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草地贪夜蛾Sf9细胞外泌体microRNA调控AcMNPV增殖的研究

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华南农业大学学报 2025年第2期46卷 133-140页

作者：田伟彬张以农任菲菲严寄铭孙京臣华南农业大学动物科学学院广东广州510642 遵义医科大学基础医学院贵州遵义563000

【目的】探究草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda Sf9细胞外泌体microRNA(miRNA)对苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)增殖的影响。【方法】通过不连续蔗糖质量分数梯度超速离心纯化外泌体,随后利用透射电镜观察和纳米颗粒跟踪分析技术对纯化产物进行颗粒直径分析。运用sRNA高通量测序技术筛选AcMNPV感染Sf9细胞后外泌体差异表达的miRNA并预测其潜在靶基因对应的生物学通路。通过转染模拟物(mimic)和病毒感染等细胞试验以及qPCR验证外泌体miRNA的差异表达,并检测差异表达miRNA——sfr-miR-1a-3p对AcMNPV增殖的影响。【结果】成功纯化Sf9细胞外泌体,且AcMNPV感染有效刺激Sf9细胞外泌体的分泌量增加。AcMNPV感染Sf9细胞72 h后,经与Rfam数据库比对,筛选出11个差异表达的外泌体miRNAs,其中,8个miRNAs的转录水平与测序结果趋势一致。通过预测miRNAs靶基因和KEGG富集分析,发现潜在的靶基因主要富集在cAMP信号通路、PI3K-Akt信号通路、癌症通路、人乳头瘤病毒信号通路等,这表明差异表达外泌体miRNA可能参与昆虫天然免疫反应。过表达sfrmiR-1a-3p能显著提高AcMNPV病毒vp39基因的表达。【结论】本研究通过sRNA测序筛选了AcMNPV感染后Sf9细胞外泌体的差异表达miRNA,证明了AcMNPV通过促进外泌体分泌,协助被感染细胞传递miRNA−sfr-miR-1a-3p来影响周围未感染细胞,以促进自身增殖。以上结果为昆虫外泌体传递miRNA以调控病毒增殖的机制研究提供了重要的理论依据。

关键词：草地贪夜蛾 Sf9细胞苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒外泌体 microRNA sfr-miR-1a-3p

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一种嵌入式可信安全中间件

中国公共安全(学术版) 2018年第1期 125-128页

作者：高振铁田伟彬田庆深圳华威世纪科技股份有限公司

针对当前可信终端系统的建立面临的许多严重的安全问题,如缺乏足够的透明性和可扩展性;无法适应海量并发用户、高吞吐量要求;难以保证系统的协同性和可移植性。本文在分析可信中间件的整体架构基础之上,结合可信计算技术和中间件技术,... 详细信息

针对当前可信终端系统的建立面临的许多严重的安全问题,如缺乏足够的透明性和可扩展性;无法适应海量并发用户、高吞吐量要求;难以保证系统的协同性和可移植性。本文在分析可信中间件的整体架构基础之上,结合可信计算技术和中间件技术,设计了一种嵌入式可信安全中间件,从用户、硬件操作系统、中间件、应用程序软件到网络服务创建了一条完整的信任链。在信任传递机制的作用下,安全性能得到了整体提升。

关键词：可信计算中间件信息安全密钥管理

shRNA靶向干扰Notch2对人脑胶质瘤细胞株U251的影响

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中国神经精神疾病杂志 2010年第8期36卷 495-497页

作者：何心焦保华郑克彬田伟河北医科大学第二医院神经外科石家庄050000

目的研究Notch2信号对人脑胶质瘤细胞株U251的增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法应用脂质体将pGFP-V-RSNotch2shRNA干扰质粒导入胶质瘤细胞株U251后,应用MTT法检测细胞增殖变化、流式细胞仪检测转染效率、细胞凋亡和细胞周期的改变、RT-... 详细信息

目的研究Notch2信号对人脑胶质瘤细胞株U251的增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法应用脂质体将pGFP-V-RSNotch2shRNA干扰质粒导入胶质瘤细胞株U251后,应用MTT法检测细胞增殖变化、流式细胞仪检测转染效率、细胞凋亡和细胞周期的改变、RT-PCR和Westenblot检测Notch2基因的抑制效果和干扰后细胞周期、凋亡相关蛋白的表达改变。结果 pGFP-V-RSNotch2shRNA干扰质粒转染效率为86.68%±2.54%,转染后在mRNA水平和蛋白水平均发生Notch2的表达抑制,与无关序列组和未转染组相比干扰组细胞自第5天开始增殖明显减慢(P<0.05),干扰组G0/G1期细胞百分数(68.2%±1.29%)显著高于无关序列组和未转染组(35.8%±2.37%和47.7%±1.03%,P<0.01),而干扰组G2/S期细胞(20.4%±1.56%)显著低于无关序列组和未转染组(49.1%±3.65%和35.4%±2.42%,P<0.05),干扰组凋亡率显著升高(P<0.05)。细胞周期、凋亡相关蛋白P21上调,cy-clinD1、p-Rb下调。结论 Notch2靶向干扰能够显著抑制U251细胞株的增殖、阻滞细胞周期、增加凋亡。

关键词： Notch2基因胶质瘤细胞周期凋亡

PTEN在正常脑组织及脑胶质瘤中的表达与细胞凋亡的关系

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肿瘤防治研究 2011年第7期38卷 827-829页

作者：郑克彬何心田伟焦保华河北医科大学第二医院神经外科石家庄050017

0引言胶质瘤是中枢神经系统中最常见的恶性肿瘤,在国内胶质瘤的发病率居颅内肿瘤之首,虽然脑肿瘤的手术技巧以及放疗和化疗等综合治疗己经取得了很大的进展,但恶性胶质瘤患者的预后仍然很差。随着分子生物学和分子遗传学的发展,

关键词： PTEN 脑胶质瘤细胞凋亡

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基于数字滤波的压裂停泵数据反演方法

中国科学技术大学学报 2018年第5期48卷 392-399页

作者：温杰雄田伟毕全福李雪彬卢德唐中国科学技术大学近代力学系安徽合肥230027 中国石油集团西部钻探工程有限公司试油公司新疆克拉玛依834027

水力压裂是目前开采致密油气的主要方式,压裂施工期间测量的地面压力及流量数据包含地层压力、渗透率和裂缝半长等重要信息,这些参数是判断压裂施工成功率及压后开采制度制定的重要依据.提出了基于数字滤波压裂停泵数据反演方法,首先采... 详细信息

水力压裂是目前开采致密油气的主要方式,压裂施工期间测量的地面压力及流量数据包含地层压力、渗透率和裂缝半长等重要信息,这些参数是判断压裂施工成功率及压后开采制度制定的重要依据.提出了基于数字滤波压裂停泵数据反演方法,首先采用井筒垂直管流方程将变密度和流量的地面压力折算到井底压力,其次采用FIR滤波处理停泵后压降数据,消除停泵水锤等噪声干扰,获得反映地层渗流的压降数据,最后采用垂直裂缝井试井分析方法解释滤波后的压降数据,获得地层渗透率、原始地层压力及裂缝半长等重要参数,实现了对裂缝及地层参数的实时分析及评价.通过与关井压力恢复分析结果比较,证明了所提方法的可靠性.

关键词：数字滤波水力压裂试井分析压裂评价

PTEN重组腺病毒对胶质瘤细胞株凋亡及凋亡抑制蛋白因子家族的影响

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中国神经精神疾病杂志 2010年第12期36卷 714-718页

作者：郑克彬何心田伟焦保华河北医科大学第二医院神经外科石家庄050017

目的探讨以腺病毒为载体转染第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)对胶质瘤细胞株增殖和凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法以携带PTEN的重组腺病毒(Ad-PT... 详细信息

目的探讨以腺病毒为载体转染第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)对胶质瘤细胞株增殖和凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法以携带PTEN的重组腺病毒(Ad-PTEN)转染胶质瘤细胞株,应用RT-PCR、Western blot检测PTEN基因mR-NA、蛋白表达的变化,MTT、TUNEL和流式细胞法检测转染后细胞增殖能力及凋亡率的改变。RT-PCR检测转染后凋亡抑制蛋白因子家族(inhibtor of apoptosis family of proteins,IAPS):CIAP1、CIAP2、XIAP、SURVIVIN的mRNA水平的变化,Westernblot检测细胞CIAP1、CIAP2、XIAP、SURVIVIN的蛋白表达水平的变化。结果经荧光显微镜证实Ad-PTEN转染成功,Western blot、RT-PCR显示转染后PTEN基因表达显著增加。PTEN转染U251、U87、A172细胞株后3d细胞凋亡率明显高于对照组(F分别为93.80、95.70、72.52,P<0.01),PTEN转染组中CIAP1、CIAP2、XI-AP、SURVIVIN mRNA及蛋白水平与空白转染组mRNA及蛋白水平相比明显下降(F分别为73.8、49.5、50.4、69.1、39.7、48.8、54.3、70.3,P<0.01)。结论 PTEN转染后可能通过抑制IAPS家族表达途径促进细胞凋亡,从而抑制胶质瘤细胞株的的生长。

关键词： PTEN 脑胶质瘤细胞凋亡

shRNA Notch2对人脑胶质瘤细胞株U251生长及凋亡的影响

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肿瘤 2011年第4期31卷 310-314页

作者：何心焦保华郑克彬田伟梁朝辉河北医科大学第二附属医院神经外科石家庄050000

目的:探讨稳定转染基因Notch2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对胶质瘤细胞株U251生长、增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体法将构建插入Notch2-shRNA和无意义shRNA(Negative-shRNA)的重组表达质粒分别转染人脑胶质瘤U251细胞,建... 详细信息

目的:探讨稳定转染基因Notch2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对胶质瘤细胞株U251生长、增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体法将构建插入Notch2-shRNA和无意义shRNA(Negative-shRNA)的重组表达质粒分别转染人脑胶质瘤U251细胞,建立稳定长效转染的细胞株;应用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Notch2-shRNA对U251细胞中Notch2表达的影响及相关蛋白表达的变化;MTT法检测其细胞增殖的影响;FCM法检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:稳定转染Notch2-shRNA后,U215细胞中Notch2 mRNA和蛋白的表达明显受到抑制;干扰组细胞从第5天开始增殖明显降低(P<0.05);干扰组细胞的凋亡率为(15.14±4.26)%,明显高于Negative-shRNA组的(2.70±1.45)%和未转染组的(2.10±1.72)%(P<0.05);Notch2-shRNA干扰组细胞S期细胞所占百分比为(23.1±3.4)%,明显低于转染Negative-shRNA组的(41.2±6.9)%和未转染组的(53.2±7.8)%(P<0.01),而干扰组G1期细胞所占百分率为(51.8±3.9)%,显著高于转染Negative-shRNA组的(38.9±9.7)%和未转染组的(25.2±7.7)%(P<0.05);与转染Negative-shRNA组和未转染组相比,干扰组细胞中p21和p27蛋白表达量上调,而细胞周期蛋白cyclinD1和微型染色体维持蛋白2(minichromosome maintenance 2 protein,MCM2)的表达量下调。结论:Notch2shRNA能有效抑制U251细胞中Notch2的表达和细胞的增殖,为脑胶质瘤基因治疗提供了新的靶点。

关键词：神经胶质瘤 RNA,小干扰基因,Notch2 U215细胞

二溴和二碘取代的手性Schiff碱-钒(Ⅳ)络合物催化硫醚不对称氧化

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催化学报 2006年第8期27卷 743-748页

作者：高爱萍王梅王东平张路刘海彬田伟孙立成大连理工大学精细化工国家重点实验室辽宁大连116012

由廉价的手性氨基醇与3,5-二溴或3,5-二碘水杨醛缩合得到配体,配体与VO(acac)2按一定比例络合形成络合物催化剂,考察了室温下该催化剂对芳基甲基硫醚不对称氧化反应的催化性能.结果表明,当VO(acac)2/配体摩尔比为1/2,并且以H2O2作为氧源... 详细信息

由廉价的手性氨基醇与3,5-二溴或3,5-二碘水杨醛缩合得到配体,配体与VO(acac)2按一定比例络合形成络合物催化剂,考察了室温下该催化剂对芳基甲基硫醚不对称氧化反应的催化性能.结果表明,当VO(acac)2/配体摩尔比为1/2,并且以H2O2作为氧源时,催化剂具有较高的活性和中等至很高的对映选择性.与(S)-苯丙氨醇和(R)-亮氨醇衍生得到的配体相比,由(S)-缬氨醇得到的配体具有更高的对映选择性.在缓慢滴加H2O2的条件下,以3,5-二碘水杨醛和(S)-缬氨醇缩合得到的Schiff碱为配体,以苯甲硫醚和对溴苯甲硫醚为底物时,产物的ee值分别为88%和92%.研究表明,与Fe(acac)3/Schiff碱体系不同,向VO(acac)2/Schiff碱催化体系中加入羧酸或羧酸盐类化合物并不能改善催化剂的催化性能.

关键词：溴碘 Sehiff碱手性亚砜钒硫醚不对称氧化

前列腺动脉栓塞治疗良性前列腺增生的中期疗效分析

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中华放射学杂志 2021年第11期55卷 1197-1201页

作者：徐忠伟周春高田伟冷斌施海彬刘圣南京医科大学第一附属医院介入放射科 210029

目的探讨前列腺动脉栓塞(PAE)治疗良性前列腺增生源性下尿路梗阻症状(LUTS)、尿潴留及血尿的中期疗效。方法回顾性分析2014年2月至2018年12月在我院确诊为良性前列腺增生并接受PAE治疗的140例患者的临床资料,其中LUTS患者85例(60例单纯L... 详细信息

目的探讨前列腺动脉栓塞(PAE)治疗良性前列腺增生源性下尿路梗阻症状(LUTS)、尿潴留及血尿的中期疗效。方法回顾性分析2014年2月至2018年12月在我院确诊为良性前列腺增生并接受PAE治疗的140例患者的临床资料,其中LUTS患者85例(60例单纯LUTS+25例LUTS合并血尿),尿潴留患者52例(50例单纯尿潴留+2例尿潴留合并血尿),单纯肉眼血尿患者3例,随访24个月并评价PAE临床成功率。采用Friedman检验比较PAE术前及术后各随访时间点国际前列腺症状评分(IPSS)、生活质量(QoL)评分及前列腺体积(PV)的差异,2个特定时间点各指标两两比较采用Bonferroni方法。结果85例LUTS患者术前及术后3、6、12、24个月的IPSS、QoL评分及PV两两比较,差异均存在统计学意义(P<0.001),术后各随访时间点临床成功率分别为95.3%(81/85)、91.8%(78/85)、87.1%(74/85)、83.5%(71/85)。52例尿潴留患者术后30 d内尿管拔除率98.1%(51/52),平均拔管时间(6.8±3.7)d,术后临床成功率分别为94.1%(48/51)、92.2%(47/51)、88.2%(45/51)、84.3%(43/51)。血尿患者术后平均肉眼血尿消失时间(3.4±2.5)d,术后临床成功率分别为90.0%(27/30)、90.0%(27/30)、83.3%(25/30)、80.0%(24/30)。结论PAE治疗良性前列腺增生源性下尿路梗阻症状、尿潴留及血尿中期内均是有效的。

关键词：前列腺增生前列腺动脉栓塞下尿路梗阻症状尿潴留血尿