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基质金属蛋白酶9在大鼠跟腱异位骨化模型中的动态变化研究

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中国修复重建外科杂志 2014年第9期28卷 1133-1138页

作者：石伟哲肖海军薛锋吴江南方医科大学第三临床医学院南方医科大学附属奉贤医院骨科上海201400

目的通过观测创伤早期大鼠异位骨化模型中基质金属蛋白酶9（matrixmetalloproteinase9，MMP-9）表达变化，探讨MMP-9对预测异位骨化发生的价值。方法取4～5周龄雄性SD大鼠132只，体重（135．0±6．5）g，随机分为两组（n=66）。实验组... 详细信息

目的通过观测创伤早期大鼠异位骨化模型中基质金属蛋白酶9（matrixmetalloproteinase9，MMP-9）表达变化，探讨MMP-9对预测异位骨化发生的价值。方法取4～5周龄雄性SD大鼠132只，体重（135．0±6．5）g，随机分为两组（n=66）。实验组通过钳夹并切断跟腱制备异位骨化模型，对照组仅暴露跟腱。术后观察两组大鼠一般情况，2、3、4、5、6、7、8d两组各取8只大鼠，取跟腱组织行大体、组织学及免疫组织化学染色观察，取血清及跟腱组织分别行ELISA及RT-PCR检测MMP-9蛋白含量及基因表达。通过两组剩余10只大鼠术后5、10周x线片及术后10周组织学观察结果，诊断异位骨化形成情况。结果所有大鼠均存活至实验完成。各时间点对照组大鼠跟腱无明显变化，呈正常跟腱结构；实验组随时间延长，跟腱断端硬度逐渐增加，出现大量不规则结缔组织及软骨细胞，MMP-9免疫组织化学染色呈深染阳性。各时间点实验组MMP-9蛋白含量及基因相对表达量均显著高于对照组（P〈0．05）；实验组MMP-9蛋白含量及基因相对表达量均总体呈上升趋势（P〈0．05）。根据x线片及组织学观察结果，术后10周实验组大鼠跟腱组织均发生异位骨化，对照组均无异位骨化发生。结论在大鼠跟腱异位骨化早期，MMP-9表达明显升高，提示其对预测异位骨化发生有参考意义。

关键词：基质金属蛋白酶9 异位骨化细胞外基质大鼠

基质金属蛋白酶及其相关抑制剂在异位骨化中的作用及机制研究

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基质金属蛋白酶及其相关抑制剂在异位骨化中的作用及机制研究

作者：石伟哲南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景：异位骨化(Heterotopic Ossification, HO)是指在正常情况下没有骨组织的软组织内形成的新生病理骨组织,其既不是单纯的钙盐沉积,也不同于骨折愈合中的新骨形成。随着人工关节置换的广泛应用以及交通伤导致的高能量创伤数量增... 详细信息

研究背景：异位骨化(Heterotopic Ossification, HO)是指在正常情况下没有骨组织的软组织内形成的新生病理骨组织,其既不是单纯的钙盐沉积,也不同于骨折愈合中的新骨形成。随着人工关节置换的广泛应用以及交通伤导致的高能量创伤数量增加,异位骨化发病率也显著上升,研究表明在没有进行预防性治疗的情况下,异位骨化发生率高达60%-75%,髋臼骨折切开复位内固定术发生率超过60%,脊髓损伤后的发生率为20%-25%,其中约18%-35%出现明显的关节活动受限,闭合性颅脑损伤后异位骨化的发生率为10%-20%,其中约10%产生明显的关节活动受限。HO的发病主要可分为三个阶段：(1)炎性浸润及间充质干细胞分化阶段,(2)软骨细胞,成骨细胞等生长阶段,(3)病理骨组织成熟阶段。早期HO局部有明显肿痛,关节活动受限。晚期由于骨组织形成,导致关节活动限制。其基本病理改变是在纤维结缔组织中,原始细胞增殖活跃伴有丰富的毛细血管网,钙盐沉积,形成骨。成熟的异位骨化具有骨的结构,外层包裹纤维结缔组织,里面是成骨细胞,具有小梁结构及类骨组织,中心是活跃的原始细胞。临床诊断主要依靠X线及CT检查进行诊断。治疗中往往对存在高危因素患者实行预防性治疗如放射治疗、非甾体类抗炎药及二磷酸盐等,然而传统非甾体类抗炎药具有胃肠副作用,给患者带来了伤痛,限制了其应用,同时预防性放疗会导致患者出现癌症几率增加,并干扰正常成骨(如骨折愈合和假体植入后的骨长入),并且治疗后仍有较高的发生率。对于已经形成的异位骨化,临床上有效的治疗方法只有手术切除,因此,对异位骨化的早期诊断可以避免对不出现异位骨化的患者进行过度的预防性治疗。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)家族是一类高度保守的锌离子和钙离子依赖的基因多态性内切蛋白水解酶家族,由中性粒细胞、巨噬细胞、小胶质细胞、星型胶质细胞、神经元和血管内皮细胞等以无活性的酶原形式分泌到细胞外,经过活化后在中性条件下发挥活性。它的表达受即早基因、细胞因子、生长因子的调节,同时很多细胞因子可诱导MMPs的表达,如白介素-1、白介素-6、血小板衍化生长因子、血管内皮生长因子、转化生长因子-B、成纤维细胞生长因子、肿瘤坏死因子-a等,起抑制作用的有干扰素B-1b。 MMPs除在转录水平受到调节外,其活性亦在酶原激活、酶活性的抑制等环节受到调控,不同MMPs之间可能也具有活化作用,MMPs的蛋白水解酶活性受非特异性和特异性抑制剂抑制,非特异性抑制剂包括a2-巨球蛋白、a1-抗胰蛋白酶、巴马斯汀(batimastatBB-1101、BB-94)等。基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)是一种糖化蛋白酶,参与内皮细胞、成纤维细胞、上皮细胞和基质角质细胞核迁移等,在基质降解、组织重塑、细胞迁移、血管生成、伤口愈合,骨生长等病理生理过程中发挥关键作用,是软骨基质降解中最重要的酶之一,是早期的细胞外基质(ECM)重组的生物标记物。MMP-9表达细胞存在于骨髓中,在骨骼肌缺氧环境下会使MMP-9极大的增强,同时在体外实验显示,间充质干细胞增加毛细血管网的生长,并伴随有MMP-2和MMP-9的升高。基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteinase-2, MMP-2)可表达在成骨细胞及部分破骨细胞的细胞质,同时可对骨基质进行降解,并抑制骨质吸收和促进骨重建修复。成骨细胞中分泌MMP-2蛋白的变化过程可反映骨代谢的基本情况,如果血清中MMP-2蛋白水平升高,骨转换的速度也随之增快。组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases,TMPs)广泛分布于体液与组织中,其来源主要是巨噬细胞和结缔组织,同时纤维细胞以及成骨细胞亦可分泌,MMPs与TIMPs之间保持相对的特异性和功能上的动态平衡。当病理条件下,MMPS与TIMPS间的动态平衡被打破,会使细胞外基质过度分解,出现相对应的病理变化。有研究表明,TIMP-1蛋白可选择性抑制MMP-9蛋白的功能,TIMP-2蛋白可选择性抑制MMP-2蛋白的功能,TIMPs蛋白在细胞外基质代谢过程中对MMP蛋白起到相应的负性调节作用,阻止MMP的活化以及对细胞外基质的降解作用,影响蛋白分解的程度和时间。最近研究认为MMP-9蛋白对异位骨化早期发生有预测作用,本研究通过使用脑创伤大鼠模型合并大鼠跟腱钳夹诱导异位骨化模型,综合比较与MMP-9蛋白同属明胶酶的明胶酶A (MMP-2),以及其抑制剂TIMP-1的变化。通过对血液标本使用ELISA法检测蛋白含量,局部组织进行HE切片、免疫组化染色以及RT-PCR基因相对表达量。分析MMP-9蛋白在异位骨化早期预测作用的特异性以及在局部组织的分泌变化关系,以此了解早期阶段异位骨化局部组织中的相关蛋白变

关键词：基质金属蛋白酶9 异位骨化细胞外基质大鼠 MMP-9 MMP-2 TIMP-1 细胞外基质

CHRNG基因新发变异致多发性翼状胬肉综合征1例的遗传学分析

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中华医学遗传学杂志 2023年第6期40卷 686-690页

作者：陈亦儒农恬颖石伟哲李建贵丁雪娇李粤朱明伟徐宏文广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心广州510630

目的探讨1例多发性翼状胬肉综合征(MPS)患儿的临床特征及遗传学病因。方法选取2020年8月19日于广州市妇女儿童医疗中心骨科就诊的1例MPS患儿作为研究对象。收集患儿的临床资料,采集患儿及其父母的外周血样,对患儿进行全外显子组测序(WE... 详细信息

目的探讨1例多发性翼状胬肉综合征(MPS)患儿的临床特征及遗传学病因。方法选取2020年8月19日于广州市妇女儿童医疗中心骨科就诊的1例MPS患儿作为研究对象。收集患儿的临床资料,采集患儿及其父母的外周血样,对患儿进行全外显子组测序(WES),用Sanger测序对候选变异进行家系验证,并进行生物信息学分析。结果患儿为女性,11岁,因"发现脊柱侧弯8年,加重伴双肩不等高1年"就诊。WES检测结果提示其携带CHRNG基因c.55+1G>C纯合剪接变异,Sanger测序证实其父母均携带CHRNG基因c.55+1G>C杂合剪接变异。生物信息学分析:CHRNG基因c.55+1G>C变异在CNKI、万方数据知识服务平台及HGMG等数据库中均未见收录。经Multain在线软件分析,该位点所编码的氨基酸在不同物种中高度保守。经CRYP-SKIP在线软件预测,该变异导致第1外显子潜在剪接位点激活与跳跃的概率分别为0.30与0.70。确诊患儿罹患MPS。结论CHRNG基因c.55+1G>C变异可能是本研究MPS患儿的遗传学病因。

关键词：多发性翼状胬肉综合征 CHRNG基因新变异儿童

Salter截骨对残余髋臼发育不良患儿下肢运动学的影响

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中华小儿外科杂志 2022年第9期43卷 827-834页

作者：荀福兴黎艺强李敬春许伏龙邱晨光吴剑平石伟哲袁哲朱明伟徐宏文广州市妇女儿童医疗中心骨科广东省儿童健康与疾病临床医学研究中心广州510623

目的通过步态分析研究发育性髋关节发育不良(developmental dysplasia of the hip,DDH)闭合复位后残余髋臼发育不良(residual acetabular dysplasia,RAD)患儿Salter截骨前后下肢运动学的变化。方法收集广州市妇女儿童医疗中心骨科2016年... 详细信息

目的通过步态分析研究发育性髋关节发育不良(developmental dysplasia of the hip,DDH)闭合复位后残余髋臼发育不良(residual acetabular dysplasia,RAD)患儿Salter截骨前后下肢运动学的变化。方法收集广州市妇女儿童医疗中心骨科2016年1月至2020年3月DDH闭合复位后RAD并施行Salter截骨术的患儿15例,其中女14例,男1例;患侧为左侧8例,右侧7例。患儿闭合复位时年龄为(15.8±3.0)个月,Salter截骨时年龄为(58.0±10.4)个月。另招募15例正常儿童作为步态分析的对照组,其中女6例,男9例;年龄为(69.2±20.4)个月。Salter截骨术前及术后1年对患儿进行临床和影像学评估并行步态分析。采用t检验分别比较Salter截骨患儿术前及术后与对照组之间的髋臼指数(acetabular index,AI)、中心边缘角(center-edge angle,CEA)、时空参数等差异,采用重复测量方差分析比较Salter截骨患儿术前和术后与对照组儿童关节运动角度差异。结果所有患儿均获得满意的髋关节功能。Salter截骨术后AI为(14.9±1.9)º,较术前的(30.4±2.3)º显著减小;术后CEA为(35.7±8.6)º,较术前的(18.7±6.1)º显著增大,差异均具有统计学意义(P<0.001)。术后患侧骨盆内旋角度为(5.03±0.88)º,较术前显著增大;术后患侧骨盆上抬角度为(-1.38±0.98)º,较术前显著减小,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,时空参数中,Salter截骨术前和术后均为支撑相时间整体占比增加,承重反应期时间占比增加,单支撑相时间占比减少。与对照组相比,术前患侧踝关节内翻角度增大为(0.41±0.15)º,步长减短为(69.1±8.7)cm/m,术后患侧膝关节屈膝角度增大为(27.09±1.72)°。结论DDH闭合复位后RAD患儿行Salter截骨后步态明显改善。与截骨前相比,患侧骨盆冠状面上抬角度减小,横断面内旋角度增大,站立前中期内旋角度趋于正常。术后患儿需进行相应的髋外展肌、屈髋肌和外旋肌的锻炼以进一步矫正步态。

关键词：发育性髋关节发育不良闭合复位术 Salter截骨术残余髋臼发育不良步态分析

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手术治疗老年陈旧性肩关节脱位的疗效观察

中国修复重建外科杂志 2015年第9期29卷 1076-1079页

作者：喻都肖海军石伟哲鞠金勇南方医科大学附属第三临床医学院广州 510515 南方医科大学附属奉贤医院骨科

目的探讨老年陈旧性肩关节脱位的手术方法及临床疗效。方法 2011年10月-2014年4月,手术治疗老年陈旧性肩关节脱位7例。男2例,女5例;年龄61～83岁,平均74岁。致伤原因：摔伤6例,交通事故伤1例;受伤至确诊时间4～12周,平均6.7周。肩关节... 详细信息

目的探讨老年陈旧性肩关节脱位的手术方法及临床疗效。方法 2011年10月-2014年4月,手术治疗老年陈旧性肩关节脱位7例。男2例,女5例;年龄61～83岁,平均74岁。致伤原因：摔伤6例,交通事故伤1例;受伤至确诊时间4～12周,平均6.7周。肩关节恐惧试验及Dugas征阳性。肩关节主动前屈上举（50.7±8.4）°,外展（44.5±3.3）°,外旋（35.8±4.8）°,内旋达T6、T11、L4各1例及T10、T12各2例。肩关节功能ConstantMurley评分为（51.2±8.3）分,Neer评分为（45.4±7.3）分。结果术后切口均Ⅰ期愈合,无医源性骨折、神经血管损伤等并发症发生。7例均获随访,随访时间12～18个月,平均16个月。随访期间肩关节均未出现再脱位。末次随访时,患侧肩关节恐惧试验及Dugas征均呈阴性,肩关节主动前屈上举达（117.5±13.1）°,外展（72.0±4.6）°,外旋（39.0±3.4）°,内旋达T6、T10、T12、L3各1例及T11 3例。除内旋（Ζ=—1.732,P=0.083）外,其余方向活动度均较术前显著改善,比较差异有统计学意义（t=—33.746,P=0.000;t=—30.614,P=0.000;t=—2.802,P=0.031）。肩关节功能Constant-Murley评分为（85.4±4.3）分,Neer评分为（84.0±4.8）分,均较术前明显改善,比较差异有统计学意义（t=—21.016,P=0.000;t=—29.518,P=0.000）。结论手术治疗老年陈旧性肩关节脱位能明显改善肩关节活动度及功能。

关键词：陈旧性肩关节脱位手术治疗老年患者

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异位骨化早期检测研究进展

国际骨科学杂志 2013年第5期34卷 345-347页

作者：石伟哲肖海军南方医科大学附属奉贤医院骨科上海201400

异位骨化(HO)为创伤、烧伤和整形手术等的严重后遗症,晚期可致关节活动受限。近年随着人工关节广泛应用及骨折切开复位内固定术普及,HO发病率明显增高,但对其发病机制尚未明确,缺乏可靠的早期检测方法。该文就近年早期检测HO的血液指标... 详细信息

异位骨化(HO)为创伤、烧伤和整形手术等的严重后遗症,晚期可致关节活动受限。近年随着人工关节广泛应用及骨折切开复位内固定术普及,HO发病率明显增高,但对其发病机制尚未明确,缺乏可靠的早期检测方法。该文就近年早期检测HO的血液指标、影像学及基因检测等方面研究进展作一综述。

关键词：异位骨化诊断血液指标影像学基因

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浅谈计算机环境下的自主学习

无线互联科技 2016年第1期13卷 99-100页

作者：石伟哲许昌高中河南许昌461000

随着时代的发展,我国的教育模式也随之发生改变,由以往的教师传导知识为主导的模式逐渐向侧重于培养学生的自主学习能力方向过渡。而新课标的实施,也是对这一趋势的响应。随着网络的普及,大多数中学都应用了计算机来辅助教学,使得网络... 详细信息

随着时代的发展,我国的教育模式也随之发生改变,由以往的教师传导知识为主导的模式逐渐向侧重于培养学生的自主学习能力方向过渡。而新课标的实施,也是对这一趋势的响应。随着网络的普及,大多数中学都应用了计算机来辅助教学,使得网络信息成为当下学生们不可或缺的知识来源。而家庭电脑的逐渐普及,也使得学生获得知识的途径更加的宽泛。但是,在计算机环境下,学生们如何通过一定的方法和策略来提高自己的学习能力,值得深思。

关键词：计算机自主学习能力培养

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尺骨鹰嘴骨折-脱位手术治疗的疗效分析

中国骨与关节损伤杂志 2014年第1期29卷 44-46页

作者：吴江肖海军薛锋张东石伟哲南方医科大学附属奉贤医院骨科上海市201400 上海市奉贤区中心医院

目的探讨手术治疗尺骨鹰嘴骨折-脱位的效果，对手术方式和术中注意事项进行分析。方法采用手术治疗20例鹰嘴骨折-脱位，14例采用尺骨解剖钢板固定，6例使用张力带，5例在内固定后发现仍不稳定再加用外固定架固定。结果20例获随访15～30... 详细信息

目的探讨手术治疗尺骨鹰嘴骨折-脱位的效果，对手术方式和术中注意事项进行分析。方法采用手术治疗20例鹰嘴骨折-脱位，14例采用尺骨解剖钢板固定，6例使用张力带，5例在内固定后发现仍不稳定再加用外固定架固定。结果20例获随访15～30个月（平均24个月）。末次随访时肘关节功能Broberg＆Morrey评分：优6例，良5例，一般6例，差3例。15例出现关节异位骨化表现（75％），严重2例，中度5例，轻度8例。结论依据鹰嘴骨折一脱位类型与损伤机制选择适当的手术方式治疗，有利于鹰嘴形态和力线以及肘部稳定性的恢复，减少术后并发症发生。术后异位骨化发生率很高。应当早期干预。

关键词：鹰嘴骨折脱位尺骨解剖钢板张力带内固定外固定架

内侧与外侧经皮微创钢板内固定治疗A型闭合性胫骨远端骨折的疗效比较

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中国骨与关节损伤杂志 2015年第6期30卷 606-609页

作者：石伟哲肖海军广州市花都区人民医院骨科广东510800 上海市奉贤区中心医院骨科

目的比较分析应用外侧与内侧微创经皮钢板接骨术（MIPPO）联合锁定加压钢板（LCP）内固定治疗AO分型中A型闭合性胫骨远端骨折的临床疗效。方法自2007-06—2010-08,应用MIPPO技术联合LCP内固定治疗60例A型闭合性胫骨远端骨折,其中采用胫... 详细信息

目的比较分析应用外侧与内侧微创经皮钢板接骨术（MIPPO）联合锁定加压钢板（LCP）内固定治疗AO分型中A型闭合性胫骨远端骨折的临床疗效。方法自2007-06—2010-08,应用MIPPO技术联合LCP内固定治疗60例A型闭合性胫骨远端骨折,其中采用胫骨远端内侧锁定钢板内固定30例（内侧组）,采用胫骨远端外侧锁定钢板内固定30例（外侧组）。记录并比较2组临床指标（手术时间、术中出血量、骨折愈合时间、并发症、AOFAS评分、背屈活动范围、跖屈活动范围、短缩长度）及影像学指标（内翻畸形、外翻畸形、前向成角、后向成角）。结果内侧组获得随访平均14.8（12～18）个月,外侧组获得随访平均16.7（12～20）个月。内侧组手术时间及术中出血量均少于外侧组,差异有统计学意义（P〈0.05）。2组骨折愈合时间,并发症发生情况,内、外翻畸形,前、后向成角,背、跖屈活动范围,肢体短缩长度,以及AOFAS评分差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 MIPPO技术结合LCP钢板内固定治疗胫骨远端骨折时,内侧固定相对于外侧固定更符合骨折愈合的生物环境,具有创伤小、血运损伤小等优点。但是2种固定方法的短期疗效差异不大,临床治疗过程中仍需根据患者实际情况选择合适的手术方式。

关键词：闭合性胫骨远端骨折 A型骨折微创经皮钢板接骨术内侧固定外侧固定