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Carbon monoxide inhibits proliferation of pulmonary smooth muscle cells under hypoxia

Chinese Medical Journal 2003年第12期116卷 1804-1809页

作者：甄国华薛峥张珍祥徐永健 Department of Respiratory Diseases

Objective To investigate the expression of inducible heme oxygenase (HO-1) gene in pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs) exposed to hypoxia, and the influence of carbon monoxide (CO) on the proliferation of PASMCs under hypoxic conditions. Methods Primary culture of rat PASMCs were passed every 3 days, and the 3-5 passages were used. After exposure to hypoxic conditions (95% N 2, 5% CO 2) 0, 12, 24 and 48 hours, the level of HO-1 mRNA was examined by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). The volume of COHb in the medium was measured spectrophotometrically. The cyclic guanosine mono-phosphate (cGMP) concentration of cell extracts was determined by radioimmunoassay. PASMCs were divided into 5 groups, cultured under normoxia and hypoxia and treated with hemin, hemoglobin (Hb) and exogenous CO respectively. Then 3-(4, 5-cimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) colorimetric assay and immunocytochemical staining were used to study the energy metabolism and the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in PASMCs. Flow cytometry was used to analyze the cell cycle of *** After exposure to hypoxic conditions for 12, 24, and 48 hours, the HO-1 mRNA increased by 2.7%, 5.7% and 27.1% respectively (P<0.01). The carboxy-hemoglobin (COHb) in the medium increased by 13.8%, 31.0% and 93.1% (P<0.01); the cGMP concentrations were 2.7, 4.0 and 6.8-fold compared with the control group (P<0.01 and P<0.05). In comparison with the control group, the value of MTT colorimetric assay, the immunocytochemical staining of PCNA and the percentages of PASMCs in S and G 2M phases in the hypoxic group were significantly higher (P<0.01). After treatment with Hemin and CO, the results of the above analysis decreased significantly (P<0.01 and P<0.05), but increased significantly after treatment with Hb (P<0.01 and P<0.05). Conclusions The expression of HO-1 gene in PASMCs is upregulated by hypoxia and the production of endoge

关键词： hypoxia carbon monoxide smooth muscle cells hypertension pulmonary

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血液灌流对血脂和继发性甲状旁腺功能亢进的影响

血液灌流对血脂和继发性甲状旁腺功能亢进的影响

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作者：甄国华山西医科大学

学位级别：硕士

目的观察血液灌流对慢性肾衰竭维持性血液透析患者血脂的影响。方法在多个血液净化中心选取慢性肾衰竭维持性血液透析患者40例，行单次血液灌流串联血液透析，观察前后患者血脂的变化。结果慢性肾衰竭血液透析患者多数存在血脂代谢... 详细信息

目的观察血液灌流对慢性肾衰竭维持性血液透析患者血脂的影响。方法在多个血液净化中心选取慢性肾衰竭维持性血液透析患者40例，行单次血液灌流串联血液透析，观察前后患者血脂的变化。结果慢性肾衰竭血液透析患者多数存在血脂代谢的紊乱，表现为脂蛋白a[Lp(a)]及甘油三酯（TG）浓度的升高，高密度脂蛋白（HDL）及载脂蛋白A(APOA)的下降，总胆固醇（TC）、、低密度脂蛋白（LDL）、载脂蛋白B(APOB)变化不一;血液灌流后血Lp(a)以及TG的浓度下降，HDL、LDL、APOA、APOB、TC的浓度无明显变化。结论血液灌流可以降低维持性血液透析患者的Lp(a)及TG，改善其脂代谢紊乱。

关键词：血液灌流慢性肾衰竭血脂

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低氧时一氧化碳对PASMC增殖的影响及机制探讨

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中国应用生理学杂志 2002年第3期18卷 257-260页

作者：甄国华张珍祥徐永健华中科技大学同剂医学院附属同济医院呼吸内科湖北武汉430030

目的和方法 :应用MTT比色、原位杂交、免疫细胞化学技术检测内源性或外源性CO对低氧状态下PASMC增殖的作用以及对PDGF B和原癌基因bcl 2、突变型p5 3表达的影响 ,探讨CO抑制低氧状态下PASMC增殖的机制。结果 :各组PASMC中PDGF BmRNA原... 详细信息

目的和方法 :应用MTT比色、原位杂交、免疫细胞化学技术检测内源性或外源性CO对低氧状态下PASMC增殖的作用以及对PDGF B和原癌基因bcl 2、突变型p5 3表达的影响 ,探讨CO抑制低氧状态下PASMC增殖的机制。结果 :各组PASMC中PDGF BmRNA原位杂交和PDGF B蛋白的免疫细胞化学染色均为阴性 ,单纯低氧组较正常对照组Bcl 2和突变型P5 3蛋白表达增强 (P <0 .0 1) ,Hemin和CO干预组Bcl 2和突变型P5 3蛋白表达低于单纯低氧组 ,而Hb干预组则高于单纯低氧组 (P <0 .0 1)。结论 :低氧时CO可能通过抑制Bcl 2和突变型P5

关键词：低氧一氧化碳 PASMC增殖影响机制平滑肌细胞增殖 bcl-2 p53 肺血管重构

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内源性CO在缺氧性肺动脉高压大鼠肺血管重构中的作用

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中国应用生理学杂志 2002年第4期18卷 374-377页

作者：甄国华张珍祥徐永健华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科湖北武汉430030

目的和方法 :应用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)、双波长分光光度法、右心导管及维多利亚蓝染色方法 ,动态观察慢性缺氧不同时间点大鼠肺组织中诱导型血红素氧合酶 (HO 1)基因表达、内源性CO生成、肺动脉压力及构型的变化 ,探讨内源性C... 详细信息

目的和方法 :应用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)、双波长分光光度法、右心导管及维多利亚蓝染色方法 ,动态观察慢性缺氧不同时间点大鼠肺组织中诱导型血红素氧合酶 (HO 1)基因表达、内源性CO生成、肺动脉压力及构型的变化 ,探讨内源性CO在大鼠缺氧性肺动脉高压肺血管重构中的作用。结果 :①正常大鼠肺组织可表达少量HO 1mRNA ,缺氧 5、10、15d大鼠肺组织HO 1mRNA含量分别增加 2 .3、3.6、4 .0倍 (P <0 .0 1) ,动脉血中COHb分别较正常大鼠增加 1.9、2 .6和 2 .9倍 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,同时RVSP升高。光镜下可见IAPA血管壁增厚 ,管腔变窄。②Hemin可使缺氧大鼠肺组织HO 1mRNA和动脉血中COHb保持在高水平 (分别高达正常对照组的 5 .2和 3.7倍 ,P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,能部分地抑制缺氧时大鼠RVSP的升高 ,减轻IAPA的病理改变。结论 :在慢性缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织中HO 1基因的表达增加 ,内源性CO生成增多。Hemin促进HO 1基因表达和内源性CO生成 ,可抑制肺动脉压升高 ,阻抑肺血管重构。

关键词：内源性CO 缺氧性肺动脉高压大鼠肺血重构作用

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纠正继发性甲状旁腺功能亢进对肾性贫血的影响

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医师进修杂志 2004年第6期27卷 14-15页

作者：金其庄甄国华王梅北京大学第一医院肾内科北京100034 大同市第五医院肾内科山西大同037300

目的　观察慢性肾衰竭血液透析病人继发性甲状旁腺功能亢进症 (甲旁亢 )经活性维生素D3 治疗后 ,其血红蛋白 (Hb)及红细胞压积 (Hct)的变化。方法　用自身对照的方法 ,观察 2 0例维持性血液透析病人经活性维生素D3治疗纠正继发性甲旁亢... 详细信息

目的　观察慢性肾衰竭血液透析病人继发性甲状旁腺功能亢进症 (甲旁亢 )经活性维生素D3 治疗后 ,其血红蛋白 (Hb)及红细胞压积 (Hct)的变化。方法　用自身对照的方法 ,观察 2 0例维持性血液透析病人经活性维生素D3治疗纠正继发性甲旁亢前后Hb、Hct、促红细胞生成素 (EPO)用量的变化。结果　 2 0例病人经活性维生素D3 治疗后 ,免疫反应性甲状旁腺素 (iPTH)由 (5 32 .5 0± 30 8.31 ) μg/ml下降至 (1 35 .0 0± 80 .6 2 ) μg/ml,Hb由 (90 .4 5± 1 3.4 5 )g/L上升至 (1 0 1 .35± 1 4 .93)g/L ,Hct由 (2 9.4 80± 4 .36 3) %上升至 (32 .5 30± 4 .4 4 1 ) % ,EPO用量由 (5 6 1 2 .5 0± 2 5 6 0 .4 2 )IU/周下降至 (4 6 2 5 .0 0± 2 799.79)IU/周。上述所有变化均有统计学意义。结论　随着继发性甲旁亢的纠正 ,肾性贫血得到改善 ,EPO用量减少。

关键词：继发性甲旁亢肾性贫血免疫反应性甲状旁腺素促红细胞生成素

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血晶素促进缺氧大鼠肺组织诱导型血红素氧合酶基因的表达

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中国药理学通报 2001年第3期17卷 337-339页

作者：甄国华张珍祥徐永健同济医科大学附属同济医院呼吸疾病研究室武汉430030

目的　研究血晶素 (Hemin)对缺氧大鼠肺组织诱导型血红素氧合酶 (HO 1)表达的影响。方法　常压缺氧 15d复制缺氧性肺动脉高压大鼠模型 ,分为 3组 :正常对照组、单纯缺氧组和血晶素组。应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测大鼠肺组织HO ... 详细信息

目的　研究血晶素 (Hemin)对缺氧大鼠肺组织诱导型血红素氧合酶 (HO 1)表达的影响。方法　常压缺氧 15d复制缺氧性肺动脉高压大鼠模型 ,分为 3组 :正常对照组、单纯缺氧组和血晶素组。应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测大鼠肺组织HO 1mRNA水平 ,双波长分光光度法检测动脉血中一氧化碳血红蛋白 (COHb)的含量 ,并用右心导管检测右心室收缩压。结果　缺氧 15d大鼠肺组织HO 1mR NA水平及血中COHb较正常大鼠升高 (P <0 0 1) ,同时右心室收缩压 (RVSP)升高 (P <0 0 1)。经血晶素干预后 ,使缺氧大鼠HO 1mRNA和COHb进一步增高 ,而RVSP降低(P <0 0 1或P <0 0 5 )。结论　血晶素能够上调HO 1基因在缺氧大鼠肺组织中的表达 ,促进内源性CO生成。

关键词：血晶素血红素氧合酶一氧化碳肺动脉高压缺氧

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血晶素对缺氧大鼠肺组织PDGF-B基因表达的影响

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中国药理学通报 2001年第6期17卷 705-707页

作者：甄国华张珍祥徐永健华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科武汉430030

目的　研究血晶素对大鼠肺组织血小板源性生长因子B链 (PDGF B)基因表达的影响 ,探讨血晶素降低缺氧大鼠右心室收缩压 (RVSP)和改善缺氧性肺血管重构的机制。方法　用右心导管检测RVSP ;以双波长分光光度法测定动脉血中碳氧血红蛋白 (CO... 详细信息

目的　研究血晶素对大鼠肺组织血小板源性生长因子B链 (PDGF B)基因表达的影响 ,探讨血晶素降低缺氧大鼠右心室收缩压 (RVSP)和改善缺氧性肺血管重构的机制。方法　用右心导管检测RVSP ;以双波长分光光度法测定动脉血中碳氧血红蛋白 (COHb)的含量 ;用免疫组织化学染色观察PDGF B、增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白的表达 ;用原位杂交检测PDGF BmRNA的定位并用图象分析检测其水平。结果　①正常大鼠肺腺泡内动脉 (IAPA)管壁PDGF BmR NA原位杂交及PDGF B、PCNA免疫组织化学染色结果为阴性 ,而缺氧大鼠的上述实验结果均为阳性 ,同时缺氧大鼠动脉血中COHb的含量较正常对照组大鼠高 1 8倍 (P <0 0 1)。②血晶素可使动脉血中COHb含量较单纯缺氧组进一步增多 (P <0 0 5 ) ,抑制缺氧大鼠RVSP的升高 (P <0 0 1) ,肺组织IAPA管壁PDGFmRNA原位杂交及PDGF B、PCNA免疫组织化学染色虽为阳性 ,但弱于单纯缺氧组 ,经图像分析差异有显著性 (P <0 0 1或 0 0 5 )。结论　血晶素促进内源性CO的产生 ,使缺氧大鼠肺组织PDGF B基因表达下调 ,间接地抑制缺氧状态下血管壁平滑肌细胞过度增殖引起的肺血管重构。

关键词：血晶素缺氧血小板源性生长因子-B 肺动脉高压基因表达动物实验

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缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞HO-1基因表达和内源性一氧化碳生成的影响

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中国病理生理杂志 2002年第1期18卷 86-88页

作者：甄国华张珍祥徐永健同济医科大学附属同济医院呼吸疾病研究室湖北武汉430030

目的 :研究缺氧对体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞诱导型血红素氧合酶 (HO - 1)基因表达及内源性一氧化碳 (CO)产生的影响 ,探讨HO -CO系统在缺氧性肺动脉高压中的作用。方法 :原代培养大鼠肺内动脉的平滑肌细胞 (PASMC)并传代 ,选用第 ... 详细信息

目的 :研究缺氧对体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞诱导型血红素氧合酶 (HO - 1)基因表达及内源性一氧化碳 (CO)产生的影响 ,探讨HO -CO系统在缺氧性肺动脉高压中的作用。方法 :原代培养大鼠肺内动脉的平滑肌细胞 (PASMC)并传代 ,选用第 3- 5代PASMC用于实验。在培养瓶内通缺氧气体 (95 %N2 ,5 %CO2 ) 12、2 4h和48h后 ,用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT -PCR)检测PASMC中HO - 1mRNA水平 ,用酶联免疫检测仪测定培养基中碳氧血红蛋白 (COHb)含量 ,放免法测定培养基中环磷酸鸟苷 (cGMP)含量。结果 :缺氧 12、2 4和 48hHO - 1mRNA分别较正常对照组高 2 7%、5 7%和 2 7 1% (P <0 0 1) ,培养基中COHb的含量分别较正常对照组高 13 8%、31 0 %和93 1% (P <0 0 1) ,PASMC中cGMP的含量分别为正常对照组的 2 7、4 0和 6 8倍 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。结论 :缺氧诱导PASMC中的HO - 1基因表达上调 ,并使内源性CO产生增多 ,对PASMC内cGMP浓度有调节作用。

关键词：低氧一氧化碳血管平滑肌肺动脉

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一氧化碳抑制缺氧所致大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖

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中国病理生理杂志 2002年第8期18卷 966-969页

作者：甄国华张珍祥徐永健华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科湖北武汉430030

目的 :研究内源性及外源性一氧化碳 (CO)对缺氧状态下肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖的影响。方法 :选用第 3 - 5代培养的大鼠PASMC ,分别在常氧及缺氧条件下用HO酶促进剂氯血红素 (hemin)、CO清除剂牛血红蛋白 (Hb)和CO气体进行干预。通... 详细信息

目的 :研究内源性及外源性一氧化碳 (CO)对缺氧状态下肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖的影响。方法 :选用第 3 - 5代培养的大鼠PASMC ,分别在常氧及缺氧条件下用HO酶促进剂氯血红素 (hemin)、CO清除剂牛血红蛋白 (Hb)和CO气体进行干预。通过MTT比色、增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白的免疫细胞化学检测上述条件对PASMC代谢及增殖的影响 ,用流式细胞术检测不同条件对PASMC细胞周期的影响。结果 :PASMC在缺氧时MTT比色、PCNA表达及S期、G2 /M期细胞所占比例明显高于对照组 (P <0 0 1 ) ,使用hemin和CO后上述指标显著低于缺氧组 (P <0 0 1或P <0 0 5) ,而用Hb干预则PASMC代谢和增殖较缺氧组进一步增高 (P <0 0 1或P <0 0 5)。结论 :缺氧时PASMC产生的内源性CO以自分泌方式抑制PASMC自身增殖。

关键词：缺氧肺动脉平滑肌细胞一氧化碳细胞增殖缺氧性肺血管重构

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氯血红素对大鼠缺氧性肺动脉高压的作用

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中华结核和呼吸杂志 2000年第9期23卷 569-570,TO23页

作者：甄国华张珍祥徐永健同济医科大学附属同济医院呼吸疾病研究室武汉430030

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