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健胃愈疡颗粒对胃溃疡复发大鼠胃组织核因子-κBmRNA及其蛋白表达的影响

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中国中西医结合杂志 2006年第3期26卷 228-231页

作者：凌江红李家邦申定珠周兵中南大学湘雅医院中西医结合研究所长沙410008

目的观察胃溃疡复发大鼠胃组织的炎症反应、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA及其蛋白表达和健胃愈疡颗粒的干预作用。方法先后复制大鼠乙酸性胃溃疡及其复发模型,设假手术组、模型组、奥美拉唑组、健胃愈疡组。观察各组大鼠... 详细信息

目的观察胃溃疡复发大鼠胃组织的炎症反应、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA及其蛋白表达和健胃愈疡颗粒的干预作用。方法先后复制大鼠乙酸性胃溃疡及其复发模型,设假手术组、模型组、奥美拉唑组、健胃愈疡组。观察各组大鼠胃组织慢性炎症细胞和中性粒细胞计数、NF-κB mRNA及其蛋白表达的情况。结果灌胃16天和92天时,模型组大鼠胃组织慢性炎症细胞和中性粒细胞计数、NF-κB mRNA及其蛋白表达均较假手术组显著增加(P<0.01),健胃愈疡组慢性炎症细胞和中性粒细胞计数、NF-κB mRNA及其蛋白表达均显著低于模型组(P<0.05或P<0.01),与奥美拉唑组比较差异无显著性。NF-κB mRNA及其蛋白表达均分别与慢性炎症细胞和中性粒细胞计数密切相关(P<0.01)。结论NF-κB可能在调节大鼠乙酸性胃溃疡愈合及其复发的炎症反应中发挥重要作用。健胃愈疡颗粒可能通过抑制胃组织NF-κB的活化和表达抑制炎症反应,这可能是其抗溃疡复发机制之一。

关键词：胃溃疡复发核因子-κB 炎症反应健胃愈疡颗粒

肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分的干预效应

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中国中西医结合杂志 2010年第5期30卷 513-518页

作者：邱冰峰都金星申定珠陈高峰刘平上海中医药大学附属曙光医院上海市中医药研究院肝病研究所.肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海高校中医内科学E-研究院杭州师范大学附属医院杭州310015

目的探讨肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分抑制肝纤维化的效应机制。方法 75只SD雄性大鼠,采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)制备继发性胆汁淤积性肝纤维化模型,假手术组(Sham... 详细信息

目的探讨肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分抑制肝纤维化的效应机制。方法 75只SD雄性大鼠,采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)制备继发性胆汁淤积性肝纤维化模型,假手术组(Sham)仅作胆总管分离,不作胆总管结扎。大鼠BDL术后1周随机分为对照组(M)与干预组(Y组,经灌胃给予黄芪汤组分4周),Sham组于术后1周末随机抽取5只大鼠处死取材,M组分别于术后1、2、3、4周末随机抽取5只大鼠做动态观察,余下各组大鼠均于术后第5周末处死取材。观测肝脏组织学及羟脯氨酸(Hyp)含量;激光共聚焦显微镜观察肝组织胆管上皮细胞标志物角蛋白-7(CK7)与肝细胞特异性抗原(HepPar)共定位,Western blot检测CK7、HepPar的蛋白表达,IPP软件分析肝组织天狼猩红胶原染色。结果随着造模时间推移,M组大鼠肝组织肝细胞Hep Par阳性细胞逐渐减少(Sham>M1周>M2周>M3周>M4周>M5周),胆管上皮细胞(CK7阳性细胞)及纤维化程度、Hyp含量、CK7蛋白表达均逐渐增加(Sham

关键词：继发性胆汁淤积性肝纤维化肝细胞胆管上皮细胞转分化黄芪汤

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针灸膈俞对白细胞共同抗原及免疫功能的影响

四川中医 2006年第2期24卷 100-102页

作者：崔瑾申定珠熊芳丽贵阳中医学院第一附属医院针推科贵州贵阳550001 中南大学湘雅医院中西医结合研究所湖南长沙410013

目的:研究针刺、艾灸膈俞对白细胞共同抗原(CD45)及免疫功能的影响。方法:选用Wister大鼠为实验对象,用环磷酰胺(CTX)腹腔注射造成白细胞减少及免疫功能抑制模型,分组处理后,用FACS流式细胞仪和配套计算机软件对外周血CD45进行分析;用... 详细信息

目的:研究针刺、艾灸膈俞对白细胞共同抗原(CD45)及免疫功能的影响。方法:选用Wister大鼠为实验对象,用环磷酰胺(CTX)腹腔注射造成白细胞减少及免疫功能抑制模型,分组处理后,用FACS流式细胞仪和配套计算机软件对外周血CD45进行分析;用放射免疫法测定血清白细胞介素2(IL-2)活性。结果:造模组大鼠CD45下调的同时,白细胞和IL-2均明显下降,与正常组比较差异有极显著意义(P<0.01),对白细胞、CD45及IL-2的影响,艾灸膈俞穴组的效果明显优于针刺膈俞穴组及常规西药对照利血生组(P<0.05)。结论:艾灸膈俞穴能上调CD45和增强免疫的功能,这是治疗白细胞减少症的关键。

关键词：针刺艾灸膈俞穴白细胞共同抗原(CD45) 白细胞减少症环磷酰胺白细胞介素2(IL-2)

四氯化碳肝纤维化大鼠肝组织差异蛋白质组的动态变化

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中华肝脏病杂志 2012年第9期20卷 664-670页

作者：申定珠陶庆胡义扬刘平上海中医药大学附属曙光医院上海市中医药研究院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室 201203 上海市中医药研究院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海高校中医内科学E-研究院

目的探索肝纤维化形成过程中肝组织蛋白质组的变化，部分解析肝纤维化发生、发展的病理生理机制。方法采用四氯化碳（CCl4）诱导大鼠肝纤维化模型，应用双向凝胶电泳技术分离大鼠肝组织总蛋白质，经考马斯亮蓝染色、图像分析、识别差异... 详细信息

目的探索肝纤维化形成过程中肝组织蛋白质组的变化，部分解析肝纤维化发生、发展的病理生理机制。方法采用四氯化碳（CCl4）诱导大鼠肝纤维化模型，应用双向凝胶电泳技术分离大鼠肝组织总蛋白质，经考马斯亮蓝染色、图像分析、识别差异表达的蛋白质点，应用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱及数据库查询鉴定差异蛋白质点。采用Westemblot、免疫组织化学方法对细胞角蛋白（CK）8、CK18进行蛋白质表达水平的验证。计量资料采用单因素方差分析中的LSD法或非参数检验中的H检验进行统计学分析。结果大鼠造模后，随时间的推移，肝纤维化评分逐渐增加（3周组〈6周组〈9周组），建立了正常大鼠和大鼠CCl4肝纤维化形成过程3、6、9周肝组织双向凝胶电泳图谱，质谱鉴定了44种差异蛋白质；采用Westemblot、免疫组织化学方法对CK8、CK18的验证结果与双向凝胶电泳结果基本一致。正常组及3、6、9周模型组CK8／CKl8蛋白相对表达量分别为：0．113士0．005／0．170±0．030、0．473±0．046／0．530±0．070、0．682±0．087／0．780±0．080、0．837±0．096／1．390±0．130，各组间差异均有统计学意义旷值分别为196．085／74．088、13．870／16．115、75．800／75．900，（P值均〈0．01）。结论CCl4大鼠肝纤维化形成与发展过程中差异表达蛋白质的功能主要涉及细胞生长、发育与分化，细胞增殖与凋亡，血管新生或重构，氧化应激，物质代谢及转运，信号转导等。

关键词：肝硬化蛋白质组四氯化碳双向凝胶电泳

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证候蛋白质组学与中医证候学相关性探讨

中国中西医结合杂志 2006年第4期26卷 366-368页

作者：申定珠李家邦蒋荣鑫凌江红中南大学湘雅医院中西医结合研究所长沙410008

以蛋白质组学为代表的后基因组时代的到来,必然使分子生物学经历从局部观走向整体观、从线形思维走向复杂思维的转变。基于蛋白质组学的发展趋势,总结了近年来中医证候学研究方法,提倡用二维电泳及生物信息学方法鉴定不同的蛋白质。将... 详细信息

以蛋白质组学为代表的后基因组时代的到来,必然使分子生物学经历从局部观走向整体观、从线形思维走向复杂思维的转变。基于蛋白质组学的发展趋势,总结了近年来中医证候学研究方法,提倡用二维电泳及生物信息学方法鉴定不同的蛋白质。将蛋白质组学引入中医证候分类及证候演变规律的研究,对从分子流行病学水平来探讨中医学与蛋白质组学乃至现代分子生物学研究相结合都是必须的。而蛋白质组学与传统中医药在研究生命科学的思维方法上逐步趋于一致,相互渗透,说明在探讨复杂性生命现象时中西医两种医学相结合的必然性和重要性。

关键词：后基因组时代证候蛋白质组学证候蛋白质组学

Fyn信号通路参与β-淀粉样蛋白对大鼠皮层神经元的毒性损伤作用

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中国老年学杂志 2012年第19期32卷 4201-4203页

作者：邢三丽申定珠陈川上海市中医老年医学研究所上海200031

目的探讨β-淀粉样蛋白(Aβ)对原代培养皮层神经元的毒性损伤以及Fyn信号转导通路在此过程中的作用。方法孕17～18 dSD大鼠,体外分离培养皮层神经元,培养7 d后加入Aβ1～42,孵育8 h建立毒性损伤模型,采用生化方法检测神经元细胞培养上... 详细信息

目的探讨β-淀粉样蛋白(Aβ)对原代培养皮层神经元的毒性损伤以及Fyn信号转导通路在此过程中的作用。方法孕17～18 dSD大鼠,体外分离培养皮层神经元,培养7 d后加入Aβ1～42,孵育8 h建立毒性损伤模型,采用生化方法检测神经元细胞培养上清中的乳酸脱氢酶(LDH)释放率,以免疫荧光法、Western印迹法分别检测Fyn和Fak的表达情况。结果与对照组比较,经终浓度5μmol/L的寡聚体Aβ1～42诱导损伤8 h,神经元细胞培养上清中的LDH释放增加,免疫荧光和Western印迹法分别检测到Fyn和Fak的表达增加。结论 A可明显诱导原代培养皮层神经元的毒性损伤,Fyn信号通路参与这一毒性损伤作用。

关键词： Fyn信号转导通路 Aβ1~42 神经元损伤

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蔡淦运用“脾统四脏”理论治疗肺系疾病经验

中医杂志 2016年第12期57卷 1008-1010页

作者：申定珠张正利蔡淦中国中医科学院博士后科研流动站上海中医药大学附属曙光医院上海市中医老年医学研究所

蔡淦教授崇尚李东垣"内伤脾胃,百病由生"理论,推崇"脾统四脏"之说,认为脾胃乃气血生化之源,气机升降出入之枢纽,与其他四脏关系密切;擅长运用"脾统四脏"理论治疗内伤杂病,强调以脾胃为核心调摄五脏、治脾胃以安五脏。介绍蔡淦教授运用"... 详细信息

蔡淦教授崇尚李东垣"内伤脾胃,百病由生"理论,推崇"脾统四脏"之说,认为脾胃乃气血生化之源,气机升降出入之枢纽,与其他四脏关系密切;擅长运用"脾统四脏"理论治疗内伤杂病,强调以脾胃为核心调摄五脏、治脾胃以安五脏。介绍蔡淦教授运用"脾统四脏"理论治疗肺系疾病的经验,主张治脾胃以安肺疾,临证多采用健脾益肺、健脾化痰、健脾利水、养胃益肺、补益脾肾诸法治之,并附验案二则详述其临床应用。

关键词：脾统四脏肺系疾病名医经验蔡淦

从血管老化角度探讨动脉粥样硬化中医防治策略

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中国中西医结合杂志 2012年第2期32卷 266-268页

作者：申定珠陈川迟惠英赵红彬上海市中医老年医学研究所上海200031

动脉粥样硬化是随增龄不断增长、以中老年人为主要发病人群的慢性退行性疾病,抗血管细胞老化正逐渐成为动脉粥样硬化治疗的新策略。动脉粥样硬化演进过程中,内皮细胞更新加快,出现多种诱导血管老化的生物学功能紊乱,引起端粒、端粒酶的... 详细信息

动脉粥样硬化是随增龄不断增长、以中老年人为主要发病人群的慢性退行性疾病,抗血管细胞老化正逐渐成为动脉粥样硬化治疗的新策略。动脉粥样硬化演进过程中,内皮细胞更新加快,出现多种诱导血管老化的生物学功能紊乱,引起端粒、端粒酶的变化,造成内皮细胞老化及功能异常。在炎症等致病因素与AS斑块形成之间,端粒、端粒酶可能起着关键性的桥梁作用。我们以往工作发现,补肾为主的中药复方在明显改善衰老症状和功能的同时也表现出抑制动脉粥样硬化的显著作用。应积极探讨中医对动脉粥样硬化从肾论治、补肾中药从端粒途径调控动脉粥样硬化血管细胞老化的作用机制,为建立基于血管老化的动脉粥样硬化中医防治策略提供依据。

关键词：动脉粥样硬化血管老化端粒中医防治

原发性高血压肝阳上亢证评定量表的初步编制及考评

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中国临床康复 2006年第43期10卷 20-23页

作者：郭全陈泽奇刘小珍申定珠中南大学湘雅医院中西医结合研究所湖南省长沙市410008

目的:编制原发性高血压肝阳上亢证评定量表,为该证提供有效的证候识别及疗效评定工具。方法:对2005-08/2006-07中南大学湘雅医院门诊和住院患者128例进行肝阳上亢证自评量表测试,考核量表的信度、效度、反应度和可接受性。原发性高血压... 详细信息

目的:编制原发性高血压肝阳上亢证评定量表,为该证提供有效的证候识别及疗效评定工具。方法:对2005-08/2006-07中南大学湘雅医院门诊和住院患者128例进行肝阳上亢证自评量表测试,考核量表的信度、效度、反应度和可接受性。原发性高血压肝阳上亢证患者98例,为肝阳上亢组;肝肾阴虚患者30例,为肝肾阴虚组。此表根据心理学评定量表及WHO生活质量量表的研究方法,参考相关研究,通过文献研究、大样本流调资料的回顾、专家讨论、条目分析及经验性筛选等方法建立,各条目按其等级指标依次计0～4分,绝大多数条目采用5级评分方法个别难以细分的条目采用3～4级评分法。根据WHO推荐的筛选条目的标准及有关条目筛选方法,以实测数据采用以下6种方法进行联合筛选:①变异度法。②t检验法。③反应度分析。④相关系数法。⑤因子分析法。⑥克朗巴赫α系数法。结果:参与者128例均进入结果分析。编制出由阳亢、阴虚2个维度共14个条目组成的肝阳上亢证自评量表。①量表的信度:阳亢纬度、阴虚纬度及总量表的复本信度系数分别为0.973、0.952和0.976,分半信度系数分别为0.8588、0.7823和0.8632,克朗巴赫α系数分别为0.8992、0.8123和0.8925。②量表的结构效度和区分效度:因子分析提取2个公因子累积方差贡献率为56.121%,量表结构与理论构想相符。肝阳上亢组与肝肾阴虚组的量表测试结果间有极显著性差异(t=12.858,P<0.001)。③量表的反应度:30例肝阳上亢患者治疗前后的量表评测结果间有极显著性差异(t=14.630,P<0.001)。结论:原发性高血压肝阳上亢证评定量表具有较好的信度、效度和反应度,可用于该证的证候识别和疗效评价。

关键词：高血压肝阳上亢证候辨证分型