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蛇毒重组类凝血酶的分离纯化及亲和配基的制备

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蛇毒重组类凝血酶的分离纯化及亲和配基的制备

作者：雷旭宇大连理工大学

学位级别：硕士

蛇毒中的类凝血酶属于丝氨酸蛋白水解酶，它的特点是能将血液中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白凝胶。由于其形成的纤维蛋白凝胶是非交联的，并极易为内皮系统或纤溶酶所降解，因此类凝血酶在临床上可以用于降低血液中纤维蛋白原的水平、改... 详细信息

蛇毒中的类凝血酶属于丝氨酸蛋白水解酶，它的特点是能将血液中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白凝胶。由于其形成的纤维蛋白凝胶是非交联的，并极易为内皮系统或纤溶酶所降解，因此类凝血酶在临床上可以用于降低血液中纤维蛋白原的水平、改善血液的流动性，从而达到防治和治疗血栓类疾病的目的。在对蛇岛蝮蛇类凝血酶已有的研究基础上，本论文的工作从以下三个方面开展： (一)利用金属螯合层析纯化组合分离纯化重组蛇毒类凝血酶。我们将大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶基因连接到表达载体pET-32a(+)上并转入大肠杆菌BL21(DE3)中，在胞内获得可溶性表达。在表达产物的纯化过程中，比较了两种分离纯化方法的不同组合，重组类凝血酶经过组合一即金属螯合层析、疏水层析、Source 15Q强阴离子交换层析纯化后纯度能达到88％，产物回收率为37.9％，纯化倍数为26;而经过方案二中各步骤即金属螯合层析、DEAE弱阴离子交换层析、Source 15Q强阴离子交换层析纯化后，纯度只能达到75％，产物回收率和纯化倍数分别仅为7.3％，15。 (二)本文设计合成了抗重组类凝血酶的鸡卵黄免疫球蛋白抗体(IgY)的亲和配基，考察了免疫亲和层析分离纯化重组蛇毒类凝血酶的效果。将通过免疫获得的鸡卵黄免疫球蛋白经过PEG-6000三步沉淀法粗提后，可得到4.0mg／ml鸡卵黄的总IgY，再经过特异性免疫亲和柱纯化后，纯化倍数能达到200左右。表达产物的可溶组分经过疏水层析、免疫亲和层析、Source 15Q强阴离子交换层析三步纯化后，可获得纯度达到80％左右的目的融合蛋白，活性回收率为34.8％，纯化倍数为29.5。 (三)天然蛇毒中类凝血酶的分离纯化及酶学性质研究。采用SP阳离子交换层析、凝胶过滤、阴离子交换层析分离纯化蛇毒，得到两种有凝结活性的单一组分。酶Ⅰ的分子量约为34kDa，Km为3.4×10M，Vmax为6.26×10mM／s;酶Ⅱ的分子量约为38kDa，Km为5.7×10M，Vmax为7.36×10mM／s。比较了五种不同的抑制剂的抑制效果，就酶Ⅰ而言，4-氨基苯甲醚为最强的抑制剂，蛇毒重组类凝血酶的分离纯化及亲和配基的制备而盐酸肌为最弱抑制剂，而对于酶H，4一氨基苯甲醚为最强的抑制剂，盐酸肌为最弱抑制剂。

关键词：类凝血酶大肠杆菌分离纯化 IgY 免疫亲和层析

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质量阻尼比对圆柱体流致振动捕能效率的影响

哈尔滨工程大学学报 2020年第9期41卷 1274-1280页

作者：白旭韩传煜孙海江苏科技大学船舶与海洋工程学院江苏镇江212003 哈尔滨工程大学航天与建筑工程学院黑龙江哈尔滨150001

针对水下流致振动式捕能装置最优捕能制造参数的设计,建立了水流-振子-载荷耦合运动模型,推导了尾流振子模型,计算不同质量比、阻尼比条件下圆柱振子在不同约化速度下的振动状况,进而模拟出不同工况下的捕能效率。依据模拟结果拟合分析... 详细信息

针对水下流致振动式捕能装置最优捕能制造参数的设计,建立了水流-振子-载荷耦合运动模型,推导了尾流振子模型,计算不同质量比、阻尼比条件下圆柱振子在不同约化速度下的振动状况,进而模拟出不同工况下的捕能效率。依据模拟结果拟合分析,提出捕能效率最大时,阻尼比随质量比变化的拟合公式。研究结果表明:捕能效率与质量比成负相关,但在不同质量比条件下存在最佳阻尼比。振子在质量比为1.1,阻尼比为0.148时,取最大值14.50%。拟合公式能较好预测最优阻尼比,对模拟及实际工程的设计制造具有参考价值。

关键词：流致振动涡激振动质量比阻尼比单自由度刚性捕能效率最优捕能效率

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信息维度:理解冷热媒介的认知转向

现代传播（中国传媒大学学报） 2022年第9期44卷 26-32页

作者：白旭晨北京师范大学中国教育与社会发展研究院

麦克卢汉在《理解媒介:论人的延伸》中提出了冷热媒介,并通过媒介传递信息的清晰度和受众获取信息的参与度对媒介冷热进行区分,但对“清晰度”和“参与度”的界定仍然停留在感觉判断上。随着认知科学发展,可以通过人类大脑处理信息的运... 详细信息

麦克卢汉在《理解媒介:论人的延伸》中提出了冷热媒介,并通过媒介传递信息的清晰度和受众获取信息的参与度对媒介冷热进行区分,但对“清晰度”和“参与度”的界定仍然停留在感觉判断上。随着认知科学发展,可以通过人类大脑处理信息的运作机制,对媒介冷热进行更深入的研究。基于人类对不同类型符号的认知过程和认知经验差异,人类对信息的感知和认知过程受到信息符号构成的时空维度和信息传播的时空维度的影响,使不同符号构成和不同时空传播特征的信息认知过程也不相同。两方面时空维度共同构成的信息维度,反映了媒介的冷热程度,为判别冷热媒介提供了一种量度。而纵观媒介发展历程,人类正是通过信息生产变革不断实现信息维度提升,满足日益增长的信息需求,形成了媒介不断升温的人性化进化趋势。

关键词：冷媒介热媒介符号认知信息维度媒介进化

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基于贝叶斯网络的自由场地震液化沉降评估

振动与冲击 2018年第18期37卷 177-183页

作者：唐小微白旭胡记磊大连理工大学海岸与近海工程国家重点实验室辽宁大连116023 华中科技大学土木工程与力学学院武汉430074

基于贝叶斯网络方法,综合考虑地震参数、土体参数和场地条件等12个影响因素,结合场地的液化势和液化潜能指数,建立了地震液化沉降的贝叶斯网络评估模型。通过算例分析,与径向基神经网络方法和I&Y简化计算方法的评估性能对比,发现地震液... 详细信息

基于贝叶斯网络方法,综合考虑地震参数、土体参数和场地条件等12个影响因素,结合场地的液化势和液化潜能指数,建立了地震液化沉降的贝叶斯网络评估模型。通过算例分析,与径向基神经网络方法和I&Y简化计算方法的评估性能对比,发现地震液化沉降的贝叶斯网络评估模型的优势明显;该模型不仅有较好的评估精度和可靠性,而且还可以进行逆向因果推理。对两个机器学习模型进行敏感因素分析发现,在12个影响因素中,地表峰值加速度、地震持续时间和标准贯入锤击数为较敏感因素,和I&Y简化算法考虑的参数基本一致。

关键词：地震液化自由场地沉降贝叶斯网络评估

具有固定转动轴线和变转动轴线3T1R并联机构构型综合

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农业机械学报 2022年第2期53卷 451-458页

作者：刘伟刘宏昭胡旭宇西安理工大学机械与精密仪器工程学院西安710048 西安工程大学机电工程学院西安710048

使用位移流形理论对具有固定转动轴线和变转动轴线两种运动模式的3T1R并联机构进行了构型综合。分析空间球面4R机构的一般运动学方程,通过求极限计算了一种特殊空间球面4R机构连杆在奇异位形的两个瞬时连续转动轴线。根据具有固定转动... 详细信息

使用位移流形理论对具有固定转动轴线和变转动轴线两种运动模式的3T1R并联机构进行了构型综合。分析空间球面4R机构的一般运动学方程,通过求极限计算了一种特殊空间球面4R机构连杆在奇异位形的两个瞬时连续转动轴线。根据具有固定转动轴线和变转动轴线两种运动模式的球面机构,得到其连杆位移流形的表达式,从而设计了具有两种运动模式的3T1R并联机构。通过旋量理论,验证该3T1R机构在运动模式变换过程中的自由度和驱动副选取的正确性。结果表明,该3T1R并联机构具有固定转动轴线和变转动轴线两种3T1R运动模式,4条支链的4个驱动副能实现上述两种模式下机构的控制,当机构处于两种运动模式的变换位形时,需要增加一个辅助驱动副,才能实现该机构两种运动模式的变换。

关键词：并联机构运动模式变转动轴线位移流形构型综合

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融合注意力机制的金属板材表面缺陷检测方法

计算机集成制造系统 2023年

作者：张琛白旭张侠合肥学院人工智能与大数据学院中国科学技术大学计算机科学与技术学院科大国创股份有限公司

金属板材表面的缺陷检测是判断板材产品刚性和耐磨性的关键。针对传统的人工检测或通用目标检测效果差、精度低、速度慢等问题，提出了一种融合注意力机制的缺陷检测方法。首先，在主干网络中引入了空间和通道双路注意力机制，有助于网... 详细信息

金属板材表面的缺陷检测是判断板材产品刚性和耐磨性的关键。针对传统的人工检测或通用目标检测效果差、精度低、速度慢等问题，提出了一种融合注意力机制的缺陷检测方法。首先，在主干网络中引入了空间和通道双路注意力机制，有助于网络从深层特征中找到感兴趣的区域，提高模型的特征提取能力；然后，对探测头的感受野增加可变形处理，以应对实际图像发生的形变。将改进后的检测方法在金属板材表面缺陷检测数据集NEU-DET和GC10-DET上进行验证。结果表明，全类别平均精度分别提升7%和4.2%，该模型每秒内处理图片数量的能力最高达72帧/s。另外，该方法在检测速度和查全率等指标上同样优于现有的通用检测器，能够较好地满足工业场景的需求。

关键词：缺陷检测金属板材注意力机制可变形卷积

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农民权益的缺失及其保护

农业经济问题 2003年第10期24卷 10-13,66页

作者：杜旭宇中国人民武装警察部队学院管理系廊坊065000

从理论上讲 ,“三农”问题的核心是农民问题 ,农民问题的实质又是农民的权益问题 ;权益问题能否解决或解决好 ,关系到整个“三农”问题能否解决或解决好。从实践中看 ,农民权益得不到保障、实际权益缺失又是一个比较严重的问题。因此 ,... 详细信息

从理论上讲 ,“三农”问题的核心是农民问题 ,农民问题的实质又是农民的权益问题 ;权益问题能否解决或解决好 ,关系到整个“三农”问题能否解决或解决好。从实践中看 ,农民权益得不到保障、实际权益缺失又是一个比较严重的问题。因此 ,正视农民权益缺失的现状 ,寻找其原因 ,并采取行之有效的对策措施是当务之急。

关键词：农民权益中国财产权益市场主体权益组织权社会保障权政治权益劳动就业权

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现代书法随谈

书法 2011年第10期 97-99页

作者：旭宇

这里要谈的现代书法,起于民初,止于“文革”前。这是随意谈,不作书史,但也是以史观书,尺度自在。当然,这么一个看法,也不可能大家统一,也没有这个必要,可以各有所见,各持所论。先说于右任。自废清帝、立民国,一直到“文革”,最有成就的...

这里要谈的现代书法,起于民初,止于“文革”前。这是随意谈,不作书史,但也是以史观书,尺度自在。当然,这么一个看法,也不可能大家统一,也没有这个必要,可以各有所见,各持所论。先说于右任。自废清帝、立民国,一直到“文革”,最有成就的书家,我个人首推于右任于右任把碑帖有机结合起来,形成自家面貌,是一个大家,一个现代书史上承前启后的人物。他的作品多,存世量大。

关键词：

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诗书画

诗刊 2013年第1期 I0001-I0004页

作者：旭宇中国书法家协会

临江仙休说京华瑞雪少，梅已开遍江南。双袖东风已蓄满。正待诗船发，心潮涌笔端。

关键词：诗词文学文学作品诗集