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作者：甄艳凤河北医科大学

学位级别：硕士

目的:类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一种难治性疾病,在我国患病率约为0.3%,是一种全身性自身免疫性疾病,以非化脓性、增生性滑膜炎病变为主,逐渐导致关节软骨的破坏,最后造成关节功能的障碍及多器官、多组织受累。目前,... 详细信息

目的:类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一种难治性疾病,在我国患病率约为0.3%,是一种全身性自身免疫性疾病,以非化脓性、增生性滑膜炎病变为主,逐渐导致关节软骨的破坏,最后造成关节功能的障碍及多器官、多组织受累。目前,类风湿性关节炎的病因尚未阐明。许多研究认为,遗传和环境因素是主要的病因。现有研究表明,RA患者普遍存在基因组DNA低甲基化,而基因组DNA低甲基化可能使RA患者的某些基因的表达异常,此种机制可能与疾病的发生发展有关。真核基因表达的调控发生于多阶段水平,即基因组、转录、转录后、翻译和翻译后等5个阶段水平。精确调控机制之一是DNA甲基化。这是一种从遗传过程中获得的使DNA发生化学变化的渐进性调控过程,DNA甲基化发生在DNA复制之后,转录之前。其基本过程是在DNA甲基化酶的催化下,从S-腺苷酰-L-甲硫氨酸（SAM）上转移甲基到胞嘧啶环的第5位碳原子（或腺嘌呤环的N6位）上（生成5-甲基胞嘧啶和6-甲基腺嘌呤）,从而得到甲基化DNA。DNA甲基化与抗核酶的抗性、细胞防御机制、基因激活与印记、细胞的分化与发育,以及衰老和癌变相关。 DNA错配修复（mismatch repair, MMR）是重要的突变避免系统,它通过校正正常DNA代谢中产生的碱基错配及调节DNA损伤所诱导的凋亡来维持基因组的稳定性。错配修复为细胞准确复制和增殖所必须,若错配修复系统异常,细胞突变频率可增加100倍以上。人体细胞中DNA错配修复反应过程依赖于几种人类MMR基因产物的参与,因此,其中任何一种基因发生突变导致其产物功能的丧失都将造成DNA错配修复功能的异常、缺陷或丧失。目前人类的错配修复（mismatch repair enzyme,MM -R）系统含有9个基因:hMLH1、hMLH3、hPMS1、hPMS2、hMSH2、hMSH3、hMSH4、hMSH5、hMSH6,其中hMLH1（human mut-l homologue1,hMLH1）是人类错配修复系统中功能最重要的一个基因,主要作用是保持遗传物质的完整性和稳定性,保证DNA复制的忠实性。如果这些错配修复基因功能发生缺陷或活性降低,复制过程中出现的错误不能及时被纠正,就会导致微卫星不稳定（Microsatellite instability,MSI）的出现,使整个基因组不稳定,随机突变率增高,从而引起疾病的发生。有研究显示,hMLH1表达的缺失与此基因启动子胞嘧啶甲基化直接有关。在Leung等的研究中,90 %以上发生hMLH1甲基化的散发性胃癌病例同时伴有hMLH1蛋白的表达缺失,提示甲基化是导致hMLH1基因转录静止的原因。hMLH1启动子甲基化是hMLH1失活的早期分子活动,可导致mRNA或蛋白表达降低,影响hMLH1修复功能的正常发挥,使相关基因突变不能及时有效纠正,最终促使疾病发生。然而,类风湿性关节炎患者hMLH1启动子CpG岛甲基化状态如何,国内外尚未见报道。本实验以人外周静脉血为研究对象,研究hMLH1基因在类风湿性关节炎病人的甲基化情况,并在转录及蛋白水平观察该基因的表达情况。目前,DNA甲基化也是法医学的研究热点。本实验又结合DNA甲基化自身的特点,探讨其在法医学领域的应用前景。方法:采取RA患者外周静脉血,密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞,提取RNA;全血提取DNA及核蛋白。 RT-PCR、Western Blot方法检测外周血hMLH1 mRNA及蛋白表达。所得结果用Gel-pro凝胶分析软件进行半定量分析。采用亚硫酸氢钠（Sodium Bisulfite）方法处理基因组DNA,甲基化特异性PCR（methylation - specific PCR ,MSP）方法检测hMLH1基因启动子甲基化情况。实验分为两组:健康人对照组和RA患者组。SPSS11.5统计分析软件进行分析,行χ2检验或Fisher’-s确切概率法检验和Spearman等级相关分析,均数的比较行秩和检验。结果:1 38例健康人外周血hMLH1 mRNA均有表达,而33例RA患者外周血有17例hMLH1 mRNA是不表达的;38例健康人外周血hMLH1蛋白均有表达,而33例RA患者外周血有22例hMLH1蛋白是不表达的;经秩和检验,RA患者外周血hMLH1 mRNA、蛋白阳性率明显低于健康人（P ＜0.05）。 2 RA患者组与健康人对照组外周血hMLH1甲基化阳性率分别为90.9%（30/33）和13.2%（5/38）,两组间差异有统计学意义（χ2=42.717,P ＜0.05）。 3本研究发现,30例hMLH1启动子甲基化阳性的RA患者中,有14例mRNA表达阴性;而15例hMLH1 mRNA表达阴

关键词：类风湿性关节炎 DNA甲基化 hMLH1 启动子 MSP 法医学

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血清基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-1水平变化与老年糖尿病足的关系

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中国老年学杂志 2010年第17期30卷 2418-2420页

作者：李志红房辉张云良郭淑琴甄艳凤杨岳河北医科大学内科学教研室河北石家庄050017 唐山市工人医院内分泌二科保定市第一中心医院内分泌科

目的评价血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子-1(TIMP-1)水平与老年糖尿病足(DF)慢性溃疡的关系,探讨两指标的相关性。方法符合纳入标准的DF,≥60岁的52例患者作为老年DF组,0.05)。血清TIMP-1、HbA1c、年龄及病程是MMP-2的独... 详细信息

目的评价血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子-1(TIMP-1)水平与老年糖尿病足(DF)慢性溃疡的关系,探讨两指标的相关性。方法符合纳入标准的DF,≥60岁的52例患者作为老年DF组,0.05)。血清TIMP-1、HbA1c、年龄及病程是MMP-2的独立影响因素。结论 DF血清MMP-2水平明显升高、TIMP-1水平下降,降低MMP-2水平可能会促进溃疡愈合。

关键词：糖尿病足老年人溃疡基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶组织抑制因子-1

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甲状腺乳头状癌组织中STC1的表达及其临床意义

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临床与实验病理学杂志 2015年第11期31卷 1263-1266页

作者：杨莹房辉徐刚关如花杨梅柳孙雪玲甄艳凤杨岳河北医科大学研究生学院石家庄050017 唐山市工人医院内分泌科 063000 唐山市工人医院烧伤科 063000

目的探讨斯钙素1(stanniocalcin 1,STC1)蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达,分析其表达与临床病理特征的关系及意义。方法采用免疫组化En Vision两步法检测甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织中STC1的表达水平,应用Western blo... 详细信息

目的探讨斯钙素1(stanniocalcin 1,STC1)蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达,分析其表达与临床病理特征的关系及意义。方法采用免疫组化En Vision两步法检测甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织中STC1的表达水平,应用Western blot法检测甲状腺组织中STC1蛋白的表达。结果 STC1在甲状腺乳头状癌组的表达(60.6%)显著高于结节性甲状腺肿组(30.0%,P0.05),与肿瘤淋巴结转移及临床分期相关(P0.05)。结论 STC1在甲状腺乳头状癌中呈高表达,且与肿瘤淋巴结转移及临床分期存在相关性,可能在甲状腺肿瘤的恶性转化方面起重要作用,有望成为甲状腺乳头状癌诊断及判断预后的重要辅助参考指标。

关键词：甲状腺肿瘤乳头状癌 STC1 Westernblot 免疫组织化学

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2型糖尿病男性患者血清硫酸脱氢表雄酮水平与认知功能的相关性

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中华内分泌代谢杂志 2016年第8期32卷 657-662页

作者：李玉凯房辉徐刚甄艳凤邱明月周莉杨梅柳杨莹关如花唐山市工人医院内分泌二科 063000 唐山市工人医院烧伤整形科 063000

目的探讨2型糖尿病（T2DM）男性患者血清硫酸脱氢表雄酮（DHEA-S）水平与认知功能的相关性。方法选取唐山工人医院住院的T2DM男性患者99例作为病例组，同时从健康体检中心选取男性健康人群97例作为对照组。收集其人口学资料及临床检验... 详细信息

目的探讨2型糖尿病（T2DM）男性患者血清硫酸脱氢表雄酮（DHEA-S）水平与认知功能的相关性。方法选取唐山工人医院住院的T2DM男性患者99例作为病例组，同时从健康体检中心选取男性健康人群97例作为对照组。收集其人口学资料及临床检验指标，采用放免法检测血清DHEA-S水平。用RBANS量表对所有人进行认知功能评定。结果（1）T2DM患者较正常人DHEA．S[（2．66±0．78对4．02±1．24）μmol／L，P〈0．01]水平明显降低；（2）与正常人相比，T2DM患者RBANS量表即时记忆（79．24±17．47对86．25±15．21，P〈0．01）、视觉广度（83．98±17．98对97．24±11．51，P〈0．01）、注意力（96．04±14．65对101．45±13．93，P〈0．01）、延迟记忆（89．28±11．74对97．41±9．41，P〈0．01）评分以及总分（85．85±11．46对94．60±10．91，P〈0．01）明显降低；（3）与T2DM高DHEA．S组相比，低DHEA．S组患者RBANS量表延迟记忆（84．53±12．23对93．94±9．18，P〈0．01）评分及总分（80．33±10．91对91．26±9．25，P〈0．01）明显降低；（4）T2DM伴认知功能障组患者较认知功能对照组DHEA-S水平（2．314-0．79对2．90±0．67．P〈0．01）明显降低。（5）DHEA．S与RBANS量表延迟记忆（r偏=0．252，P=0．019）评分和总分（r偏=0．258，P=0．016）呈正相关。结论2型糖尿病男性患者血清DHEA-S水平及认知功能评分均降低．且DHEA-S水平与其认知功能评分呈正相关．提示血清DHEA-S可能参与了其认知功能受损的发生发展。

关键词：糖尿病 2型男性硫酸脱氢表雄酮认知功能

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高血压合并糖尿病患者脑出血后迟发性脑水肿与血清MMP-9水平的关系

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山东医药 2017年第2期57卷 63-65页

作者：刘兴宇甄艳凤崔建忠高俊玲洪军唐山市工人医院河北唐山063000 华北理工大学基础医学院

目的观察高血压合并糖尿病患者脑出血后迟发性脑水肿与血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平的关系。方法 115例高血压合并糖尿病脑出血患者,根据患者有无发生迟发性脑水肿分为脑水肿组和无脑水肿组。采用酶联免疫吸附法于入院时测定所有患... 详细信息

目的观察高血压合并糖尿病患者脑出血后迟发性脑水肿与血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平的关系。方法 115例高血压合并糖尿病脑出血患者,根据患者有无发生迟发性脑水肿分为脑水肿组和无脑水肿组。采用酶联免疫吸附法于入院时测定所有患者血清MMP-9,采用多田式公式计算脑水肿体积,采用Pearson相关分析、多重线性回归分析分析血清MMP-9水平与迟发性脑水肿患者水肿体积的关系。结果脑水肿组、无脑水肿组血清MMP-9水平分别为(139.6±20.3)、(119.8±20.4)μg/L,两组比较P<0.05。Pearson相关分析显示,血清MMP-9水平与迟发性脑水肿患者水肿体积呈正相关(r=0.46,P<0.05);多重线性回归分析结果显示,血清MMP-9水平与迟发性脑水肿患者水肿体积仍呈正相关(β=0.19,t=2.13,P<0.05)。结论高血压合并糖尿病脑出血后发生迟发性脑水肿患者血清MMP-9水平升高,患者血清MMP-9水平越高水肿体积越大。

关键词：脑出血迟发性脑水肿基质金属蛋白酶9 高血压糖尿病

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糖化血红蛋白对高血压脑出血合并糖尿病患者预后及MMP-9的影响

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广东医学 2016年第19期37卷 2947-2949页

作者：刘兴宇甄艳凤崔建忠高俊玲洪军河北省唐山市工人医院神经外二科 063000 华北理工大学基础医学院河北唐山063000

目的探讨糖化血红蛋白（HbA_（1C））对高血压脑出血合并糖尿病患者预后及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响。方法回顾性分析高血压脑出血合并糖尿病患者121例。采用离子交换高压色谱法（HPLC）检测HbA_（1C）,根据其水平分为HbA_（1... 详细信息

目的探讨糖化血红蛋白（HbA_（1C））对高血压脑出血合并糖尿病患者预后及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响。方法回顾性分析高血压脑出血合并糖尿病患者121例。采用离子交换高压色谱法（HPLC）检测HbA_（1C）,根据其水平分为HbA_（1C）〈7.0%组（A组,24例）、7.0%~9.0%组（B组,40例）和〉9.0%组（C组,57例）3组,于住院当天、7~14 d行头部CT扫描,格拉斯哥昏迷量表（GCS）、美国国立卫生研究量表（NIHSS）评估患者,比较3组迟发性脑水肿发生率、MMP-9水平、水肿体积、血肿体积、GCS及NIHSS评分,多元回归分析高血压脑出血合并糖尿病患者迟发性脑水肿的影响因素。结果 3组迟发性脑水肿发生率、MMP-9水平、水肿体积、血肿体积、GCS及NIHSS评分差异有统计学意义（均P〈0.05）;高血压脑出血合并糖尿病发生迟发性脑水肿患者HbA_（1C）与MMP-9水平（r=0.80）、血肿体积（r=0.39）、水肿体积（r=0.81）呈正相关（均P〈0.05）;多元回归分析显示,HbA_（1C）与患者水肿体积仍相关。结论控制HbA_（1C）在达标范围内可降低MMP-9水平,降低高血压脑出血合并糖尿病患者迟发性脑水肿发生率。

关键词：高血压脑出血糖尿病预后糖化血红蛋白基质金属蛋白酶-9

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老年人甲状腺乳头状癌组织中斯钙素1表达及其临床意义

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中华老年医学杂志 2016年第3期35卷 301-304页

作者：房辉杨莹徐刚关如花杨梅柳甄艳凤唐山市工人医院内分泌二科 063000 唐山市工人医院烧伤科 063000

目的探讨斯钙素1（stanniocaIcin1，STC1）蛋白在老年人甲状腺乳头状癌中的表达及其与临床病理特征的关系，分析老年患者与非老年患者斯钙素表达的差异。方法采用免疫组织化学二步法检测老年患者甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿和正常... 详细信息

目的探讨斯钙素1（stanniocaIcin1，STC1）蛋白在老年人甲状腺乳头状癌中的表达及其与临床病理特征的关系，分析老年患者与非老年患者斯钙素表达的差异。方法采用免疫组织化学二步法检测老年患者甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织以及非老年患者甲状腺乳头状癌中STC1的表达水平，应用蛋白免疫印迹（Westernblot）检测不同甲状腺组织中STC1蛋白的表达。结果STC1在老年人甲状腺乳头状癌组的表达（60．9%），显著高于结节性甲状腺肿组（30．0％，P〈0．05）和正常甲状腺组（15．0％，P〈0．01）。甲状腺乳头状癌组织中STC1蛋白的相对表达量为0．647±0．076，也显著高于结节性甲状腺肿组（0．280±0．039，F=9．965，P〈0．01）和正常甲状腺组（0．248±0．065，F=1．143，P〈0．01）。甲状腺乳头状癌中STC1蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤最大径和部位无关（P〉0．05），与肿瘤淋巴结转移以及临床分期相关（P〈0．05）。老年患者与非老年患者甲状腺乳头状癌组织中STC1表达比较，差异无统计学意义（F=0．007，P=0．934）。结论STC1蛋白与甲状腺乳头状癌发生发展相关，可能对甲状腺良恶性肿瘤的鉴别诊断、预后有一定参考意义。

关键词：甲状腺肿瘤斯钙素肿瘤标记生物学

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河北汉族人群线粒体DNA HV3(CA)n重复子长度多态性

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中国法医学杂志 2007年第2期22卷 117-118页

作者：付丽红丛斌姚玉霞甄艳凤河北医科大学法医学系河北石家庄050017

线粒体DNA的控制区具有高度多态性和母系遗传等特征被广泛应用于法医学个人识别和母系亲权鉴定。目前法医学主要应用HV1、HV2区（16024～16365nt、73～340nt）序列多态性，在mtDNA00438～00574nt的HV3区域也具有多态性，其中位于00514～... 详细信息

线粒体DNA的控制区具有高度多态性和母系遗传等特征被广泛应用于法医学个人识别和母系亲权鉴定。目前法医学主要应用HV1、HV2区（16024～16365nt、73～340nt）序列多态性，在mtDNA00438～00574nt的HV3区域也具有多态性，其中位于00514～00524的（CA）n重复子是一个长度多态性区域，重复次数为3～7次，片段长度为86～94bp。本文采用PCR方法扩增目的片段，变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结合测序方法分型，对150名河北汉族无关个体进行HV3（CA）n重复子长度多态性分析。

关键词：法医物证学线粒体DNA HV3(CA)n重复子个人识别

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血清β-淀粉样蛋白及可溶性糖基化终末产物受体与新诊断2型糖尿病患者认知功能损害的关系

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中国全科医学 2016年第2期19卷 150-153页

作者：周莉房辉徐刚张翠林李玉凯关如花杨莹张雅中田金莉许静甄艳凤华北理工大学河北省唐山市063000 唐山工人医院内分泌二科唐山工人医院烧伤整形科河北医科大学

目的通过观察2型糖尿病患者血清β-淀粉样蛋白(Aβ)1-42、可溶性糖基化终末产物受体(sRAGE)水平变化,探讨2型糖尿病患者认知功能损害的可能机制。方法选取2014年3—12月于唐山工人医院内分泌二科诊断为2型糖尿病的患者66例为病例组,另... 详细信息

目的通过观察2型糖尿病患者血清β-淀粉样蛋白(Aβ)1-42、可溶性糖基化终末产物受体(sRAGE)水平变化,探讨2型糖尿病患者认知功能损害的可能机制。方法选取2014年3—12月于唐山工人医院内分泌二科诊断为2型糖尿病的患者66例为病例组,另同期选取本院体检中心体检健康者50例为对照组。采用自制调查表收集受试者临床资料,采用可重复的成套神经心理状态测量(RBANS)量表评价受试者认知功能,该量表包括即刻记忆、视觉广度、言语功能、注意力、延迟记忆5个分测验,根据受试者不同年龄查表转化为量表分,再统一转化为标准分。抽取受试者空腹肘静脉血5 ml,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清Aβ1-42及sRAGE水平。结果病例组RBANS量表即刻记忆、视觉广度、言语功能、注意力、延迟记忆评分及标准分均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。调整年龄、受教育年限后,病例组患者Aβ1-42水平与即刻记忆、注意力、延迟记忆评分及标准分呈负相关(r=-0.464、-0.418、-0.384、-0.696,P<0.05);sRAGE水平与即刻记忆、延迟记忆评分及标准分呈正相关(r=0.422、0.394、0.566,P<0.05)。结论 2型糖尿病患者存在认知功能损害,其发生机制可能与血清Aβ1-42水平升高及sRAGE水平降低有关。

关键词：糖尿病 2型认知障碍 β淀粉样肽类糖基化终产物高级

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由废催化剂制备氧化铝的探索

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无机盐技术 2006年第2期 32-38页

作者：王荣耕王哲甄艳凤闫巍河北科技大学理学院山东省东营金岭化工有限公司离子膜车间河北省廊坊市公安局刑警支队技术大队

将含有钴离子的废催化剂，酸溶后，利用鳌合离子交换树脂．对其中钴离子进行回收，然后对剩余的氧化铝成分进行回收。本文重点讨论了D418螯合型离子交换树脂（南开大学校办工厂生产）对钴离子的吸附与洗脱情况，考察了吸附最佳PH值，吸... 详细信息

将含有钴离子的废催化剂，酸溶后，利用鳌合离子交换树脂．对其中钴离子进行回收，然后对剩余的氧化铝成分进行回收。本文重点讨论了D418螯合型离子交换树脂（南开大学校办工厂生产）对钴离子的吸附与洗脱情况，考察了吸附最佳PH值，吸附曲线等动力学研究、为工业化生产提供了必要的数据。

关键词：废催化剂回收钴离子鳌合树脂 D418螯合型离子交换树脂

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