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负载人脐带间充质干细胞来源的小细胞外囊泡的甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶治疗小鼠全层皮肤缺损创面的效果

中华烧伤与创面修复杂志 2024年第4期40卷 323-332页

作者：陈祎琦周莹芊魏茜谢晓烨刘馨竹李大伟申传安解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部北京100048

目的探究负载人脐带间充质干细胞来源的小细胞外囊泡(hUCMSC-sEV)的甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶治疗小鼠全层皮肤缺损创面的效果。方法该研究为实验研究。采用超速离心法提取hUCMSC-sEV,通过透射电子显微镜观察其形貌,采用蛋白质... 详细信息

目的探究负载人脐带间充质干细胞来源的小细胞外囊泡(hUCMSC-sEV)的甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶治疗小鼠全层皮肤缺损创面的效果。方法该研究为实验研究。采用超速离心法提取hUCMSC-sEV,通过透射电子显微镜观察其形貌,采用蛋白质印迹法检测CD9、CD63、肿瘤易感基因101(TSG101)及钙联蛋白的表达。将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及第3、4代人表皮角质形成细胞(HEK)、人真皮成纤维细胞(HDF)均分为常规培养的空白对照组和在细胞培养液中加入hUCMSC-sEV培养的hUCMSC-sEV组,行细胞划痕试验并计算划痕后6、12、24 h的细胞迁移率,行细胞Transwell试验并计算培养12 h细胞迁移数量,行5-乙炔基-2''-脱氧尿嘧啶核苷、Hoechst染色检测培养24 h增殖细胞比例,样本数均为3。制备单纯GelMA水凝胶及负载hUCMSC-sEV的GelMA水凝胶(以下简称hUCMSC-sEV/GelMA水凝胶),通过扫描电子显微镜观察2种水凝胶微观形貌,通过激光扫描共聚焦显微镜观察hUCMSC-sEV的分布情况,采用蛋白质比色定量法测定并计算hUCMSC-sEV/GelMA水凝胶在磷酸盐缓冲液(PBS)中浸泡0(即刻)、2、4、6、8、10、12 d时hUCMSC-sEV累积释放率(样本数为3)。将24只6周龄雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为PBS组、单纯hUCMSC-sEV组、单纯GelMA水凝胶组和hUCMSC-sEV/GelMA水凝胶组(每组6只),于小鼠背部制备全层皮肤缺损创面后分别行PBS注射、hUCMSC-sEV悬液注射、单纯GelMA水凝胶覆盖、hUCMSC-sEV/GelMA水凝胶覆盖。于伤后0(即刻)、4、8、12 d观察创面愈合情况并统计伤后4、8、12 d创面愈合率,于伤后12 d取创面组织行苏木精-伊红染色后观察创面新生组织结构,样本数均为6。结果提取的hUCMSC-sEV呈杯状结构,表达CD9、CD63和TSG101,几乎不表达钙联蛋白。划痕后6、12、24 h,hUCMSC-sEV组HEK(t值分别为25.94、20.98、20.04)、HDF(t值分别为3.18、5.68、4.28)、HUVEC(t值分别为4.32、19.33、4.00)的迁移率均明显高于空白对照组(P<0.05)。培养12 h,hUCMSC-sEV组HEK、HDF及HUVEC迁移数量分别为(550±23)、(235±9)、(856±35)个,均明显多于空白对照组的(188±14)、(97±6)、(370±32)个(t值分别为22.95、23.13、17.84,P<0.05)。培养24 h,hUCMSC-sEV组HEK、HDF及HUVEC增殖细胞比例均明显高于空白对照组(t值分别为22.00、13.82、32.32,P<0.05)。单纯GelMA水凝胶内部呈疏松多孔的海绵状结构且其中未见hUCMSC-sEV,hUCMSC-sEV/GelMA水凝胶具有相同海绵状结构且其中可见hUCMSC-sEV呈团块状均匀分布。hUCMSC-sEV/GelMA水凝胶浸泡2 d后hUCMSC-sEV累积释放率曲线趋于平缓,浸泡12 d时hUCMSC-sEV累积释放率为(59.2±1.8)%。伤后0~12 d,4组小鼠创面均不断缩小。伤后4、8、12 d,hUCMSC-sEV/GelMA水凝胶组小鼠创面愈合率均明显高于其余3组(P<0.05),单纯GelMA水凝胶组、单纯hUCMSC-sEV组小鼠创面愈合率均明显高于PBS组(P<0.05);伤后8、12 d,单纯hUCMSC-sEV组小鼠创面愈合率均明显高于单纯GelMA水凝胶组(P<0.05)。伤后12 d,hUCMSC-sEV/GelMA水凝胶组小鼠创面上皮化程度最佳,真皮胶原排列松散有序,炎症细胞数量最少;其余3组小鼠创面均可见真皮胶原排列致密且存在不同程度的炎症细胞浸润。结论hUCMSC-sEV能够促进皮肤创面愈合相关细胞HEK、HDF与HUVEC迁移与增殖,并可在GelMA水凝胶内缓慢释放。hUCMSC-sEV/GelMA水凝胶作为创面敷料能够显著提高小鼠全层皮肤缺损创面愈合速度。

关键词：组织工程间质干细胞水凝胶胞外囊泡生物相容性材料

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浅谈严重烧伤后休克的防与治

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第1期38卷 9-12页

作者：申传安解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部北京100048

休克是严重烧伤最常见的并发症之一,也是主要致死原因之一,休克防治贯穿严重烧伤救治的全过程。严重烧伤后休克类型主要包括:烧伤后早期因大量血管内液体渗出到体表和组织间隙,而引发的血细胞比容升高型、低血容量性休克,常称为烧伤休克... 详细信息

休克是严重烧伤最常见的并发症之一,也是主要致死原因之一,休克防治贯穿严重烧伤救治的全过程。严重烧伤后休克类型主要包括:烧伤后早期因大量血管内液体渗出到体表和组织间隙,而引发的血细胞比容升高型、低血容量性休克,常称为烧伤休克;大范围切开减张、消化道应激性溃疡、大面积切削痂手术等原因导致的失血性休克;各种微生物侵袭导致的感染性休克;输注药物或血液等引起的过敏性休克。从机体有效循环血量减少的原因看,烧伤休克与失血性休克同属低血容量性休克,感染性休克和过敏性休克同属血管扩张性休克。由于上述休克的发生时机、发生机制和临床表现各有特点,防治也应采取针对性策略。

关键词：烧伤休克防治

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胰石蛋白在脓毒症早期诊断中应用的研究进展

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中华烧伤与创面修复杂志 2023年第10期39卷 985-988页

作者：何婷刘伟申传安解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部北京100048

脓毒症是一种严重危及生命的综合征,其主要特征是宿主对感染的异常反应,可迅速演变为脓毒症休克和多器官功能衰竭。脓毒症的治疗依赖于早期识别和诊断以及充分而及时的抗感染和多器官功能支持。近年来,胰石蛋白作为一种新的脓毒症生物... 详细信息

脓毒症是一种严重危及生命的综合征,其主要特征是宿主对感染的异常反应,可迅速演变为脓毒症休克和多器官功能衰竭。脓毒症的治疗依赖于早期识别和诊断以及充分而及时的抗感染和多器官功能支持。近年来,胰石蛋白作为一种新的脓毒症生物标志物被广泛研究。现有证据表明,与目前临床上常用的炎症标志物相比,胰石蛋白对脓毒症的诊断具有更高的敏感度和特异度,并且能对脓毒症进行早期识别,可在一定程度上评估脓毒症患者病情的严重程度。该文就胰石蛋白的特征、生物学功能、诊断特点以及临床应用的研究进展作一综述。

关键词：脓毒症胰石蛋白感染诊断

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乳房缩小术对乳房及乳头乳晕复合体感觉影响的研究进展

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中华整形外科杂志 2023年第11期39卷 1262-1266页

作者：李婉迪申传安中国人民解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部北京100048

乳房肥大症患者常因乳房体积过大,造成胸部皮肤麻木、肩背疼痛、皮肤湿疹、运动不便等问题,严重影响生活质量。随着患者对生活质量要求的提高,乳房和乳头乳晕复合体(NAC)感觉的重要性逐渐得到研究者的关注。该文通过回顾采用定量感觉测... 详细信息

乳房肥大症患者常因乳房体积过大,造成胸部皮肤麻木、肩背疼痛、皮肤湿疹、运动不便等问题,严重影响生活质量。随着患者对生活质量要求的提高,乳房和乳头乳晕复合体(NAC)感觉的重要性逐渐得到研究者的关注。该文通过回顾采用定量感觉测试评估乳房及NAC感觉变化的相关研究,介绍了Semmes-Weinstein单丝检查(SWME)和指定压力感觉测试仪(PSSD),以及乳房肥大症患者乳房及NAC的感觉变化,同时总结了造成乳房缩小整形术后皮肤感觉变化的主要因素。研究发现在乳房肥大症患者的感觉异常中,乳头和乳晕的感觉变化并不一定完全一致。蒂的位置选择可能影响术后乳房及NAC的感觉,其中上蒂和外上蒂损伤NAC支配神经风险增加,可能造成术后部分区域的皮肤敏感度在一定时间内显著下降。另外,乳房体积较大的患者手术获益可能更大。同时,乳腺组织切除量与感觉变化无显著相关性。

关键词：乳房乳房成形术感觉

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解放军总医院第四医学中心烧伤整形科创新发展的60年

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中华烧伤杂志 2018年第12期34卷 840-843页

作者：申传安解放军总医院第四医学中心烧伤整形科北京100048

解放军总医院第四医学中心烧伤整形科始建于1958年,是国内建科最早的烧伤专科之一。在享誉国内外的烧伤外科学泰斗、中国工程院院士盛志勇教授的开拓下,以朱兆明、郭振荣、柴家科、杨红明、申传安等历届科主任为代表的几代烧伤科人辛勤... 详细信息

解放军总医院第四医学中心烧伤整形科始建于1958年,是国内建科最早的烧伤专科之一。在享誉国内外的烧伤外科学泰斗、中国工程院院士盛志勇教授的开拓下,以朱兆明、郭振荣、柴家科、杨红明、申传安等历届科主任为代表的几代烧伤科人辛勤耕耘、传承创新,科室由单纯治疗型,逐步发展为集专科救治、科学研究、成果转化、人才培养于一体的全军重中之重建设学科、全军烧伤研究所、国家临床重点专科和国家重点学科。目前,科室展开床位300张,拥有独立的烧伤专科门急诊、挂号和收费处、烧伤专科手术室(7间)、医学美容中心、毛发移植中心、康复体疗中心、皮肤护理中心和专科实验室。每年门急诊量7万余人次、住院患者6500余例次、手术量9000余台次,烧伤治愈率达99.5%,半数致死烧伤面积达98%体表总面积,位居国际领先水平。

关键词：烧伤创新发展

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糖皮质激素在烧伤脓毒症骨骼肌蛋白代谢中作用的研究

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中华外科杂志 2002年第9期40卷 705-708页

作者：柴家科申传安盛志勇解放军第三四医院烧伤研究所北京100037

目的　探讨糖皮质激素在烧伤脓毒症骨骼肌蛋白代谢中的作用及其机制。　方法　大鼠随机分为 4组 ,每组 1 5只 :B组大鼠 30 %Ⅲ度烫伤后立即腹腔注射内毒素 6mg/kg,模拟烧伤脓毒症 ;C组于伤前 2h ,D组于伤后 2h分别使用糖皮质激素受体拮... 详细信息

目的　探讨糖皮质激素在烧伤脓毒症骨骼肌蛋白代谢中的作用及其机制。　方法　大鼠随机分为 4组 ,每组 1 5只 :B组大鼠 30 %Ⅲ度烫伤后立即腹腔注射内毒素 6mg/kg,模拟烧伤脓毒症 ;C组于伤前 2h ,D组于伤后 2h分别使用糖皮质激素受体拮抗剂RU38486灌胃 (1 0mg/kg) ,余处理同B组 ;A组为假伤组 ,并使用等量的生理盐水替代内毒素。伤后 1 2h ,测定血浆皮质醇浓度 ,称重和离体有氧孵育伸趾长肌 ,高效液相色谱法测定肌组织蛋白降解率 ,Northern杂交检测伸趾长肌泛素、E2 1 4kDa和C2mRNA的表达变化。　结果　伸趾长肌重量 ,B组较A组明显降低 ,差异有显著意义 (t=9 0 3 ,P <0 0 1 ) ;而C组和D组虽然低于A组 ,但显著高于B组 ,差异有显著意义 (t=2 2 6 ,6 42 ,P <0 0 5或P <0 0 1 )。血浆皮质醇浓度 ,B ,C和D组都明显高于A组 ,差异有显著意义 (t=9 0 3 ,2 2 94,P <0 0 1 )。蛋白降解率 ,B组总蛋白和肌纤维蛋白降解率较A组分别升高 58 8% (2 1 0 / 357)和335 5 % (4 1 6/ 1 2 4 ) ,差异有显著意义 (t=36 99和t=46 1 9,P <0 0 1 ) ;C组总蛋白和肌纤维蛋白降解率较B组分别减少 2 8 3 % (1 61 / 567)和 49 6 % (2 68/ 5 40 ) ,D组较B组分别减少 1 8 9% (1 0 8/ 567)和2 3 2 % (1 2 5/ 5 40 ) ,差异有显著?

关键词：烧伤脓毒症糖皮质激素类骨骼肌蛋白代谢

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异体皮在烧伤外科的应用

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中华烧伤杂志 2019年第4期35卷 243-247页

作者：申传安解放军总医院第四医学中心烧伤整形科北京100048

异体皮移植至今已经有近150年的历史,是修复大面积深度烧伤创面的关键措施之一。异体皮暂时存活覆盖创面,为最终自体皮修复创面提供宝贵机会。作为我国烧伤外科修复特大面积深度烧伤创面的主要方法——微粒皮移植技术和嵌皮技术都以异... 详细信息

异体皮移植至今已经有近150年的历史,是修复大面积深度烧伤创面的关键措施之一。异体皮暂时存活覆盖创面,为最终自体皮修复创面提供宝贵机会。作为我国烧伤外科修复特大面积深度烧伤创面的主要方法——微粒皮移植技术和嵌皮技术都以异体皮移植为基础。近年来,由于异体皮来源困难,国内的许多烧伤中心出现"寸皮难求"的现象,严重影响了临床救治效果。器官获取组织和异体皮库建设将有望成为解决异体皮来源及质量问题的合法途径,而成功研制理想的组织工程皮肤是根本解决措施。

关键词：烧伤组织工程皮肤移植异体皮创面器官获取组织

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重视负压伤口治疗技术在烧伤外科中的应用

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中华烧伤杂志 2015年第2期31卷 81-83页

作者：柴家科申传安解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所北京100048

负压伤口治疗（negative pressure wound therapy,NPWT）技术通过将微孔泡沫材料紧密接触创面，使用生物膜密封，在负压作用下经引流管抽吸，在创面形成单向负压环境，经材料徽孔引流分泌物和渗出液。该技术借助负压徽作用力改善局部组... 详细信息

负压伤口治疗（negative pressure wound therapy,NPWT）技术通过将微孔泡沫材料紧密接触创面，使用生物膜密封，在负压作用下经引流管抽吸，在创面形成单向负压环境，经材料徽孔引流分泌物和渗出液。该技术借助负压徽作用力改善局部组织微循环，增加细胞生长因子分泌，加快细胞增殖与血管生成，从而促进创面愈合。近年来，NPWT技术越来越多被应用于烧伤外科临床，主要涉及普通急性烧伤创面和毁损性创面修复、皮片移植、后期瘢痕整复这几个方面，展现出良好的优越性。

关键词：烧伤负压伤口疗法创面修复

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表皮干细胞在皮肤创面修复中的作用与机制研究进展

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第9期38卷 854-858页

作者：石志远张博涵孙佳辰刘馨竹申传安解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部北京100048

表皮干细胞在皮肤自我更新、创面修复、再上皮化过程中发挥关键作用。单细胞测序、基因敲除等新技术新理念的出现进一步揭示了表皮干细胞维持表皮自我更新、参与创面修复的新机制,为创面修复提供了新思路。该文回顾了近年来关于表皮干... 详细信息

表皮干细胞在皮肤自我更新、创面修复、再上皮化过程中发挥关键作用。单细胞测序、基因敲除等新技术新理念的出现进一步揭示了表皮干细胞维持表皮自我更新、参与创面修复的新机制,为创面修复提供了新思路。该文回顾了近年来关于表皮干细胞的增殖、分化、迁移的机制,通过对表皮干细胞异质性与可塑性相关研究的分析,进一步加深对表皮干细胞生理功能的理解;结合表皮干细胞在创面修复领域中的应用进展,为从事创面修复相关工作的临床与基础研究工作者提供参考。

关键词：皮肤表皮干细胞干细胞异质性细胞可塑性创面修复

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成人大面积烧伤后急救复苏十倍法补液公式的创建与应用

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第3期38卷 236-241页

作者：申传安刘馨竹李大伟刘兆兴张博涵解放军总医院第四医学中心烧伤整形医学部北京100048

目的探讨成人大面积烧伤后急救复苏十倍法补液公式的科学性和可行性。方法采用回顾性观察性研究方法。收集解放军总医院第四医学中心2016年12月—2019年12月收治的170例大面积烧伤成年患者[男135例、女35例,年龄(42±14)岁]的烧伤总面积... 详细信息

目的探讨成人大面积烧伤后急救复苏十倍法补液公式的科学性和可行性。方法采用回顾性观察性研究方法。收集解放军总医院第四医学中心2016年12月—2019年12月收治的170例大面积烧伤成年患者[男135例、女35例,年龄(42±14)岁]的烧伤总面积[30%~100%体表总面积(TBSA)]和体重(45~135 kg)资料。将45~135 kg中的每一体重(编程步长为1 kg)与烧伤总面积为30%~100%TBSA中的每一面积(编程步长为1%TBSA)配对后的6461对模拟数据,代入4个公认补液公式——Parkland公式、Brooke公式、解放军第三〇四医院公式和第三军医大学公式与2个急救补液公式——世界卫生组织烧伤技术工作小组(TWGB)提出的大面积烧伤患者急救简化复苏方案(以下简称TWGB公式)和该文作者提出的十倍法补液公式,计算伤后8 h内补液速度(以下简称补液速度),结果以烧伤总面积编程步长为10%TBSA进行展示。以4个公认补液公式的计算结果为合理补液速度,计算并比较采用2个急救补液公式计算的补液速度的准确率。利用烧伤总面积分别为30%、100%TBSA时采用十倍法补液公式计算结果为合理补液速度时对应的最大体重,将45~135 kg分为3个段,比较各个体重分段中采用2个急救补液公式计算的补液速度的准确率。当2个急救补液公式计算的补液速度均不合理时,比较两者补液速度的差异。统计前述170例患者中前述3个体重分段分布;利用前述170例患者的烧伤总面积和体重数据,同前计算并比较采用2个急救补液公式计算的补液速度的准确率。对数据进行McNemar检验。结果烧伤总面积分别为30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%TBSA时,体重为45~135 kg的情况下,采用2个急救补液公式计算的补液速度均没有超过4个公认补液公式的计算结果中的最大值;TWGB公式计算的补液速度不随烧伤总面积的变化而改变,十倍法补液公式计算的补液速度不随体重的变化而改变。6461对模拟数据代入显示,根据十倍法补液公式计算的补液速度的准确率为43.09%(2784/6461),明显高于TWGB公式的2.07%(134/6461),χ^(2)=2404.80,P<0.01。当体重为45~62、63~93 kg时,根据十倍法补液公式计算的补液速度的准确率分别为100%(1278/1278)、68.42%(1506/2201),均明显高于TWGB公式的0(0/1278)、0.05%(1/2201),χ^(2)=1276.00、1501.01,P<0.01;当体重为94~135 kg时,根据十倍法补液公式计算的补液速度的准确率为0(0/2982),明显低于TWGB公式的4.46%(133/2982),χ^(2)=131.01,P<0.01。当2个急救补液公式计算的补液速度均不合理时,采用十倍法补液公式计算的大部分补液速度大于TWGB公式的计算结果,占79.3%(2808/3543)。170例患者中,体重为45~62、63~93、94~135 kg者所占比例分别为25.29%(43/170)、65.88%(112/170)、8.82%(15/170)。170例患者中,采用十倍法补液公式计算的补液速度的准确率为69.41%(118/170),明显高于TWGB公式的3.53%(6/170),χ^(2)=99.36,P<0.01。结论应用十倍法补液公式计算成人大面积烧伤后急救复苏补液速度相对4个公认补液公式简便,优于TWGB公式,适合非烧伤专业的一线医护人员院前抢救大面积烧伤成年患者时应用,值得推广。

关键词：烧伤休克急救十倍法补液公式复苏

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