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重组β防御素3载体的构建及其抗菌活性初探

重组β防御素3载体的构建及其抗菌活性初探

作者：石晨龙扬州大学

学位级别：硕士

防御素是近年来发现的人体抵抗病原微生物的重要物质—抗菌肽中的一大类,大小约为3-5KDa,是一种富含半胱氨酸的阳离子短肽类物质,它在特异性免疫和非特异性免疫中都具有重要的作用,它可以拮抗包括G+菌、G-菌、真菌、病毒、原虫等在内的... 详细信息

防御素是近年来发现的人体抵抗病原微生物的重要物质—抗菌肽中的一大类,大小约为3-5KDa,是一种富含半胱氨酸的阳离子短肽类物质,它在特异性免疫和非特异性免疫中都具有重要的作用,它可以拮抗包括G+菌、G-菌、真菌、病毒、原虫等在内的多种病原体且不易产生耐药性。现今抗生素的广泛使用,产生的各种问题,如体内药物的残留、过敏反应、耐药性,迫使人类急需开发一种新型抗菌物质,因此抗菌肽的研究开发利用成为一个热点。防御素是抗菌肽家族中的一大类,为一种含有β-片层结构的阳离子活性肽,人防御素类别中的人β防御素-3(Human beta-defensin-3, HBD-3)最初是在银屑病患者的皮损组织提取物中发现的,且在皮肤、扁桃体、呼吸道、生殖道上皮细胞、成年人骨骼肌、心脏、胸腺、食道、口腔黏膜、气管和胎盘均有不同程度的表达,HBD-3由于其抗菌谱广,盐浓度对其影响相对小,对宿主细胞的毒性低,且对多重耐药菌有效,因此具有较高的研究价值。本研究根据大肠杆菌的偏好密码子,人工设计并合成了HBD-3基因,克隆到原核表达载体pET30a-SPM-ELP中,获得重组表达载体pET-30a-ELP-SPM-HBD-3.本实验所使用的弹性蛋白样多肽(Elastin-like polypeptide, ELP)介导的原核表达载体系统,是目前最为成功的外源性蛋白表达系统之一。载体中的ELP是一类人工合成的生物大分子,由五肽重复序列单元VPGXG(Val-Pro-Gly-Xaa-Gly, Xaa可以是除Pro在外的任何一种氨基酸)。ELP具有温度诱导的可逆变特性,即在高于某一特定相变温度的溶液中呈现凝聚的状态,在低于这一温度时为可溶的状态。ELP融合蛋白也具有与ELP相似的性质,因此能通过此特性,用温度控制和离心法来分离前体蛋白。自我剪接单元(self-processing module, SPM)为一具有自我剪切特性的标签的单元,在有Ca2+存在条件下可执行自我剪切功能,可利用钙离子切割液来切割获取目的小蛋白。本研究利用其中弹性蛋白样多肽(ELP)系统具有的温度诱导反复相变特性,以低温诱导法诱导重组菌表达,在不同温度进行反复离心洗涤结合盐离子的沉淀,获得了融合蛋白。经过SDS-PAGE检测证明能表达预期分子量大小的融合前体蛋白ELP-SPM-HBD3,再切割,获得目的蛋白后,利用琼脂扩散法来测定其体外抗白念珠菌活性,通过琼脂扩散法,MIC测定及动物模型来测定其对金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果证实本实验研究中重组表达载体所表达的HBD-3具有一定的抗白色念珠菌及金黄色葡萄球菌活性,其最小抑制金黄色葡萄球菌浓度为80μg/ml,且对金黄色葡萄球菌动物感染模型也有一定的抗感染作用。本实验方法中重组蛋白的分离、纯化过程简单,生产成本低,且表达出的HBD-3有一定的抗菌活性,故可为进一步研究和开发HBD-3奠定基础。

关键词： ELP-SPM表达系统 HBD-3 抗菌活性白念珠菌金黄色葡萄球菌

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富血小板血浆在皮肤科的临床应用进展

中国美容整形外科杂志 2023年第5期34卷 319-320,I0004,I0005页

作者：陶丛敏石晨龙丁颖彭鹰黎炜梅润宏易阳艳南昌大学第二附属医院整形美容科江西南昌330006 南昌大学第一附属医院口腔颌面外科江西南昌330006

富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)是将自体全血以离心的方式而获得的含大量血小板的血浆成分,其含有多种促进组织修复和再生的生物活性物质,目前已成为再生医学治疗的重要组成部分。因其取自自体全血,无免疫排斥,取材方便,制备... 详细信息

富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)是将自体全血以离心的方式而获得的含大量血小板的血浆成分,其含有多种促进组织修复和再生的生物活性物质,目前已成为再生医学治疗的重要组成部分。因其取自自体全血,无免疫排斥,取材方便,制备相对简单,在皮肤科、整形美容外科、骨科、口腔科、眼科等的应用越来越广泛。现就近年PRP在皮肤科领域的相关研究和应用作一综述,并为PRP治疗规范化提供参考(活性物质包括细胞因子、生长因子、胞外囊泡等)。

关键词：富血小板血浆皮肤科临床应用再生医学

欧洲色素失禁症患者的诊断和实践管理共识解读

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中国循证医学杂志 2021年第10期21卷 1117-1121页

作者：丁颖石晨龙陶丛敏彭鹰黎炜易阳艳南昌大学第二附属医院医疗美容科南昌330006

色素失禁症(incontinentia pigmenti,IP)是一种罕见的X染色体连锁显性遗传病,具有特征性的皮损表现。该病在婴儿期即可发病,且容易被误诊,并可能伴随严重的眼部和/或脑部并发症。2020年3月欧洲罕见皮肤病网络(ERN-Skin)发布了《欧洲多... 详细信息

色素失禁症(incontinentia pigmenti,IP)是一种罕见的X染色体连锁显性遗传病,具有特征性的皮损表现。该病在婴儿期即可发病,且容易被误诊,并可能伴随严重的眼部和/或脑部并发症。2020年3月欧洲罕见皮肤病网络(ERN-Skin)发布了《欧洲多学科共识建议:色素失禁症患者的诊断和实践管理》,对IP的诊断、治疗、随访等方面给出了共识建议。本文对其进行解读,以期为诊治色素失禁症提供参考。

关键词：色素失禁症皮肤组织学并发症诊断实践管理

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黑眼圈治疗进展

黑眼圈治疗进展

2015江西省首届医学美容整形联合学术会议、江西省医学会第十一次医学美学与美容学术研讨会、江西省第四次中西医结合医学美容学术会议

作者：易阳艳丁颖石晨龙南昌大学第二附属医院医疗美容科

目的:黑眼圈是位于双侧眶周,呈环形的,外观颜色较正常皮肤相对深的皮肤表现。本文对其治疗作一综述,旨在为临床医生治疗黑眼圈提供更多的参考。方法:黑眼圈的治疗方法包括外用药物、化学换肤、激光、强脉冲光、局部注射及手术治疗等。结...

目的:黑眼圈是位于双侧眶周,呈环形的,外观颜色较正常皮肤相对深的皮肤表现。本文对其治疗作一综述,旨在为临床医生治疗黑眼圈提供更多的参考。方法:黑眼圈的治疗方法包括外用药物、化学换肤、激光、强脉冲光、局部注射及手术治疗等。结果:外用药物治疗常用的有氢醌、维甲酸制剂及维生素制剂。化学剥脱治疗常用的有三氯乙酸,果酸。激光治疗:色素选择性激光如Q开关红宝石激光(694nm),Q开关翠绿宝石激光(755nm

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来源： cnki会议评论

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痣的常见临床分型及治疗

痣的常见临床分型及治疗

色素痣激光术后使用重组牛碱性成纤维细胞生长因子的疗效观察

2015江西省首届医学美容整形联合学术会议、江西省医学会第十一次医学美学与美容学术研讨会、江西省第四次中西医结合医学美容学术会议

作者：易阳艳丁颖石晨龙南昌大学第二附属医院医疗美容科

目的:对临床常见痣进行分类,以指导诊治。方法:根据痣成分的不同进行分类。据临床特征的不同进一步分类。并选用不同的治疗方法。结果:据痣成分的不同可分为:色素痣、皮脂腺痣、血管痣、疣状表皮痣、浅表脂肪瘤样痣、黑头粉刺痣以及结...

目的:对临床常见痣进行分类,以指导诊治。方法:根据痣成分的不同进行分类。据临床特征的不同进一步分类。并选用不同的治疗方法。结果:据痣成分的不同可分为:色素痣、皮脂腺痣、血管痣、疣状表皮痣、浅表脂肪瘤样痣、黑头粉刺痣以及结缔组织痣等。色素痣可分为痣细胞痣、表皮黑素细胞增生,真皮黑素细胞增生。痣细胞痣据发生时间又可分为先天性痣和后天性痣,先天性痣一般直径大于1cm,恶变概率较高,首选手术治疗。后天性痣

关键词：

来源： cnki会议评论

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色素痣激光术后使用重组牛碱性成纤维细胞生长因子的疗效观察

2015江西省首届医学美容整形联合学术会议、江西省医学会第十一次医学美学与美容学术研讨会、江西省第四次中西医结合医学美容学术会议

作者：石晨龙丁颖易阳艳南昌大学第二附属医院

目的:观察二氧化碳治疗色素痣后,使用重组牛碱性成纤维细胞生长因子的疗效。方法:将我科2014年7月至2015年7月行二氧化碳激光除色素痣的患者1580例患者随机均分为两组,治疗组于二氧化碳激光术后使用重组牛碱性成纤维细胞生长因子,对照...

目的:观察二氧化碳治疗色素痣后,使用重组牛碱性成纤维细胞生长因子的疗效。方法:将我科2014年7月至2015年7月行二氧化碳激光除色素痣的患者1580例患者随机均分为两组,治疗组于二氧化碳激光术后使用重组牛碱性成纤维细胞生长因子,对照组治疗后使用莫匹罗星软膏外用,对比两组术后的创口外观、分泌物、创缘反应,愈合时间及不良反应。结果与对照组相比,重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗组的创口分泌物较少,愈合

关键词：

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支原体耐四环素类药物分析及耐药基因的检测

中国麻风皮肤病杂志 2013年第7期29卷 488-489页

作者：周敏谢铮石晨龙赵莉莉高慧扬州大学临床医学院江苏扬州225001 盐城市第三人民医院江苏盐城224001

本文就支原体耐药性进行探索．同时对四环素耐药基因进行研究。

关键词：四环素耐药基因支原体药物分析四环素类检测耐药性

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浅表脂肪瘤样痣1例

江西医药 2020年第5期55卷 582-583页

作者：丁颖石晨龙陶丛敏易阳艳南昌大学第二附属医院医疗美容科南昌330000

浅表脂肪瘤样痣是一种罕见的皮肤良性肿瘤,易被误诊,最早于1921年由Hoffmann和Zurhelle首次描述,它是一种良性的先天的畸形,以成熟的异位脂肪细胞围绕在真皮层胶原束周围为特征。目前未发现有家族性遗传性、性别差异及其他系统的累及[1... 详细信息

浅表脂肪瘤样痣是一种罕见的皮肤良性肿瘤,易被误诊,最早于1921年由Hoffmann和Zurhelle首次描述,它是一种良性的先天的畸形,以成熟的异位脂肪细胞围绕在真皮层胶原束周围为特征。目前未发现有家族性遗传性、性别差异及其他系统的累及[1]。有学者提出此病的发病可能与2p24基因位点的缺失有关。我院近期诊治1例,现报道如下。

关键词：浅表脂肪瘤样痣个案报道臀部皮疹

CO_2点阵激光联合糖皮质激素外用治疗面部浅表性瘢痕的临床疗效观察

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中国医疗美容 2017年第5期7卷 37-40页

作者：赵灿文易阳艳石晨龙丁颖南昌大学第二附属医院整形美容科江西南昌330006

目的观察CO_2点阵激光联合糖皮质激素外用治疗面部浅表性瘢痕的临床疗效及安全性。探索一种疗效确切、安全性好、适合推广的治疗面部浅表性瘢痕的新方法。方法选取2016年1月-2017年1月我院整形美容科门诊就诊的明确诊断为面部浅表性瘢痕... 详细信息

目的观察CO_2点阵激光联合糖皮质激素外用治疗面部浅表性瘢痕的临床疗效及安全性。探索一种疗效确切、安全性好、适合推广的治疗面部浅表性瘢痕的新方法。方法选取2016年1月-2017年1月我院整形美容科门诊就诊的明确诊断为面部浅表性瘢痕的60名患者,按就诊时间先后随机分为两组,即观察组和对照组,每组均为30人。对照组采用单纯CO_2点阵激光进行治疗,观察组采用CO_2点阵激光联合外用醋酸曲安奈德进行治疗。依据温哥华瘢痕评分表,医师对比观察治疗前后瘢痕情况作出评分。结果治疗前对照组温哥华瘢痕评分(5.83±1.11),观察组温哥华瘢痕评分(5.60±1.22),两组治疗前温哥华瘢痕评分无统计学差异(P<0.05),治疗后3个月,对照组温哥华瘢痕评分(4.26±1.17),观察组温哥华瘢痕评分(3.13±1.10),治疗后均有一定的改善,差异有统计学意义(P<0.05)。两组温哥华瘢痕评分治疗前后改善程度分别为(1.57±1.57)和(2.47±1.60)两组差异有统计学意义(P<0.05),观察组高于对照组。结论观察组点阵激光联合糖皮质激素与对照组单纯点阵激光治疗面部浅表性瘢痕均有效果;

关键词：浅表性瘢痕 CO2点阵激光曲安奈德疗效观察