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miR-4286靶向FOXO4对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响

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中国免疫学杂志 2021年第8期37卷 958-963页

作者：赵敏厉永强石贞玉河南大学淮河医院呼吸与危重症医学科开封475000 河南大学基础医学院开封475000 河南大学医学院开封475000

目的:探讨miR-4286靶向FOXO4对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:实时荧光定量PCR(RTqPCR)检测肺癌组织和与其对应的癌旁组织中miR-4286和FOXO4 mRNA的表达。将miR-4286抑制物(anti-miR-4286)转染至肺癌A549细胞,CCK-8、克... 详细信息

目的:探讨miR-4286靶向FOXO4对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:实时荧光定量PCR(RTqPCR)检测肺癌组织和与其对应的癌旁组织中miR-4286和FOXO4 mRNA的表达。将miR-4286抑制物(anti-miR-4286)转染至肺癌A549细胞,CCK-8、克隆形成实验、流式细胞术、Transwell、Western blot分别检测抑制miR-4286表达对A549细胞存活、克隆形成、凋亡、迁移侵袭及P21、Caspase-3、E-cadherin和MMP-2表达的影响。荧光素酶报告基因实验及Western blot验证miR-4286对FOXO4的靶向调控关系。结果:肺癌组织中miR-4286的表达较癌旁组织显著升高,FOXO4 mRNA的表达较癌旁组织显著降低(P<0.05)。抑制miR-4286表达后A549细胞的存活率、克隆形成及迁移侵袭能力显著降低,细胞凋亡率显著升高,P21、Caspase-3和E-cadherin蛋白表达显著升高,MMP-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。miR-4286靶向FOXO4并负性调控A549细胞中FOXO4表达。抑制FOXO4表达可逆转抑制miR-4286对A549细胞存活、克隆形成、迁移侵袭及凋亡的影响(P<0.05)。结论:肺癌组织中miR-4286呈高表达。抑制miR-4286通过上调FOXO4抑制肺癌细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导细胞凋亡。

关键词： miR-4286 FOXO4 肺癌细胞增殖迁移侵袭凋亡

亚硝酸钠预处理对乙醇损伤SMMC-7721细胞的保护作用

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药学学报 2010年第10期45卷 1254-1259页

作者：史齐李延红石贞玉厉永强刘彬皇甫超申河南大学医学院环境医学研究所河南开封475004 河南大学环境与健康工程中心河南开封475004

研究亚硝酸钠预处理对乙醇损伤的人肝癌SMMC-7721细胞的保护作用。0.25mmol·L-1亚硝酸钠预处理细胞24h或4周后,再用200mmol·L-1乙醇处理12h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞活力,FITC-AnnexinⅤ/PI流式细胞术检测细胞凋亡,Hoechst3325... 详细信息

研究亚硝酸钠预处理对乙醇损伤的人肝癌SMMC-7721细胞的保护作用。0.25mmol·L-1亚硝酸钠预处理细胞24h或4周后,再用200mmol·L-1乙醇处理12h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞活力,FITC-AnnexinⅤ/PI流式细胞术检测细胞凋亡,Hoechst33258和PI活细胞联染评定细胞损伤,蛋白印迹技术(Westernblotting)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和凋亡相关蛋白表达水平。结果发现,无论亚硝酸钠短暂或慢性预处理,皆可抑制由乙醇引起的细胞凋亡和过氧化损害,同时细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性升高,丙二醛(MDA)含量下降。亚硝酸钠预处理24h的细胞再用乙醇处理时,HIF-1α表达增高,同时促凋亡相关蛋白Bax、Caspase-9、Caspase-3表达下降,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达增加。结果表明,低剂量亚硝酸钠预处理能够抵抗乙醇诱导的人肝癌SMMC-7721细胞凋亡,其机制可能与HIF-1α表达增高有关。

关键词：亚硝酸钠乙醇 SMMC-7721细胞细胞保护

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自噬与缺氧缺血性脑损伤

生理学报 2017年第3期69卷 316-324页

作者：厉永强付苏王来刘彬石贞玉邓锦波河南大学护理学院神经生物研究所开封475004

自噬是生物体内高度进化保守的生理机制,包括自噬体形成、自噬体与溶酶体结合以及自噬体降解等过程。生理条件下,自噬主要负责清理细胞内衰老的细胞器及长寿命蛋白,对维持细胞及生物体的自稳状态至关重要。同时,自噬也与许多疾病的发生... 详细信息

自噬是生物体内高度进化保守的生理机制,包括自噬体形成、自噬体与溶酶体结合以及自噬体降解等过程。生理条件下,自噬主要负责清理细胞内衰老的细胞器及长寿命蛋白,对维持细胞及生物体的自稳状态至关重要。同时,自噬也与许多疾病的发生和发展密切相关,但具体的作用与机制尚不十分明确。以脑卒中为代表的缺氧缺血性脑损伤与自噬的关系是近年来的研究热点,关于自噬在其中的作用与机制尚无定论。本文就自噬在缺氧缺血性脑损伤中的激活、发挥的作用及其机制进行综述,旨在为相关领域的研究提供参考。

关键词：自噬缺氧缺血氧化应激细胞凋亡

亚硝酸钠对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭能力的影响

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环境科学学报 2011年第8期31卷 1776-1782页

作者：闫文义皇甫超申史齐李延红石贞玉厉永强刘彬河南大学医学院环境医学研究所河南大学环境与健康工程中心

为研究亚硝酸钠对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭能力的影响,用0.25mmol·L-1亚硝酸钠孵育SMMC-7721细胞48h,然后收集细胞培养液上清.用人工基底膜包被的Transwell小室记录细胞侵袭能力,考马斯亮蓝及α-微管蛋白免疫荧光染色观察细胞骨架,West... 详细信息

为研究亚硝酸钠对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭能力的影响,用0.25mmol·L-1亚硝酸钠孵育SMMC-7721细胞48h,然后收集细胞培养液上清.用人工基底膜包被的Transwell小室记录细胞侵袭能力,考马斯亮蓝及α-微管蛋白免疫荧光染色观察细胞骨架,Westernblot检测细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达.结果显示,用亚硝酸钠孵育SMMC-7721细胞48h,穿膜细胞为(211.5±17.6)个,与对照组(176.3±15.5)个有显著性差异(p﹤0.05);用亚硝酸钠孵育48h,细胞培养液上清+无血清培养液组细胞穿膜数为(165.12±7.90)个,较无血清培养液阴性对照组(30.32±11.00)个显著增多(p﹤0.05);细胞培养液上清+含10%牛血清白蛋白(FBS)组细胞穿膜数为(186.73±9.41)个,较单纯含10%FBS阳性对照组细胞穿膜数(170.54±9.60)个也明显增多(p﹤0.05).0.25mmol·L-1亚硝酸钠处理细胞48h,细胞骨架微丝聚合成应力纤维,沿细胞纵轴延伸,使细胞胞体伸长,微管蛋白聚合;MMP-2和MMP-9蛋白表达增加.上述结果表明,亚硝酸钠通过诱导细胞骨架重排,促进人肝癌SMMC-7721细胞侵袭能力.

关键词：亚硝酸钠人肝癌SMMC-7721细胞株侵袭细胞骨架

肉桂醛氧氟沙星酰腙诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用

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药学学报 2010年第9期45卷 1109-1115页

作者：任争康玉华石贞玉皇甫超申胡国强刘彬河南大学护理学院神经生物学研究所河南开封475004 河南大学淮河临床学院河南开封475004 河南大学化学生物学研究所河南开封475004

为观察喹诺酮类化合物肉桂醛氧氟沙星酰腙化合物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,用不同浓度的N-(3-苯亚丙烯基)-6-氟-1,8-(2,1-丙氧基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼(FQ16)与SMMC-7721细胞体外培养。MTT法检测FQ16对... 详细信息

为观察喹诺酮类化合物肉桂醛氧氟沙星酰腙化合物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,用不同浓度的N-(3-苯亚丙烯基)-6-氟-1,8-(2,1-丙氧基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼(FQ16)与SMMC-7721细胞体外培养。MTT法检测FQ16对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;Hoechst33258/PI双染荧光染色法、TUNEL法及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡变化;以pBR322DNA为底物,采用琼脂糖凝胶电泳法测定FQ16对人DNA拓扑异构酶II活性的影响;高内涵活细胞成像系统测定细胞线粒体膜电位(△ψm)变化;RT-PCR方法观察Bcl-2、BaxmRNA的表达变化;Westernblotting方法测定caspase-9、caspase-8、caspase-3、p53、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果显示,FQ16在0.625～10μmol·L?1的浓度范围能抑制细胞增殖,呈时间、浓度依赖性;各组FQ16作用24h后,细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05);琼脂糖凝胶电泳可见凋亡细胞典型的梯状DNA条带,并伴有线粒体膜电位降低。与对照组比较,FQ16能抑制DNA拓扑异构酶II的活性,使细胞BaxmRNA表达增高,Bcl-2mRNA表达水平下降,p53、Bax、caspase-9、caspase-3蛋白表达量增加,其中caspase-9、caspase-3活性裂解片段显著增加,caspase-8无变化,而Bcl-2蛋白表达水平下降。结果提示,肉桂醛氧氟沙星酰腙能够抑制DNA拓扑异构酶II活性,造成DNA损伤并激活线粒体凋亡通路,诱导人肝癌细胞凋亡。

关键词：喹诺酮衍生物细胞凋亡拓扑异构酶Ⅱ 线粒体膜电位

开封市社区2734名健康成年居民饮食结构及人体质量指数与血脂的关系

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中国临床康复 2005年第31期9卷 20-21页

作者：谷敬丽李佰成石贞玉河南大学医学院生物化学与分子生物学教研室河南省开封市475001 河南大学护理学院基护教研室河南省开封市475001

目的:通过调查、检测开封市社区居民身高、体质量、饮食情况和血脂各项指标,探讨体质量指数和饮食结构与血脂的关系。方法:随机抽取2003-07/2004-07开封市社区20岁以上健康居民2734例。其中男1432例,女1302例,年龄20～80岁。①调查既往... 详细信息

目的:通过调查、检测开封市社区居民身高、体质量、饮食情况和血脂各项指标,探讨体质量指数和饮食结构与血脂的关系。方法:随机抽取2003-07/2004-07开封市社区20岁以上健康居民2734例。其中男1432例,女1302例,年龄20～80岁。①调查既往病史、吸烟史、饮食及生活习惯,并测身高、体质量、血压及心率等。②禁食12h以上,次日清晨静息状态下抽取空腹静脉血2mL,检测血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平。结果:2734例被调查对象全部进入结果分析。①血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇随体质量指数增加而升高,高密度脂蛋白胆固醇随体质量指数增加而下降。②血脂水平的变化与饮食结构的改变:按膳食结构和生活行为分为两组,Ⅰ组为1637例,人均每日热量和蛋白质摄入量达到中国营养学会建议的每日摄入量的111%和145%,脂肪占热量的38.7%,动物性食物平均每日350g以上,谷类食物、蔬菜摄入量较少,Ⅱ组为1097例,基本保持中国传统膳食模式。Ⅰ组总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇明显高于Ⅱ组[(4.97±1.31),(4.14±1.16)mmol/L;(1.30±0.94),(0.94±0.48)mmol/L;(3.28±1.36),(2.74±1.1)mmol/L,P<0.005～0.01],高密度脂蛋白胆固醇水平明显低于Ⅱ组[(1.22±0.38),(1.41±0.35)mmol/L,P<0.05]。结论:肥胖和高脂类、高动物性食物摄入过多均可导致脂代谢的异常,体质量指数与总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白呈正相关,与高密度脂蛋白水平呈负相关。

关键词：脂类/血液体重饮食习惯

小鼠大脑亚硝酸盐暴露与DNA甲基化和组蛋白去乙酰化

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解剖学报 2017年第6期48卷 642-650页

作者：刘俊张丽丽石贞玉邓锦波河南大学护理学院河南大学神经生物研究所河南开封475004

目的观察慢性亚硝酸盐暴露对小鼠大脑皮质炎症损伤的影响及其探讨DNA甲基化和组蛋白去乙酰化等相关机制。方法选取8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠,随机分为对照组(生理盐水)、低剂量亚硝酸盐组(3g/L)和高剂量亚硝酸盐组(6 g/L),建立亚硝酸... 详细信息

目的观察慢性亚硝酸盐暴露对小鼠大脑皮质炎症损伤的影响及其探讨DNA甲基化和组蛋白去乙酰化等相关机制。方法选取8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠,随机分为对照组(生理盐水)、低剂量亚硝酸盐组(3g/L)和高剂量亚硝酸盐组(6 g/L),建立亚硝酸盐暴露模型,收集各组小鼠大脑皮质,利用免疫荧光染色法和Western blotting法分析大脑皮质炎症损伤,组蛋白去乙酰化酶和DNA甲基化相关酶的表达情况。结果慢性亚硝酸盐暴露后小鼠大脑皮质炎症损伤因子环氧化酶2(COX2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、离子钙接头蛋白分子1(Iba1)、c-Fos、IL-6表达量明显多于对照组(P<0.01),同时高剂量暴露组DNA甲基化相关酶5-甲基胞嘧啶(5-m C)、DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3a、和组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)表达明显低于对照组(P<0.01)且都呈亚硝酸盐剂量依赖性。结论亚硝酸盐暴露可通过促进细胞免疫炎症对小鼠大脑皮质造成损伤,并且DNA甲基化和组蛋白去乙酰化可能参与了慢性亚硝酸盐暴露过程中的应答过程及其调控机制。

关键词：亚硝酸盐暴露炎症反应 DNA甲基化组蛋白去乙酰化免疫印迹法小鼠