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人类免疫缺陷病毒1型颗粒化衣壳蛋白展示其包膜蛋白表面环区表位的分子设计和免疫原性分析

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人类免疫缺陷病毒1型颗粒化衣壳蛋白展示其包膜蛋白表面环区表位...

作者：白诗梦厦门大学

学位级别：硕士

人类免疫缺陷型病毒HIV自1983年被发现以来已有30多年的时间,开发有效、安全且价格低廉的预防性与治疗性艾滋疫苗及抗病毒药物仍然是预防和治疗艾滋病的首要任务。世界上各个国家的研究团队正在尝试不同的技术手段致力于艾滋疫苗的研发... 详细信息

人类免疫缺陷型病毒HIV自1983年被发现以来已有30多年的时间,开发有效、安全且价格低廉的预防性与治疗性艾滋疫苗及抗病毒药物仍然是预防和治疗艾滋病的首要任务。世界上各个国家的研究团队正在尝试不同的技术手段致力于艾滋疫苗的研发。随着单细胞分选和二代测序等技术的发展,从HIV感染者体内分离出了一系列超强的广谱中和抗体,通过对这些广谱中和抗体结构的晶体学分析发展出了新型免疫原设计,其中包括以HIV广谱中和抗体表位或是以保守性表位为基础的表位聚焦的免疫原设计,主要是借助外源支架或是病毒颗粒展示不同的表位递呈给机体免疫系统,旨在诱导出广谱中和抗体。本研究在先前报道的对p24突变蛋白结构及免疫原性研究的基础上,利用其可组装为颗粒、具有高度保守的序列以及大量的T、B细胞可识别的免疫优势表位的特性,以该突变型的衣壳蛋白为支架展示不同的包膜蛋白表位构建融合蛋白,探索其作为HIV表位展示载体进行免疫原设计的可能性。根据前期对p24突变体N21C/A22C蛋白结构及性质的研究,以CypA连接环为表位展示区,设计构建一系列不同Env表位的重组克隆,以实验室成熟的大肠杆菌原核表达系统表达出了不同的N21C/A22C-V3及N21C/A22C-V1V2融合蛋白,包括B亚型NL4-3与89.6和D亚型的94UG114,并通过离子层析及疏水层析纯化后获得纯度较高的各亚型的重组蛋白。利用ELISA、Western blot等手段分析其理化特征;利用流式细胞术、免疫荧光、酶联免疫吸附实验及基于免疫斑点印迹(ELISPOT)平台的TZM-bl中和检测方法评价重组蛋白的免疫原性包括多抗血清的抗体滴度、中和能力及细胞免疫应答特征。对重组蛋白反应活性及小鼠免疫原性进行检测,重组蛋白与不同的中和抗体反应性良好,并且免疫后的小鼠多抗血清可以中和不同亚型的病毒,同时又可激起免疫小鼠Thl和Th2型的细胞免疫应答。综上,本研究评价了以突变型的衣壳蛋白N21C/A22C作为载体的可行性,为以颗粒化衣壳蛋白为支架的免疫原设计提供了概念验证,可作为HIV-1疫苗研发的免疫原设计策略,同时也为后续表位聚焦的疫苗研究提供参考。

关键词： p24突变蛋白表位展示中和抗体

财务问询函能够提高年报可读性吗?——来自董事联结上市公司的经验证据

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外国经济与管理 2020年第9期42卷 136-152页

作者：翟淑萍王敏白梦诗天津财经大学会计学院天津300222

本文从年报可读性视角,探究交易所问询函对董事联结公司年报可读性的治理作用。研究发现,财务报告问询函能够发挥显著的监管效果,不仅提高收函公司(发讯公司)年报可读性,而且促使与收函公司具有董事联结关系的上市公司(受讯公司)改善年... 详细信息

本文从年报可读性视角,探究交易所问询函对董事联结公司年报可读性的治理作用。研究发现,财务报告问询函能够发挥显著的监管效果,不仅提高收函公司(发讯公司)年报可读性,而且促使与收函公司具有董事联结关系的上市公司(受讯公司)改善年报披露行为。尤其是当投资者关注度高、媒体报道多和产品市场竞争激烈的公司被问询时,受讯公司会更大幅度提高年报可读性。作用机理检验证实,财务报告问询函降低收函公司盈余管理、增加违规成本,对收函公司年报可读性产生直接影响;同时,基于联结董事对信息的传递并出于对其声誉的维护,问询函对受讯公司年报可读性产生间接影响。本文将问询函影响的范围从收函公司本身拓展至具有董事联结的公司,探讨交易所问询监管能否发挥间接治理效果,为完善证券市场监管模式、提高市场监管效率提供了新的思路。

关键词：财务报告问询函年报可读性董事联结间接影响

国有上市公司杠杆操纵治理研究——基于党组织治理视角

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证券市场导报 2021年第11期 12-23页

作者：翟淑萍毛文霞白梦诗天津财经大学会计学院天津300222

以2015―2019年国有上市公司为样本,本文从党组织治理视角研究了如何治理国有上市公司杠杆操纵。研究表明,在去杠杆政策压力下,国有上市公司确实存在杠杆操纵,党组织以"双向进入、交叉任职"方式参与公司治理能显著抑制杠杆操纵。机制检... 详细信息

以2015―2019年国有上市公司为样本,本文从党组织治理视角研究了如何治理国有上市公司杠杆操纵。研究表明,在去杠杆政策压力下,国有上市公司确实存在杠杆操纵,党组织以"双向进入、交叉任职"方式参与公司治理能显著抑制杠杆操纵。机制检验表明,党组织治理通过提高企业信息透明度、降低管理层机会主义动机,抑制了国有上市公司杠杆操纵。当机构投资者持股比例较低、高管有更强的政治晋升激励以及产品市场竞争度更高时,国有上市公司党组织对杠杆操纵的治理效果更为显著。

关键词：杠杆操纵党组织治理国有上市公司信息透明度管理层机会主义动机

D8L区功能性缺失降低重组痘苗病毒载体自身免疫原性

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中华微生物学和免疫学杂志 2023年第11期43卷 836-842页

作者：张子凌曹康丽白诗梦董兰兰杨天涵赵晨徐建青张晓燕复旦大学生物医学研究院上海200032 复旦大学附属上海市公共卫生临床中心上海201508 复旦大学附属中山医院生物治疗中心上海200032

目的以痘苗病毒中和抗体表位D8L区为重组位点进行外源基因替换,从而降低载体自身免疫原性。方法通过同源重组技术,插入表达流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)序列,对D8L区进行替换,构建重组痘苗病毒流感疫苗,同时以表达相同HA的TK区重... 详细信息

目的以痘苗病毒中和抗体表位D8L区为重组位点进行外源基因替换,从而降低载体自身免疫原性。方法通过同源重组技术,插入表达流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)序列,对D8L区进行替换,构建重组痘苗病毒流感疫苗,同时以表达相同HA的TK区重组痘苗病毒疫苗为对照。Western blot对HA的表达进行验证;小鼠实验、ELISA、血凝抑制试验检测每次免疫后2周的血清抗体效价,攻毒保护试验评价重组痘苗病毒的保护效力。结果Western blot表明构建的重组疫苗均能正确表达HA D8L蛋白。ELISA、血凝抑制试验显示,初次免疫后,D8L区突变的重组痘苗病毒疫苗HA抗体效价略高于TK区突变的重组疫苗,并随着免疫次数的增多差异有统计学意义(P0.05)。H1N1pdm攻毒后保护效力评价结果显示,D8L区突变组可完全清除病毒,且小鼠肺部炎症水平更低、组织损伤更少。结论通过将外源基因插入到痘苗病毒载体中和抗体表位D8L区,有助于降低载体自身的免疫原性,并提高外源基因的免疫原性,为痘苗病毒载体在疫苗或基因治疗领域作为递送工具提供了参考。

关键词：流感疫苗痘苗病毒中和抗体表位载体效应

HIV-1 CAP2NC蛋白的表达及体外自组装

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生物工程学报 2018年第4期34卷 586-593页

作者：白诗梦张芝晴乔佳明沈鸿霖黄芳高双全李少勇李少伟夏宁邵顾颖厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102 厦门大学公共卫生学院分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102

构建并表达HIV-1 CAP2NC蛋白,探索其体外自组装条件。通过PCR技术扩增HIV-1(NL4-3毒株)CAP2NC基因片段,并将其连接到原核表达载体pTO-T7,获得重组质粒pTO-T7-CAP2NC,然后转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经疏水层析纯化后获得重组蛋白CAP2N... 详细信息

构建并表达HIV-1 CAP2NC蛋白,探索其体外自组装条件。通过PCR技术扩增HIV-1(NL4-3毒株)CAP2NC基因片段,并将其连接到原核表达载体pTO-T7,获得重组质粒pTO-T7-CAP2NC,然后转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经疏水层析纯化后获得重组蛋白CAP2NC。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白CAP2NC可在大肠杆菌可溶高效表达,经纯化后纯度约为95%。ELISA检测表明重组蛋白CAP2NC可被HIV-1衣壳蛋白特异性单克隆抗体识别,具有较好反应活性。重组蛋白透析后在非原性SDS-PAGE中呈现为多种聚体形式。分子筛排阻层析分析CAP2NC蛋白透析后可进行组装,负染电镜进一步观察显示CAP2NC蛋白在RNA存在条件下,可形成空心管状颗粒,其形态结构与HIV-1病毒衣壳体外自组装形成的类似。上述结果表明HIV-1 CAP2NC蛋白具有体外自组装的性质,为进一步在体外研究非成熟病毒样颗粒结构奠定基础。

关键词： HIV-1 CAP2NC蛋白自组装

联合雷特格韦用于HIV-1初次治疗有效性和安全性的Meta分析

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中华疾病控制杂志 2017年第5期21卷 504-509页

作者：张峰张芝晴白诗梦高双全田金辉顾颖曲成毅厦门大学公共卫生学院福建厦门361102 分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102 厦门大学生命科学学院福建厦门361102 兰州大学循证医学中心甘肃兰州730000 山西医科大学公共卫生学院流行病学教研室山西太原030001

目的评价联合雷特格韦治疗方案用于人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)初次抗病毒治疗的安全性和有效性。方法检索联合雷特格韦用于HIV-1感染者初次抗病毒治疗的临床随机对照试验(randomized controlled trial,R... 详细信息

目的评价联合雷特格韦治疗方案用于人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)初次抗病毒治疗的安全性和有效性。方法检索联合雷特格韦用于HIV-1感染者初次抗病毒治疗的临床随机对照试验(randomized controlled trial,RCT),采用Rev Man 5.2软件和Stata 12.0进行Meta分析。结果纳入17个RCT,Meta分析结果:以血浆病毒载量0.05);治疗240周,试验组有效率高于对照组(70.2%和61.5%),合并效应量(RR=1.15,95%CI:1.03~1.28,P=0.010)。试验组与对照组在腹泻、恶心、头晕、头痛、失眠等常见不良反应差异均无统计学意义(均有P>0.05);其中96周及144/156周时脂质代谢异常增高合并效应量RR(95%CI)分别为:低密度脂蛋白0.16(0.05~0.49)、0.20(0.08~0.48),甘油三酯0.12(0.02~0.59)、0.12(0.03~0.59),总胆固醇0.04(0.00~0.40)、0.04(0.00~0.34)。脂质代谢指标异常增高发生率,试验组均少于对照组,差异均有统计学意义(均有P白酶抑制剂可以作为HIV-1/艾滋病初次抗病毒治疗的可选方案,与目前推荐的抗病毒治疗方案疗效相当,且安全性较好,其中脂质代谢异增高常明显减少,但受纳入研究对象的限制,需要更多研究进一步证验证。

关键词： HIV 获得性免疫缺陷综合征 Meta分析随机对照试验

产业链安全关切下汽车供应链韧性评估及强链策略研究

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产业链安全关切下汽车供应链韧性评估及强链策略研究

作者：徐诗梦天津理工大学

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高氯酸钠溶解度测试与结晶行为

化学工程 2024年第9期52卷 32-36页

作者：范诗梦高尚王亮刘够生南昌大学化学化工学院江西南昌330031 江西坤隆新材料有限公司江西宜春336000 厦门紫金矿冶技术有限公司福建厦门361000

采用质量法测定313.15—338.15 K(40—65℃)高氯酸钠的水溶解度并绘制溶解度曲线,使用Apelblat方程、多项式方程和Van′t Hoff方程对溶解度数据进行关联拟合。采用激光法测量高氯酸钠溶液的超溶解度并计算介稳区宽度,考察温度、搅拌速... 详细信息

采用质量法测定313.15—338.15 K(40—65℃)高氯酸钠的水溶解度并绘制溶解度曲线,使用Apelblat方程、多项式方程和Van′t Hoff方程对溶解度数据进行关联拟合。采用激光法测量高氯酸钠溶液的超溶解度并计算介稳区宽度,考察温度、搅拌速率和降温速率对介稳区宽度、晶体形貌等高氯酸钠结晶行为的影响。结果表明:高氯酸钠溶解度随着温度升高而增大,Apelblat方程对高氯酸钠溶解度的关联性最优。升温、高搅拌速率、低降温速率会使高氯酸溶液介稳区宽度变窄。在起始温度40—65℃下,搅拌速率250 r/min、降温速率0.3 K/min时,可获得晶型完整的高氯酸钠晶体。这可为解决高氯酸钠工业结晶过程中晶体易聚集、晶型不稳定等问题提供数据支撑和理论参考。

关键词：高氯酸钠结晶溶解度超溶解度介稳区

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中国上市公司存货投资粘性研究

管理学报 2024年第2期21卷 278-286,316页

作者：张亮亮黄诗梦柴紫谦中国矿业大学经济管理学院江苏省徐州市221116

以2007~2020年中国沪深A股制造业上市公司为样本,实证研究企业存货投资的粘性行为。研究发现,企业销售收入下降时存货投资减少的幅度小于等量销售收入上升时存货投资增加的幅度,即企业存货投资存在粘性。考虑不同类别存货的差异后发现,... 详细信息

以2007~2020年中国沪深A股制造业上市公司为样本,实证研究企业存货投资的粘性行为。研究发现,企业销售收入下降时存货投资减少的幅度小于等量销售收入上升时存货投资增加的幅度,即企业存货投资存在粘性。考虑不同类别存货的差异后发现,产成品的存货投资粘性更强。进一步,管理者对未来需求的乐观预期、稳定的市场需求和较高的缺货成本是存货投资粘性的重要成因。研究还发现,存货投资粘性越强,企业未来销售收入增长越快,市场竞争力越强,分析师销售收入预测也越乐观和准确,这表明存货投资粘性有助于提升企业产品市场的表现,同时能够向资本市场参与者提供有用的信息,具有一定的信息含量。

关键词：存货投资投资粘性市场表现分析师预测

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