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辽宁地区汉族人群D17S518基因座多态性及其毛发检材的应用研究

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辽宁地区汉族人群D17S518基因座多态性及其毛发检材的应用研究

作者：白梅中国医科大学

学位级别：硕士

前言短串联重复序列(short tandem repeats,STR)又称微卫星DNA(mierosatellite),是指重复单位只有1～6bp、重复次数一般在数次至几十次之间的串联重复DNA序列。STR在人类基因组中分布广泛、数量较多、等位基因片段长度较短、扩增成功率... 详细信息

前言短串联重复序列(short tandem repeats,STR)又称微卫星DNA(mierosatellite),是指重复单位只有1～6bp、重复次数一般在数次至几十次之间的串联重复DNA序列。STR在人类基因组中分布广泛、数量较多、等位基因片段长度较短、扩增成功率高,是目前法医物证鉴定中应用最广泛的DNA长度多态性遗传标记。然而,对于毛发等富含角化细胞的特殊法医物证检材,由于其细胞核发生明显的转移,核基因组DNA含量少且分解严重,常规方法检测法医物证鉴定中最常用的四核苷酸STR基因座时,常难以获得满意的结果。线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)检测作为法医学应用序列多态性分析进行个人识别的典型实例,在毛发等非常规检材的鉴定中具有重要的实用价值。但mtDNA特殊的遗传特征、突变率较高、信息量较低、检测技术复杂等因素的影响,在一定程度上限制了mtDNA的法医学应用。因此,选择多态性程度较高且等位基因片段更短,适用于毛发等检材DNA多态性分析的遗传标记,是法医物证工作者共同关心的课题。D17S518基因座位于人类第17号染色体上,是由(CA)n核心序列构成的二核苷酸简单串联重复序列。本研究首先应用PCR扩增结合聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的方法,调查D17S518基因座在辽宁汉族人群中的频率分布,以评估该遗传标记的法医学应用价值,并对其应用于毛发检材的可行性及影响因素进行了初步研究,为该基因座在更广泛领域的应用奠定了基础。材料与方法根据文献合成特异性扩增D17S518基因座的引物,应用PCR技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离结合银染显谱的方法,对120例中国辽宁地区无血缘关系的汉族个体血液样本进行D17S518基因座分型,并通过DNA序列分析确定其等位基因;对采用不同方法(酚/氯仿法和Chelex—100法)提取DNA,不同数量(1根、2根和5根)和不同区段(远段、中段和近段)毛发检材的D17S518基因座扩增结果进行比较。结果在120例中国辽宁地区无血缘关系汉族个体中,检出D17S518基因座的5种等位基因及12个基因型,根据DNA序列分析结果将扩增片段长度为88bp、90bp、94 bp、98 bp、100 bp的5种等位基因分别命名为D17S518*15、D17S518*16、D17S518*18、D17S518*20和D17S518*21。12种基因型及频率分别为:15/15为12例(10%),16/16为13例(10.7%),18/1 8为3例(2.5%),15/16为21例(17.5%),15/18为23例(19.2%),15/20为6例(5%),15/21为2例(1.7%),16/18为20例(16.7%),16/20为8例(6.7%),16/21为5例(4.2%),18/20为4例(3.3%),18/21为3例(2.5%);5种等位基因频率分别为:D17S518*15=0.317、D17S518*16=0.333、D17S518*18=0.233、D17S518*20=0.075、D17S518*21=0.042。应用Powerstatsvl2软件对D17S518基因座群体调查结果进行数据分析,获得如下法医学应用参数:杂合度(H)为0.767,个人识别几率(DP)为0.872,偶合几率(Pm)为0.128,非父排除率(PE)为0.539,多态信息含量(PIC)为0.68。6个个体毛发检材的D17S518基因座扩增产物检测结果:①采用酚/氯仿方法提取模板DNA,其扩增产物检出率随毛发数量的增加而提高,即1根为2/6、2根为4/6、5根为5/6;而采用Chelex-100法提取模板DNA的毛发检材均未检出扩增产物。②同一毛发不同区段的扩增产物检出结果不同;不同毛发中、远段部分扩增产物检出规律不同,但近段毛发均可检出扩增产物。结论1、D17S518基因座在中国辽宁地区汉族群体中具有良好的多态性分布,在法医学上具有较高的应用价值。2、二核苷酸简单串联重复序列的STR基因座适用于毛发等非常规法医物证检材的DNA多态性分析。3、酚/氯仿法提取毛干DNA的扩增效果明显优于Chelex-100法。

关键词：二核苷酸简单串联重复顺序 D17S518 PCR-STR 毛发检材辽宁汉族

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基于地域文化下的公交车站的设计研究

基于地域文化下的公交车站的设计研究

作者：白梅合肥工业大学

学位级别：硕士

公交车站是城市公共环境设施的一项基本内容。城市公交车站的设计的完整性可以从整体上提升城市公共环境以及相应设施的建设。随着精神文明的发展与生活节奏的加快,人们对于公交车站的整体设计要求也随之提高。富有特色的公交车站一方... 详细信息

公交车站是城市公共环境设施的一项基本内容。城市公交车站的设计的完整性可以从整体上提升城市公共环境以及相应设施的建设。随着精神文明的发展与生活节奏的加快,人们对于公交车站的整体设计要求也随之提高。富有特色的公交车站一方面可以塑造城市形象,另一方面可以传播地域文化与内在传统精神。随着经济全球一体化的时代到来,当今的中国社会是非常重视精神与文化的社会,各个地区的地域文化成为打造这个城市品牌的灵魂。地域文化作为文化传承不可或缺的部分,得到世界各国设计师的普遍重视。笔者针对当前城市公交车站进行研究发现,如何体现城市公交车站设计的民族性与地域性是需要解决的问题。本文在现代中国城市环境的基础上分析了地域文化为公交设计带来的种种影响,总结了地域文化在公交车站设计中的基本应用现状,论述了如何设计出具有地域文化的公交车站设计,针对当前我国公交车站设计缺乏地域文化的创新性,较为全面的分析和论述。根据公交车站所处城市空间环境因素,融合地域文化因素,对公交车站视觉进行再设计。研究符合当前城市公共环境的公交车站。本文旨在地域文化在公交车站设计中得以继承和创新为目的,深入研究地域文化与公交车站设计的关系,从而设计出赋予时代性的公交车站的地域文化精神。完善城市公共环境基础设施文明建设。

关键词：公交车站地域文化设计融合

黄酒酵母2-苯乙醇合成途径中预苯酸脱水酶的催化特性研究

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黄酒酵母2-苯乙醇合成途径中预苯酸脱水酶的催化特性研究

作者：白梅江南大学

学位级别：硕士

2-苯乙醇(2-Phenylethanol;2-PE)是一种具有玫瑰香味的芳香醇,是黄酒中重要的香气物质之一。黄酒中的2-苯乙醇主要是在黄酒酿造过程中由黄酒酵母来合成。提高黄酒酿造过程中酵母生成2-苯乙醇的能力,不仅有利于提升黄酒的风味品质,其较... 详细信息

2-苯乙醇(2-Phenylethanol;2-PE)是一种具有玫瑰香味的芳香醇,是黄酒中重要的香气物质之一。黄酒中的2-苯乙醇主要是在黄酒酿造过程中由黄酒酵母来合成。提高黄酒酿造过程中酵母生成2-苯乙醇的能力,不仅有利于提升黄酒的风味品质,其较高的香气强度也可以赋予黄酒独特的风味,但不同批次黄酒基酒中含量参差不齐,是黄酒品质不稳定的一个重要因素。本研究在前期工作中从黄酒发酵醪液中筛选得到一株高产2-苯乙醇的黄酒酵母(Saccharomyces cerevisiae,HJ),通过序列比对明确黄酒酵母HJ中2-苯乙醇合成代谢途径中的合成关键酶,为黄酒中2-苯乙醇含量的理性控制提供了操作靶点。本研究主要研究结果如下:分别采用酿酒酵母模式菌株W303和黄酒酵母HJ制作酒母,用于黄酒发酵,检测发现黄酒酵母HJ生成2-苯乙醇的含量比酵母模式菌株W303升高了约50%。然后分别对酿酒酵母模式菌株W303和黄酒酵母HJ中预苯酸脱水酶(PHA2p)的序列进行扩增测序比对,结果发现:与酿酒酵母模式菌株PHA2p相比,黄酒酵母PHA2p 序列发生了三处自然突变(I161K、L239P、Q250H)。对酿酒酵母模式菌株W303和黄酒酵母菌株HJ中PHA2p蛋白的分别进行原核表达、纯化。最后分别对纯化后PHA2p此酶蛋白的稳定性、苯乙醇耐受性、末端代谢产物反馈抑制的能力等进行测定。结果表明:该酶的最适作用pH为8.2,最适反应温度为45℃;在pH在6.2.7范围内较稳定,酶活在400℃范围内保持较好;酪氨酸(Tyr)及色氨酸(Try)对该酶活性影响较小,其中Tyr对预苯酸脱水酶具有极小的促进作用。对纯化后的酿酒酵母模式菌株W303及黄酒酵母菌株HJ中的预苯酸脱水酶进行酶动力学的研究:酿酒酵母模式菌株W303和黄酒酵母HJ中的预苯酸脱水酶K=0.16mmol?L,酿酒酵母模式菌株W303中k/K催化效率指数=26.50 L?mmol?min,黄酒酵母HJ中为36.48 L?mmol?min;外源添加3 mmol·L苯丙氨酸(L-Phe)的情况下,模式菌株W303中的预苯酸脱水酶K=0.27 mmol?L,k/K催化效率=2.82L?mmol?min;黄酒酵母中黄酒酵母菌株HJ的预苯酸脱水酶K=0.27 mmol?L,k/K催化效率=2.91 L?mmol?min。根据上述动力学数据,研究发现来自酿酒酵母模式菌株W303和黄酒酵母HJ pha2基因编码的预苯酸脱水酶均受到L-Phe的反馈抑制,同时也发现黄酒酵母菌株HJ的预苯酸脱水酶的比酶活比酿酒酵母模式菌株W303提高了22.60%。这为酿酒酵母芳香族氨基酸代谢途径的改造提供了新的靶点。将黄酒酵母HJ与酿酒酵母模式菌株W303在YPD培养基和黄酒模拟液培养基进行发酵培养,监测黄酒酿造过程中2-苯乙醇生成过程,分阶段取样,并检测苯丙氨酸和苯乙醇的含量。研究发现:黄酒酵母的艾利希(Ehrlich)途径活力和莽草酸途径活力都很强。黄酒酵母HJ产生的2-苯乙醇主要来源于莽草酸途径。

关键词： 2-苯乙醇黄酒酵母预苯酸脱水酶酶学特性

先天性感音聋幼儿的内耳形态学研究及听觉传导通路的DTI评估

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先天性感音聋幼儿的内耳形态学研究及听觉传导通路的DTI评估

作者：郑梅竹天津医科大学

学位级别：硕士

目的：探讨先天性感音神经性耳聋（CSNHL）患儿的蜗神经（CN）及内耳道（IAC）是否存在发育异常,并探讨CN发育与年龄及IAC大小的关系。应用磁共振扩散张量成像（DTI）技术评价CSNHL患儿中枢听觉传导通路的完整性及损伤情况,探讨听觉传... 详细信息

目的：探讨先天性感音神经性耳聋（CSNHL）患儿的蜗神经（CN）及内耳道（IAC）是否存在发育异常,并探讨CN发育与年龄及IAC大小的关系。应用磁共振扩散张量成像（DTI）技术评价CSNHL患儿中枢听觉传导通路的完整性及损伤情况,探讨听觉传导通路脑白质微观结构改变。方法：应用德国Siemens公司Magnetom Trio Tim MR 3.0T扫描仪对43例CSNHL患儿及15例听力正常对照（NC）者进行全脑的常规T1WI、T2WI扫描,、T2-SPACE及DTI扫描。T2-SPACE序列参数为：[TR/TE 1000/132ms,矩阵200×200]。DTI序列参数[TR/TE 10500/103ms,空间分辨率1.8×1.8×1.8LP/mm,b值分别取0、1000 s/mm2,方向20个]。测量所有研究对象双侧CN的水平径、横截面积、横截面周长及双侧内耳道的水平径、垂直径径线;并测量听觉传导通路上的斜方体（TB）、上橄榄核（SON）、下丘（IC）、内侧膝状体（MGB）、颞横回下白质（WTG）的部分各向异性（FA）、表面扩散系数（ADC）、横向扩散系数（λ（?））及纵向扩散系数（λ⊥）。用r检验,比较左右侧各径线有无统计学差别。将患儿按两个标准分组,①内耳结构是否异常②是否能感知声音。用LSD检验对组间CN径线进行比较。采用Pearson积差相关法对CN和IAC大小进行相关性分析。用t检验,比较左右侧两组间5个兴趣区（ROI）4个DTI参数值有无差异。将患儿按是否能感知声音分组。用LSD检验对组间5个兴趣区（ROI）4个DTI参数值进行比较。采用Pearson积差相关法对最敏感参数和年龄进行相关性分析。结果：1.43例患儿中,16例内耳畸形,其中大前庭9例,大前庭导水管8例。耳蜗螺旋畸形12例。***组、NC组CN左右侧横径、横截面积、横截面周长及IAC水平径、垂直径分别比较,均无统计学差异（P＞0.05）。***横径、横截面积及横截面周长在内耳结构正常组患儿（Ⅰ组）、内耳结构异常组患儿（Ⅱ组）与正常对照组（Ⅲ组）间进行方差分析,存在统计学差异（P＜0.05）。Ⅰ组、Ⅱ组CSNHL患儿的CN横径、横截面积及横截面周长小于Ⅲ组对照组;Ⅰ组左侧CN面积大于Ⅱ组,均有统计学差异（P＜0.05）。4CN横径、横截面积及横截面周长在带助听器患儿组（甲组）、不带助听器患儿组（乙组）及正常对照组（丙组）间进行方差分析,存在统计学差异（P＜0.05）。甲组、乙组CSNHL患儿的CN横径、横截面积及横截面周长小于丙组对照组,差别有统计学意义（P＜0.05）。5. CSNHL患儿的CN横截面积和周长相对于NC组和年龄无明显的线性关系。***左侧IAC水平径与CN横截面积有线性关系。***组下丘及颞横回下白质的FA、ADC、λ∥、λ⊥左右侧比较差异有统计学意义（P＜0.05）。NC组下丘左右FA、ADC、λ∥、λ⊥有统计学差异（P＜0.05）。8.除斜方体外其他4个ROIs,甲组、乙组CSNHL患儿的FA与丙组之间均存在统计学差异（P＜0.05）,且均小于丙组对照组;除颞横回下白质其他4个ROIs,甲组、乙组CSNHL患儿的λ⊥与丙组之间均存统计学差异（P＜0.05）,且均大于丙组对照组。两组CSNHL患儿之间各参数均无统计学差异（P＞0.05）。9.正常对照组的FA值在5个ROIs都随着年龄的增长而增大,CSNHL组患儿5个ROIs的FA值与年龄并未存在相关。结论：本研究发现CSNHL患儿的CN大小比正常组略小。内耳结构可能会影响听神经的发育。CN横截面积为测量CN大小最敏感指标。幼儿左、右脑FA值不对称是先天形成的。CSNHL组4个ROIs的FA值下降,λ⊥升高,而ADC值和λ″没有改变,说明听神经纤维束有所破坏,但纤维束依然完整。下丘是对声音刺激影响最敏感部位。微弱的声音刺激对脑内听觉传导通路发育没有显著的影响。

关键词：弥散张量成像先天性感音神经性耳聋蜗神经内耳道听觉传导通路

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究竟在什么条件下两个李萨如图形的形状相同

大学物理 1991年第9期10卷 6-9页

作者：白梅兰北方工业大学

本文推出了李萨如图形轨迹方程通式，在此基础上首次建立并证明了关于两个李萨如图形在什么条件下形状相同的基本定理，澄清了目前人们对于这个问题的一些模糊认识．

关键词：李萨如图形轨迹方程简谐振动

维普期刊数据库

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复述对高中英语阅读学习的促进作用研究

复述对高中英语阅读学习的促进作用研究

作者：白梅延安大学

学位级别：硕士

英语教学的工具性目标注重其语言知识和语言技能,在素质教育的提倡下,学生在掌握英语语言知识的基础上,更加夯实了对语言技能的掌握。在高中阶段的英语教学中,阅读学习是重点也是难点,学生在初中养成的精细阅读习惯无法快速高效的阅读... 详细信息

英语教学的工具性目标注重其语言知识和语言技能,在素质教育的提倡下,学生在掌握英语语言知识的基础上,更加夯实了对语言技能的掌握。在高中阶段的英语教学中,阅读学习是重点也是难点,学生在初中养成的精细阅读习惯无法快速高效的阅读高中阶段稍复杂的文本。复述法常常用在低年级的语文和英语教学中,用以检查学生对文章理解程度;而实际上复述法是一种基于理解的创新,是对理解、总结、记忆及表达这四种能力的综合,对高中阶段的英语阅读学习也有一定的促进作用。本研究针对当前高中英语阅读学习现状,试图探究复述法应用于高中生英语阅读学习的可行性和有效性,并以输入、输出假说理论和建构主义学习理论为理论依据,以陕西省绥德一中高二年级两个班的120名学生为对象进行为期3个月的实验。本研究结合问卷调查和实验研究,控制班按正常教学方式讲授阅读课,实验班加入了复述法训练。实验后对两个班进行前后对比,对得到的前测、后测数据通过SPSS17.0进行统计,并结合调查问卷进行分析。实验结果表明,学生倾向于选择来自课外的、故事性较强的复述材料,对同伴复述或小组复述有更高的积极性,最常用的复述方法是关键词提示法和列提纲法。实验表明,复述法有助于提高学生的英语阅读能力,尤其对学生理解间接性问题有更明显的促进作用。因此,复述法是有效促进高中学生英语阅读学习的方法之一。

关键词：复述法英语阅读高中英语

高中生科学解释能力调查研究 ——以电学部分知识为例

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高中生科学解释能力调查研究 ——以电...

作者：白梅华东师范大学

学位级别：硕士

建立对自然系统的特性和行为的科学解释的能力一度被认为是科学课程学习的核心能力。认知心理学的研究表明,如果学生在学习或解决问题时能自行产生解释,就可以加深对主题的理解,并改善知识的传播。2012年,NGSS将“建构解释”视为主要的... 详细信息

建立对自然系统的特性和行为的科学解释的能力一度被认为是科学课程学习的核心能力。认知心理学的研究表明,如果学生在学习或解决问题时能自行产生解释,就可以加深对主题的理解,并改善知识的传播。2012年,NGSS将“建构解释”视为主要的科学实践之一,多项科学教育文献和有关科学教育的改革文件一直在强调学生参与建构自己的科学解释的重要性。关于评价物理学科领域学生的科学解释能力,本文根据科学解释的哲学释义对学生的科学解释能力进行概念界定,结合国外现有研究成果构建了包括解释的深度、解释的结构性、解释的统一性三个维度的科学解释能力的理论框架,编制了三道高中物理电学部分的测试题对上海市不同层次水平的三类学校10个物理等级考班级的学生的科学解释能力进行了调查。结果表明高中物理等级班的学生具有推论最佳解释的能力,但学生所表现出的整体科学解释能力水平较低,大多数学生只能解释到活动深度,其解释不具有良好的逻辑结构,而在统一性方面学生很难推论出具有广泛适用性的解释。同时我们发现三个维度之间,学生的解释深度、解释结构分别于解释统一性存在一定的相关性。对不同层次学校学生的解释能力的对比分析,三类学校学生解释能力具有显著性差异。对学生所作科学解释特点进行分析,我们发现:（1）高中的学生不再出现目的论解释,具有较高的因果敏感性和知识储备能够完成解释推论。（2）受直觉思维的影响,进行局部推理、集中式推理,难以对系统中作为微观级交互结果出现的宏观级属性进行推理。（3）专注于线性顺序因果链,难以进行复杂结构关系解释。针对提高学生科学解释能力,我们提出了进行情境式学习、探究式学习,进行明确的科学解释培训,进行交互式计算机仿真和提高学生元认知能力的教学建议。

关键词：科学解释能力因果机制推论最佳解释

乳腺癌及妇科肿瘤组织常染色体SNP突变分析

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乳腺癌及妇科肿瘤组织常染色体SNP突变分析

作者：白梅河北医科大学

学位级别：硕士

目的:在法医日常司法鉴定实践活动中,除了常见的血液、血痕、毛发、唾液等检材外,还有一类特殊的检材,即肿瘤组织,在某些特定情况下可能成为检案唯一的参照样本。与STR相比,SNP具有突变率低和易于检测等特点,从而对于肿瘤组织身源认定... 详细信息

目的:在法医日常司法鉴定实践活动中,除了常见的血液、血痕、毛发、唾液等检材外,还有一类特殊的检材,即肿瘤组织,在某些特定情况下可能成为检案唯一的参照样本。与STR相比,SNP具有突变率低和易于检测等特点,从而对于肿瘤组织身源认定具有潜在的应用价值。但是目前国内外尚缺乏对肿瘤组织SNP稳定性的系统研究。本研究旨在探讨妇科肿瘤组织和乳腺癌组织的SNP突变规律,并分析肿瘤类型、组织类型、分化程度、临床分期对SNP突变率的影响,以系统评估SNP对该两种肿瘤组织的法医学检验的实际应用价值,并探索应对肿瘤来源生物学检材的高效、准确的SNP分型方法,以期对此类案件的法医学检验提供参考。方法:1样本采集:本实验中所使用样本为本科室前期采集的63例乳腺癌和62例妇科恶性肿瘤患者的肿瘤组织和癌旁正常组织,以及10例妇科良性肿瘤组织及正常对照组织。相应地包括患者的年龄、肿瘤类型、组织类型、临床分期、分化程度等信息。2 DNA提取:分别用动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒和石蜡包埋组织DNA提取试剂盒提取妇科肿瘤和乳腺癌的肿瘤组织、癌旁正常组织DNA,采用ND-1000蛋白核酸定量仪定量。3 SNP分型:采用SNap Shot multiplex kit试剂盒扩增肿瘤组织及正常组织DNA的55个常染色体SNP基因座;然后进行PCR反应产物纯化、单碱基延伸反应、单碱基延伸反应产物纯化、ABI 3130基因分析仪对单碱基延伸反应纯化产物进行电泳分型,使用Gene Mapper?v3.2软件分析结果,得到肿瘤组织、正常组织的SNP分型。比对来自同一个体的正常组织和肿瘤组织的SNP分型结果,记录突变的位点和类型。4等位基因特异性PCR扩增（AS-PCR）4.1 AS-PCR引物设计:从55个SNP位点中选择18个基因座,其中9个为检测到突变的基因座,9个为未检测到突变的基因座。根据http://***/snp/网站公布的参考序列,结合引物设计软件Primer Premier 6.0和oligo 7.0,以及NCBI blast比对结果,对选取的18个SNP基因座重新设计AS-PCR的两条等位基因特异性引物和一条通用引物。为增加引物的特异性,在两条等位基因特异性引物中均额外引入一个错配碱基;此外,在其中一条等位基因特异性引物5'端加入一段与模板DNA不配对的核苷酸序列,将SNP序列差异转换为长度差异,便于后续毛细管电泳检测。4.2单位点等位基因特异性PCR扩增:为验证单位点AS-PCR分型体系的准确性,选取4例已知SNP分型的健康个体DNA样本,分别采用Q5超保真DNA聚合酶和Ampli Taq Gold DNA聚合酶对其DNA进行AS-PCR,产物经ABI 3130基因分析仪进行检测,Data Collection V3.0软件采集数据,Genemapper V3.2软件分析数据得到SNP分型。5 SNP突变验证:采取多次重复SNap Shot实验、单等位基因Sanger测序、单位点AS-PCR对部分突变位点进行验证。6统计学分析:应用Excel、SPSS v21.0软件对上述实验结果进行统计学分析,用χ检验分别比较妇科肿瘤和乳腺癌不同肿瘤类型、组织类型、分化程度的SNP突变差异;用秩和检验分别比较两种肿瘤不同临床分期的SNP突变差异;用χ检验比较妇科肿瘤与乳腺癌组织之间SNP突变率的差异。结果:1 AS-PCR体系构建及准确性验证设计了18个SNPs位点的AS-PCR引物,引物长度18～32个碱基,扩增产物长度107～217bp。见Table1。4例已知SNP分型的DNA样本经AS-PCR,结果显示Q5超保真DNA聚合酶得到的SNP分型存在非特异性扩增,与已知分型均不一致;而Ampli Taq Gold DNA聚合酶得到的SNP分型结果与已知分型完全一致,结果正确。选取六个SNP位点的等位基因进行Sanger测序,其中rs1109037、rs740598、rs10092491测序失败,其余三个位点rs2342747、rs6444724、rs159606的等位基因序列与NCBI网站提供的标准序列一致,验证了所构建的AS-PCR分型体系的准确性。2妇科肿瘤组织的SNP突变10例妇科良性肿瘤组织未检出突变;62例妇科恶性肿瘤组织经SNap Shot方法分型后,共发现5例样本的五个SNP位点发生了突变,突变类型表现为杂合性丢失,包括9号样本和29号样本的rs13218440、16号样本的rs1523537、18号样本的rs1498553和28号样本的rs315791。选取9号、18号、29号样本进行AS-PCR,并对9号、18号、28号、29号肿瘤组织DNA进行Sanger测序。16号样本的rs1523537位点三次SNap S

关键词：单核苷酸多态性妇科肿瘤乳腺癌突变等位基因特异性聚合酶链反应

Q235钢表面激光熔覆316L涂层及316L/Al2O3复合涂层研究

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Q235钢表面激光熔覆316L涂层及316L/Al2O3复合涂层研究

作者：白梅中北大学

学位级别：硕士

Q235钢是最常见的低碳结构钢，它具有含碳量低，强度、韧性较好、焊接性好、成本低等优点，广泛应用于建筑工程结构中。如材质为Q235钢的中厚板主要应用于建筑工程、大型铁路桥梁的钢板中。在工矿条件中，对其承截能力、承受的动载荷、... 详细信息

Q235钢是最常见的低碳结构钢，它具有含碳量低，强度、韧性较好、焊接性好、成本低等优点，广泛应用于建筑工程结构中。如材质为Q235钢的中厚板主要应用于建筑工程、大型铁路桥梁的钢板中。在工矿条件中，对其承截能力、承受的动载荷、震动、冲击、耐磨性和耐腐蚀性的要求都很高，在实际工作环境中，钢板由于受到介质的腐蚀、载荷的冲击等，其表面会发生磨损腐蚀现象。所以对其表面进行修复很有必要，本课题主要研究利用激光熔覆技术，在Q235钢表面激光熔覆316L涂层和316L/Al2O3复合涂层。本文探究了在单因素试验下，不同激光工艺参数对单道316L涂层宏观形貌及几何截面尺寸的影响;并利用正交试验激光熔覆单道316L涂层，得出最佳工艺参数;研究了不同扫描间距对316L熔覆层成型质量的影响，分析了不同扫描速度和不同激光电流下，316L熔覆层的界面结合形态;利用金相显微镜和扫描电镜对不同熔覆层的微观组织进行了分析;利用XRD对316L粉末和不同熔覆层的物相进行了分析;测试了不同熔覆层的硬度、耐磨性和耐腐蚀性能;最后分析了熔覆层中产生缺陷的原因，并对减少熔覆层中的球化、裂纹、气孔及夹杂等缺陷提出了相应的措施。结果表明：（1）单道熔覆层的宽度，高度和深度都是随着激光电流、脉冲宽度和激光频率的增大逐渐增大，而随着扫描速度的增大都逐渐减小。在粉末涂层厚度为0.5mm时，通过正交试验得出最佳的激光熔覆的工艺参数，即在激光电流为160A，扫描速度为110mm/min，激光脉宽为4.0ms，脉冲频率为10Hz等工艺参数下，熔覆层表面无裂纹、气孔、夹杂等缺陷，且与基体达到了良好的冶金结合。（2）316L涂层和316L/Al2O3复合涂层从熔覆层底部到上部的组织都是由平面晶向柱状晶，胞状晶最后到树枝晶及等轴晶过渡。含量为6%Al2O3复合涂层的组织细小，熔覆层中Al2O3粉末含量超过6%时，熔覆层表面成型质量也下降，且熔覆层组织中会出现部分未溶解的白色的Al2O3颗粒，熔覆层中会出现大量的孔洞，致使熔覆层质量变差。物相分析为：316L粉末的物相是由奥氏体相组成，而316L涂层和316L/Al2O3复合涂层中新增加了铁素体相。（3）316L不锈钢熔覆层的硬度约为230-270HV，平均摩擦系数为最低为0.3608，磨损损失量为0.00875g;316L+6%Al2O3熔覆层的硬度值最大为568HV，平均摩擦系数最低为0.1246，磨损损失量为0.00007g;而基体的硬度仅为110-140HV之间，基体的平均摩擦系数最低为0.4231，磨损损失量为0.01226g。可知，316L涂层的硬度及耐磨性相比于基体略有提高，而316L/6%Al2O3涂层的硬度及耐磨性较基体的显著提高，这是因为熔覆层中的Al2O3硬质颗粒有效阻碍了磨损。从磨损机制来看，基体Q235钢和316L涂层的磨损形式为磨料磨损和黏着磨损的复合，而316L/Al2O3复合涂层的磨损形式主要为磨料磨损。（4）电化学腐蚀及盐雾试验测量表明，316L涂层的腐蚀电位为-346mv比基体的腐蚀电位-432mv高，316L涂层的极化电流密度为0.016mA比基体的极化电流密度0.296mA低，说明316L涂层的耐腐蚀性较基体提高很多，而316L/Al2O3复合涂层中，当Al2O3含量为6%时，熔覆层的腐蚀电位为-330mV，极化电流密度也最小为0.0012mA。当Al2O3含量超过6%时，熔覆层的耐腐蚀性逐渐下降，总的看，316L/Al2O3复合涂层的耐腐蚀性也要比基体Q235钢的好。

关键词： Q235钢 316L粉末 Al2O3粉末激光熔覆耐磨性耐腐蚀性