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作者：田伦富西南大学

学位级别：硕士

本文主要研究蛋白质与[Hg(SCN)4]2-、[Zn(SCN)4]2-等金属配阴离子、蛋白质与蛋白质、蛋白质与肝素钠之间发生相互作用时对吸收光谱、荧光光谱和共振瑞利散射光谱的影响。研究探讨了它们之间相互作用的机理、结合模式、结合位点以及结合... 详细信息

本文主要研究蛋白质与[Hg(SCN)4]2-、[Zn(SCN)4]2-等金属配阴离子、蛋白质与蛋白质、蛋白质与肝素钠之间发生相互作用时对吸收光谱、荧光光谱和共振瑞利散射光谱的影响。研究探讨了它们之间相互作用的机理、结合模式、结合位点以及结合作用力等,并发展和建立了测定蛋白质和肝素钠的新方法。主要研究内容如下： 1. [Hg(SCN)4]2-与蛋白质相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用在pH 1.0-4.5的稀硫酸介质中,[Hg(SCN)4]2-配阴离子与人血清白蛋白(HSA)、α-糜蛋白酶(α-Chy)、牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lyso)和Y-球蛋白(γ-G)等蛋白质反应形成复合物,此时将导致共振瑞利散射(RRS)的显著增强,也能引起吸收光谱的变化和荧光猝灭,同时还观察到圆二色(CD)光谱特征的改变。本文主要研究[Hg(SCN)4]2--蛋白质复合物的RRS光谱特征,适宜的反应条件和影响因素以及某些分析化学性质,并以[Hg(SCN)4]2--Lyso体系为例,结合吸收、荧光和圆二色光谱的变化,对复合物的结合位点、结合模式以及散射增强的原因进行了讨论。RRS法具有较高的灵敏度,它对不同蛋白质的检出限在4.6-10.8ng/mL之间,据此建立了以[Hg(SCN)4]2-配阴离子作探针测定人血液和尿液中蛋白质的新方法。 2. [Hg(SCN)4]2-与血红蛋白相互作用的荧光和共振瑞利散射光谱研究在pH7.4的生理条件下,[Hg(SCN)4]2-配阴离子能与血红蛋白(Hb)发生相互作用并形成10：1的复合物,此时将导致溶液的共振瑞利散射(RRS)的显著增强并出现相应的散射光谱,其最大散射波长位于313 nm附近。本文根据反应产物对共振光散射光谱的影响,结合[Hg(SCN)4]2-对Hb的荧光猝灭作用和圆二色光谱的变化,讨论了[Hg(SCN)4]2-与Hb的相互作用、结合位点和结合模式。 3. [Hg(SCN)4]2-对蛋白质的荧光猝灭反应及其分析应用在pH 1.4-3.4的酸性介质中,[Hg(SCN)4]2-配阴离子可与牛血清白蛋白(BSA)、γ-球蛋白(γ-G)和血红蛋白(Hb)等蛋白质反应形成复合物,此时将引起蛋白质荧光的猝灭。荧光猝灭程度在一定范围内与Hg(Ⅱ)的浓度成线性关系,对Hg(Ⅱ)测定的线性范围为0.015-1.25μg/mL,检出限(3σ)分别为4.4 ng/mL (BSA)、6.5 ng/mL (y-G)和12.9 ng/mL (Hb)。文中研究了适宜的反应条件和影响因素,考察了共存物质的影响,表明方法有良好的选择性,可用于红药水和乙肝疫苗中汞的测定。此外,通过研究[Hg(SCN)4]2--BSA体系吸收光谱的变化、温度的影响以及Stern-Volmer作图,判断该反应为静态猝灭反应。 4. [Zn(SCN)4]2-与蛋白质相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用在pH 1.75-1.90的酸性介质中,[Zn(SCN)4]2-与某些非酶蛋白质[如人血清白蛋白(HSA)、牛血清白蛋白(BSA)、血红蛋白(Hb)、γ-球蛋白(γ-G)]和某些蛋白质酶[如α-糜蛋白酶(α-Chy)、溶菌酶(Lyso)]相互作用时,不能使吸收光谱和荧光光谱发生改变,但是却能引起共振瑞利散射(RRS)和二级散射(SOS)、倍频散射(FDS)等共振非线性散射(RNLS)的显著增强。不同蛋白质体系具有相似的散射光谱特征,其最大RRS、SOS和FDS波长分别位于290 nm、552 nm和392 nm附近,但相对强度有一定差异,其中以HSA、y-G和Hb体系灵敏度更高。当用RRS法时,对于HSA、y-G和Hb的检出限在4.9-7.8ng/mL之间,本文研究了反应体系的RRS光谱特征,适宜的反应条件和影响因素,考察了方法的选择性,并建立了以[Zn(SCN)4]2-作探针RRS法测定人血清和人尿液中总蛋白质的方法。文中还以[Zn(SCN)4]2--HSA体系为例讨论了复合物的结合比、它们之间的主要作用力和可能的结合模式。表明RRS法是研究蛋白质中非芳香族残基与其它分子相互作用的有效手段,这也是吸收光谱法和荧光法所不具备的优点。同时还可以从研究的体系中发展出用RRS技术高灵敏度测定蛋白质的新方法。 5.胃蛋白酶与溶菌酶相互作用的共振瑞利散射和共振非线性散射光谱及其分析应用研究在pH 4.8-5.6的酸性介质中,带多个负电荷的胃蛋白酶(Pep)与带大量正电荷的溶菌酶(Lyso)可借静电引力、氢键作用力和疏水作用力而形成1：2的结合产物,这将引起共振瑞利散射(RRS)和二级散射(SOS)、倍频散射(FDS)等共振非线性散射(RNLS)的显著增强,其最大RRS波长位于290 nm附近。散射增强(ΔI)在一定范围内与Lyso的浓度成线性关系,可用于痕量Lyso的测定。三种方法对Lyso的检出限分别为4.3 ng/mL(RRS)、4.5

关键词：共振瑞利散射共振非线性散射金属配阴离子蛋白质肝素钠

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[Hg(SCN)_4]^(2-)配阴离子二级散射和倍频散射光谱法测定蛋白质

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西南大学学报（自然科学版） 2011年第7期33卷 58-61页

作者：田伦富刘绍璞发光与实时分析教育部重点实验室重庆400715 西南大学化学化工学院重庆400715

在pH=1.0~4.5的稀硫酸介质中,[Hg(SCN)4]2-配阴离子能与人血清白蛋白(HSA)、α-糜蛋白酶(α-Chy)、牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lyso)和γ-球蛋白(γ-G)等蛋白质反应形成复合物,此时将引起二级散射(SOS)和倍频散射(FDS)的显著增强.最大SO... 详细信息

在pH=1.0~4.5的稀硫酸介质中,[Hg(SCN)4]2-配阴离子能与人血清白蛋白(HSA)、α-糜蛋白酶(α-Chy)、牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lyso)和γ-球蛋白(γ-G)等蛋白质反应形成复合物,此时将引起二级散射(SOS)和倍频散射(FDS)的显著增强.最大SOS峰和最大FDS峰分别位于668 nm和396 nm附近,散射增强(ΔI)在一定范围内与蛋白质的质量浓度成正比,两种方法对不同蛋白质的检出限(3σ)分别在17.30~43.53 ng/mL(SOS)和18.38~54.04 ng/mL(FDS)之间.据此发展了用SOS和FDS法灵敏、简便、快速测定血清中总蛋白的新方法.考察了共存物质的影响,结果表明该方法具有较好的选择性.

关键词：蛋白质 [Hg(SCN)4]2- 二级散射倍频散射

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偶氮胂Ⅲ光度法测定铝合金中微量钪

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冶金分析 2015年第10期35卷 60-63页

作者：田伦富邹德霜代以春中国工程物理研究院机械制造工艺研究所

在pH 1.8的HCl-KCl缓冲溶液中,钪与偶氮胂Ⅲ形成稳定的紫红色络合物,其最大吸收峰在680nm处。研究了酸度、偶氮胂Ⅲ用量、反应时间、共存元素等因素对显色反应的影响。结果表明:酸度和偶氮胂Ⅲ用量对体系吸光度影响较大,最佳pH值和偶氮... 详细信息

在pH 1.8的HCl-KCl缓冲溶液中,钪与偶氮胂Ⅲ形成稳定的紫红色络合物,其最大吸收峰在680nm处。研究了酸度、偶氮胂Ⅲ用量、反应时间、共存元素等因素对显色反应的影响。结果表明:酸度和偶氮胂Ⅲ用量对体系吸光度影响较大,最佳pH值和偶氮胂Ⅲ体积范围分别为1.5;.0和1.5;.5mL;温度对显色反应影响不大,室温下显色5min即可测定,且吸光度在120min内基本保持不变;铁、钛、锆严重干扰钪的测定,采用铜铁试剂沉淀分离的方法可消除其影响。在最佳条件下,钪在0;.0μg/mL范围内符合比尔定律,表观摩尔吸光系数为1.8×104 L·mol-1·cm-1。方法用于铝合金中微量钪的测定,相对标准偏差（RSD）不超过2%,测定结果与标样认定值或对比方法（电感耦合等离子体原子发射光谱法）测定结果基本一致。

关键词：钪偶氮胂Ⅲ 铜铁试剂分光光度法铝合金

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普罗帕酮与曙红Y的双荧光猝灭反应及其分析应用研究

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化学学报 2011年第4期69卷 411-417页

作者：田伦富胡小莉刘忠芳孔玲刘绍璞发光与实时分析教育部重点实验室西南大学化学化工学院重庆400715

曙红Y(EY)是一种荧光染料,它具有强的荧光,而普罗帕酮(PPF)也是一种荧光物质.在pH 2.5～3.8的酸性溶液中,EY的最大发射波长(λem)位于549 nm,PPF的λem则在419 nm处,两者的荧光光谱相距较远而能很好地分开.当PPF与EY反应形成复合物时,... 详细信息

曙红Y(EY)是一种荧光染料,它具有强的荧光,而普罗帕酮(PPF)也是一种荧光物质.在pH 2.5～3.8的酸性溶液中,EY的最大发射波长(λem)位于549 nm,PPF的λem则在419 nm处,两者的荧光光谱相距较远而能很好地分开.当PPF与EY反应形成复合物时,观察到两者的荧光均发生猝灭,因此这是一种双荧光猝灭的反应体系.当用EY作探针测定PPF时,检出限(3σ)为9.4 ng/mL;反之当用PPF作探针测定EY时,检出限为259.7 ng/mL,前者具有很高的灵敏度,后者灵敏度较低,因此方法更适合于对痕量PPF的定量测定.研究了荧光猝灭反应的适宜条件、影响因素和分析化学特性,并探讨了反应机理和复合物的组成和结构,结果表明两者通过静电引力、疏水作用、芳基堆积作用和氢键作用而形成1∶1的复合物.荧光猝灭是一种静态猝灭过程.因此以EY作探针荧光猝灭法测定PPF为例,考察了方法的分析应用.

关键词：普罗帕酮曙红Y 双荧光猝灭反应

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[Hg(SCN)_4]^(2-)对蛋白质的荧光猝灭反应及其分析应用

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高等学校化学学报 2012年第1期33卷 59-65页

作者：田伦富刘忠芳胡小莉孔玲刘绍璞发光与实时分析教育部重点实验室西南大学化学化工学院重庆400715

在pH=1.4～3.4的酸性介质中,[Hg(SCN)4]2-配阴离子可与牛血清白蛋白(BSA)、γ-球蛋白(γ-G)和血红蛋白(Hb)等蛋白质反应形成复合物,从而引起蛋白质荧光的猝灭.荧光猝灭的程度在一定范围内与Hg(Ⅱ)的浓度呈线性关系,可用于Hg(Ⅱ)的测定.... 详细信息

在pH=1.4～3.4的酸性介质中,[Hg(SCN)4]2-配阴离子可与牛血清白蛋白(BSA)、γ-球蛋白(γ-G)和血红蛋白(Hb)等蛋白质反应形成复合物,从而引起蛋白质荧光的猝灭.荧光猝灭的程度在一定范围内与Hg(Ⅱ)的浓度呈线性关系,可用于Hg(Ⅱ)的测定.该方法有较高的灵敏度,检出限(3σ)分别为4.4 ng/mL(BSA)、6.5 ng/mL(γ-G)和12.9 ng/mL(Hb),其中以BSA体系灵敏度最高.研究了[Hg(SCN)4]2-与蛋白质相互作用对荧光光谱的影响、适宜的反应条件和影响因素;结合吸收光谱的变化、温度的影响以及某些热力学参数讨论了荧光猝灭反应的机理;并以[Hg(SCN)4]2--BSA体系为例考察了共存物质的影响.结果表明,该方法具有良好的选择性.以BSA为探针采用荧光猝灭法测定了红药水中汞溴红和乙肝疫苗中硫柳汞的含量,结果令人满意.

关键词： [Hg(SCN)4]2- 牛血清白蛋白 γ-球蛋白血红蛋白荧光猝灭

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[Hg(SCN)4]^2-与蛋白质相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用

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科学通报 2011年第6期56卷 396-406页

作者：田伦富刘忠芳孔玲胡小莉刘绍璞发光与实时分析教育部重点实验室西南大学化学化工学院重庆400715

在pH1.0～4.5的稀硫酸介质中,[Hg(SCN)4]2-配阴离子与人血清白蛋白(HSA)、α-糜蛋白酶(α-Chy)、牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lyso)和γ-球蛋白(γ-G)等蛋白质反应形成复合物,此时将导致共振瑞利散射(RRS)的显著增强,也能引起吸收光谱的... 详细信息

在pH1.0～4.5的稀硫酸介质中,[Hg(SCN)4]2-配阴离子与人血清白蛋白(HSA)、α-糜蛋白酶(α-Chy)、牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lyso)和γ-球蛋白(γ-G)等蛋白质反应形成复合物,此时将导致共振瑞利散射(RRS)的显著增强,也能引起吸收光谱的变化和荧光猝灭,同时还观察到圆二色(CD)光谱特征的改变.本文主要研究[Hg(SCN)4]2--蛋白质复合物的RRS光谱特征、适宜的反应条件和影响因素,以及分析化学性质,并以[Hg(SCN)4]2--Lyso体系为例,结合吸收、荧光和圆二色光谱的变化,对复合物的结合位点、结合模式以及散射增强的原因进行了讨论.RRS法具有较高的灵敏度,它对不同蛋白质的检出限在4.6～10.8ng/mL之间,据此建立了以[Hg(SCN)4]2-配阴离子作探针测定人血液和尿液中蛋白质的新方法.

关键词：蛋白质 [Hg(SCN)4]^2- 共振瑞利散射吸收光谱荧光猝灭

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电感耦合等离子体原子发射光谱法测定锡铝合金中铝

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冶金分析 2021年第6期41卷 83-86页

作者：田伦富代以春邹德霜中国工程物理研究院机械制造工艺研究所

锡铝合金是一种潜在的特殊物理实验用功能材料,准确测定铝元素含量对该材料的研究具有重要意义。实验采用稀王水溶解样品,选择Al 396.152nm作为分析谱线,采用基体匹配法绘制校准曲线消除基体效应的影响,建立了电感耦合等离子体原子发射... 详细信息

锡铝合金是一种潜在的特殊物理实验用功能材料,准确测定铝元素含量对该材料的研究具有重要意义。实验采用稀王水溶解样品,选择Al 396.152nm作为分析谱线,采用基体匹配法绘制校准曲线消除基体效应的影响,建立了电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICPAES)测定锡铝合金中铝含量的方法。铝的质量浓度在1.00～20.00mg/L范围内与谱线强度呈良好线性关系,相关系数r为0.999 9,方法检出限为0.001 3%(质量分数,下同),定量限为0.004 3%。按照实验方法测定3个锡铝合金样品中铝,结果的相对标准偏差(RSD,n=6)不大于1.3%,回收率为97%～102%,且与分光光度法的测定值基本一致。

关键词：铝电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES) 锡铝合金

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镉-碘化钾-罗丹明B体系分光光度法测定微量镉

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光谱学与光谱分析 2018年第S1期38卷 301-302页

作者：田伦富代以春邹德霜中国工程物理研究院机械制造工艺研究所四川绵阳621900

目前低含量镉的测定方法主要有分光光度法、分子荧光法、电化学法、电感耦合等离子体发射光谱法、原子吸收光谱法等。其中分光光度法以其准确、灵敏、操作简便、分析成本低易于普及等优点,在分析检测中得到了广泛的应用。分光光度法测... 详细信息

目前低含量镉的测定方法主要有分光光度法、分子荧光法、电化学法、电感耦合等离子体发射光谱法、原子吸收光谱法等。其中分光光度法以其准确、灵敏、操作简便、分析成本低易于普及等优点,在分析检测中得到了广泛的应用。分光光度法测定镉的试剂较多,常用的有双硫腙、溴苯并噻唑偶氮萘酚、吡啶偶氮二乙氨基酚等,这些试剂在显色后大多需要使用毒性较大的有机溶剂进行配合物的萃取,这不仅操作繁琐,而且对操作者健康不利。已知镉的卤离子配合物可与碱性染料形成三元离子缔合物,本文选用罗丹明B作显色剂,研究了在聚乙烯醇存在下,碘化镉配阴离子与罗丹明B的显色反应,发现在聚乙烯醇存在的酸性介质中,镉与碘化钾及罗丹明B反应形成紫红色三元离子缔合物,该缔合物的最大吸收波长为592nm,摩尔吸光系数为2.38×10~5 L·mol^(-1)·cm^(-1),镉的质量浓度在0~0.12μg·mL^(-1)范围内符合比耳定律。方法用于铝合金中微量镉的测定,准确度良好。

关键词：镉碘化钾罗丹明B 分光光度法

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Pd(Ⅱ)与还原型辅酶Ⅰ和溶菌酶相互作用的荧光和共振瑞利散射光谱研究

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西南大学学报（自然科学版） 2013年第11期35卷 1-13页

作者：刘绍璞刘林丰刘忠芳孔玲胡小莉田伦富西南大学化学化工学院重庆400715 发光与实时分析教育部重点实验室重庆400715

在弱酸性介质中,Pd(Ⅱ)能分别与还原型辅酶Ⅰ(NADH)和溶菌酶(Lyso)形成1∶1和2∶1的复合物,并导致NADH和Lyso的荧光猝灭,但不能引起共振瑞利散射(RRS)的变化和增强.但是当Pd(Ⅱ)与NADH和Lyso同时作用并形成n(Pd(Ⅱ))∶n(NADH)∶n(Lyso)=... 详细信息

在弱酸性介质中,Pd(Ⅱ)能分别与还原型辅酶Ⅰ(NADH)和溶菌酶(Lyso)形成1∶1和2∶1的复合物,并导致NADH和Lyso的荧光猝灭,但不能引起共振瑞利散射(RRS)的变化和增强.但是当Pd(Ⅱ)与NADH和Lyso同时作用并形成n(Pd(Ⅱ))∶n(NADH)∶n(Lyso)=2∶2∶1的三元复合物时,不仅能使Lyso的荧光猝灭,而且能引起RRS显著增强并出现最大散射波长位于309 nm附近的RRS光谱.研究了Pd(Ⅱ)-NADH-Lyso反应体系的荧光和RRS光谱特征,适宜的反应条件,探讨了反应机理及Pd(Ⅱ)与NADH和Lyso的结合位点和结合模式,考查了荧光猝灭和RRS增强的原因.当Pd(Ⅱ)和Lyso过量时,散射增强(ΔI)在一定范围内与NADH的质量浓度成正比,对NADH的检出限为5.7 ng/mL(8.6×10-9mol/L).同样当Pd(Ⅱ)和NADH过量时,散射增强(ΔI)在一定范围内与Lyso的质量浓度成正比,检出限为15.1 ng/mL(1.06×10-9mol/L).因此RRS光谱不仅可为研究金属离子与不同生物分子之间的相互作用提供新的信息,而且也为高灵敏度定量测定痕量NADH和Lyso这样的生物分子创造了条件.

关键词：溶菌酶还原型辅酶I Pd(1I) 荧光共振瑞利散射

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二安替比林甲烷分光光度法测定钒基合金中钛含量

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理化检验（化学分册） 2017年第10期53卷 1229-1231页

作者：田伦富杨强代以春邹德霜王利利田东中国工程物理研究院机械制造工艺研究所绵阳621900

钒-铬-钛合金是一种具有耐中子辐照、低活化特性、耐液态金属腐蚀、高温强度高等优点的新材料，在聚变反应堆、航空航天、高温等领域都具有广阔的应用前景。钒基合金中加入一定量钛可显著改善合金耐中子辐照损伤的能力。因此为保证材料... 详细信息

钒-铬-钛合金是一种具有耐中子辐照、低活化特性、耐液态金属腐蚀、高温强度高等优点的新材料，在聚变反应堆、航空航天、高温等领域都具有广阔的应用前景。钒基合金中加入一定量钛可显著改善合金耐中子辐照损伤的能力。因此为保证材料的质量，需要对钛含量进行准确测定。

关键词：钒基合金分光光度法测定二安替比林甲烷钛含量液态金属腐蚀中子辐照高温强度聚变反应堆

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