住院时间较短,有助于减少患者经济负担及早日回归社会生活,具有应用及推广价值。

关键词：电视胸腔镜纵隔肿瘤开胸手术