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赖氨大黄酸对HeLa细胞周期的影响及其机制

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中国现代应用药学 2011年第6期28卷 489-493页

作者：林雅军甄永占魏洁胡刚卫生部北京医院/卫生部北京老年医学研究所北京100730 华北煤炭医学院河北唐山063000

目的探讨赖氨大黄酸对HeLa细胞周期的影响及其机制。方法 MTT法检测赖氨大黄酸对HeLa细胞增殖的影响;流式细胞技术检测活性氧水平和细胞周期变化;显微镜下观察HeLa细胞形态变化;Western blot法检测p53和p21蛋白表达。结果赖氨大黄酸剂... 详细信息

目的探讨赖氨大黄酸对HeLa细胞周期的影响及其机制。方法 MTT法检测赖氨大黄酸对HeLa细胞增殖的影响;流式细胞技术检测活性氧水平和细胞周期变化;显微镜下观察HeLa细胞形态变化;Western blot法检测p53和p21蛋白表达。结果赖氨大黄酸剂量依赖性地抑制HeLa细胞增殖,IC50约为83μmol·L-1。随着赖氨大黄酸剂量的增加,HeLa细胞中活性氧水平增加,并出现S期和G2期阻滞,以及细胞空泡样变性。通过Western blot研究发现赖氨大黄酸处理后的p53蛋白磷酸化水平呈剂量依赖性地增加,同时下游周期相关蛋白p21表达水平也随之增加,而p53蛋白表达水平未出现显著地剂量依赖性变化。结论赖氨大黄酸通过增加HeLa细胞中活性氧水平,引起细胞周期相关蛋白p53的磷酸化水平和p21蛋白表达水平增加,引起HeLa细胞出现空泡样变性,并诱导S期和G2期阻滞。

关键词： HeLa细胞赖氨大黄酸活性氧细胞周期

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赖氨大黄酸对2型糖尿病小鼠胰腺保护作用

第三军医大学学报 2014年第5期36卷 461-465页

作者：胡刚甄永占骆广玲魏洁林雅军卫生部北京医院/卫生部北京老年医学研究所北京100730 河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000 开滦医疗集团林西医院妇产科河北唐山063000

目的探讨赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对2型糖尿病小鼠胰腺保护作用。方法建立小鼠2型糖尿病模型并根据体质量分层,采用随机数字表分为3组:模型组、25 mg/kg RHL和50 mg/kg RHL治疗组,另外设对照组为同龄正常小鼠。检测体质量、血糖... 详细信息

目的探讨赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对2型糖尿病小鼠胰腺保护作用。方法建立小鼠2型糖尿病模型并根据体质量分层,采用随机数字表分为3组:模型组、25 mg/kg RHL和50 mg/kg RHL治疗组,另外设对照组为同龄正常小鼠。检测体质量、血糖、血脂、胰岛素水平;检测胰腺活性氧水平和抗氧化酶活性。体外培养小鼠胰岛β细胞系,检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,糖尿病模型组小鼠血糖、总胆固醇、甘油三酯和胰腺活性氧水平均显著升高(P<0.05),体质量、胰岛素和抗氧化酶活性均显著降低(P<0.05)。与模型组相比,25、50 mg/kg RHL治疗组血糖、总胆固醇、甘油三酯和胰腺活性氧水平均显著降低(P<0.05),体质量、胰岛素和抗氧化酶活性均显著升高(P<0.05)。体外研究发现RHL能抑制过氧化氢诱导的胰岛β细胞凋亡。结论 RHL对2型糖尿病小鼠胰腺的保护作用与抑制氧化应激、减少胰岛β细胞凋亡有关。

关键词： 2型糖尿病赖氨大黄酸胰岛β细胞细胞凋亡小鼠

EBV感染胃癌细胞系NU-GC-3增强BCL-2基因的表达

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基础医学与临床 2010年第8期30卷 877-879页

作者：甄永占周天戟章广玲朱丽华高俊玲华北煤炭医学院基础部组织学与胚胎学教研室河北唐山063000 华北煤炭医学院生物科学系河北唐山063000

近年来Epstein-Barr病毒(EBV)感染与胃癌的关系受到关注[1]。目前,对EBV相关胃癌的研究主要在临床病理方面[2],而EBV感染后胃上皮细胞变化的分子机制尚不明确,用EBV感染体外培养的胃腺癌细胞系NU-GC-3,同时用EBVⅠ型潜伏感染基因构建的... 详细信息

近年来Epstein-Barr病毒(EBV)感染与胃癌的关系受到关注[1]。目前,对EBV相关胃癌的研究主要在临床病理方面[2],而EBV感染后胃上皮细胞变化的分子机制尚不明确,用EBV感染体外培养的胃腺癌细胞系NU-GC-3,同时用EBVⅠ型潜伏感染基因构建的表达载体分别转染NU-GC-3,对其感染或转染细胞中BCL-2表达进行研究,从而探讨BCL-2基因在EBV致胃癌发生发展中的作用

关键词： EBV 胃癌细胞 NU-GC-3 BCL-2基因表达

赖氨大黄酸通过升高miRNA-451抑制肺癌A549细胞迁移

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第三军医大学学报 2014年第3期36卷 248-252页

作者：纪春梅甄永占骆广玲赵毓芳朱丽华唐山协和医院呼吸内科河北唐山063000 河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000 开滦医疗集团林西医院妇产科河北唐山063000

目的研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对肺癌细胞株(A549)迁移的影响及miRNA-451在其中的作用。方法选取处于对数生长期的A549细胞株,并分为对照组、不同剂量(0、10、20、40、80、160μmol/L)的RHL组。采用MTT法检测各组细胞48 h增... 详细信息

目的研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对肺癌细胞株(A549)迁移的影响及miRNA-451在其中的作用。方法选取处于对数生长期的A549细胞株,并分为对照组、不同剂量(0、10、20、40、80、160μmol/L)的RHL组。采用MTT法检测各组细胞48 h增殖情况;细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞48 h迁移情况;Real-time PCR检测各组细胞48 h miRNA-451和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的转录水平;Western blot检测各组细胞48 h MMP-9蛋白水平变化。结果细胞培养48 h后,RHL处理组A549细胞增殖活性呈现明显剂量依赖性抑制。细胞划痕实验和Transwell实验均发现80μmol/L RHL能够抑制A549细胞迁移。同时80μmol/L以上剂量的RHL能够显著升高miR-451水平,降低MMP-9的转录水平(P<0.05)。Western blot检测结果也证实了80μmol/L以上剂量的RHL能够显著抑制MMP-9蛋白表达水平(P<0.05)。结论 RHL通过诱导miR-451的表达、抑制MMP-9的表达,从而抑制A549细胞迁移。

关键词：赖氨大黄酸肺肿瘤细胞迁移 miRNA-451 基质金属蛋白酶-9

半定量聚合酶链反应分析EB病毒相关疾病标本中的EB病毒DNA

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国外医学（微生物学分册） 2002年第6期25卷 40-41页

作者：甄永占

EB病毒(EBV)是导致免疫缺陷病人产生传染性单核细胞增多症(IM)、淋巴组织增生症的主要病因,并与Burkitt淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤等发生密切相关。免疫缺陷病人的原发性EBV感染及再活化感染的实验室诊断常用方法为血清学试验,但较为困难,且... 详细信息

EB病毒(EBV)是导致免疫缺陷病人产生传染性单核细胞增多症(IM)、淋巴组织增生症的主要病因,并与Burkitt淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤等发生密切相关。免疫缺陷病人的原发性EBV感染及再活化感染的实验室诊断常用方法为血清学试验,但较为困难,且与临床资料难以吻合。近年来,用聚合酶链反应(PCR)技术检测EBV DNA。

关键词：半定量聚合酶链反应 EB病毒相关疾病 EB病毒 DNA 诊断

赖氨大黄酸通过抑制HER-2信号通路诱导乳腺癌SK-Br-3细胞凋亡

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药学学报 2008年第11期43卷 1099-1105页

作者：林雅军黄云虹甄永占刘秀均甄永苏中国医学科学院、北京协和医学院医药生物技术研究所北京100050 华北煤炭医学院河北唐山063000

为研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对人乳腺癌细胞株SK-Br-3细胞增殖、凋亡的影响及HER-2信号通路在其中的作用。应用MTT法检测赖氨大黄酸对SK-Br-3细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡;应用Western blotting... 详细信息

为研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对人乳腺癌细胞株SK-Br-3细胞增殖、凋亡的影响及HER-2信号通路在其中的作用。应用MTT法检测赖氨大黄酸对SK-Br-3细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡;应用Western blotting检测HER-2信号通路蛋白表达水平及蛋白磷酸化水平;应用RT-PCR和免疫化学方法分别检测HER-2 mRNA和蛋白表达水平。结果显示,赖氨大黄酸能有效抑制乳腺癌SK-Br-3细胞增殖,作用48 h的IC50值为85μmol.L-1,并能诱导其凋亡,随药物浓度的增加,细胞凋亡率也逐渐升高;Western blotting结果显示,赖氨大黄酸抑制HER-2蛋白表达和蛋白磷酸化,抑制NF-κB蛋白表达,升高p53和p21蛋白表达;RT-PCR和免疫化学结果表明,赖氨大黄酸能抑制HER-2 mRNA的转录水平,从而抑制其蛋白表达。因此,赖氨大黄酸能有效抑制SK-Br-3细胞增殖,并诱导其凋亡,HER-2/NF-κB/p53/p21参与了赖氨大黄酸诱导SK-Br-3细胞凋亡的过程。赖氨大黄酸解决了大黄酸不溶于水的难题,并且能够通过HER-2信号通路诱导细胞凋亡,有望成为临床肿瘤辅助化疗药物。

关键词：赖氨大黄酸细胞凋亡 HER-2信号通路乳腺肿瘤

赖氨大黄酸对快速老化小鼠SAMP 10肾组织COL1A1、COL3A1和COL4A1表达的影响

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第三军医大学学报 2013年第17期35卷 1805-1808页

作者：甄永占胡刚章广玲魏静波李冉王梅梅林雅军河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000 卫生部北京医院卫生部北京老年医学研究所北京100730

目的研究赖氨大黄酸(rhein lysinate,RHL)对快速老化小鼠(senescence accelerated mouse prone 10,SAMP 10)肾组织Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)、Ⅲ型胶原α1链(COL3A1)和Ⅳ型胶原α1链(COL4A1)蛋白表达的影响。方法选取7月龄SAMP 10小鼠18只,并根据随机数字表分为空白对照组、低剂量RHL组(25 mg/kg)和高剂量RHL组(50 mg/kg),每组6只;另选抗快速老化小鼠(senescence accelerated mouse resistance 1,SAMR 1)6只作为青年对照,给药时间6个月。采用HE染色观察肾脏组织病理改变,Masson染色观察肾脏组织纤维化改变,Western blot方法检测肾组织COL1A1、COL3A1、COL4A1和NF-κB蛋白的表达。结果与SAMP 10空白对照组相比,25和50 mg/kg RHL组治疗后SAMP 10小鼠精神状态、活动度、毛色等方面较好;肾脏指数升高。HE染色显示SAMP 10空白对照组小鼠肾组织有节段性肾小球萎缩、硬化和明显的间质纤维化,SAMR 1组和RHL组小鼠则无肾小球萎缩、硬化和明显的间质纤维化。RHL能够抑制SAMP 10小鼠衰老过程中出现的肾组织COL1A1、COL3A1和NF-κB蛋白过度表达(P<0.05)。结论 RHL可通过抑制COL1A1、COL3A1和NF-κB蛋白过度表达,减轻衰老过程中SAMP 10小鼠肾组织纤维化程度,发挥肾脏保护作用。

关键词：赖氨大黄酸 SAMP 10快速老化小鼠肾间质纤维化抗衰老

BCL-2基因转染的人胃黏膜上皮细胞株GES-1的建立与鉴定

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基础医学与临床 2006年第10期26卷 1142-1145页

作者：朱丽华甄永占李淑英习瑾昆章广玲周天戟赵红天津医科大学生命科学中心实验室天津300070 华北煤炭医学院河北唐山063000 江苏大学医学技术学院微生物与免疫学教研室江苏镇江212000 华北煤炭医学院附属医院河北唐山063000

目的构成BCL-2基因表达的人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞模型。方法质粒pcDNA3-BCL-2经酶切鉴定后,以脂质体法转染人胃黏膜上皮细胞GES-1,经G418筛选获得细胞克隆,荧光免疫组化法鉴定BCL-2基因表达阳性细胞。结果经酶切鉴定为携带BCL-2基... 详细信息

目的构成BCL-2基因表达的人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞模型。方法质粒pcDNA3-BCL-2经酶切鉴定后,以脂质体法转染人胃黏膜上皮细胞GES-1,经G418筛选获得细胞克隆,荧光免疫组化法鉴定BCL-2基因表达阳性细胞。结果经酶切鉴定为携带BCL-2基因的质粒pcDNA3-BCL-2,荧光免疫组化结果显示7个克隆中,均有不同程度的BCL-2基因表达。BCL-2主要表达在胞质及细胞核膜。结论GES-1细胞为BCL-2表达阳性的细胞,为进一步研究BCL-2基因与胃癌的关系提供了理想的细胞模型。

关键词： BCL-2基因人胃上皮细胞 GES-1细胞转染

赖氨大黄酸对糖尿病大鼠肝脏的保护作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2014年第3期40卷 499-503,I0001页

作者：刘晓庆甄永占郝晓方王梅梅章广玲河北联合大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室河北唐山063000 河北联合大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000

目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对糖尿病模型大鼠肝脏的保护作用,阐明RHL对肝脏的保护作用机制。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病模型。将40只大鼠随机分为对照组、糖尿病模型组、25和50mg·kg-1 RHL治疗组,每组10只。采用... 详细信息

目的:探讨赖氨大黄酸(RHL)对糖尿病模型大鼠肝脏的保护作用,阐明RHL对肝脏的保护作用机制。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病模型。将40只大鼠随机分为对照组、糖尿病模型组、25和50mg·kg-1 RHL治疗组,每组10只。采用硫代巴比妥酸法检测肝脏组织中丙二醛(MDA)水平,联苯三酚自氧化法和NADPH偶联法分别检测超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;HE染色观察肝脏组织病理学变化;Nile red染色观察肝脏组织脂肪水平;Western blotting法检测脂肪合成相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,糖尿病模型组大鼠体质量减低,血糖、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平升高(P<0.05),肝脏组织中SOD和GSH-Px活性降低(P<0.05),肝脏组织出现大量脂肪空泡和脂肪蓄积。糖尿病模型大鼠脂肪合成信号通路ERK1/2-SREBP-1c被激活;与模型组比较,25和50mg·kg-1 RHL治疗组大鼠脂肪合成信号通路被抑制。与模型组比较,RHL治疗组大鼠体质量无显著变化,但血糖、TG和TC水平显著降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05)。与糖尿病模型组比较,RHL治疗组大鼠肝脏组织中的脂肪空泡和脂肪蓄积明显减少。结论:RHL能抑制氧化应激、肝脏脂肪变性和脂肪蓄积从而发挥对糖尿病大鼠肝脏的保护作用。

关键词：赖氨大黄酸糖尿病肝脏脂肪肝