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基于SSR和InDel标记的海南荔枝种质资源遗传多样性分析及杂交后代鉴定研究

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基于SSR和InDel标记的海南荔枝种质资源遗传多样性分析及杂交后代...

作者：田婉莹海南大学

学位级别：硕士

荔枝(Litchi chinensis Sonn.)是华南重要的果树,海南是荔枝的起源地之一,野生、半野生和栽培资源都十分丰富,对其进行遗传多样性分析,可为进一步开展荔枝遗传改良和育种提供依据。杂交育种是培育荔枝新品种的有效方法,探讨提高授粉效... 详细信息

荔枝(Litchi chinensis Sonn.)是华南重要的果树,海南是荔枝的起源地之一,野生、半野生和栽培资源都十分丰富,对其进行遗传多样性分析,可为进一步开展荔枝遗传改良和育种提供依据。杂交育种是培育荔枝新品种的有效方法,探讨提高授粉效率和真杂种鉴别效率的方法,对加快荔枝杂交育种进程具有重要意义。本研究开发了一批SSR标记和InDel标记;利用这些标记对232份主要来自海南的栽培荔枝、半野生荔枝和野生荔枝的材料进行了遗传多样性研究;筛选有效标记并利用其对2011-2014年间获得的11个荔枝杂交组合2300余株F1代进行了真杂种鉴定,并证实控制授粉可显著提高育种效率。这些工作为下一步的荔枝育种工作打下基础。主要结果如下： 1.依据获得的EST序列和基因组序列,设计了117对EST-SSR引物和34对InDel引物,以6个荔枝品种DNA为模板,筛选出可用于遗传多样性分析的引物30对,其中SSR引物18对,InDel引物12对;筛选出可用于以紫娘喜、无核荔、妃子笑、白糖罂、三月红、新球蜜荔为亲本的真杂种后代鉴别的引物8对。 2.应用18对SSR和12对InDel引物在232份荔枝资源中检测到141个基因位点,不同引物的扩增位点在2-11条之间,平均4.7条,多态性位点为139个,多态性位点比率高达98.58%。18对SSR引物中有11对表现为高度多态性,7对表现为中度多态性;而12对InDel引物中有6对表现为高度多态性,2对表现为中度多态性,4对表现为低度多态性。30对引物的平均PIC值为0.5166,平均观察等位基因位点数为1.9611,平均有效等位基因位点数为1.3539,平均基因杂合度为0.2240,平均群体遗传多样性指数为0.3574,说明SSR和InDel标记能够很好地揭示供试荔枝种质的遗传差异,荔枝种质间存在遗传变异,但变异的水平不是很高。 3.对232份荔枝种质资源进行聚类分析发现,其遗传相似系数在0.66-1.00之间。在相似系数为0.66处,供试材料被聚为两大类,来自海南的荔枝除了三月选、海垦8号等7个种质外,其他全部聚为一大类。在遗传相似系数为0.78处,供试材料聚为21大类,其中,海南11份野生荔枝资源较为均匀地分布在7个类群中,海南62份半野生荔枝资源较为均匀地分布在17个类群中,说明海南野生、半野生荔枝遗传多样性非常丰富;海南74份栽培品种和其他地区的栽培品种一样,总体上按照地区集中聚类,说明地区内的荔枝遗传差异较小,原因可能是由于地理隔离或人为选择栽培;少部分种质相互混杂的原因可能是荔枝在产地间互相传播繁殖,导致品种混淆。鉴定了多个同物异名种质。 4.以紫娘喜、无核荔、白糖罂、妃子笑、三月红、新球蜜荔6个荔枝品种为亲本进行了人工点授杂交,以紫娘喜和无核荔为亲本进行了控制授粉,创制了11个杂交组合,共获得2317株F1代植株。利用筛选的5对SSR标记和3对InDel标记引物从中鉴定出真杂种1666株。不同组合的杂交效率存在差异,平均真杂种率为71.9%;杂交后代中发现了双亲位点缺失、新位点出现的现象;发现了可用于紫娘喜×无核荔、无核荔×紫娘喜、紫娘喜×妃子笑、紫娘喜×三月红、无核荔×新球蜜荔、新球蜜荔×无核荔、白糖罂×无核荔、白糖罂×三月红8个组合后代真杂种鉴定的5个纯合显性标记。人工点授和控制授粉两种方式没有显著差异。

关键词：荔枝 SSR InDel 遗传多样性授粉方式杂种鉴定

海之尽头天为岸,人之尽头“仁”为峰——读《论语》有感

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大众文艺 2010年第6期 155-156页

作者：田婉莹北京师范大学文学院

《论语》作为儒家经典著作可谓家喻户晓,《论语》所倡导的思想精华更可谓博大精深。本文着意从"仁"的角度介绍《论语》这部不朽的作品的精神内涵,开篇提纲挈领地将"仁"理解为人性的完美巅峰,然后从字面意义来解释"仁",再将《论语》中的"... 详细信息

《论语》作为儒家经典著作可谓家喻户晓,《论语》所倡导的思想精华更可谓博大精深。本文着意从"仁"的角度介绍《论语》这部不朽的作品的精神内涵,开篇提纲挈领地将"仁"理解为人性的完美巅峰,然后从字面意义来解释"仁",再将《论语》中的"仁"的内涵分为三方面加以深入地阐述,最后通过详细分析什么样的人可以算作"仁",再次为现代社会迷茫的人们明确指明人性的完美巅峰:海之尽头天为岸,人之尽头"仁"为峰。

关键词：《论语》 “仁” 人性

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命运的悲歌——《俄狄浦斯王》悲剧多面观

青年文学家 2010年第5期 10-11页

作者：田婉莹北京师范大学文学院

《俄狄浦斯王》是古希腊悲剧的典范,在思想上、艺术上都达到了古希腊悲剧的巅峰,而其中所蕴含的发人深省的命运主题更是为世人所重。本文笔者从思想内容和艺术手法两个方面,通过对《俄狄浦斯王》悲剧因素的分析,实现对其命运主题的感悟... 详细信息

《俄狄浦斯王》是古希腊悲剧的典范,在思想上、艺术上都达到了古希腊悲剧的巅峰,而其中所蕴含的发人深省的命运主题更是为世人所重。本文笔者从思想内容和艺术手法两个方面,通过对《俄狄浦斯王》悲剧因素的分析,实现对其命运主题的感悟和理解。

关键词：悲剧命运思想内容艺术手段

miR-9和miR-124共表达载体的构建与靶分子鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第6期31卷 800-804页

作者：薛茜王琰张坤赵湘辉田婉莹杨安钢鞠躬王键第四军医大学基础部神经生物学教研室陕西西安710032 西安交通大学口腔医院颌面外科陕西西安710043 陕西省人民医院神经外科陕西西安710068 第四军医大学基础部免疫学教研室陕西西安710032

目的构建miR-9和miR-124单独表达和串联共表达的真核表达载体,并鉴定其共同靶分子。方法将pri-miR-9和pri-miR-124的编码序列分别插入或串联后插入真核表达载体p CAG,转染He La细胞后,实时定量PCR鉴定成熟miRNA的表达水平。构建miR-9和m... 详细信息

目的构建miR-9和miR-124单独表达和串联共表达的真核表达载体,并鉴定其共同靶分子。方法将pri-miR-9和pri-miR-124的编码序列分别插入或串联后插入真核表达载体p CAG,转染He La细胞后,实时定量PCR鉴定成熟miRNA的表达水平。构建miR-9和miR-124分子完全互补的靶基因萤光素酶报告载体,双萤光素酶报告系统检测表达的成熟miRNA的生物学功能。利用生物信息学软件预测miR-9和miR-124的共同靶分子,将靶分子mRNA的3'非翻译区(UTR)克隆入p GL3luciferase报告基因载体中,观察转染细胞后miRNA对报告基因表达的影响。结果经测序及酶切鉴定证实3种miRNA表达载体构建完全正确,实时定量PCR检测表明这3种表达载体均能正确高表达成熟的miRNA。双萤光素酶报告系统检测证实3种载体表达的miRNA分子具有生物学活性。生物学软件预测发现小分子GTP结合蛋白Ras相关蛋白2a(Rap2a)是miR-9和miR-124的靶基因,成功构建了含有Rap2a 3'UTR的萤光素酶报告基因载体。双萤光素酶报告系统提示miR-9和miR-124均能抑制Rap2a的表达。结论成功构建了miR-9和miR-124的单独表达和共表达载体,并能高表达具有生物学活性的成熟的miR-9和miR-124分子。Rap2a可能是miR-9和miR-124的一个共同靶分子。

关键词： miRNA 共表达载体脊髓损伤

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4GXJ电动胶刀助推天然橡胶产业机械化智能化

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中国农村科技 2020年第7期 32-33页

作者：田婉莹刘倩中国热带农业科学院

天然橡胶是国防战略物资,与煤炭、石油、钢铁并称“四大”工业原料,广泛应用于国防、医疗、民生等领域。“十三五”期间,中国热带农业科学院橡胶研究所研究员曹建华带领科研团队,经过潜心攻关,突破关键技术难题,在世界上率先开发并推出4... 详细信息

天然橡胶是国防战略物资,与煤炭、石油、钢铁并称“四大”工业原料,广泛应用于国防、医疗、民生等领域。“十三五”期间,中国热带农业科学院橡胶研究所研究员曹建华带领科研团队,经过潜心攻关,突破关键技术难题,在世界上率先开发并推出4GXJ系往复便携式电动胶刀,填补了该领域空白,目前已在13个国家天然橡胶产区推广应用。这标志着我国正在步入机械化采胶时代。

关键词：橡胶研究所天然橡胶科研团队中国热带农业科学院关键技术难题 4G 战略物资 “十三五”期

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油棕苗期叶斑病的病原鉴定及其生物学特性研究

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中国油料作物学报 2014年第6期36卷 794-801页

作者：郑丽杨兴玉谢昌平李静冯朝阳曾宪海田婉莹沈会芳覃新导农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室/农业部儋州热带作物科学观测实验站海南儋州571737 中国热带农业科学院广州实验站中国热带农业科学院热带能源生态研究中心广东广州510140 广东省农业科学院植物保护研究所广东广州510640 海南大学环境与植物保护学院海南海口570228 中国热带农业科学院海南海口571101

对采集于广东江门的油棕病叶进行了病原菌分离,通过形态学和ITS序列分析,结果表明此病原菌为小孢拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis microspora）,这是在我国属首次发现由小孢拟盘多毛孢菌引起油棕叶斑病。生物学特性研究结果表明：该菌菌... 详细信息

对采集于广东江门的油棕病叶进行了病原菌分离,通过形态学和ITS序列分析,结果表明此病原菌为小孢拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis microspora）,这是在我国属首次发现由小孢拟盘多毛孢菌引起油棕叶斑病。生物学特性研究结果表明：该菌菌丝生长最适宜温度为28~30℃,p H为6.0~8.0;分生孢子萌发最适温度为25~30℃,p H为6.0~9.0。菌丝对碳源的利用效果最高为D-麦芽糖和可溶性淀粉;对氮源的利用效率以蛋白胨最高,明显优于其他氮源,而以可溶性淀粉、D-半乳糖、D-麦芽糖、葡萄糖为碳源,分生孢子的萌发率最高,分别为94.33%、90.00%、88.33%、89.67%,四者差异不显著;以蛋白胨和硝酸钾为氮源,分生孢子萌发率较高,分别为80.33%和74.00%。

关键词：油棕叶斑病小孢拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsis microspora) 生物学特性

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