检索结果-南通市图书馆

作者：牛碧玲兰州大学

学位级别：硕士

本文以女性主义电影理论为依据,选择二十一世纪以来中国女导演的电影进行分析。首先是从中国女性导演整个历时性的发展中,探寻进入21世纪以来女性导演的电影创作所发生的一些改变。其次是选取某些具有明显女性电影特色的影片进行文本细... 详细信息

本文以女性主义电影理论为依据,选择二十一世纪以来中国女导演的电影进行分析。首先是从中国女性导演整个历时性的发展中,探寻进入21世纪以来女性导演的电影创作所发生的一些改变。其次是选取某些具有明显女性电影特色的影片进行文本细读,主要是从两个大的方面,第一是对于影片内容的女性主义解读。在对影片中塑造的女性形象以及女性独特心理和精神的深入挖掘中,探寻电影中的女性意识和女性因素。其次是有关电影语言的分析,即在电影中,女性导演如何运用电影表现女性意识,对电影语言进行性别化的读解。最后是将女性导演的主流商业电影创作与女性电影创作进行比较,凸显出女性导演在主流电影中对于女性意识的妥协与退让。本文主要分为四个章节,以求展示21世纪以来的中国女性导演的女性电影在女性形象、女性视角、女性镜头语言等方面所绽放出来的炫丽光芒。分析得出了在商业化和主流意识形态的双重制约下,女性导演必须做到共赢才能拥有更大的市场的结论。第一章论述了女性的存在以及女性电影理论的发展流变。第二章从历时性方向对中国电影上出现过的女性导演进行梳理,概述她们的主要作品在影片内容和电影语言的运用等方面的不同追求,以及作品中呈现出来的女性意识。沿用的是代际划分的方法,从整体上把握女性导演创作群体的创作特点。对于21世纪以来的女性导演的创作特色从对于导演权力的争取、女性私人化经验的表述和类型片的僭越三个方面进行做了大致的宏观的归纳。第三章从叙事角度入手,对现代女性形象和女性情谊的精确、细腻的把握来对女性电影中表现出的女性新叙事视角进行分析。第四章分析女性电影对于传统电影语言的批判,通过对镜头语言的女性化解读,解析出女性电影特有的电影语言。结语中对主流商业电影类型中的女导演的创作进行分析,凸显女性导演在商业电影中对于女性意识的坚守与妥协。通过与女性导演商业电影的比较,针对消费时代的女性电影创作提出一些思考。

关键词： 21世纪女性导演女性主义电影理论

青少年非自杀性自伤的访谈与干预研究——基于获益与阻碍模型

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青少年非自杀性自伤的访谈与干预研究——基于获益与阻碍模型

作者：秦碧雯华中师范大学

学位级别：硕士

非自杀性自伤(Non-suicidal self-injury,NSSI,以下简称自伤),是指个体故意伤害自己的身体,主要形式包括抓挠、割伤皮肤、揪扯头发和击打自己等,个体伤害自己的行为没有自杀意图,且不被社会所认可。青少年是自伤行为的高发人群,在青少... 详细信息

非自杀性自伤(Non-suicidal self-injury,NSSI,以下简称自伤),是指个体故意伤害自己的身体,主要形式包括抓挠、割伤皮肤、揪扯头发和击打自己等,个体伤害自己的行为没有自杀意图,且不被社会所认可。青少年是自伤行为的高发人群,在青少年人群中,有过自伤史的比率高达30%～40%(王玉龙,覃雅兰,肖璨,蔺秀云,2016)。约50%实施自伤行为的人很少或不再自伤,50%会重复高频地自伤。因此,如何科学预测青少年的自伤行为,并进行有效的干预是摆在研究者面前重要的实践问题。本研究旨在探究青少年持续和停止自伤的预测性因素,并对持续自伤的青少年进行心理辅导干预。研究一为青少年自伤持续和停止预测性因素的质性研究。选取18名实施过自伤的青少年和在青春期自伤过的大学生进行访谈,运用三级编码对全部访谈文本资料编码与分析,扎根于原始资料,建构青少年自伤行为持续和停止的预测性因素理论。结果表明,青少年持续自伤的预测性因素可以划分为3个方面:自伤的功能、消极自我概念和环境因素。自伤的功能包括情绪调节、人际影响、惩罚自己、对抗自杀、对抗解离、体验回避;消极自我概念分别为消极学业自我概念、消极身体自我概念、消极社会自我概念、消极心理自我概念;环境因素包括家庭环境因素、学校环境因素。停止自伤的预测性因素包括4个方面:环境因素、积极的自我概念、对自伤的态度和希望感。环境因素分为家庭支持、同伴支持、老师支持三个方面;积极的自我概念包括积极的学业自我概念、积极的身体自我概念、积极的心理自我概念、积极的社会自我概念;对自伤的态度有避免疼痛和对自伤的消极评价;希望感包括未来目标的确定和追求目标的动力。研究一中发现自我概念对青少年持续和停止自伤均有影响,消极的自我评价是青少年反复自伤的预测性因素,相反,积极的自我概念是停止自伤的预测性因素,因此研究二采用焦点解决短程治疗(SFBT),对自伤青少年的自我概念水平进行干预,将研究一中的12名青少年随机分配6名至干预组,6名至等待组,当实验组进行SFBT干预的时候,等待组进行音乐放松治疗,采用《Wallace自我概念量表》对自我概念水平进行前后测。结果显示,参与SFBT干预后的6位自伤青少年自我概念水平得到了显著的提高,参与SFBT干预的被试与参与音乐放松治疗的被试自我概念水平的后测存在着显著性差异,并且参与SFBT干预的被试自我概念水平变化比参与音乐放松治疗的被试自我概念水平变化大,这说明SFBT的心理干预方式能有效提高自伤青少年的自我概念水平,预防自伤的再次发生。本研究探究了青少年非自杀性自伤持续和停止的预测性因素,发现了自我概念的重要影响作用,并采用焦点解决短程治疗干预方法有效提高了自伤青少年的积极自我概念,为自伤青少年的干预提供了新的视角。

关键词：非自杀性自伤青少年自我概念预测因素

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唐代私学教育研究

唐代私学教育研究

作者：高碧英四川师范大学

学位级别：硕士

从孔子秉承“有教无类”的原则创办私学,打破“学在官府”的传统以来,私学开始成为中国古代教育体系不可缺少的组成部分,为历代士子实现“学而优则仕”的梦想提供了平台。但隋唐以前的察举制、九品中正制等选士制度,从制度上确保了特权... 详细信息

从孔子秉承“有教无类”的原则创办私学,打破“学在官府”的传统以来,私学开始成为中国古代教育体系不可缺少的组成部分,为历代士子实现“学而优则仕”的梦想提供了平台。但隋唐以前的察举制、九品中正制等选士制度,从制度上确保了特权阶级垄断仕途,私学由于缺乏相应的政治资源和经济基础而举步维艰。隋唐以后,随着科举取仕的实行以及科举考试制度的日臻完善,门阀观念逐渐被打破,庶族平民通过私学途径也可由科考而获得入仕的资格,上升通道逐渐畅通,必然带来唐代私学的发展。唐时大土地庄园经济的发展,也为私学的成长提供了必要的经济基础。唐代私学的教育形式灵活多样,家学教育、私塾教育、乡村学校教育、习业山林寺院、私人讲学五种类型皆各具特色。家学、私塾以及乡村学校教育以蒙学教育为主,构成了唐代私学教育的基础教育部分。习业山林寺院和私人讲学则主要以科考内容为主,属于高级教育。这种多样化的教学方式,给出身于不同阶层的求学者提供了不同层次的教育资源,为他们完成学业创造了更多的机会。唐代私学教育与官学相辅相成,呈现出内容的丰富性、形式的多样性、参与者的广泛性以及发展历程的阶段性等特点。唐代的私学教育在科举制的推动下,使不同社会阶层的人才进入了统治集团,扩大了统治基础,有助于国家政权的稳定和社会的安定。同时私学也推动了教育的普及化和学术文化的传播,对唐代及其以后的教育文化事业产生了深远的影响。

关键词：唐代教育私学家学

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预应力管桩竖向承载力模糊可靠性分析研究

预应力管桩竖向承载力模糊可靠性分析研究

作者：赖碧涛广东工业大学

学位级别：硕士

预应力管桩是预制混凝土桩体和岩土体共同作用的系统,影响其工作性能的因素很多,破坏模式复杂,进行桩基概率极限状态设计与模糊概率极限状态设计方法的研究是一项具有重要意义而较艰巨的任务和工作。本文分析了预应力管桩的特点、适用... 详细信息

预应力管桩是预制混凝土桩体和岩土体共同作用的系统,影响其工作性能的因素很多,破坏模式复杂,进行桩基概率极限状态设计与模糊概率极限状态设计方法的研究是一项具有重要意义而较艰巨的任务和工作。本文分析了预应力管桩的特点、适用的地质条件,并对现行规范在计算预应力管桩的竖向承载力所采用的安全系数法的特点与不足进行了讨论分析。在此基础上,采用数理统计的方法,结合桩的荷载传递机理,应用高应变法测桩的大量数据作为统计的基础,对现行预应力管桩桩规范中有关预制桩的竖向荷载的计算方法及公式进行分析和改进。一方面,本文应用了可靠性理论分析的方法,确定了预应力管桩的可靠度指标β,并提出了预应力管桩竖向承载力的总抗力分项系数,侧摩阻力分项系数和桩端阻力分项系数。另一方面,本文将模糊可靠性分析方法引入及应用于该类问题,确定了预应力管桩的模糊可靠度指标(?),并在此基础上提出了预应力管桩竖向承载力的总抗力分项系数,侧摩阻力分项系数和桩端阻力分项系数。同时建立了预应力管桩的竖向承载力的计算表达式,为今后规范的修正和同类型桩的单桩竖向承载力的设计提供了参考。最后,本文利用具有代表性的数根混凝土预应力管桩的静荷载试验结果,与本文基于可靠性理论建立的预应力管桩竖向承载力理论公式、基于模糊可靠性理论建立的竖向承载力理论公式、规范公式的结果进行了比较、检验;结果表明,本文的理论结果与实测结果较为接近。

关键词：预应力管桩竖向承载力模糊随机可靠度分项系数比较分析

利用三条直线投影的极点极线关系标定中心折反射摄像机

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利用三条直线投影的极点极线关系标定中心折反射摄像机

作者：郑碧辉云南大学

学位级别：硕士

摄像机标定在三维重建、图像的深度信息提取、虚拟视图的合成、实时定位与地图构建等方面是不可缺少的重要步骤.中心折反射摄像机与普通摄像机相比具有较大的成像视野,在工业方面的应用价值也越来越突出.因此中心折反射摄像机标定有重... 详细信息

摄像机标定在三维重建、图像的深度信息提取、虚拟视图的合成、实时定位与地图构建等方面是不可缺少的重要步骤.中心折反射摄像机与普通摄像机相比具有较大的成像视野,在工业方面的应用价值也越来越突出.因此中心折反射摄像机标定有重要的研究意义和应用价值.本文通过分析空间中不同位置关系的三条直线在中心折反射摄像机下的成像性质,提出了三种算法获取正交消失点或圆环点的像,完成摄像机内参数的标定.在中心折反射摄像机下,空间中三条非平行直线通过单位视球的球心投影到单位视球球面上,形成以单位视球球心为圆心的三个大圆.每两个大圆相交于单位视球上的一对对拓点,三个大圆两两相交,每个大圆上有两对对拓点,进而可以获得两个无穷远点,无穷远点关于圆的极线方向的无穷远点与该无穷远点正交.根据射影变换下的仿射不变性,在像平面上会得到两组正交消失点和一条消失线.线像与消失线的交点为圆环点的像.三条直线的像可获得六组正交消失点和三组圆环点的像.根据正交消失点或圆环点的像与绝对二次曲线的像的约束关系,完成摄像机内参数的标定.空间中交于一点的三条直线在单位视球上形成三个交于一对对拓点的大圆.由射影变换下的仿射不变性,在像平面上可以获得三个消失点.根据代数射影几何中,线像与消失点对绝对二次曲线的像的约束关系完成摄像机内参数的标定.通过大量的仿真实验和真实实验验证本文算法的有效性.在真实实验中进行了重投影误差分布和三维重构实验,结果表明本文的算法具有较强的鲁棒性.

关键词：中心折反射摄像机正交消失点圆环点的像绝对二次曲线的像极点极线

Agrin/MuSK信号通路在脓毒症致大鼠骨骼肌烟碱型乙酰胆碱受体异化重构中的作用

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Agrin/MuSK信号通路在脓毒症致大鼠骨骼肌烟碱型乙酰胆碱受体异化...

作者：吕碧霄重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:研究脓毒症情况下大鼠产生骨骼肌功能障碍,以及神经肌肉接头(neuromuscular junction,NMJ)突触后膜上烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,n ACh R)产生异化重构现象的机制,验证聚集蛋白agrin通过影响agrin/Mu SK... 详细信息

目的:研究脓毒症情况下大鼠产生骨骼肌功能障碍,以及神经肌肉接头(neuromuscular junction,NMJ)突触后膜上烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,n ACh R)产生异化重构现象的机制,验证聚集蛋白agrin通过影响agrin/Mu SK(muscle-specific kinase,Mu SK)信号通路改善乙酰胆碱受体异化重构的现象并减轻神经肌肉功能障碍。方法:选取2-3月龄健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,体重250-280g。采用随机数字表法将大鼠分为3组,每组各12只大鼠,即对照组(Control组),假手术组(Sham组)和脓毒症组(CLP组)。脓毒症组采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)术建立脓毒症模型,假手术组仅暴露腹腔并探查后逐层缝合,建模后24 h进行相应检测以及取材。采用ELISA法检测大鼠血浆中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平来反映体内炎症状态;采用复合肌肉动作电位(compound muscle action potential,CMAP)衡量神经肌肉功能,测量其振幅、持续时间、潜伏期以及神经肌肉传导速度;通过免疫荧光法观测γ-n ACh R和α7-n ACh R在大鼠胫前肌表面分布情况;采用q RT-PCR检测大鼠胫前肌内烟碱型乙酰胆碱受体γ亚基和α7亚基的转录水平;采用western blot法测定大鼠胫前肌中agrin、Mu SK、rapsyn、γ-n ACh R、α7-n ACh R和ε-n AChR的蛋白表达量。另取相同月龄及体重的SD大鼠24只,建立脓毒症模型后分为2组,即生理盐水组(CLP+S)和agrin组(CLP+A)。在建模后立即给予0.1 ml agrin蛋白溶液(100μg/ml)双侧胫前肌内注射,生理盐水组则注射等体积的生理盐水。两组在建模24 h后采用与第一部分相同的方法进行检测相同指标。结果:第一部分(1)大鼠血浆中炎症因子的比较:与Control组和Sham组相比,CLP组IL-6和TNF-α的表达水平明显提升,其差异有统计学意义(P0.05)。(2)CMAP相关检测指标的比较:与生理盐水组相比,CLP+A组大鼠CMAP振幅和神经传导速度增加,而其持续时间和潜伏期缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)免疫荧光法检测大鼠胫前肌γ-n ACh R和α7-n ACh R的分布表达:与生理盐水组相比,CLP+A组大鼠胫前肌组织中γ-n ACh R和α7-n ACh R的荧光表达降低,分布减少。(4)γ亚基和α7亚基转录水平的比较:与生理盐水组相比,CLP+A组大鼠胫前肌组织中Chrng和Chrna7基因的转录水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)各项蛋白表达情况的比较:与生理盐水组相比,CLP+A组大鼠胫前肌组织中γ-n ACh R、α7-n ACh R和ε-n ACh R的蛋白表达量降低,agrin的蛋白含量上升,Mu SK和rapsyn表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)脓毒症情况下大鼠骨骼肌异常的agrin/Mu SK信号通路改变,可能与神经肌肉功能障碍以及烟碱型乙酰胆碱受体异化重构有关。(2)给予大鼠神经源性agrin可以通过调节其相关信号通路减少骨骼肌异质化乙酰胆碱受体的表达及相关亚基的转录,并减轻神经肌

关键词：脓毒症烟碱型乙酰胆碱受体神经肌肉功能聚集蛋白

浙江省制造业出口贸易二元边际结构及影响因素研究

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浙江省制造业出口贸易二元边际结构及影响因素研究

作者：熊碧霞海南大学

学位级别：硕士

自从我国加入世贸组织以来,浙江省的出口贸易额随之不断增加。制造业作为浙江省的支柱性产业之一,其地位在外贸中举足轻重,其出口量的增加不仅体现了浙江省经济结构的变化,还象征着浙江省强大的经济综合实力水平。在经济高速发展的进程... 详细信息

自从我国加入世贸组织以来,浙江省的出口贸易额随之不断增加。制造业作为浙江省的支柱性产业之一,其地位在外贸中举足轻重,其出口量的增加不仅体现了浙江省经济结构的变化,还象征着浙江省强大的经济综合实力水平。在经济高速发展的进程中,浙江省制造业出口的产品遇到的问题也十分值得关注和思考。2008年金融危机的爆发对浙江省经济造成的影响充分显示了浙江省工业制成品出口的不稳定性。在此背景下,加快转变浙江省贸易的增长方式十分重要,并成为区域经济学研究的新热点。新--新贸易理论为我们从微观视角分析浙江省制造业出口增长的路径提供了理论基础。本文的主体思路是采用理论与实证相结合的方法来研究浙江省制造业出口增长的内部微观结构及影响因素,以期为推动制造业产品出口的快速,稳健增长找到有效的路径。首先,在对文献回顾和详细研究的基础上,主要从三个方向进行分析:二元边际对贸易增长的贡献,二元边际的影响因素和贸易的福利获得。文献的不断完善为以后的学者研究提供了更广阔的视角,国内对二元边际的研究还处于早期阶段,在这一领域仍然有较大的研究空间和价值。但以往的文献对某一省份的研究相对较少,区域性的研究还未涉足。因此,本文尝试将浙江省的制造业出口问题和二元边际找到契合点,从新一新贸易理论的角度对制造业产品的出口问题进行定性与定量的分析。其次,本文介绍了二元边际的测算方法并分析了有关出口增长的二元边际。文章采用Hummels和Klenow(2005)的分解方法客观分析了浙江省制造业出口产品的二元边际情况,主要从产品和企业两个方面进行分解。一方面从产品角度进行分解,找出了浙江省制造业出口的主要产品,分析得出影响浙江省制造业出口的主要因素是集约边际,扩展边际几乎没有影响。第二个方面是从企业的角度来分析浙江省制造业产品的出口情况,从选取的30个行业可以得出,影响浙江省制造业出口的主要因素是集约边际,扩展边际的作用较小。本文的实证部分对浙江省制造业出口的二元边际的影响因素进行了分析,主要借鉴Kancs(2007)的理论框架并结合中国的实际情况,采用面板数据进行实证研究,考察了出口市场规模,贸易成本,生产率,外商直接投资等因素对二元边际的影响机制,结果显示影响二元边际的因素有所不同,说明政策的制定也应当有着不同的倾向性。最后,本文根据研究结果提出了促进浙江省制造业出口增长二元边际的均衡增长的若干建议政策,主要包括提高技术进步,实行市场多元化战略,发挥外商直接投资的效应,降低出口的贸易成本,提高研发投入的促进作用和加快产品向以质取胜的方向转变等。

关键词：制造业二元边际影响因素

生酮饮食改善db/db小鼠认知功能障碍的分子机制研究

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生酮饮食改善db/db小鼠认知功能障碍的分子机制研究

作者：严碧莹武汉体育学院

学位级别：硕士

研究目的:通过观察生酮饮食(Ketogenic diet,KD)干预糖尿病小鼠认知障碍改善的效果,探讨其可能的分子机制,为KD在糖尿病认知障碍(Diabetes cognitive impairment,DCI)的临床应用推广提供理论基础。研究方法:36只8周龄雄性SPF级小鼠,分别... 详细信息

研究目的:通过观察生酮饮食(Ketogenic diet,KD)干预糖尿病小鼠认知障碍改善的效果,探讨其可能的分子机制,为KD在糖尿病认知障碍(Diabetes cognitive impairment,DCI)的临床应用推广提供理论基础。研究方法:36只8周龄雄性SPF级小鼠,分别为12只野生型m/m小鼠和24只db/db小鼠。适应性喂养一周后,共分成3个组,每组12只,m/m小鼠作正常对照组(MA组),db/db小鼠分为实验对照组(DA组)和KD干预组(DS组)。MA组和DA组作常规饲养,DS组使用生酮饲料喂养,生酮饲料配比为:70%椰子油、20%酪蛋白、5.5%纤维素和4.5%预混料,共干预8周。期间每周测一次体重和空腹血糖,每两周测一次血酮。8周之后,对三组小鼠的认知能力进行检测,以自发活动和新物体识别实验来检测三组小鼠的自主探究行为和非空间短时间记忆力,以定向导航和空间探索实验来验检测三组小鼠的空间学习和记忆能力。每组取3只实验小鼠用4%多聚甲醛进行心脏灌注,灌注固定完成后取全脑,用HE染色观察海马组织锥体细胞的排列,用免疫荧光检测海马组织β-淀粉样蛋白(Amyloidβ-protein,Aβ)、小胶质细胞标记物“离子钙接头蛋白(Ionized calcium binding adaptor molecule-1,Iba-1)”、星形胶质细胞标记物“胶质纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary Acidic Protein,GFAP)”的荧光强度。剩余9只小鼠处死取材,用Western blot检测海马组织晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end-product,AGE)、糖基化终产物受体(Receptor for advanced glycation end-products,RAGE)、核转录因子κB(Nuclear Factor-κB,NF-κB)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白的表达。研究结果:1.一般指标体重:组内比较,三组小鼠8周时的体重相较于0周时均显著增高(P<0.01或P<0.001);组间比较,0周时,MA组体重显著低于DA组(P<0.001),DS组与DA组之间无显著差异,8周时,MA组和DS组体重均显著低于DA组(P<0.01或P<0.001)。空腹血糖:组内比较,MA组8周相较于0周时无显著差异,DA组8周相较于0周时显著增高(P<0.05),DS组8周相较于0周显著降低(P<0.01);组间比较,0周时,MA组空腹血糖显著低于DA组(P<0.001),DS组与DA之间无显著差异,8周时,MA和DS组空腹血糖均显著低于DA组(P<0.001)。血酮:组内比较,DA组各周与0周相比较均无显著差异,DS组各周与0周相比均有显著增长(P<0.01或P<0.001)。且DA组小鼠各周的血酮值均处于正常值,DS组小鼠各周的血酮值均处在营养性酮症的范围。2.认知能力自发活动:MA组和DS组的活动时间百分比显著多于DA组(P<0.01或P<0.001)。新物体识别:MA组和DS组新物体探索时间百分比显著多于DA组(P<0.05)。定向导航:随着训练的进行,三组小鼠的逃避潜伏期依次降低。组间比较,4天的定向导航测试中,MA组和DS组的逃避潜伏期均显著低于DA组(P<0.01或P<0.001)。空间探索:在空间探索实验中,对三组小鼠的游泳速度、目标象限探索时间百分比、穿越平台次数进行统计比较,MA组各项指标均显著高于DA组(P<0.05或P<0.001),DS组的游泳速度、目标象限探索时间百分比均显著高于DA组(P<0.05),穿越平台次数也稍高。3.形态学指标HE染色结果:DA组海马CA1区锥体细胞排列松散、紊乱,细胞层次变少,细胞核大小不均。MA组和DS组锥体细胞排列整齐、紧密,细胞层数较多,细胞核大小匀称。对同一视野的椎体细胞个数进行统计,MA和DS组的锥体细胞个数显著多于DA组(P<0.05)。免疫荧光结果:Aβ荧光强度结果:MA组和DS组的Aβ的表达显著较低于DA组(P<0.001)。Iba-1荧光强度结果:MA组和DS组的Iba-1的表达显著低于DA组(P<0.001)。GFAP荧光强度结果:MA组和DS组的GFAP的表达显著低于DA组(P<0.01或P<0.001)。4.海马组织Western Blot指标:AGE蛋白表达结果:MA组和DS组的AGE蛋白表达的灰度值显著低于DA组(P<0.05或P<0.01)。RAGE蛋白表达结果:MA组和DS组的RAGE蛋白表达的灰度值显著低于DA组(P<0.001)。NF-κB蛋白表达结果:MA组和DS组的NF-κB蛋白表达

关键词：糖尿病认知障碍生酮饮食 AGEs 神经炎症

Akkermansia muciniphila源β-半乳糖若酶基因的克隆表达及酶学性质研究

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Akkermansia muciniphila源β-半乳糖若酶基因的克隆表达及酶学性...

作者：郭碧珊南京农业大学

学位级别：硕士

β…半乳糖苷酶属于外切糖苷酶,能够将半乳糖基从糖复合物的非还原性末端切割下来,释放出游离半乳糖,是用于糖链结构解析的一种重要工具酶。现有的β-半乳糖苷酶来源不够广泛且缺乏足够的底物特异性,不能满足糖生物学的发展需要,因此需... 详细信息

β…半乳糖苷酶属于外切糖苷酶,能够将半乳糖基从糖复合物的非还原性末端切割下来,释放出游离半乳糖,是用于糖链结构解析的一种重要工具酶。现有的β-半乳糖苷酶来源不够广泛且缺乏足够的底物特异性,不能满足糖生物学的发展需要,因此需要寻找新的具有特殊功能的半乳糖苷酶。Akkermansia muciniphila是来自人体肠道黏膜的革兰氏阴性严格厌氧菌,以前的研究中还没有关于该菌能够表达β-半乳糖苷酶的报道。本研究利用生物信息学技术,从Akkermansia muciniphila源中挖掘出一种新型的β-半乳糖苷酶基因,对其进行基因克隆、表达载体的构建以及体外重组表达后获得了重组β-半乳糖苷酶基因,并对其酶学特性和底物特异性进行了研究。1.以Akkermansia muciniphila源的基因组DNA为模板,克隆,获得编码β-半乳糖苷酶的基因AmBGa10874。通过重组质粒及表达载体的构建等步骤将克隆完成得到的重组β-半乳糖苷酶基因转到大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达,然后通过镍亲和层析柱对重组β-半乳糖苷酶进行纯化。利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对重组酶的表达和纯化效果进行检测,并利用底物4-甲基伞形-β-半乳糖（4MU-β-Gal）显色反应对酶活性进行检测,结果表明获得了纯度较高且具有活性的重组β-半乳糖苷酶。2.为了确定重组β-半乳糖苷酶的活性及底物特异性,用酶标仪方法检测10种不同的经pNP衍生得到的糖底物（pNP-α/β-半乳糖,pNP-α/β-岩藻糖,pNP-α/β-甘露糖,pNP-α/β-葡萄糖,pNP-a/β-N-乙醜葡糖胺）,结果表明重组β-半乳糖苷酶只能水解pNP-ββ-半乳糖,对pNP-β-半乳糖具有专一性。而酶的生化特性研究表明:酶AmBGa10874的最适温度为45℃;最适pH为3.5;不依赖金属离子,镁离子能够降低酶的活性,其它的金属离子和EDTA对酶活性没有抑制作用;SDS对酶活性抑制作用最强,几乎0.1%（V/V）的SDS就使酶几乎完全失活,而其它表面活性剂对酶活性几乎没有抑制作用。酶的比活力为83.33 mU/mg,Km值为1.73 mM,最大反应速率为 0.54 μmol/min/mg。3.利用不同连接键型的O-链及N-链寡糖标品对重组β-半乳糖苷酶的底物特异性进行检测。结果表明:酶AmBGal0874能够水解各种底物非还原性末端的β1,3-和β1,6-连接的半乳糖,对β1,4-键连接的半乳糖的水解效率极低甚至可以忽略不计。对于连接键型相同但相邻糖分子不同的底物的水解效率也有很大差别,说明部分糖苷配体的不同也会极大影响酶对其的水解活性。综上所述,本研究成功克隆了Akkermansia muciniphila源的新型β-半乳糖苷酶基因并在大肠杆菌中实现了异源重组表达。它是第一个从人体肠道黏膜中分离出来并被定性的酶。该酶具有较强的温度耐受性且反应的pH环境偏酸性,扩大了应用条件范围,丰富了β-半乳糖苷酶基因的研究库。同时,该β-半乳糖苷酶具有强大的水解能力和特殊的底物连接位点以及键型特异性,能够高效水解各种寡糖底物非还原性末端的β1,3-和β1,6-连接的半乳糖,为糖生物学研究提供了一种重要的工具酶,具有极大的潜在利用价值。

关键词： β-半乳糖苷酶 Akkermansia muciniphila 生化特性底物特异性

公安机关办理涉正当防卫案件法律认识误区研究

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公安机关办理涉正当防卫案件法律认识误区研究

作者：姚碧娇山西大学

学位级别：硕士

正当防卫制度是我国刑法的重要组成部分,是公民面对不法侵害时行使防卫权的法律依据,这在打击违法犯罪方面的作用是不可替代的。公安机关作为刑事案件的侦查机关,在刑事司法案件的开端全面正确认定正当防卫,确保节约司法资源、保障公民... 详细信息

正当防卫制度是我国刑法的重要组成部分,是公民面对不法侵害时行使防卫权的法律依据,这在打击违法犯罪方面的作用是不可替代的。公安机关作为刑事案件的侦查机关,在刑事司法案件的开端全面正确认定正当防卫,确保节约司法资源、保障公民权利、提高公安机关执法公信力的目标能够实现。笔者作为一名人民警察,通过对最高人民检察院和最高人民法院发布的指导性案例和典型案例的分析,对所在公安分局2019年至2021年案件办理数据的统计,发现公安机关办理涉正当防卫案件的现状不容乐观。公安机关办理涉正当防卫案件现状不容乐观的一个重要原因是对正当防卫制度存在法律认识误区,本文力求探究法律认识误区出现的原因,并着力找到走出法律认识误区的解决路径。本文除引言和结论外,由以下三部分组成:第一部分是公安机关办理涉正当防卫案件存在的法律认识误区的表现,主要有三方面。对“防卫起因”的狭义性认识包括对“不法侵害”范围的认识和对“紧迫性”的认识;对“防卫时间”的点性认识包括对“正在进行”的认识和对“持续性”的认识;对“防卫限度”的同情性认识包括对损害结果的认识和对“唯结果论”的盲目信赖。第二部分是公安机关办理涉正当防卫案件法律认识误区出现的原因,主要表现为:法条具有抽象性的特征以及不同的法律解释者学历、经历等情况的不同会出现不同的理论和观点;公安机关在案件办理过程中重结果轻意图、重行为轻过程与公安机关的性质密切相关,是惩罚与保护的失衡性的表现;加之正当防卫适用要求的“严格性”,使得公安机关在办理涉正当防卫案件时出现了法律认识误区,未能全面正确的认定正当防卫。第三部分是公安机关走出办理涉正当防卫案件法律认识误区的解决路径,主要有:要在证据和事实的前提下,以正义为基础,正确运用法律解释权;要正确适用正当防卫的条件;要强化内外部监督机制,公安机关内部法制和纪检部门要发挥作用;检察院、媒体界、法学界、当事人等的外部监督也必不可少;要在将“误判特权”理论引入到正当防卫的认定中、纠正“唯结果论”的基础上建立“防卫人豁免权”理念,促进正当防卫制度的发展和进步。

关键词：公安机关正当防卫法律认识误区路径