检索结果-南通市图书馆

基于胰高血糖素样肽-1的Ⅱ型糖尿病治疗研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

药物生物技术 2013年第1期20卷 68-71页

作者：李闻田浤高向东中国药科大学生命科学与技术学院江苏南京210009

Ⅱ型糖尿病的治疗是现今研究关注的热点。现有的抗糖尿病药物由于副作用以及对病程恶化无显著改善而限制了其临床应用。基于胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的药物为Ⅱ型糖尿病治疗提供了新的思路,主要包括GLP-1类似物及二肽基肽酶-IV(DPP-IV)... 详细信息

Ⅱ型糖尿病的治疗是现今研究关注的热点。现有的抗糖尿病药物由于副作用以及对病程恶化无显著改善而限制了其临床应用。基于胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的药物为Ⅱ型糖尿病治疗提供了新的思路,主要包括GLP-1类似物及二肽基肽酶-IV(DPP-IV)抑制剂,其安全性和有效性已被大量的临床试验证明。GLP-1能够葡萄糖依赖地促进胰岛素分泌,且能够促进胰岛细胞的增殖,降低糖化血红蛋白浓度。文章就GLP-1及二肽基肽酶抑制剂用于Ⅱ型糖尿病治疗的研究作了综述。

关键词：胰高血糖素样肽-1 二肽基肽酶Ⅳ抑制剂 Ⅱ型糖尿病

多肽药物关键水解酶体外高通量分析方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药科大学学报 2019年第3期50卷 352-356页

作者：张凡田浤姚文兵中国药科大学生命科学与技术学院江苏省生物药物成药性研究重点实验室

为了建立测定多肽药物体内代谢关键水解酶的高通量分析方法,本研究基于高效液相色谱技术,确定通用的体外酶解反应条件为:pH7.8或9.0,缓冲体系为0.01mol/LPBS或50mmol/L Tris缓冲液,实现对多肽药物关键水解酶的统一高通量体外检测。利用... 详细信息

为了建立测定多肽药物体内代谢关键水解酶的高通量分析方法,本研究基于高效液相色谱技术,确定通用的体外酶解反应条件为:pH7.8或9.0,缓冲体系为0.01mol/LPBS或50mmol/L Tris缓冲液,实现对多肽药物关键水解酶的统一高通量体外检测。利用该方法对多肽药物普兰林肽的关键水解酶进行分析,研究结果显示,基肽释放相关酶5和二肽基肽酶4对普兰林肽的水解作用最强,与微量热泳动分析结果一致。因此,本研究所建立的方法可用于分析多肽药物的关键水解酶,为优化多肽药物的酶稳定性提供方法参考与指导。

关键词：多肽酶解代谢高效液相色谱蛋白水解酶高通量分析普兰林肽

弱化抗性标记筛选高表达CHO细胞株的方法建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药科大学学报 2015年第5期46卷 617-622页

作者：刘苏田浤王驰姚文兵中国药科大学生命科学与技术学院南京210009

为了优化中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达体系,建立高表达CHO细胞株筛选方法,将外源基因表达载体上抗性筛选基因表达的新霉素磷酸转移酶(NPT)的261位氨基酸天冬氨酸突变成甘氨酸。经G418筛选,转染含突变型NPT表达载体的细胞存活率显著低于转... 详细信息

为了优化中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达体系,建立高表达CHO细胞株筛选方法,将外源基因表达载体上抗性筛选基因表达的新霉素磷酸转移酶(NPT)的261位氨基酸天冬氨酸突变成甘氨酸。经G418筛选,转染含突变型NPT表达载体的细胞存活率显著低于转染含野生型NPT表达载体的细胞存活率。以绿色荧光蛋白-抗体Ig G1 Fc结构域融合蛋白为报告基因,验证了突变后新霉素磷酸转移酶对抗生素G418抗性减弱。经G418持续加压培养3周后,转染含突变型NPT表达载体的细胞中EGFP的表达量显著高于转染含野生型NPT表达载体的细胞,表明其具有筛选出高表达单克隆细胞株的潜力。

关键词：中国仓鼠卵巢细胞新霉素磷酸转移酶增强型绿色荧光蛋白高表达系统

含有L-对硝基苯丙氨酸的BAFF改构体的分子动力学模拟与分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药科大学学报 2017年第2期48卷 227-232页

作者：蔡棣田浤姚文兵中国药科大学生命科学与技术学院南京210009

建立含有L-对硝基苯丙氨酸(p-nitro-L-phenylalanine,pNO_2Phe)蛋白的分子动力学模拟方法,分析了含有pNO_2Phe的蛋白具有免疫原性的构效关系,为其他含有非天然氨基酸蛋白的动力学模拟研究提供参考。使用CGenFF-paramchem计算天然氨基酸... 详细信息

建立含有L-对硝基苯丙氨酸(p-nitro-L-phenylalanine,pNO_2Phe)蛋白的分子动力学模拟方法,分析了含有pNO_2Phe的蛋白具有免疫原性的构效关系,为其他含有非天然氨基酸蛋白的动力学模拟研究提供参考。使用CGenFF-paramchem计算天然氨基酸中不存在的L-对硝基苯丙氨酸的新的成键、键角、二面角信息与能量,将新成键的键长、键角、二面角参数与相应的能量信息写入CHARMM(chemistry at Harvard macromolecular mechanics)力场参数文件中。重新定义L-对硝基苯丙氨酸的CHARMM力场参数后,利用纳米分子动力学(NAMD)成功对含有L-对硝基苯丙氨酸的B淋巴细胞刺激因子(BAFF)进行动力学模拟。统计动力学模拟过程中的每一帧体系的温度,作出的温度分布图符合正态分布,证明了新定义力场参数的稳定性。模拟结果中,蛋白的均方根偏差(RMSD)在趋近于2.5,pNO_2Phe残基的均方根涨落(RMSF)为3.7,显著高于分子的其他部位,表明pNO_2Phe残基运动剧烈,蛋白在该残基附近结构的可变性较大,可能会产生新的构象表位,为含有pNO_2Phe蛋白成为自体疫苗的设计提供了理论上的可行性。

关键词：纳米分子动力学(NAMD) 可视化分子动力学(VMD) 分子动力学模似 CHARMM L-对硝基苯丙氨酸 B淋巴细胞刺激因子

基于神经网络和遗传算法的非天然氨基酸突变蛋白的培养优化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

药物生物技术 2013年第5期20卷 414-418页

作者：黄捷田浤陈海姚文兵中国药科大学生命科学与技术学院江苏南京210009

非天然氨基酸定点改构技术已被广泛应用于蛋白质结构与功能研究以及新药开发等,然而常用的无机盐培养基营养匮乏导致突变蛋白的产量过低,严重限制了该技术的进一步应用。相比传统的优化方法,文章结合了人工神经网络以及遗传算法,更方便... 详细信息

非天然氨基酸定点改构技术已被广泛应用于蛋白质结构与功能研究以及新药开发等,然而常用的无机盐培养基营养匮乏导致突变蛋白的产量过低,严重限制了该技术的进一步应用。相比传统的优化方法,文章结合了人工神经网络以及遗传算法,更方便、更准确地对大肠杆菌发酵突变蛋白的培养条件进行了优化。试验以引入对乙酰基苯丙氨酸的尿酸酶作为模式蛋白,以尿酸酶的酶活测定直观反映蛋白表达量,对培养条件中4个因素进行了摸索并优化,最终获得了最佳培养条件为:甘油1.04%、非天然氨基酸溶液1 mmol/L、金属离子综合液0.86×、IPTG 0.5 mmol/L,并且利用优化后的培养条件发酵获得的尿酸酶产量较未优化前提高了14%。并且通过测定尿酸酶酶活的精确比较,验证了ANN方法较响应面法在优化复杂的非线性生物工艺方面的优势。本试验的顺利完成,不仅提高了引入对乙酰基苯丙氨酸的尿酸酶的产量,同时也为其他非天然氨基酸定点引入蛋白的发酵培养基优化提供了重要参考。

关键词：人工神经网络遗传算法非天然氨基酸尿酸酶培养基优化

聚乙二醇对干扰素α-2b的初步化学修饰研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药科大学学报 2000年第1期31卷 74-77页

作者：田浤姚文兵吴梧桐沈子龙中国药科大学生物制药学院南京210009

以几种不同方法活化的聚乙二醇 5 0 0 0对干扰素进行化学修饰 ,并对修饰条件、修饰后干扰素生物活性进行了初步比较。相同反应条件下 ,单甲氧基聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯 (SC mPEG)的选择性较单甲氧基聚乙二醇琥珀酸琥珀酰亚胺酯 (SS mP... 详细信息

以几种不同方法活化的聚乙二醇 5 0 0 0对干扰素进行化学修饰 ,并对修饰条件、修饰后干扰素生物活性进行了初步比较。相同反应条件下 ,单甲氧基聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯 (SC mPEG)的选择性较单甲氧基聚乙二醇琥珀酸琥珀酰亚胺酯 (SS mPEG)高 ,聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯 (BSC PEG)由于有两个活性基团 ,选择性与SS mPEG相近。以聚乙二醇活化的修饰剂会使干扰素分子见形成交联 ,修饰后生物活性损失较大 ,而单甲氧基聚乙二醇活化的修饰剂修饰干扰素 ,修饰率保持在 30

关键词：聚乙二醇干扰素 rhuIFNα-2b

重组人血清白蛋白第3结构域-Nartograstim融合蛋白在毕赤酵母中的表达及初步活性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药科大学学报 2013年第6期44卷 577-582页

作者：赵述强张瑜田浤刘超高向东中国药科大学生命科学与技术学院南京210009

将人血清白蛋白第3结构域(3DHSA)与粒细胞集落刺激因子突变体(Nartograstim)融合基因克隆至载体pPICzαA,置于醇氧化酶启动子(AOX)和α交配因子信号肽作用下构建分泌表达质粒,电击转化入毕赤酵母GS115。SDSPAGE结果显示3DHSA-Nartogras... 详细信息

将人血清白蛋白第3结构域(3DHSA)与粒细胞集落刺激因子突变体(Nartograstim)融合基因克隆至载体pPICzαA,置于醇氧化酶启动子(AOX)和α交配因子信号肽作用下构建分泌表达质粒,电击转化入毕赤酵母GS115。SDSPAGE结果显示3DHSA-Nartograstim相对分子质量约为42 kD,Western blot证实其同时具有HSA和G-CSF的抗原性。建立融合蛋白表达的条件为:BMMY培养基pH 6.0、1.5%甲醇、诱导84 h,灰度扫描发现该条件下融合蛋白的纯度为79%。依次采用亲和色谱和疏水色谱纯化得到纯度高于90%的融合蛋白,终产量为86 mg/L。采用MTT法检测融合蛋白对NFS-60细胞株的促增殖能力,结果显示,3DHSA-Nartograstim具有剂量依赖性促进NFS-60细胞增殖的作用。本研究为3DHSA-Nartograstim的进一步研究奠定了基础。

关键词：人血清白蛋白粒细胞集落刺激因子 3DHSA 毕赤酵母

新一代基因组编辑技术在基因治疗及生物制药领域中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药科大学学报 2014年第4期45卷 504-510页

作者：张然田浤高向东姚文兵中国药科大学生命科学与技术学院南京210009

近年来,随着锌指核酸酶、转录激活子样效应因子核酸酶和成簇可调控间隔短回文重复RNA引导核酸酶的出现,"基因组编辑"技术得到广泛应用。由于此类技术具有高效和可定制的特点,在基因治疗、细胞模型、糖基化工程、细胞工程等方面许多新策... 详细信息

近年来,随着锌指核酸酶、转录激活子样效应因子核酸酶和成簇可调控间隔短回文重复RNA引导核酸酶的出现,"基因组编辑"技术得到广泛应用。由于此类技术具有高效和可定制的特点,在基因治疗、细胞模型、糖基化工程、细胞工程等方面许多新策略、新方法不断涌现,产生了十分重要的影响。本文就近年来基因组编辑技术的发展及其在基因治疗和生物制药领域的应用进行综述。

关键词：基因组编辑锌指核酸酶转录激活子样效应因子核酸酶成簇可调控间隔短回文重复RNA引导核酸酶基因治疗生物制药

口服新型降糖多肽ODA的设计及其口服降糖活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药科大学学报 2023年第4期54卷 511-518页

作者：安东贤姚文兵高向东田浤中国药科大学生命科学与技术学院、江苏省生物药物成药性研究重点实验室南京211198

肠促胰岛素分泌肽胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和葡萄糖依赖性促胰岛素释放多肽(GIP)能通过血糖依赖机制促进胰岛素分泌,其特异性结合受体GLP-1R和GIPR是治疗2型糖尿病的良好靶点。以本实验室前期设计的口服降糖多肽OHP2为基础,设计了可口... 详细信息

肠促胰岛素分泌肽胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和葡萄糖依赖性促胰岛素释放多肽(GIP)能通过血糖依赖机制促进胰岛素分泌,其特异性结合受体GLP-1R和GIPR是治疗2型糖尿病的良好靶点。以本实验室前期设计的口服降糖多肽OHP2为基础,设计了可口服的新型降糖多肽——ODA。ODA较OHP2的亲脂性提高,在Caco-2细胞中的胞吞能力及跨细胞转运能力更强。ODA保留了OHP2对GLP-1R的激活能力,增强了与GIPR的结合能力。口服低剂量ODA(0.53 mg/kg)即可达到与口服OHP2(1.06 mg/kg)相当的降糖水平。研究结果显示,ODA是治疗2型糖尿病极具潜力的口服药物。

关键词：肠促胰岛素分泌肽胰高血糖素样肽-1 葡萄糖依赖性促胰岛素释放多肽 2型糖尿病口服降糖活性