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HBV慢性感染患者外周血CD8^+ T细胞程序性死亡受体-1和黏蛋白结构域-3的表达及意义

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广东医学 2014年第7期35卷 1045-1047页

作者：王琳赵春楠祁松楠彭群新史进方顾国浩苏州大学附属第一医院检验科江苏苏州215006

目的探讨乙型肝炎病毒慢性感染患者外周血CD8+T细胞程序性死亡受体-1(PD-1)、黏蛋白结构域-3(Tim-3)的表达及意义。方法采用流式细胞术和定量PCR等技术测定42例慢性乙型肝炎(慢性乙型肝炎组)、30例乙型肝炎后肝硬化(肝硬化组)、30例肝癌... 详细信息

目的探讨乙型肝炎病毒慢性感染患者外周血CD8+T细胞程序性死亡受体-1(PD-1)、黏蛋白结构域-3(Tim-3)的表达及意义。方法采用流式细胞术和定量PCR等技术测定42例慢性乙型肝炎(慢性乙型肝炎组)、30例乙型肝炎后肝硬化(肝硬化组)、30例肝癌(肝癌组)患者及30例健康对照(健康对照组)外周血CD8+T细胞表面的PD-1、Tim-3的表达量,并结合乙型肝炎病毒DNA载量、乙型肝炎e抗原和谷丙转氨酶等指标作综合分析。结果 CD8+T细胞PD-1、Tim-3的表达量在各组间表达量差异有统计学意义(P<0.05)。PD-1、Tim-3慢性乙型肝炎组高于其他3组(P<0.05,P<0.01);CD8+T细胞PD-1表达量与谷丙转氨酶含量(r=0.516,P<0.01)、乙型肝炎病毒DNA载量(r=0.582,P<0.01)均呈正相关;CD8+T细胞Tim-3的表达量与乙型肝炎病毒DNA载量也呈正相关(r=0.556,P<0.01);CD8+T细胞PD-1与Tim-3的表达量也呈正相关(r=0.506,P<0.01)。结论乙型肝炎病毒感染患者外周血CD8+T细胞PD-1、Tim-3的高表达与其免疫功能紊乱和慢性化病变发生发展密切相关,为临床抗病毒治疗及疗效观察提供新思路。

关键词：乙型肝炎病毒 CD8^+T细胞 PD-1 Tim-3 流式细胞术

基质金属蛋白酶组织抑制因子-1在2型糖尿病患者中的表达变化

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广东医学 2014年第6期35卷 888-890页

作者：赵春楠彭群新李艳萌王琳祁松楠顾国浩史进方苏州大学附属第一医院检验科江苏省临床免疫学重点实验室江苏苏州215000

目的探讨未发生并发症的2型糖尿病患者基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的变化及其与空腹血糖的关系。方法选取无并发症的2型糖尿病患者41例,门诊体检正常者30例为对照。采用实时荧光定量RT-PCR的方法检测外周血单个核细胞中TIMP-1... 详细信息

目的探讨未发生并发症的2型糖尿病患者基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的变化及其与空腹血糖的关系。方法选取无并发症的2型糖尿病患者41例,门诊体检正常者30例为对照。采用实时荧光定量RT-PCR的方法检测外周血单个核细胞中TIMP-1 mRNA的量,采用ELISA的方法检测血浆中TIMP-1的量。结果 (1)2型糖尿病患者外周血单个核细胞中TIMP-1 mRNA的表达量[(6.13±1.59)copies/mL]明显高于正常者[(5.29±1.56)copies/mL]。(2)2型糖尿病患者血浆中TIMP-1蛋白的表达量[(246 334.83±82 567.858)pg/mL]明显高于正常者[(105 498.00±21 554.324)pg/mL]。(3)2型糖尿病患者血浆中TIMP-1与空腹血糖呈负相关(r=-0.490 1,P<0.01)。结论无并发症的2型糖尿病患者TIMP-1无论是mRNA的表达量还是蛋白的表达量均较正常者偏高,并且血浆中蛋白的表达量与空腹血糖负相关。

关键词： 2型糖尿病基质金属蛋白酶组织抑制因子

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子表达量变化及其意义

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中华检验医学杂志 2014年第2期37卷 105-109页

作者：王琳赵春楠祁松楠彭群新史进方顾国浩江苏省临床免疫实验室苏州大学附属第一医院检验科 215006

目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子的表达量变化及其意义。方法临床病例对照研究。收集2012年10月至2013年11月在苏州大学附属第一医院感染科住院的慢性乙型肝炎患者82例，其中男50例，女32例，年龄（42．25±14... 详细信息

目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子的表达量变化及其意义。方法临床病例对照研究。收集2012年10月至2013年11月在苏州大学附属第一医院感染科住院的慢性乙型肝炎患者82例，其中男50例，女32例，年龄（42．25±14．22）岁，健康对照组30名来自本院预防保健科，其中男15例，女15例，年龄（42．32±3．74）岁；采用流式细胞术和定量PCR等技术测定慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面CD28、CTLA4、PD．1、Tim一3的表达、T淋巴细胞亚群（CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋），其中未经抗病毒及相关免疫治疗的有40例，经过抗病毒治疗有效的有30例，无效的12例，并结合HBV病毒载量、乙型肝炎e抗原和丙氨酸转氨酶等指标作综合分析。组间比较采用单因素方差分析和Kruskal—WallisH检验，两样本均数的比较采用t检验和Mann—WhitneyU检验，相关分析用Spearman＋S检验。结果CD4＋CD28＋组间表达量健康对照组最高[404．65（331．65—536．09）]，治疗无效组最低[277．15（249．90—344．25）]，差异有统计学意义（H=29．81，P〈0．001）；CD4＋PD一1＋组间表达量未治疗组最高[32．89（29．69～39．69）]，治疗无效组最低[19．26（11．90—20．56）]，差异有统计学意义（H=43．13，P〈0．001）；CD8＋PD．1＋组间表达量未治疗组最高[15．47（12．50～17．78）]，健康对照组最低[3．05（1．41～3．97）]，差异有统计学意义（H=56．60，P〈0．001）；CD4＋Tim-3＋组间表达量治疗无效组最高[199．62（55．61—239．45）]、健康对照组最低[70．62（53．88—112．32）]，差异有统计学意义（H=41．03，P〈0．001）；CD8＋Tim-3＋组间表达量未治疗组最高[82．50（78．69～84．58）]，健康对照组最低[3．07（1．56—6．87）]，差异有统计学意义（H=74．84，P〈0．001）；与低病毒载量组相比，治疗前CD8＋PD-1＋在高病毒载量组中的表达量[17．87（13．38—20．94）]升高，差异有统计学意义（U=25．00，P〈0．001），治疗后CD8＋PD-1＋在高病毒载量组中的表达量[16．95（5．39～18．27）]升高，差异有统计学意义（U=63．50，P〈0．001）；治疗后PD-1表达量与ALT也有明显的正相关性，其中CD4＋PD-1＋（r=0．689，P〈0．001）、CD8＋PD-1＋（r=0．751，P〈0．001）。结论在慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗过程中，可能伴随有CD28、PD．1、CTLA-4和Tim-3的异常表达。共刺激分子的检测可为临床合理治疗慢性乙肝提供新线索。（中华检验医学杂志，2014,37：105－109）

关键词：肝炎,乙型,慢性 T淋巴细胞抗原,CD28 CTLA-4抗原膜蛋白质类流式细胞术

非小细胞肺癌患者共刺激分子mRNA的表达及意义

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广东医学 2014年第16期35卷 2568-2571页

作者：祁松楠钱忠萍赵瑞珂凌晨王琳蒋敏史进方顾国浩吴静苏州大学附属第一医院检验科江苏苏州215006 江苏省盐城市妇幼保健院检验科 224002

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者共刺激分子CD28、细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、程序性死亡分子-1(PD-1)、程序性死亡配体-1(PD-L1)mRNA的表达及意义。方法采用Taqman探针实时荧光定量PCR方法检测50例NSCLC患者、30例肺良性疾病... 详细信息

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者共刺激分子CD28、细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、程序性死亡分子-1(PD-1)、程序性死亡配体-1(PD-L1)mRNA的表达及意义。方法采用Taqman探针实时荧光定量PCR方法检测50例NSCLC患者、30例肺良性疾病患者及50例健康人外周血共刺激分子CD28、CTLA-4、PD-1、PD-L1 mRNA的表达水平。结果与健康人相比,NSCLC及肺良性疾病患者CD28 mRNA表达显著降低(P0.05),与肺良性疾病患者相比,NSCLC患者4项指标差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ+Ⅳ期NSCLC患者CD28 mRNA表达低于Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.05),有淋巴结转移的NSCLC患者CD28 mRNA表达低于无淋巴结转移的患者,PD-1 mRNA表达高于无淋巴结转移的患者(P<0.05)。结论 NSCLC患者B7-CD28家族分子表达异常是其免疫功能紊乱和疾病恶化进展的重要原因。

关键词：共刺激分子非小细胞肺癌实时荧光定量PCR mRNA

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肺癌血清自身抗体及其应用的研究进展

国际检验医学杂志 2014年第18期35卷 2506-2509页

作者：祁松楠钱忠萍顾国浩蒋敏苏州大学附属第一医院检验科江苏苏州215000

肺癌是全球范围内发病率和病死率均较高的恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康。肺癌已成为男性恶性肿瘤中发病率占第1位的肿瘤，在所有癌症致死病例中，23％由肺癌引起［1］。肺癌的预后与诊断时的临床分期密切相关：0期肺癌患者术后5年... 详细信息

肺癌是全球范围内发病率和病死率均较高的恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康。肺癌已成为男性恶性肿瘤中发病率占第1位的肿瘤，在所有癌症致死病例中，23％由肺癌引起［1］。肺癌的预后与诊断时的临床分期密切相关：0期肺癌患者术后5年生存率可达90％以上，Ⅰ期为60％，Ⅱ～Ⅳ期患者则从40％下降至5％以下。肺癌早期多无特异临床症状，难以被察觉，大多数患者就诊时已处于疾病的晚期，失去了最佳治疗时期，出现症状而就诊的患者中80％已为Ⅲ、Ⅳ期而失去手术的机会［2］。因此肺癌的早期诊断至关重要。目前应用于临床的肺癌的诊断方法如X射线、CT、PET 等影像学方法缺乏特异性，只能作为辅助诊断指标，细胞学、组织病理学方法虽然可确诊，但取材难度大，无法用于大规模的人群筛查，一些常用的血清肿瘤标志物（如癌胚抗原、糖类抗原、细胞角蛋白、酶类等）灵敏度和特异度不够理想，诊断价值有限，因此寻找新的具有早期诊断价值的肺癌标志物成为癌症早期诊断的突破点。

关键词：肺癌自身抗体肿瘤相关抗原

非小细胞肺癌围手术期患者外周血T细胞PD-L1/PD-1的检测及其意义

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临床检验杂志 2015年第9期33卷 695-697页

作者：钱忠萍凌晨祁松楠韩清珍邱骏顾宗江张光波蒋敏顾国浩苏州大学附属第一医院检验科江苏苏州215000 江苏省临床免疫学研究所江苏苏州215000

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者围手术期外周血T细胞程序性死亡分子1/配体(PD-L1/PD-1)的表达水平及其临床意义。方法收集60例NSCLC患者手术前后及60例健康体检者外周血标本,流式细胞仪检测外周血T细胞CD4+PDL1+、CD8+PD-L1+、CD4+PD... 详细信息

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者围手术期外周血T细胞程序性死亡分子1/配体(PD-L1/PD-1)的表达水平及其临床意义。方法收集60例NSCLC患者手术前后及60例健康体检者外周血标本,流式细胞仪检测外周血T细胞CD4+PDL1+、CD8+PD-L1+、CD4+PD-1+、CD8+PD-1+的百分比。结果 NSCLC患者术前与健康对照组CD4+PD-L1+、CD8+PD-L1+、CD4+PD-1+、CD8+PD-1+T细胞的百分比(%)分别为(7.14±1.69 vs 4.99±1.14)、(4.56±0.40 vs 1.48±1.08)、(17.21±2.70 vs 14.30±2.92)、(13.31±3.16 vs 8.38±2.11),差异均有统计学意义(P均<0.05)。术后外周血NSCLC患者CD4+PD-L1+、CD8+PD-L1+、CD4+PD-1+、CD8+PD-1+T细胞的百分比(%)依次为(5.86±1.54)、(3.58±0.52)、(13.38±2.17)、(11.48±2.61),与术前比较均降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);且CD4+PD-L1+、CD8+PD-L1+、CD8+PD-1高于健康对照组(P均<0.05)。结论外周血T细胞中PD-L1/PD-1百分比与NSCLC进展有关,检测PD-L1/PD-1对NSCLC的诊疗和预后监测有一定的帮助。

关键词：流式细胞术程序性死亡分子1/配体非小细胞肺癌

迈瑞CAL8000血液分析流水线性能验证与评价

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世界最新医学信息文摘 2018年第99期 11-12+14页

作者：祁松楠郁佳佳董菁张丽张胜刘冬梅苏州大学附属第一医院

目的验证迈瑞CAL800血液分析流水线的系统性能,保证检验质量。方法参照WS/T405-2012标准、WS/T406-2012标准、CLSI的EP6标准对迈瑞CAL8000血液分析流水线的性能进行验证和评价。结果迈瑞CAL8000血液分析流水线的正确度、精密度、线性范... 详细信息

目的验证迈瑞CAL800血液分析流水线的系统性能,保证检验质量。方法参照WS/T405-2012标准、WS/T406-2012标准、CLSI的EP6标准对迈瑞CAL8000血液分析流水线的性能进行验证和评价。结果迈瑞CAL8000血液分析流水线的正确度、精密度、线性范围、参考区间、携带污染、本底计数、实验室内可比性、不同吸样模式的结果可比性均符合评价标准,验证通过。结论迈瑞CAL8000血液分析流水线各项性能符合预期要求,可用于临床检测。

关键词： CAL8000血液分析流水线性能验证评价

基于协同刺激分子表达量建立慢性HBV感染患者T淋巴细胞免疫功能评价新体系的研究

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中华临床感染病杂志 2014年第1期7卷 53-59页

作者：王琳赵春楠祁松楠彭群新史进方顾国浩苏州大学附属第一医院检验科 215006

目的探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者外周血T淋巴细胞CD28、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）、程序性死亡分子-1（PD-1）和T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（Tim-3）的表达及意义.方法连续收集2012年10月至2013年6月在... 详细信息

目的探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者外周血T淋巴细胞CD28、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）、程序性死亡分子-1（PD-1）和T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（Tim-3）的表达及意义.方法连续收集2012年10月至2013年6月在苏州大学附属第一医院住院的慢性HBV感染患者102例,其中慢性乙型肝炎（CHB） 42例,乙型肝炎肝硬化30例,肝癌30例.另选30名健康体检者作为对照组.采用流式细胞术和定量聚合酶链反应（PCR）技术测定所有研究对象外周血T淋巴细胞表面CD28、CTLA-4、PD-1和Tim-3的表达量,并采用单因素方差分析和LSD-t检验比较各组间的差异.采用Spearman秩相关分析外周血T淋巴细胞表面CD28、CTLA-4、PD-1和Tim-3的表达量与HBV DNA载量、乙型肝炎e抗原（HBeAg）和丙氨酸转氨酶（ALT）之间的相关性.结果慢性HBV感染患者CD4＋ CD28＋、CD8＋ CD28＋和CD4＋ CTLA-4＋的表达均低于健康对照人群,其中肝癌组的CD4＋ CD28＋表达量低于CHB组（t=2.373,P＜0.05）,肝硬化和肝癌组的CD8＋CD28＋表达量低于CHB组（t=4.324和4.088,P＜0.01）.CHB组CD8＋ PD-1＋、CD4＋ Tim-3＋和CD8＋ Tim-3＋的表达量高于肝硬化、肝癌以及健康对照组（t=3.051,3.130,3.121,3.254和3.723,P＜0.01）.相关性分析显示,CD8＋T淋巴细胞PD-1表达量与ALT水平、HBV DNA载量呈正相关（r=0.516和0.582,P＜0.01）;CD8＋T淋巴细胞Tim-3的表达量与ALT水平、HBV DNA载量也呈正相关（r=0.578和0.556,P＜0.01）.此外,CD8＋T淋巴细胞PD-1与Tim-3的表达量也呈一定的正相关（r =0.506,P＜0.01）.结论 HBV感染患者外周血T淋巴细胞表面分子异常表达与其免疫功能紊乱和疾病慢性化的发生和发展相关.

关键词：肝炎病毒,乙型 T淋巴细胞 CD28 细胞毒T淋巴细胞相关抗原4 程序性死亡分子-1 T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3

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围绝经期妇女PD-1的表达及意义

中国医药科学 2015年第9期5卷 13-16,57页

作者：吴静王琳凌晨祁松楠赵瑞珂顾国浩江苏省盐城市妇幼保健院检验科江苏盐城224002 苏州大学附属第一医院检验科江苏苏州215006

目的探讨围绝经期妇女外周血单个核细胞共刺激分子PD-1m RNA和T细胞表面PD-1分子的表达和意义。方法采用Taqman探针实时荧光定量PCR法、流式细胞术检测70例围绝经期、40例绝经后期和30例育龄期组外周血单个核细胞PD-1m RNA的表达。结果 ... 详细信息

目的探讨围绝经期妇女外周血单个核细胞共刺激分子PD-1m RNA和T细胞表面PD-1分子的表达和意义。方法采用Taqman探针实时荧光定量PCR法、流式细胞术检测70例围绝经期、40例绝经后期和30例育龄期组外周血单个核细胞PD-1m RNA的表达。结果 PD-1m RNA的表达在三组间比较差异有统计学意义(P<0.05),与育龄期组相比,围绝经期组及绝经后期组PD-1m RNA表达量均显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);T细胞表面PD-1的表达在三组间比较差异有统计学意义(P<0.05),围绝经期及绝经后期组CD4+T细胞和CD8+T细胞的PD-1水平低于育龄期组(P<0.05)。结论共刺激分子PD-1的异常表达可能与围绝经期妇女免疫功能失调有关。

关键词：围绝经期实时荧光定量PCR 流式细胞术免疫功能 PD-1