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作者：申洪远宁夏医科大学

学位级别：硕士

第一部分关于靶向超声纳米造影剂的制备及基本性质的研究目的:制备以聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PEG-PLGA）为外壳的包载多西紫杉醇（DTX）、血管内皮生长因子C小干扰RNA（VEGF C si RNA）及全氟戊烷（PFP）的纳米粒,表面枝接靶向... 详细信息

第一部分关于靶向超声纳米造影剂的制备及基本性质的研究目的:制备以聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PEG-PLGA）为外壳的包载多西紫杉醇（DTX）、血管内皮生长因子C小干扰RNA（VEGF C si RNA）及全氟戊烷（PFP）的纳米粒,表面枝接靶向性c RGD多肽,验证纳米粒基本表征及包载效率。探究体内外纳米粒靶向能力,验证靶向超声纳米造影剂体内外超声成像能力并评价其生物安全性。方法:利用超声乳化法制作纳米粒c RGD-PEG-PLGA@VEGF C si RNA-DTXPFP（c PPVDP NPs）,观察基本表征包括其大小、电位,透射电镜（TEM）观察其形态,检测c RGD连接情况;FAM荧光标记VEGF si RNA验证是否包载成功,通过绘制DTX标准曲线得到DTX包封率与载药率;透析法探究不同条件下（不同p H值,有无LIFU作用）c PPVDP NPs的DTX释药特性。荧光标记的靶向与非靶向纳米粒与乳腺癌细胞孵育不同时间后,显微镜下观察体外靶向性情况;将上述纳米粒注射入小鼠体内,利用小动物活体成像仪观察不用时间（0.5、1、2、6、12、24h）纳米粒在小鼠体内聚集情况;取c PPVDP NPs于恒温水浴箱内加热至不同温度（40℃、45℃、50℃、55℃）,观察其热致相变能力;LIFU作用于琼脂糖凝胶模型观察c PPVDP NPs声致相变能力及体外造影效果,并于小鼠体内观察肿瘤二维及增强显影情况;将空白纳米粒稀释为不同浓度（0、0.2、0.4、0.6、0.8mg/ml）后,与细胞共培养不同时间（6、12、24h）,cck8检测细胞活力,并结合昆明小鼠体内注射评估纳米粒体内外生物安全性。结果:成功制备cPPVDP NPs平均粒径约（224.7±110.9）nm,ζ电位约（-4.08±0.85）m V;TEM观察其为大小均一,形态规则的球形。核磁氢谱（H-NMR）结果显示c RGD与PEG-PLGA连接成功;荧光显微镜与Western Blot结果提示VEGFC si RNAsi RNA成功包载;DTX载药量为84.89±0.78%。透析法测观察纳米粒p H=5.6缓冲液中累积药物药物释放率高于p H=7.4的缓冲液,靶向纳米粒+UTD组纳米粒在p H值=5.6缓冲液的累积药物释放率达最高。激光共聚焦显微镜及小动物活体成像结果提示靶向纳米粒集可实现体内外汇聚于乳腺癌细胞周围,且靶向组纳米粒荧光强度强于非靶向组;生物安全性体外实验发现不同纳米粒浓度的空白纳米粒与细胞共培养时间后,细胞活力均大于85%;昆明小鼠体内纳米粒安全性实验发现纳米粒对小鼠心肝肾功能并无损害;相变实验提示,随温度提高,纳米粒形态发生改变,55℃纳米粒开始破裂;声致相变观察纳米粒变化趋势于热致相变相似,随着LIFU作用时间增加,纳米粒粒径增大,120s后纳米粒碎裂;此时二维与超声造影也达到最佳成像效果,体内亦可实现造影成像。结论:成功制备包载DTX与VEGF Csi RNA的靶向超声纳米粒造影剂,结构为稳定壳核结构,稳定性好,c PPVDP NPs体内外均具有较好靶向性,生物安全性良好,具有良好相变能力;可稳定包裹PFP,在LIFU作用下可实现体内外超声成像、增强造影;为后期抗乳腺癌诊疗一体化奠定基础。第二部分:靶向超声纳米造影剂抗乳腺癌治疗、抑制转移的体内外研究目的:联合超声靶向破坏技术验证体内外抗乳腺癌治疗效果及抑制远处转移的能力。方法;1.体外验证:相同方法制作si RNA NPs、DTX NPs、非靶向纳米粒PPVDP NPs;CCK-8法比较其与靶向纳米粒c PPVDP NPs对乳腺癌细胞增殖能力的影响;Transwell及细胞划痕（Scratch-Wound）观察靶向纳米粒对肿瘤细胞侵袭迁移能力的影响;通过TUNEL及流式细胞学（Flow Cytometry）检测不同纳米粒对肿瘤细胞的促凋亡能力;2.体内验证:荷瘤小鼠随机分为五组,空白对照组（PBS+UTD）,基因纳米粒组（si RNA NPs+UTD）、化疗药物组（DTX NPs+UTD）、非靶向纳米粒组（PPVDP NPs+UTD）,靶向纳米粒组（c PPVDP NPs+UTD）,不同分组纳米粒静脉注射入从小鼠体内,24h内行LIFU辐照治疗,隔天治疗一次,定期观察小鼠体重,肿瘤体积生长情况,治疗20天后处死取肿瘤组织行HE染色、PCNA染色及LYVE-1免疫组化病理,并取肺组织做HE染色观察肺部转移情况。结果:1.体外验证:CCK8结果显示c PPVDP NPs+UTD组纳米粒对肿瘤细胞增殖抑制效果最佳,远高于其他组;c PPVDP+UTD NPs组纳米粒侵袭与迁移细胞数目也达最少;划痕实验验证了c PPVDP NPs+UTD组细胞迁移能力最低;TUNEL结果发现c PPVDP NPs+UTD组细胞凋亡细胞相较其他组最多;流式细胞学结果提示c PPVDP NPs+UTD组细胞

关键词：乳腺癌靶向纳米粒化疗基因治疗超声靶向破坏技术

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载替莫唑胺纳米粒联合低强度聚焦超声对人胶质瘤细胞的促凋亡作用

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中华超声影像学杂志 2023年第1期32卷 86-91页

作者：常瑞姣陶宏宇申洪远张茜杨光飞宁夏医科大学总医院超声科银川750004

目的制备由聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)包载全氟戊烷(PFP)与化疗药替莫唑胺(TMZ)的液气相变型纳米粒(TMZ/PFP/PLGA NPs),联合低强度聚焦超声(LIFU)辐照,探讨其体外超声显影能力及对人胶质瘤细胞的体外干预效果。方法采用复乳法制备TMZ/... 详细信息

目的制备由聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)包载全氟戊烷(PFP)与化疗药替莫唑胺(TMZ)的液气相变型纳米粒(TMZ/PFP/PLGA NPs),联合低强度聚焦超声(LIFU)辐照,探讨其体外超声显影能力及对人胶质瘤细胞的体外干预效果。方法采用复乳法制备TMZ/PFP/PLGA NPs,检测其基本理化性质及药物包载能力,观察纳米粒体外超声显影效果;CCK-8法检测纳米粒的体外细胞毒性及与LIFU协同干预对胶质瘤细胞存活率的影响;Western blot检测协同干预后细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2、bax及caspase-3的表达水平变化。结果在透射电镜下,TMZ/PFP/PLGA NPs呈形态规则的类圆形核壳结构,粒径(137.9±63.31)nm,对TMZ的包封率为(83.01±5.57)%,载药量(3.19±0.22)%;纳米粒与U251细胞共孵育24 h后细胞存活率仍可保持在70%以上,在同时施加LIFU辐照的协同作用下,可使细胞凋亡加速,细胞存活率明显下降;Western blot检测结果显示,协同干预可明显下调细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,同时明显上调bax蛋白与caspase-3蛋白的表达(均P<0.05)。结论TMZ/PFP/PLGA NPs本身具有良好的基本理化性质,在高效包载化疗药物替莫唑胺的同时,具有较低的体外细胞毒性,在LIFU辐照下的协同干预可明显加速U251胶质瘤细胞凋亡,具有良好的应用前景。

关键词：低强度聚焦超声胶质瘤替莫唑胺药物递送载体

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精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸环肽修饰的纳米粒在小鼠乳腺癌细胞中的靶向性及超声成像研究

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中国医学影像学杂志 2022年第5期30卷 423-429页

作者：申洪远陶宏宇张芙蓉王晨雨米成嵘宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院超声科宁夏银川750004

目的制备精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸环肽(c RGD肽)修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸(PEG-PLGA)高分子聚合物靶向纳米造影剂c RGD-PEG-PLGA@PFPNPs(c RGD-NPs),探究其表征、相变及对小鼠乳腺癌细胞(4T1)的靶向性及超声成像。材料与方法利用... 详细信息

目的制备精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸环肽(c RGD肽)修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸(PEG-PLGA)高分子聚合物靶向纳米造影剂c RGD-PEG-PLGA@PFPNPs(c RGD-NPs),探究其表征、相变及对小鼠乳腺癌细胞(4T1)的靶向性及超声成像。材料与方法利用双乳化法制成c RGD-NPs,验证c RGD与PEG-PLGA连接情况,观察cRGD-NPs表征、热致相变稳定性等基本特征;检测其对4T1细胞活性的影响;使用激光共聚焦显微镜,将BALB/c小鼠分为靶向组3只及非靶向组3只,通过活体成像观察小鼠体内外乳腺癌细胞摄取c RGD-NPs情况;观察c RGD-NPs声致相变及造影效果。结果成功制备c RGD-NPs,光镜与透射电镜下均表现为形态规则、大小均一的球形,平均粒径为(93.19±31.41)nm;不同浓度c RGD-NPs同4T1细胞共孵育不同时间后,细胞活力均>85%。激光共聚焦显微镜及活体组织荧光成像观察显示,与非靶向纳米粒组相比,c RGD-NPs组更多聚集于肿瘤细胞周围。随着低强度聚焦超声辐照时间推移增加,体外超声造影成像效果越好,在相同条件下也实现了体内乳腺肿瘤显影。结论cRGD-NPs是一种可靶向聚集于4T1细胞区域,具有靶向定位释药潜能且可显影的纳米级载体,可为临床乳腺癌化疗及靶向治疗提供新思路。

关键词： cRGD肽纳米造影剂靶向性乳腺肿瘤超声检查

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经皮浅表超声造影动态观察兔乳腺癌淋巴转移模型中前哨淋巴结的变化

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中国超声医学杂志 2023年第3期39卷 333-336页

作者：王文申洪远张茜杨光飞王福霞米成嵘宁夏医科大学总医院心脑血管病医院超声科东南大学附属中大医院超声科宁夏医科大学总医院超声科

目的通过兔乳腺癌淋巴转移模型动态观察前哨淋巴结(SLN)增强模式。方法 VX2(兔间变表皮鳞癌细胞株)组织悬液建立兔乳腺癌淋巴转移模型，隔天行二维超声及SLN示卓安超声造影(CEUS)检查，观察转移过程中SLN造影模式变化。结果随着肿瘤... 详细信息

目的通过兔乳腺癌淋巴转移模型动态观察前哨淋巴结(SLN)增强模式。方法 VX2(兔间变表皮鳞癌细胞株)组织悬液建立兔乳腺癌淋巴转移模型，隔天行二维超声及SLN示卓安超声造影(CEUS)检查，观察转移过程中SLN造影模式变化。结果随着肿瘤进展，SLN增强模式也随之变化，表现为均匀性增强、非均匀性增强、边缘环状增强内部无增强及完全无增强淋巴结周围出现淋巴管绕行4种模式，其中非均匀性增强模式随时间表现为：a.无增强区域75%/完全不增强。结合病理结果，4种增强超声造影表现可有效评估SLN良恶性(P<0.05)。结论借助兔乳腺癌淋巴转移模型，经皮示卓安浅表超声造影(SNZ-CEUS)可沿淋巴管精确定位及区分SLN,在乳腺癌转移过程中评估SLN状态、观察淋巴系统重建中具有重要价值。

关键词：乳腺癌淋巴转移前哨淋巴结 VX2动物模型浅表超声造影

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超声造影对小鼠乳腺癌淋巴结转移模型的诊断价值

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宁夏医科大学学报 2022年第4期44卷 404-408页

作者：陶宏宇孙楠朱珊申洪远米成嵘王福霞王文宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏医科大学总医院超声科银川750004

目的探讨经静脉超声造影(contrast-enhanced ultrasound,CEUS)对诊断小鼠乳腺癌淋巴结转移模型的应用价值。方法采用小鼠4T1乳腺癌细胞足垫种植成瘤的方法构建50只Balb/c小鼠腘窝淋巴结肿瘤转移模型,接种肿瘤细胞悬液后2~6周,每周随机抽... 详细信息

目的探讨经静脉超声造影(contrast-enhanced ultrasound,CEUS)对诊断小鼠乳腺癌淋巴结转移模型的应用价值。方法采用小鼠4T1乳腺癌细胞足垫种植成瘤的方法构建50只Balb/c小鼠腘窝淋巴结肿瘤转移模型,接种肿瘤细胞悬液后2~6周,每周随机抽取10只小鼠进行常规超声及CEUS检查,然后立即处死小鼠并解剖肿大腘窝淋巴结进行病理诊断,分析不同时间点淋巴结声像图表现及转移发生率。结果超声共检出50枚小鼠肿大腘窝淋巴结,其中经病理诊断为转移性淋巴结共32枚(32/50),反应性增生淋巴结18枚(18/50)。在CEUS上转移性淋巴结多表现为向心性的整体不均匀增强,反应性增生淋巴结多表现为离心性的整体均匀增强。常规超声在淋巴结良恶性鉴别中准确度为56.0%,灵敏度为56.3%,特异度为55.6%,联合经静脉CEUS在淋巴结良恶性鉴别中准确度为76.0%,灵敏度为75.0%,特异度为77.8%,联合CEUS的诊断准确度要高于单独常规超声(P0.05)。结论经静脉CEUS对小鼠乳腺癌淋巴结转移模型的诊断有一定的应用价值。

关键词：超声造影乳腺癌前哨淋巴结动物模型

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PET/MRI检查技术评估胰腺癌肿瘤可切除性的应用研究

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临床放射学杂志 2017年第8期36卷 1129-1133页

作者：郝利国崔红升孟鑫张淑丽王梓旭周蕾陈曲申洪远黄钰齐齐哈尔医学院医学技术学院 161000 齐齐哈尔医学院附属第三医院 161000

目的探讨PET/MR检查技术在评估胰腺癌肿瘤可切除性中的应用价值。方法选取2015年1月至2016年1月本院经病理证实的胰腺癌患者50例作为研究对象。所有患者均行18FDG-PET/MRI及增强MRI检查。根据患者的PET/MRI、MRI影像资料分MRI组、PET/MR... 详细信息

目的探讨PET/MR检查技术在评估胰腺癌肿瘤可切除性中的应用价值。方法选取2015年1月至2016年1月本院经病理证实的胰腺癌患者50例作为研究对象。所有患者均行18FDG-PET/MRI及增强MRI检查。根据患者的PET/MRI、MRI影像资料分MRI组、PET/MRI组、MRI结合PET/MRI组,对胰腺癌的可切除性分别进行评估,依据患者临床结局及预后对比分析三组在胰腺癌可切除性评估中的应用价值。对各组评估结果之间的差异采用χ~2检验。结果 PET/MRI与增强MRI对肿瘤不可切除性比较,(χ~2=4.708,P=0.043),具有显著性差异。增强MRI与PET/MRI评估结果比较,在诊断灵敏度(χ~2=5.103,P=0.037)、特异度(χ~2=6.818,P=0.015)、阳性预测值(χ~2=5.531,P=0.031)具有统计学意义(P0.05)。结论 PET/MRI与增强MRI检查技术均可用于评估胰腺癌肿瘤可切除性,PET/MR的应用价值更高,联合应用可为临床提供更为准确的肿瘤可切除性参考信息,具有临床应用及推广价值。

关键词： PET/MRI 增强MRI 胰腺癌肿瘤可切除性应用价值

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VX-2组织悬液原位种植与Panc-1细胞悬液原位种植在家兔胰腺癌模型建立中的效果比较

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医学研究生学报 2017年第3期30卷 302-305页

作者：王梓旭孟鑫周蕾陈曲申洪远黄钰郝利国齐齐哈尔医学院医学技术学院齐齐哈尔161000 齐齐哈尔医学院附属第三医院MR室

目的目前有关家兔的胰腺癌模型制作方法报道较为少见,文中比较Panc-1细胞悬液原位种植与VX-2组织悬液原位种植在家兔胰腺癌模型建立中的效果。方法选取健康家兔30只,采取随机数字表法分为组织悬液组(n=15)、细胞悬液组(n=15)。组织悬液... 详细信息

目的目前有关家兔的胰腺癌模型制作方法报道较为少见,文中比较Panc-1细胞悬液原位种植与VX-2组织悬液原位种植在家兔胰腺癌模型建立中的效果。方法选取健康家兔30只,采取随机数字表法分为组织悬液组(n=15)、细胞悬液组(n=15)。组织悬液组采取VX-2组织悬液原位种植,细胞悬液组采取Panc-1细胞悬液原位种植,种植后观察模型的建立情况。通过B超、3.0T磁共振以及CT等辅助检查评价两种建模结果。结果组织悬液组第3周内有5只家兔出现十二指肠、结肠、盲肠、腹膜壁出现大量肿瘤组织种植性转移,3只家兔大网膜出现肿瘤组织种植性转移,MR T2见胃体后高信号影。细胞悬液组第3周内1只家兔十二指肠出现肿瘤组织种植性转移,MR LAVA见胃体后方稍高信号影。组织悬液组中15只模型全部建立成功,细胞悬液组仅发现3例建模成功。与组织悬液组比较,细胞悬液组第3、4周肿瘤种植成功率明显降低(46.66%vs 6.67%,100%vs 20.00%,P<0.05)。结论 VX-2组织悬液原位种植较Panc-1细胞悬液原位种植的更具有可行性,更易实施。

关键词： VX-2组织悬液 Panc-1细胞悬液原位种植胰腺癌模型家兔

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磁共振功能成像DWI技术在家兔胰腺肿物模型鉴别中的应用价值

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重庆医学 2017年第24期46卷 3375-3377,3380页

作者：郝利国崔红升孟鑫隋雪峰杨艳丹张广凤张淑丽王梓旭周蕾陈曲申洪远黄钰齐齐哈尔医学院医学技术学院影像设备与技术学教研室黑龙江齐齐哈尔161000 齐齐哈尔医学院附属第三医院MR室黑龙江齐齐哈尔161000

目的探讨磁共振分子功能成像DWI技术在动物模型胰腺癌与肿块型胰腺炎的鉴别中的应用价值。方法选取实验室内家兔胰头移植瘤模型、慢性肿块型胰腺炎模型、正常家兔各8只,对其进行磁共振弥散加权分子功能成像,b值为333、667、1 000s/mm^2... 详细信息

目的探讨磁共振分子功能成像DWI技术在动物模型胰腺癌与肿块型胰腺炎的鉴别中的应用价值。方法选取实验室内家兔胰头移植瘤模型、慢性肿块型胰腺炎模型、正常家兔各8只,对其进行磁共振弥散加权分子功能成像,b值为333、667、1 000s/mm^2,观察不同b值下胰腺癌模型、慢性炎性模型及正常兔胰腺区的表观弥散系数(ADC),并分析不同b值下胰腺癌模型、慢性炎性模型及正常兔胰腺区的ADC值及表观弥散系数差值(DADC)的变化情况,并观察各组织在分子扩散、组织灌注等方面中的差异。结果整个研究周期,胰头移植瘤模型死亡率为50%;肿块型胰腺炎模型和8只正常家兔均正常存活。相同b值下胰腺癌ADC值明显低于慢性炎症及正常胰腺区,随着b值的增大,各组织ADC值明显下降,b值为333s/mm^2时,各组织内ADC数值存在差异(F=6.662,P=0.014),组间两两比较,胰腺癌与胰腺炎(t=6.773,P=0.003),胰腺癌与正常胰腺(t=5.883,P=0.016),差异有统计学意义(P<0.05)。b值增大,DADC越小,不同b值时胰腺癌区与慢性炎症肿块区、胰腺癌区与正常胰头区各组织DADC值变化差异有统计学意义(P<0.05)。结论合理选择b值的分子功能成像DWI技术能够较好的鉴别胰腺癌与肿块型胰腺炎,可在动物胰头癌模型的评价中推广应用。

关键词：磁共振成像胰腺肿瘤胰腺炎鉴别诊断

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全球人工智能治理的困境与出路

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现代国际关系 2024年第4期 116-137,140页

作者：赵申洪中共中央党校(国家行政学院)国际战略研究院

随着人工智能技术的快速迭代,人工智能治理成为全球治理的重要领域。当前全球人工智能治理机制逐步建立,但治理法律法规不完善,监管机构不健全,多边机制尚未形成统一的治理框架。其原因在于主要国家的政策差异较大,美西方国家在治理实... 详细信息

随着人工智能技术的快速迭代,人工智能治理成为全球治理的重要领域。当前全球人工智能治理机制逐步建立,但治理法律法规不完善,监管机构不健全,多边机制尚未形成统一的治理框架。其原因在于主要国家的政策差异较大,美西方国家在治理实践中搞阵营化对抗,以及行业性组织的不协调。展望未来,全球人工智能治理面临多方面的挑战,包括主要国家的治理政策遭到国内政治的掣肘,主要国家之间的矛盾妨碍合作,商业利益和监管之间也存在冲突。为深化全球人工智能治理合作,国际社会应秉持多边主义理念,遵循技术—社会标准,而不是简单复制现有机制。

关键词：人工智能全球治理治理机制技术—社会标准多边主义

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IGFBP1在胃癌组织中的表达特点及其预后作用与机制的生物信息学分析

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中国医学物理学杂志 2024年第5期41卷 628-639页

作者：熊珊申洪华南理工大学医学院广东广州510006 南方医科大学基础医学院病理学系广东广州510515

目的:通过综合方法分析IGFBP1在胃癌表达、预后以及参与的生物学功能,探讨其在胃癌中的诊断和治疗价值。方法:基于TCGA数据分析IGFBP1在胃癌中的表达水平,以及不同临床病理分期和生存状态下的表达差异;采用Kaplan-Meier曲线描述IGFBP1... 详细信息

目的:通过综合方法分析IGFBP1在胃癌表达、预后以及参与的生物学功能,探讨其在胃癌中的诊断和治疗价值。方法:基于TCGA数据分析IGFBP1在胃癌中的表达水平,以及不同临床病理分期和生存状态下的表达差异;采用Kaplan-Meier曲线描述IGFBP1表达和胃癌患者预后的关系;采用ROC曲线、Cox回归及Meta分析评价IGFBP1在胃癌中诊断及预后价值,利用LASSO回归分析建立与IGFBP1相关的预后模型,并通过PPI网络筛选IGFBP1相关的核心基因;利用GO、KEGG及CIBERSORT等分析方法分析IGFBP1在胃癌中涉及的潜在致病通路及肿瘤免疫浸润;通过Cell Miner数据库预测IGFBP1与抗肿瘤药物敏感性的相关性。结果:IGFBP1在多种癌症中异常表达,包括胃癌,其中在III~IV期胃癌患者中表达显著上调;Cox回归证实IGFBP1是独立危险因素,预后分析提示IGFBP1与预后不良密切相关;GO分析提示IGFBP1相关差异基因在细胞粘附的正向调节、囊泡管腔和丝氨酸水解酶活性富集,KEGG分析提示其在IL-17信号通路中富集;肿瘤免疫浸润分析提示IGFBP1高低表达组间免疫细胞浸润显著差异;单因素Cox和LASSO回归分析构建了IGFBP1相关的胃癌预后模型,PPI网络从中筛选出7个核心基因,这些基因在胆固醇代谢、嘧啶代谢和PPAR信号通路中富集;IGFBP1的表达水平与Dasatinib等药物的敏感性相关。结论:IGFBP1在胃癌中表达上调并导致患者预后不良,可能通过影响IL-17信号通路和M0巨噬细胞浸润等机制调控胃癌发生发展。

关键词：胃癌 IGFBP1 免疫细胞浸润生物信息预后

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