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流产布鲁氏菌bp26和omp10基因的同源性分析

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中国兽医科学 2011年第1期41卷 25-30页

作者：王军王瑞申之义杨莲茹内蒙古大学生命科学学院内蒙古呼和浩特010021 内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018

利用布鲁氏菌外膜蛋白bp26基因和omp10基因,对分离的布鲁氏菌和参考布鲁氏菌菌株进行克隆和序列分析,以明确分离的布鲁氏菌和参考布鲁氏菌菌株与基因库中的布鲁氏菌外膜蛋白bp26基因和omp10基因间的同源性。根据GenBank中的布鲁氏菌bp2... 详细信息

利用布鲁氏菌外膜蛋白bp26基因和omp10基因,对分离的布鲁氏菌和参考布鲁氏菌菌株进行克隆和序列分析,以明确分离的布鲁氏菌和参考布鲁氏菌菌株与基因库中的布鲁氏菌外膜蛋白bp26基因和omp10基因间的同源性。根据GenBank中的布鲁氏菌bp26基因和omp10基因,分别设计合成了1对特异性引物,以提取的分离株布鲁氏菌和2株参考布鲁氏菌的总DNA为模板,通过PCR技术扩增得到了bp26基因和omp10基因,回收纯化后将这2个基因分别连接到pMD18-T载体上,热激发转化受体菌大肠杆菌DH5α,并进行质粒提取、PCR鉴定和测序。结果表明,bp26基因全长为995bp,包含1个由753bp的核苷酸组成的完整开放阅读框,分离菌株的同源性为100%,与参考菌株M5、S2的同源性分别为100%和99.9%,与参考序列S19、870的同源性分别为99.9%和100%;omp10基因全长531bp,包含1个由396bp的核苷酸组成的完整开放阅读框,分离菌株的同源性为100%,与参考菌株M5、S2的同源性均为100%,与参考序列544的同源性为99.7%。证实bp26基因和omp10基因在各种型间的同源性都在99%以上,表明这2个基因在布鲁氏菌属的细菌中是高度保守的。

关键词：布鲁氏菌 bp26基因 omp10基因同源性分析

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羊传染性脓疱病毒分离及生物学特性研究

中国动物检疫 2006年第8期23卷 25-27页

作者：罗云申之义内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018

用犊牛睾丸细胞及BK细胞,从内蒙古自治区达拉特旗发病的进口小尾寒羊痂块中分离到一株病毒,对其进行连续传代至病变稳定。通过对该分离株进行动物回归试验,在犊牛睾丸细胞及BK细胞中的增殖特性试验、病毒核酸类型鉴定试验、脂溶剂敏感... 详细信息

用犊牛睾丸细胞及BK细胞,从内蒙古自治区达拉特旗发病的进口小尾寒羊痂块中分离到一株病毒,对其进行连续传代至病变稳定。通过对该分离株进行动物回归试验,在犊牛睾丸细胞及BK细胞中的增殖特性试验、病毒核酸类型鉴定试验、脂溶剂敏感试验及其它生物学特性试验、电镜观察等,初步鉴定该分离株为羊传染性脓疱病毒。

关键词：羊传染性脓疱病毒生物学特性分离

羊传染性脓疱病毒内蒙分离株F1L基因的克隆与序列分析

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中国动物检疫 2007年第6期24卷 26-27页

作者：王辉赵晓军易建刚申之义内蒙古农业大学动物科学与医学学院呼和浩特010018 内蒙古生物药品厂内蒙古呼和浩特010030

本试验通过对羊传染性脓疱病毒内蒙分离株(OV/nm-05)进行总DNA提取,参考GeneBank中OrfVirus(Strain NZ2)株F1L基因序列设计一对引物,应用PCR技术特异性地扩增出该毒株的F1L基因的片段,并将其克隆到pGEM-Teasy载体后进行测序,得到该病毒... 详细信息

本试验通过对羊传染性脓疱病毒内蒙分离株(OV/nm-05)进行总DNA提取,参考GeneBank中OrfVirus(Strain NZ2)株F1L基因序列设计一对引物,应用PCR技术特异性地扩增出该毒株的F1L基因的片段,并将其克隆到pGEM-Teasy载体后进行测序,得到该病毒F1L基因序列。应用计算机软件将测定序列与参考毒株OV/7、Strain NZ2、OV/C2、OV/mi-90、OV/Torino、OV/2的F1L基因序列进行比较。结果表明羊传染性脓疱病毒内蒙分离株与Strain NZ2同原性最高,达99.1%,与OV/Torino最低,但也为96.3%。说明羊传染性脓疱病毒内蒙分离株F1L基因与其他参考毒株之间差异不大。

关键词：羊传染性脓疱病毒 F1L基因 PCR 序列分析

绵羊肺炎支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

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中国兽医科学 2018年第8期48卷 965-970页

作者：韩瑞鑫申捷申之义内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区动物疫病预防控制中心内蒙古呼和浩特010010

本研究旨在建立一种灵敏性高、特异性强的检测绵羊肺炎支原体的TaqMan实时荧光定量PCR方法。根据GenBank上已发表的绵羊肺炎支原体HSP70基因序列设计引物和探针,构建标准阳性质粒,建立实时荧光定量PCR方法。试验结果显示,该方法标准曲... 详细信息

本研究旨在建立一种灵敏性高、特异性强的检测绵羊肺炎支原体的TaqMan实时荧光定量PCR方法。根据GenBank上已发表的绵羊肺炎支原体HSP70基因序列设计引物和探针,构建标准阳性质粒,建立实时荧光定量PCR方法。试验结果显示,该方法标准曲线的线性关系良好,标准曲线的相关系数R2=1.000,斜率S=-3.334,扩增效率E=99.5%;敏感性高,可以检测出的最低样品浓度为1×101copies/L,是普通PCR的100倍;特异性强,能有效区分巴氏杆菌等9种病原;重复性好,组内、组间的Ct值变异系数均小于2%。运用本试验建立的实时荧光定量PCR方法可简便、准确地鉴定绵羊肺炎支原体。

关键词：绵羊肺炎支原体 HSP70基因 TaqMan实时荧光定量PCR

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鸡传染性支气管炎

兽医导刊 1992年第4期 55-58页

作者：申之义内蒙古农牧学院动物医学系

鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis,IB)是由传染性支管炎病毒(IBV)引起的鸡的一种高度传染性的急性传染病。死亡率一般在25%左右,但幼雏受侵时死亡率有时高达75%-90%,其中,肾病变型IB引起的死亡率较大。IBV不仅侵害鸡的呼吸系统,... 详细信息

鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis,IB)是由传染性支管炎病毒(IBV)引起的鸡的一种高度传染性的急性传染病。死亡率一般在25%左右,但幼雏受侵时死亡率有时高达75%-90%,其中,肾病变型IB引起的死亡率较大。IBV不仅侵害鸡的呼吸系统,还常侵害母鸡卵巢和输卵管,造成产蛋的数量和质量下降。IBV嗜肾株对肾脏的掼

关键词：鸡传染性支气管炎交叉免疫血清型血清变种油乳苗病毒株败血支原体鸡场青年鸡疫苗毒

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鸡传染性支气管炎

内蒙古畜牧业 1992年第11期 5-6页

作者：申之义

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鸡胚免疫接种的研究近况和展望

内蒙古畜牧科学 1992年第4期13卷 17-19页

作者：申之义内蒙古农牧学院动物医学系

鸡胚免疫接种是从八十年代开始发展起来的一种新型免疫接种技术.国内外学者进行了鸡马立克氏病、鸡传染性法氏囊病、鸡新城疫和鸡传染性支气管炎的鸡胚免疫研究.结果表明,鸡胚免疫能够使雏鸡产生主动免疫力,甚至提前获得免疫力.只要疫... 详细信息

鸡胚免疫接种是从八十年代开始发展起来的一种新型免疫接种技术.国内外学者进行了鸡马立克氏病、鸡传染性法氏囊病、鸡新城疫和鸡传染性支气管炎的鸡胚免疫研究.结果表明,鸡胚免疫能够使雏鸡产生主动免疫力,甚至提前获得免疫力.只要疫苗种类和剂量、鸡胚日龄和接种途径合适,鸡胚免疫不影响出雏率和健雏率.这种接种技术便于实现机械化、自动化操作,具有广阔的应用前景.

关键词：免疫接种鸡鸡胚接种

牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的分离鉴定 Ⅰ.病毒分离培养、理化特性测定、中和试验

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中国兽医杂志 1993年第3期19卷 7-9页

作者：申之义王克恭关平原李平安内蒙古农牧学院动物医学系呼和浩特010018

用牛睾丸细胞,从呼和浩特市某奶牛场病牛脾脏中分离出1株病毒,并对其细胞培养特性、形态特征、核酸类型和对某些理化因素的敏感性进行了观察和检测,均与BVD—MDV一致,进一步用标准BVD—MDV Oregon C_(24)V阳性血清对分离病毒进行中和试... 详细信息

用牛睾丸细胞,从呼和浩特市某奶牛场病牛脾脏中分离出1株病毒,并对其细胞培养特性、形态特征、核酸类型和对某些理化因素的敏感性进行了观察和检测,均与BVD—MDV一致,进一步用标准BVD—MDV Oregon C_(24)V阳性血清对分离病毒进行中和试验,结果为阳性。表明该病毒为BVD—MDV。

关键词：牛病腹泻粘膜病病毒分离

应用反转录聚合酶链反应检测鸡传染性支气管炎病毒核酸的研究

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中国兽医杂志 1997年第1期23卷 5-7页

作者：张七斤申之义关平原李平安红梅内蒙古农牧学院动物医学院呼和浩特兽医站

根据国外报道的鸡传染性支气管炎病（ＩＢＶ）Ｇｒａｙ株的纤突蛋白（Ｓ１）核苷酸序列，自行设计合成了Ｓ１蛋白主要抗原决定簇基因两侧的１对引物，跨幅为１．０ｋｂ。用该引物对从内蒙古、天津、山东等地分离的３株ＩＢＶ进行ＲＮＡ... 详细信息

根据国外报道的鸡传染性支气管炎病（ＩＢＶ）Ｇｒａｙ株的纤突蛋白（Ｓ１）核苷酸序列，自行设计合成了Ｓ１蛋白主要抗原决定簇基因两侧的１对引物，跨幅为１．０ｋｂ。用该引物对从内蒙古、天津、山东等地分离的３株ＩＢＶ进行ＲＮＡ提取，反转录后ＰＣＲ，经琼脂糖凝胶电泳结果表明，３株毒株均获得了与预期一致的ＰＣＲ产物；此外，ＩＢＶＰＣＲ灵敏度的测定结果表明，ＰＣＲ方法可检测出１０ｐｇ的模板，ＰＣＲ酶切结果为，ＨａｅⅢ、ＴａｇⅠ酶对３株ＰＣＲ产物均有１个酶切位点。

关键词：鸡病传染性支气管炎病毒聚合酶链反应