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交变载荷下螺纹连接松动机理与防松方法研究

交变载荷下螺纹连接松动机理与防松方法研究

作者：田乐西安理工大学

学位级别：硕士

螺纹连接广泛应用于航空航天、通用机械、建筑安装等生产生活中。在很多工况下,螺纹连接需要承受交变载荷。在振动的工况下,螺纹连接的松动更容易发生。关键位置的螺纹连接在服役期发生松动行为是巨大的安全隐患。螺纹连接松动的影响因... 详细信息

螺纹连接广泛应用于航空航天、通用机械、建筑安装等生产生活中。在很多工况下,螺纹连接需要承受交变载荷。在振动的工况下,螺纹连接的松动更容易发生。关键位置的螺纹连接在服役期发生松动行为是巨大的安全隐患。螺纹连接松动的影响因素很多,松动机理尚未统一,防松手段各有利弊。本论文以螺纹连接为研究对象,从理论推导、有限元仿真、实验验证三个方面对交变载荷下螺纹连接松动机理进行了研究分析,初步探讨了单螺栓连接和螺栓组连接的防松方法。(1)基于YAMAMOTO理论对承受轴向载荷的螺纹连接的啮合螺纹牙的变形进行了理论分析,进而基于YAMAMOTO模型研究了螺纹连接的承载分布,针对8.8级M8普通螺纹(三角螺纹)计算了相应的模型参数,并求解了各螺纹牙承载占比的解析解。得出结果:第一扣螺纹牙承担了 25.0%的载荷,第二扣螺纹牙承担了 1 9.3%的载荷,第三扣螺纹牙承担了15.1%的载荷,前三扣了螺纹牙一共承受了整体载荷的59.4%,第七扣螺纹牙只承受8%的轴向载荷。从而得出结论:普通螺纹连接承载分布严重不均匀,啮合螺纹的第一扣螺纹牙承载最大,依次递减,前三扣螺纹牙承载了大部分的载荷。(2)根据螺纹连接的特点和在交变载荷下材料的行为,基于弹塑性理论和服从Ziegler随动硬化准则的混合硬化模型,在ABAQUS中构建了材料的弹塑性本构模型,建立了螺纹连接的有限元仿真模型。设计搭建了螺纹连接松动实验台通过仿真实验和振动试验,研究分析了螺纹连接进入材料松动期的原因,从而探究螺纹连接松动的机理。根据仿真实验对螺纹连接应力集中区的监测和实验对轴向力的监测,得到预紧扭矩25.5Nm的螺纹连接在交变载荷下产生了棘轮行为,轴向力随时间下降。而预紧扭矩5Nm的螺纹连接轴向力几乎没有下降的结果且未出现棘轮行为。从结果得出结论:螺纹连接在较大顶紧扭矩下,承载占比较大的区域产生了塑性变形,在交变载荷的作用下,材料发生棘轮效应,造成塑性变形区扩大,导致螺纹连接进入了材料松动期。根据研究分析所得机理,提出了一种均载化螺纹连接防松的方法。通过有限元仿真,对不同环槽参数的环槽均载化螺母螺纹连接承载分布进行了分析,得出了一种均布化较好的均载化环槽螺母。(3)基于弹性相互作用理论,建立了螺栓组连接顺序拧紧的理论模型。利用ABAQUS建立了周向均匀分布6个M16 8.8级螺栓的螺栓组仿真模型,分别对11种拧紧顺序(方式)进行了仿真分析。对得到的最终的预紧力结果进行了统计分析,得出了一种均布化较好的拧紧顺序,从而避免了因受力不均而松动。

关键词：材料松动期棘轮效应单螺栓螺栓组承载分布拧紧顺序

西成高铁对沿线城市可达性及区域经济发展的影响研究

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西成高铁对沿线城市可达性及区域经济发展的影响研究

作者：田乐西南交通大学

学位级别：硕士

近十年来,我国的高速铁路发展迅速,无论是通车里程还是最高时速,都处于世界领先地位。高铁的开通,不仅为沿线城市的居民提供了方便快捷的交通方式,更重要的是能提升城市的综合竞争力。本文以2017年底开通的西成高铁为例,选取沿线共计15... 详细信息

近十年来,我国的高速铁路发展迅速,无论是通车里程还是最高时速,都处于世界领先地位。高铁的开通,不仅为沿线城市的居民提供了方便快捷的交通方式,更重要的是能提升城市的综合竞争力。本文以2017年底开通的西成高铁为例,选取沿线共计15个节点城市,分析并计算可达性和区域经济模型,同时根据计算结果对西成高铁开通前后节点城市的可达性和区域经济指标进行了分析论证,最后使用SOM神经网络算法对节点城市进行了聚类并对结果进行了深入分析。本文使用最短平均旅行时间、加权平均旅行时间和日常可达性模型评价可达性指标,使用经济潜能和空间相互作用模型评价区域经济指标。在对模型进行详细分析的基础上,运用MATLAB对模型进行了构建,同时设计了完整的GUI界面和交互流程,并使用多种图形化的表格输出计算结果。在分析西成高铁对沿线城市的影响方面,本文使用SOM聚类方法,以可达性和区域经济模型作为分析的维度,将沿线城市分类并对结果进行了分析总结。通过对计算结果的分析,可以看出西成高铁的开通,对西安和成都两大城市群的多项指标都有显著的提升,并且彻底改变了沿线城市如汉中、广元等城市的交通面貌。西成高铁加强了沿线城市的交通与联系,促进了沿线城市的一体化进程,初步形成了西成高铁沿线的城市经济带,也大大拉近了陕西和四川两个省份空间距离。

关键词：西成高铁可达性区域经济

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消化性溃疡患者的全科医生管理效果评价

消化性溃疡患者的全科医生管理效果评价

作者：田乐西藏大学

学位级别：硕士

背景消化性溃疡(peptic ulcer,PU)是消化道黏膜被自身消化酶消化所形成的溃疡,可发生任何胃肠道部位,其中以胃和十二指肠溃疡最多见,另外,还可发生于胃-空肠吻合口附近以及含有胃黏膜的Meckel憩室。该病是消化系统常见病之一,易治愈,且... 详细信息

背景消化性溃疡(peptic ulcer,PU)是消化道黏膜被自身消化酶消化所形成的溃疡,可发生任何胃肠道部位,其中以胃和十二指肠溃疡最多见,另外,还可发生于胃-空肠吻合口附近以及含有胃黏膜的Meckel憩室。该病是消化系统常见病之一,易治愈,且易复发,老年患者反复复发易致癌变。其最常见的病因为幽门螺旋杆菌感染和药物的使用,除此之外,不良生活习惯、遗传易感性等也在溃疡的形成中发挥一定的作用。治疗消化性溃疡的方式主要包括药物治疗和手术治疗。在此基础上,进行健康教育宣传,让患者了解导致该病的相关病因,进行规范化治疗,改善自己的生活习惯,应能起到避免和预防该病复发目的。目的拟组建全科医生、专科医生、患者及其家属为一体的综合管理团队,通过对PU患者实施全科医学管理,评价该管理模式对PU患者的知识知晓情况、生活习惯改善、整体健康状况等方面的影响。方法1.基数资料的收集:在通过医学伦理审批和受试者知情同意的前提下,根据指定好的相关标准(纳入标准和排除标准),从西藏自治区人民医院消化内科选取108名符合条件的患者,随机分为两组:实验组和对照组,采用问卷调查方法或查阅患者电子病例系统收集患者基数资料,包括:(1)一般情况:姓名、性别、年龄、民族、住址、联系方式、受教育情况、溃疡类型、HP感染情况、用药情况;(2)生活习惯:吸烟、饮酒、刷牙、风干肉食用情况、暴饮暴食、辛辣刺激性食物食用情况、饮食不规律、户外饮食、熬夜、心情不好、适量运动;(3)知识知晓情况;(4)健康调查情况:一般健康状况、健康变化、生理机能、生理职能、情感职能、社会功能、躯体疼痛、精力、精神健康。2.实验组进行全科医生管理:对实验组患者进行不定时的用药指导、生活指导和健康知识宣教,并及时回答患者的相关咨询,主要包括门诊和电话随访,频次为至少每月1次,随访时间为6个月内。3.对照组常规门诊管理。4.最终数据的收集:对选取的108名患者采用问卷调查表(详见附录2-5)的方法收集最终数据,包括:生活习惯、知识知晓情况和健康调查情况。5.统计分析:采用SPSS 17.0统计软件进行统计分析。计量资料用`X±S表示,采用t检验,非正态分布采用Z检验;计数资料用百分率表示,组间分析采用x检验;以P0.05)。实验组管理前后在知识知晓、吸烟、饮酒、刷牙、暴饮暴食、饮食不规律、户外饮食、熬夜、心情不好、适量运动、健康变化、生理机能、生理职能、情感职能、躯体疼痛、精力、精神健康、社会功能、一般状况方面有统计学差异(P0.05)。对照组管理前后在各方面均无统计学差异(P>0.05)。结论消化性溃疡是一种慢性、易复发性疾病,它与幽门螺旋杆菌感染、非甾体类抗炎药的长期服用以及不良的生活习惯有着密切的关系。全科医生管理可以在一定程度上改善患者的生活习惯、有助于患者对该病的正确认识以及改善患者的健康状况。

关键词：消化性溃疡全科医生管理效果评价

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汉画像石元素在现代服装设计中的应用研究

汉画像石元素在现代服装设计中的应用研究

作者：田乐上海工程技术大学

学位级别：硕士

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接菌影响模拟重构土层水分布及水同位素分馏

煤炭科学技术 2023年第9期51卷 274-283页

作者：毕银丽田乐煊柯增鸣西安科技大学西部矿山生态环境修复研究院陕西西安710054 中国矿业大学(北京)煤炭资源与安全开采国家重点实验室北京100083

水资源决定着生态恢复过程中的植被结构和种类,是矿区实现绿色生产、生态修复的主要限制因素。为了研究半干旱煤矿区接种丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhiza Fungi,AMF)对植物根系提水、模拟土壤水分分布及水同位素分馏的影响,本研究... 详细信息

水资源决定着生态恢复过程中的植被结构和种类,是矿区实现绿色生产、生态修复的主要限制因素。为了研究半干旱煤矿区接种丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhiza Fungi,AMF)对植物根系提水、模拟土壤水分分布及水同位素分馏的影响,本研究以玉米为供试植物,布设室内分层土柱模拟试验。设置纯土柱(CK1)、土柱+玉米(CK2)、土柱+接菌玉米(AMF)三个处理,每个处理3个重复,测定土柱毛细水上升高度、土壤含水率以及玉米茎水与土壤水的氢氧同位素。分析了不同处理之间玉米生长发育情况、水分运移规律以及不同深度土壤水同位素分馏的差异,结果表明:①接菌有效促进玉米生长发育,株高、地上生物量、地下生物量、总根长比CK2处理分别提高15.78%、23.39%、43.40%、21.0%。②AMF促进根系吸收底部黏土层内的蓄水,提高毛细水上升高度18.9%,玉米吸水空间扩大约50%,进而影响土柱水分分布。③土柱表层、深层土壤水与初始水相比分馏差异较大。在表层0~10 cm处,CK2与AMF处理的18O、2H富集系数显著低于CK1处理,在深层60~70 cm处,AMF处理的18O、2H富集系数显著高于CK2处理,表明AMF可以增强深层土壤水同位素分馏的现象。综上,接菌可以提高玉米对重构土层内深部土壤水的吸收,促使根系通过提水效应反释至上部干燥土壤,提高水分重分配能力,影响不同深度的土壤水同位素分馏,该结果为解决半干旱煤矿区排土场土地复垦水资源短缺问题提供了科学依据和技术支持。

关键词：矿区生态修复土柱试验丛枝菌根水同位素分馏土壤水运移提水作用

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回归分析在水资源短缺预测中的应用

统计与决策 2012年第14期28卷 84-86页

作者：田乐蒙西南财经大学统计学院成都610000

文章以北京市30多年来的水资源短缺情况为研究对象,运用回归分析法,在众多影响因子中找出了影响北京市水资源短缺的主要因子,建立了北京市水资源短缺预测模型,并对北京市未来水资源的短缺情况进行了预测,得出了北京市未来水资源仍处于... 详细信息

文章以北京市30多年来的水资源短缺情况为研究对象,运用回归分析法,在众多影响因子中找出了影响北京市水资源短缺的主要因子,建立了北京市水资源短缺预测模型,并对北京市未来水资源的短缺情况进行了预测,得出了北京市未来水资源仍处于短缺状态的结论,并提出了应对措施。

关键词：水资源短缺回归分析模型

人角膜缘干细胞保存和结膜杯状细胞诱导分化的初步研究

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人角膜缘干细胞保存和结膜杯状细胞诱导分化的初步研究

作者：田乐济南大学

学位级别：硕士

目的体外分离培养人结膜杯状细胞,观察其形态结构并对其性质进行鉴定;观察正常人角膜缘组织与结膜上皮组织在羊膜上培养的区别;探讨γ-分泌酶抑制剂对体外培养的人结膜杯状细胞增殖及特异性基因表达的影响;观察羊膜为载体的重组结膜上... 详细信息

目的体外分离培养人结膜杯状细胞,观察其形态结构并对其性质进行鉴定;观察正常人角膜缘组织与结膜上皮组织在羊膜上培养的区别;探讨γ-分泌酶抑制剂对体外培养的人结膜杯状细胞增殖及特异性基因表达的影响;观察羊膜为载体的重组结膜上皮与正常结膜上皮的区别。方法一、人结膜上皮细胞的体外培养及鉴定1.人结膜上皮细胞的体外培养取眼库提供的正常人眼结膜组织,离体后6小时内采用组织块法培养原代人结膜上皮细胞。2.体外培养的人结膜杯状细胞的鉴定采用阿利新蓝/过碘酸-希夫试剂染色(AB-PAS染色)培养的结膜上皮细胞;采用细胞免疫化学染色检测悬浮细胞中Muc5Ac的表达;采用细胞免疫荧光染色检测CK7的表达,鉴定分化的杯状细胞。二、正常人角膜缘组织与结膜上皮组织在羊膜上培养的区别取眼库提供的保存于角膜中期保存液的正常人角膜缘组织,用消化培养法培养于羊膜载体上;取眼库提供的正常人眼结膜组织,用组织块法培养于羊膜载体上;采用PAS染色观察比较二者的差别。三、γ-分泌酶抑制剂诱导人结膜杯状细胞分化及其相关检测1.结膜杯状细胞的诱导分化原代培养的结膜上皮细胞汇合度达到30～40%时,分别加入含100nM、200nM、400nMγ-分泌酶抑制剂的培养液,处理72h,观察细胞形态变化。2.诱导分化的结膜杯状细胞的性质检测原代培养的人结膜上皮细胞处理72h后,采用AB-PAS双染法染色,以比较相同时间、不同浓度γ-分泌酶抑制剂处理后杯状细胞密度的差异;分别提取相同时间、不同浓度γ-分泌酶抑制剂处理后人结膜上皮细胞的总RNA,反转成cDNA后行实时荧光定量PCR(RT-Q-PCR)检测,观察CK7的mRNA表达量在相同时间、不同浓度处理组结膜上皮细胞中的变化;提取阴性对照及200nMγ-分泌酶抑制剂处理72h后的人结膜上皮细胞的总蛋白,行Western-Blot检测CK7蛋白在人结膜上皮细胞中的表达情况。3.统计学分析:对上述结果采用方差分析(Analysisi of Variance,ANOVA)检验进行统计学分析,比较不同浓度γ-分泌酶抑制剂处理组与阴性对照组的差异性,以P<0.05视为差异具有统计学意义。四、羊膜为载体构建重组结膜上皮与正常结膜上皮的比较取眼库提供的正常人眼结膜组织,用组织块法培养于羊膜载体上,行PAS染色;对正常结膜上皮采用石蜡切片PAS染色,观察并比较二者的差别。结果一、培养的人结膜上皮细胞及鉴定1.组织块培养法培养正常人结膜上皮细胞,次日补液后,12小时内可见细胞从组织块周围迁出,细胞贴壁生长,15天左右可长满培养皿,倒置显微镜下观察,可见较多悬浮状态的杯状细胞。2.体外培养的人结膜杯状细胞的鉴定(1)AB-PAS染色结果显示:胞浆呈蓝色及红色颗粒者为杯状细胞,可以初步鉴定体外培养的人结膜上皮细胞中含有杯状细胞。(2)细胞免疫化学结果显示:原代培养的人结膜上皮细胞中的悬浮细胞,以小鼠单克隆Muc5Ac抗体进行染色,呈阳性反应者为杯状细胞。证明体外培养的人结膜上皮细胞中的悬浮细胞中含有杯状细胞。(3)细胞免疫荧光结果显示:原代培养的人结膜上皮细胞,以小鼠单克隆CK7抗体进行染色,呈阳性反应者为杯状细胞。可以证明体外培养的人结膜上皮细胞中含有杯状细胞。二、正常人角膜缘组织与结膜上皮组织在羊膜上培养的区别PAS染色结果显示:培养于羊膜上的角膜缘上皮细胞及结膜上皮细胞中均含有染色阳性的杯状细胞;角膜缘上皮细胞中的杯状细胞较结膜上皮细胞中密度低,且分化程度低。三、体外培养的人结膜杯状细胞经γ-分泌酶抑制剂诱导分化及相关检测1.倒置显微镜下观察:加入γ-分泌酶抑制剂组杯状细胞密度较阴性对照组增高,其中200nM组增高最明显。2. AB-PAS染色结果显示:加入γ-分泌酶抑制剂处理72h后的人结膜上皮细胞中的杯状细胞密度较阴性对照组高;其中200nM组中杯状细胞密度最高。3. RT-Q-PCR结果显示:100nMγ-分泌酶抑制剂处理组与阴性对照组间CK7mRNA的表达量差异具有显著性。4. Western-blot结果显示:结果显示CK7蛋白的表达量在200nM组较阴性对照组显著升高。四、羊膜为载体构建重组结膜上皮与正常结膜上皮的比较PAS染色结果显示:羊膜为载体构建的重组结膜上皮细胞中杯状细胞的密度较正常结膜上皮中杯状细胞的密度低;后者PAS染色显示杯状细胞嵌入结膜上皮层中,前者PAS染色显示杯状细胞位于羊膜表层,易脱落。

关键词：结膜上皮杯状细胞细胞培养角膜缘干细胞细胞培养羊膜保存方法

面向存储和功耗优化的TCAM报文分类算法研究

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面向存储和功耗优化的TCAM报文分类算法研究

作者：田乐解放军信息工程大学

学位级别：硕士

三态内容寻址存储器（TernaryContent-Addressable Memory，TCAM）具有查询速度快、匹配时间固定等优点，目前广泛应用于报文分类和路由查表领域。但是TCAM还存在以下问题（1）TCAM不直接支持范围规则匹配，一条范围规则必须转换成多条T... 详细信息

三态内容寻址存储器（TernaryContent-Addressable Memory，TCAM）具有查询速度快、匹配时间固定等优点，目前广泛应用于报文分类和路由查表领域。但是TCAM还存在以下问题（1）TCAM不直接支持范围规则匹配，一条范围规则必须转换成多条TCAM表项，导致空间利用率较低;（2）TCAM的并行匹配机制导致高功耗，对系统设备的整体设计和布局提出了更高的要求。本文结合国家863计划课题“面向三网融合的统一安全管控网络”，对现有基于TCAM的报文分类算法进行分析总结，分别提出了一种基于域转换的范围匹配算法(DTRM)和一种基于三态位分割的低功耗算法(TSP-PR)，并在此基础上设计了一种高效的报文分类引擎实现方案。本文主要工作如下： 1、针对TCAM不直接支持范围规则匹配，导致空间利用率较低的问题，提出了一种基于域转换的范围匹配算法(Domain Transformation for Range Match，DTRM)。DTRM算法针对传统算法未充分利用TCAM表项中冗余位的不足，在DIRPE编码方法的基础上设计了一种支持任意比特数目的编码方法Smart-DIRPE，利用Smart-DIRPE对TCAM表项中的所有冗余位进行编码，构建新的范围域;根据Smart-DIRPE的编码特点和规则集中范围规则的分布特征，设计域转换函数，实现规则集原始范围域到新构建范围域的转换，使得规则集能够压缩为较少的TCAM表项。仿真结果表明，DTRM算法的扩张因子可达到1.21以下，TCAM空间利用率在82%以上，同时支持规则的增量更新。 2、针对TCAM采用并行匹配方式导致功耗较高的问题，提出了一种基于三态位分割的低功耗报文分类算法(Tri-State based Partition for Power Reduction，TSP-PR)。TSP-PR算法基于TCAM的分区匹配和三态位特性，提出了一种无规则复制的规则集划分方法，设计标志位选取函数，选取少量能够充分表达规则集内部特征信息的比特位，据此将规则集划分为多个具有不同特征的规则子集并存储在相应的TCAM分区，通过对TCAM分区的选择性查找降低功耗。仿真结果表明，TSP-PR算法在付出小于15%存储代价的情况下，功耗减少了70%以上。 3、基于DTRM和TSP-PR算法，结合三网融合管控平台，设计了一种基于TCAM的报文分类引擎实现方案。首先，给出了该引擎的总体框图以及各子模块的功能介绍;然后，详细介绍了DTRM和TSP-PR算法在分类引擎中的具体实现;之后，通过实际测试验证了本方案可获得较高的空间利用率和较低的功耗;最后，给出了理论功耗减少量与实际测试值存在偏差的原因。

关键词：报文分类三态内容寻址存储器范围规则匹配低功耗

虾青素缓解黄曲霉毒素B1诱导IPEC-J2细胞损伤作用的研究

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虾青素缓解黄曲霉毒素B1诱导IPEC-J2细胞损伤作用的研究

作者：田乐吉林大学

学位级别：硕士

虾青素(AST)属于类胡萝卜素中的叶黄素类,具备强抗氧化性。黄曲霉毒素B1(AFB1)是一种在饲料中常见的真菌毒素,有强烈毒性,氧化应激是它发挥毒性的主要途径之一,找到一种合适的抗氧化剂是缓解其毒性的有效措施。猪对AFB1特别敏感,并且AFB... 详细信息

虾青素(AST)属于类胡萝卜素中的叶黄素类,具备强抗氧化性。黄曲霉毒素B1(AFB1)是一种在饲料中常见的真菌毒素,有强烈毒性,氧化应激是它发挥毒性的主要途径之一,找到一种合适的抗氧化剂是缓解其毒性的有效措施。猪对AFB1特别敏感,并且AFB1会对肠道造成严重损伤。因此,本研究以IPEC-J2细胞为研究对象,目的是探究AST能否缓解AFB1对IPEC-J2细胞的损伤及具体机制。本研究共两部分研究内容,研究一是AST对IPEC-J2细胞的影响,研究二是AST缓解AFB1对IPEC-J2细胞的损伤作用。不同浓度的AST(0、5、10、20、40、80和100μM)处理细胞24 h后,通过CCK-8测定细胞活力。结果表明AST(5～100μM)对IPEC-J2细胞活力是无显著差异,细胞活力未下降。通过超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测SOD活性以及利用q-PCR技术检测总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)的基因表达量评估AST对IPEC-J2细胞抗氧化能力的影响。结果表明,与对照组(未添加虾青素)相比,随着AST浓度的增加,SOD活性显著上升,T-SOD和CAT基因表达量也显著增加,这表明AST能够增强IPEC-J2细胞的抗氧化能力(P<0.05)。与对照组比较,AST组肿瘤坏死因子(TNF-α)、髓分化因子88(My D88)和白细胞介素1β(IL-1β)的基因表达量在AST(10μM)之后显著下降(P<0.05)。与对照组相比,在AST(20μM)之后,半胱天冬蛋白酶9(Caspase-9)基因表达量和Bcl-2相关x蛋白(Bax)/B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)比值显著下降,80μM的AST可以显著降低Bax蛋白表达量和Bax/Bcl-2蛋白表达量比值(P<0.05)。AST是Nrf2激活剂,Nrf2又是调节抗氧化功能的重要转录因子。AST作用IPEC-J2细胞后,检测到Nrf2通路受到AST的影响被激活。AST浓度的增加使Nrf2基因表达量逐渐增加,Nrf2下游抗氧化基因血红素加氧酶1(HO-1)、NADH:醌氧化还原酶1(NQO-1)、热休克蛋白70(HSP70)和超氧化物歧化酶2(SOD2)基因表达量被显著提升,AST(80μM)显著增加Nrf2和HO-1蛋白水平(P<0.05)。总之,AST(5～100μM)对IPEC-J2细胞是无毒害作用的,可以激活IPEC-J2细胞Nrf2信号通路,其中AST(80μM)对细胞抗氧化、抗炎和抗凋亡能力提升效果更为稳定,效果更好。不同浓度的AFB1(1、5、10、20、40和80μM)处理IPEC-J2细胞24 h后,细胞活力从AFB1(5μM)开始出现显著下降(P<0.01),AFB1(10μM)导致细胞活力下降到80%左右,之后选择10μM的AFB1进行试验。根据之前研究结果,将AFB1(10μM)与AST(5、10、20、40、80和100μM)共同处理细胞,结果表明,与AFB1组相比,AST(80μM)显著提升由AFB1(10μM)引起的IPEC-J2细胞活力的降低(P<0.01)。因此,后续试验选择AFB1(10μM)和AST(80μM)共同作用于IPEC-J2细胞,分为3个处理组,对照组、AFB1(10μM)组和AFB1(10μM)+AST(80μM)组。与对照组相比,AFB1组显著增加LDH、ROS以及MDA水平,降低SOD和GSH的活性。然而,与AFB1组相比,AST的添加使得LDH和ROS水平显著下降(P<0.05),MDA含量也出现下降趋势,但无显著差异。与AFB1组相比,AFB1+AST组中SOD和GSH活性被显著提升。使用流式细胞仪检测细胞凋亡率,结果表明,与对照组相比,AFB1显著增加细胞凋亡率,而AST的补充显著降低凋亡率(P<0.01)。与对照组相比,AFB1组的促凋亡蛋白包括细胞色素C、Bax、Bax/Bcl-2比率和Caspase-3蛋白表达量显著增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达量显著下降。而与AFB1组相比,AFB1+AST组逆转了上述相关凋亡蛋白表达趋势(P<0.05)。较对照组而言,AFB1诱导IPEC-J2细胞中Nrf2和HO-1蛋白表达量显著下降,Nrf2下游基因包括NQO-1、SOD2和HSP70,它们的表达量在AFB1的作用后显著下降。与AFB1组比,AST成功激活Nrf2通路,显著增加Nrf2、HO-1、SOD2和HSP70基因表达量,NQO1也呈现上升趋势,同时,也显著提高Nrf2和HO-1蛋白表达量(P<0.05)。总之,结合AFB1(10μM)引起IPEC-J2细胞发生氧化应激和凋亡损伤来看,AST(80μM)可以通过激活Nrf2信号通路来减轻这些危害。综上所述,通过以上研究明确AST对AFB1诱导IPEC-J

关键词：虾青素黄曲霉毒素B1 IPEC-J2细胞氧化应激细胞凋亡 Nrf2信号通路