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糙皮侧耳热激转录因子鉴定及其基因表达模式分析

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菌物研究 2024年

作者：王风芹于振麦非凡刘元栋胡延如文晴申进文戚元成河南农业大学生命科学学院周口市农业科学院

热激转录因子（Heat shock transcription factor， Hsf）是真核生物中广泛存在的一类转录因子，它们通过识别热激元件调控基因表达，从而参与生物对胁迫的响应及各种生命活动过程。本研究从糙皮侧耳基因组中鉴定出具有热激转录因子DNA... 详细信息

热激转录因子（Heat shock transcription factor， Hsf）是真核生物中广泛存在的一类转录因子，它们通过识别热激元件调控基因表达，从而参与生物对胁迫的响应及各种生命活动过程。本研究从糙皮侧耳基因组中鉴定出具有热激转录因子DNA结合结构域（DNA Banding Domain，DBD）的蛋白5个，命名为PoHsf1-PoHsf5。生物信息学分析表明，这5个蛋白均为不稳定亲水性蛋白，定位于细胞核。保守基序和系统进化分析发现，PoHsf1、PoHsf4与酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）ScHsf1具有较近的亲缘关系，PoHsf2与ScSkn7高度相似。基因表达模式分析表明PoHsf1在原基期和子实体期以及高温胁迫下显著下调，而在低温和氧化胁迫下显著上调；PoHsf2和PoHsf3在原基期显著下调；PoHsf4在高温胁迫下显著上调；PoHsf5在原基期和子实体期显著上调。本研究为糙皮侧耳热激转录因子家族成员的功能鉴定奠定了基础。

关键词：食用菌糙皮侧耳热激转录因子生物信息学表达模式

磷酸氢二铵对糙皮侧耳菌丝生长及基质降解酶活性的影响

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菌物学报 2022年第4期41卷 658-667页

作者：胡延如柴茜茜董浩哲文晴申进文河南农业大学生命科学学院河南郑州450002

氮源种类和浓度均会对糙皮侧耳Pleurotus ostreatus菌丝长势、生长速率以及代谢产生影响,而氮匮乏与氮过量积累都会对糙皮侧耳的生长产生不利影响。为了研究氮源对糙皮侧耳菌丝生长和基质降解酶活性的影响,本研究选取磷酸氢二铵[(NH4)2H... 详细信息

氮源种类和浓度均会对糙皮侧耳Pleurotus ostreatus菌丝长势、生长速率以及代谢产生影响,而氮匮乏与氮过量积累都会对糙皮侧耳的生长产生不利影响。为了研究氮源对糙皮侧耳菌丝生长和基质降解酶活性的影响,本研究选取磷酸氢二铵[(NH4)2HPO4]作为唯一氮源,通过在培养基中添加不同浓度的磷酸氢二铵检测糙皮侧耳菌丝生长速率和木质纤维素降解酶的活性,筛选出糙皮侧耳生长的最适磷酸氢二铵浓度。结果表明,当磷酸氢二铵的添加浓度区间为10–20 mmol/L时菌丝长势最好。以缺氮时的酶活作为对照,当磷酸氢二铵的添加浓度为10 mmol/L时,羧甲基纤维素酶的活力最强,显著高于对照组(P0.05);当添加浓度为40 mmol/L时,木聚糖酶的活力最强,显著高于对照组(P<0.05);当添加浓度为10mmol/L时,漆酶的活力最强,显著高于对照组(P<0.05)。基质降解酶活性越强,越有利于糙皮侧耳对基质的降解利用。本研究为糙皮侧耳的栽培提供理论和实践指导,对糙皮侧耳产业发展具有积极意义。

关键词：糙皮侧耳磷酸氢二铵酶活性菌丝生长

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热胁迫对糙皮侧耳抗霉菌侵染能力的影响

菌物学报 2022年第7期41卷 1080-1087页

作者：胡延如丁佳雪董浩哲柴茜茜戚元成文晴申进文河南农业大学生命科学学院河南郑州450002

糙皮侧耳Pleurotus ostreatus具有较高的食用与药用价值,是世界上广泛栽培的食用菌之一,也是中国栽培范围最广的食用菌。糙皮侧耳生产中会受到多种环境因素的影响,其中温度是最重要的环境因子。为了探究高温对糙皮侧耳生理及抗霉菌侵染... 详细信息

糙皮侧耳Pleurotus ostreatus具有较高的食用与药用价值,是世界上广泛栽培的食用菌之一,也是中国栽培范围最广的食用菌。糙皮侧耳生产中会受到多种环境因素的影响,其中温度是最重要的环境因子。为了探究高温对糙皮侧耳生理及抗霉菌侵染能力的影响,以生产菌袋为材料,分离并获得3种霉菌,经鉴定为卷枝毛霉Mucor circinelloides、四孢脉孢菌Neurospora tetraspora和长柄木霉Trichoderma longibrachiatum;进一步研究发现,高温显著抑制糙皮侧耳菌丝生长,高温胁迫后,糙皮侧耳抗霉菌侵染的能力降低、微观结构遭到破坏、糙皮侧耳菌丝胞外多糖含量显著增加并且吸附霉菌孢子的能力增强。本研究为阐明高温降低糙皮侧耳霉菌感染抗性的作用机制提供科学依据。

关键词：食用菌糙皮侧耳热胁迫霉菌抗性

四种信号类物质对糙皮侧耳冷胁迫适应性的影响

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菌物学报 2023年第7期42卷 1530-1538页

作者：胡延如陈浩澜李会会戚元成王风芹文晴申进文河南农业大学生命科学学院河南郑州450002

糙皮侧耳Pleurotusostreatus是我国主栽食用菌品种之一,经济效益较高。但是,大棚环境种植糙皮侧耳控制能力较差,受外界环境条件影响较大,在寒冷条件下糙皮侧耳易受冷胁迫影响,生长受到抑制。信号类物质在生物应对环境胁迫中发挥重要作用... 详细信息

糙皮侧耳Pleurotusostreatus是我国主栽食用菌品种之一,经济效益较高。但是,大棚环境种植糙皮侧耳控制能力较差,受外界环境条件影响较大,在寒冷条件下糙皮侧耳易受冷胁迫影响,生长受到抑制。信号类物质在生物应对环境胁迫中发挥重要作用,本试验以全国广泛栽培的糙皮侧耳新831菌种为材料,通过4℃冷胁迫处理,加入不同浓度的信号类物质,研究了腐胺(putrescine,Put)、Ca^(2+)、H_(2)O_(2)、NO这4种信号类物质对糙皮侧耳冷胁迫适应性的影响。发现一定浓度的Put和NO可提高冷胁迫期间糙皮侧耳的菌丝生长速率,Put不仅可提高冷胁迫期间菌丝生长速率,还可以提高冷胁迫后的恢复生长速率。本文研究了4种信号类物质对糙皮侧耳冷胁迫适应性的影响,可为深入研究糙皮侧耳冷胁迫抗性机理提供借鉴和参考,具有一定的理论意义和应用价值。

关键词：糙皮侧耳信号类物质冷胁迫

中国主要食用菌子实体γ-氨基丁酸含量测定及产量影响因素

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菌物学报 2023年第1期42卷 231-243页

作者：文晴赵浩洋邵艳红胡延如戚元成王风芹申进文河南农业大学生命科学学院河南郑州450002

氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种功能性非蛋白氨基酸,在维持人体健康方面发挥着重要作用。为探明食用菌子实体的GABA含量水平和影响食用菌GABA产量的因素,本研究通过对食用菌GABA提取和衍生条件优化,建立了食用菌GABA检测的9... 详细信息

氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种功能性非蛋白氨基酸,在维持人体健康方面发挥着重要作用。为探明食用菌子实体的GABA含量水平和影响食用菌GABA产量的因素,本研究通过对食用菌GABA提取和衍生条件优化,建立了食用菌GABA检测的9-芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)柱前衍生HPLC法;利用该方法测定了20种中国主要食用菌子实体的GABA含量,并进一步探究了培养料氮源含量和种类、栽培时间对GABA含量的影响。食用菌GABA提取的最佳料液比、时间和温度分别为1:100、1 h和65℃。20种食用菌子实体的GABA含量在0.20-3.02 mg/g DW,存在显著种间差异,其中黄白银耳GABA含量最高(3.02 mg/g DW),香菇、银耳、金针菇、双孢蘑菇的GABA含量也较高,为1-2 mg/g DW。增加培养料含氮量可显著促进GABA积累,且添加尿素的促进效果明显优于添加麦麸。栽培时间也可影响子实体GABA产量,第二茬和三茬子实体的GABA含量显著高于第一茬子实体。综上可知,食用菌GABA含量不仅与品种密切相关,而且受到培养料中氮源含量和种类、栽培时间的影响。

关键词： γ-氨基丁酸食用菌高效液相色谱芴甲氧羰酰氯氮源栽培时间

四种外源信号物质对糙皮侧耳菌丝热胁迫适应性的影响

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食用菌学报 2023年第6期30卷 45-51页

作者：胡延如邵玉强文晴戚元成王风芹申进文河南农业大学生命科学学院河南郑州450002

研究外源信号物质H_(2)O_(2)、Ca^(2+)、NO(供体硝普钠,sodium nitroprusside,SNP)、1,4-二氨基丁烷(putrescine, Put)对糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)菌株Xin831热胁迫适应性的影响。以无菌水为对照,在培养基中分别添加不同浓度H_(2)O_(2)(0.01、0.05、0.25、1.25、6.25 mmol·L^(-1))、Ca^(2+)(2.5、5、10、20、40 mmol·L^(-1))、NO供体SNP(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mmol·L^(-1))、Put (25、50、100、200、400μmol·L^(-1)),待菌丝生长5 d后,分别设置常温(25℃)、40℃热胁迫处理24 h,测量并计算各处理下糙皮侧耳菌丝生长速率。结果表明:在常温条件下,0.01~1.25 mmol·L^(-1) H_(2)O_(2)、(2.5、10、20)mmol·L^(-1) Ca^(2+)、0.2 mmol·L^(-1) SNP、25~200μmol·L^(-1)Put对糙皮侧耳菌丝生长均具有促进作用,6.25 mmol·L^(-1) H_(2)O_(2)、40 mmol·L^(-1) Ca^(2+)、0.4~0.8 mmol·L^(-1) SNP抑制糙皮侧耳菌丝生长;在实验范围内,热胁迫条件下,不同浓度H_(2)O_(2)、Ca^(2+)、SNP、Put对糙皮侧耳菌丝恢复生长均具有促进作用。

关键词：糙皮侧耳外源信号物质热胁迫恢复生长

糙皮侧耳热胁迫背景下RT-qPCR内参基因的筛选

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菌物研究 2023年第1期21卷 200-206页

作者：胡延如邵玉强陈浩澜戚元成王风芹文晴申进文河南农业大学生命科学学院郑州450002

通过文献报道和对糙皮侧耳基因组进行搜索,得到14个候选基因。以40℃热胁迫不同时间(0,1,2,4,8,12 h)的菌丝作为材料,通过反转录得到的候选基因片段,进行实时荧光定量PCR筛选,使用geNorm、NormFinder、BestKeeper 3种软件对结果进行分析... 详细信息

通过文献报道和对糙皮侧耳基因组进行搜索,得到14个候选基因。以40℃热胁迫不同时间(0,1,2,4,8,12 h)的菌丝作为材料,通过反转录得到的候选基因片段,进行实时荧光定量PCR筛选,使用geNorm、NormFinder、BestKeeper 3种软件对结果进行分析,筛选得到稳定的内参基因β肌动蛋白(β-actin)、假定蛋白(sar1)。此外,选取2种热应激反应基因Hsp9、Hsp90作为靶基因,分别以筛选得到的稳定、不稳定基因以及多个内参基因作为内参进行分析,结果显示选用多个内参基因时能够缩小不同基因作为内参导致的结果差异。

关键词：食用菌热胁迫内参基因 RT-qPCR

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食用菌病毒脱毒方法的比较

病毒学报 2010年第3期26卷 249-254页

作者：张朝辉刘映淼戚元成高玉千申进文邱立友河南农业大学生命科学学院郑州450002

应用dsRNA技术从平菇天达300(Pleurotus ostreatus TD300)菌丝中提取到4条dsRNA条带,大小分别是8.2、2.5、2.1和1.1kb。采用菌丝尖端脱毒法、原生质体再生法、冷冻真空干燥法和单孢杂交法进行脱毒,各得到一株脱毒菌株,分别是HTC8、PR15... 详细信息

应用dsRNA技术从平菇天达300(Pleurotus ostreatus TD300)菌丝中提取到4条dsRNA条带,大小分别是8.2、2.5、2.1和1.1kb。采用菌丝尖端脱毒法、原生质体再生法、冷冻真空干燥法和单孢杂交法进行脱毒,各得到一株脱毒菌株,分别是HTC8、PR15、FL01和SSH11。脱毒菌株HTC8仅残留有低含量的8.2kbdsRNA,PR15和SSH11完全脱去dsRNA,而FL01仍残留有低浓度的8.2kb和2.5kbdsRNA。该4株脱毒菌株的菌丝生长速度和漆酶活力均比出发菌种有不同程度的提高,尤其是HTC8和PR15,菌丝生长速度比出发菌种分别提高22.73%和18.18%,漆酶活力比出发菌种分别提高145.83%和134.38%。综合比较此4种脱毒方法,菌丝尖端脱毒法和原生质体再生脱毒法比冷冻真空干燥法和单孢杂交法脱毒效果好,制备脱毒菌株用时短、效率高。

关键词：平菇脱毒菌丝生长速度漆酶

培养料不同含氮量和碳氮比对糙皮侧耳生长和营养成分含量的影响

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食用菌学报 2022年第1期29卷 36-40页

作者：胡延如尼振原张佳欣余海尤戚元成申进文文晴河南农业大学生命科学学院河南郑州450002 河南牧业经济学院食品与生物工程学院河南郑州450002

采用不同比例(10%、20%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%)麦麸与玉米芯混合进行糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)熟料栽培,研究培养料不同含氮量和碳氮比对菌丝生长、生物学效率和子实体营养成分的影响。结果表明:在实验范围内,... 详细信息

采用不同比例(10%、20%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%)麦麸与玉米芯混合进行糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)熟料栽培,研究培养料不同含氮量和碳氮比对菌丝生长、生物学效率和子实体营养成分的影响。结果表明:在实验范围内,随着麦麸用量增加,培养料含氮量呈上升趋势,碳氮比呈下降趋势;菌丝生长速度呈下降趋势;生物学效率呈先升高后降低趋势;子实体粗蛋白含量呈上升趋势,而子实体总糖、粗脂肪和粗纤维含量呈下降趋势。综合菌丝长势、生物学效率、营养成分含量等因素,玉米芯、麦麸栽培糙皮侧耳的最佳配方:52%玉米芯、45%麦麸、2%石灰、1%轻质碳酸钙,含水量65%;对应培养料的含氮量和碳氮比分别为1.69%和21.90∶1。

关键词：食用菌糙皮侧耳麦麸玉米芯碳氮比