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对虾养殖系统中副溶血弧菌基因水平转移和表达特性研究

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对虾养殖系统中副溶血弧菌基因水平转移和表达特性研究

作者：王青瑶大连海洋大学

学位级别：硕士

副溶血弧菌是一种嗜盐性细菌,主要存在于近海岸的海水和鱼类、贝类等海产品中,给我国水产经济养殖以及人类健康造成巨大的威胁。其中由副溶血弧菌引起的急性肝胰腺坏死病(AHPND)是一种细菌性疾病,其在对虾养殖中造成的对虾死亡率高达100... 详细信息

副溶血弧菌是一种嗜盐性细菌,主要存在于近海岸的海水和鱼类、贝类等海产品中,给我国水产经济养殖以及人类健康造成巨大的威胁。其中由副溶血弧菌引起的急性肝胰腺坏死病(AHPND)是一种细菌性疾病,其在对虾养殖中造成的对虾死亡率高达100%。该疾病已给全球对虾养殖业造成重大经济损失。本研究的主要研究内容是对中国北方5个城市(大连,营口,天津,唐山,黄骅)的对虾养殖场进行连续多年的监测,通过药敏实验、多位点系列分型分析、比较基因组学分析和转录组分析,对副溶血弧菌的进化方式进行初步探究。得到的研究成果如下:一、对虾养殖场中抗生素的使用驱动了副溶血弧菌的耐药和毒力进化。我们首先通过多位点序列分型(MLST)和全基因组测序分析了2011年至2018年中国北方三个对虾养殖场(天津、唐山、黄骅)副溶血弧菌在连续抗生素治疗下的序列类型(ST)的变化和进化过程。结果表明,副溶血弧菌菌株氟苯尼考和恩诺沙星耐药性的逐步出现与抗生素的使用有关。对2014-2016年分离的副溶血弧菌ST122菌株的基因组分析表明,氟苯尼考和恩诺沙星的耐药移动基因元件的获得与2014年以来在对虾养殖场使用抗生素密切相关。此外,我们还发现ISVal1转座子在30个副溶血弧菌基因组中形成了50个插入位点;这些插入位点,造成了部分基因失活,同时促进了致病岛(PAI)和适应岛的基因水平转移。此外,对自2016年以来的菌株进行比较基因组分析表明,在天津养殖场中副溶血弧菌ST1菌株的trh-nik-ure毒力基因组岛由染色体转移到质粒上,并随后通过基因水平转移,转移至ST422菌株中,提高了ST422菌株的毒力。这些结果表明,抗生素的使用不仅促进了耐药基因岛的出现,也驱动了副溶血弧菌毒力进化。二、不同养殖模式下副溶血弧菌的基因水平转移的比较。我们分别对对虾池塘养殖系统(营口)和循环水养殖系统(大连)的副溶血弧菌进行了为期三年的连续监测。这些养殖场在上述养殖周期均未使用抗生素,以排除抗生素对副溶血弧菌基因水平转移的潜在影响。我们采用MLST描述副溶血弧菌种群的动态变化,并通过全基因组测序(WGS)以确定每个养殖场的代表性。结果表明,循环水养殖场的副溶血弧菌种群结构随时间保持稳定,三年的监测过程中分别发现到4种、8种、3种ST型。相反,在池塘养殖中分别发现12种、16种、9种ST型,并且副溶血弧菌种群每年发生更替。基于全基因组序列的系统发育分析将50个分离菌株共分为五个簇,其中ST型为ST917a的菌株含有一个插入rec A基因内部的基因组岛。对来自同一ST型的菌株进行基因组比较表明,它们具有遗传相关性,但属于与地理分布相关的不同克隆。这些结果表明,循环水养殖通过最小化与外部环境的水交换而呈现特定的生态位。三、发现获得携带VI型分泌系统(T6SS)的质粒后,副溶血弧菌对环境的适应能力显著提高。我们在营口池塘养殖场中在2020和2019年分别分离鉴定了两株ST型为ST114的副溶血弧菌,分别为菌株VP14-2020(质粒中携带的新T6SS)、菌株YK114(野生型)。在本章节中,我们对这两个菌株进行了比较基因组分析,并比较了两个菌株之间的表型差异。结果表明,VP14-2020含有一个103kb的质粒,包含两个片段:73kb的片段,与质粒p TJ114-1和36kb的T6SS操纵子的DNA同源性为97.4%。微生物blastn发现,该T6SS1操纵子也存在于两个具有类似质粒和Vp368菌株染色体I的菌株中。转录组结果表明,VP14-2020通过水平基因转移使菌株获得T6SS后,较菌株YK114,其生长能力、毒力、环境适应能力与其他菌株竞争能力有所增强。共培养试验表明,VP14-2020对霍乱弧菌的抗菌活性明显高于菌株YK114(p<0.05)。综上所属,T6SS的获得提高了副溶血弧菌的适应性和毒力。因此,新获得的T6SS可能对弧菌的生存至关重要,因为它减轻了副溶血弧菌适应性进化的选择压力。这项研究首次提出了细菌基因的进化轨迹,这有助于我们理解新基因型的出现机制。

关键词：副溶血弧菌基因水平转移基因组学 T6SS 进化

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湿地生态补偿方式探讨

林业资源管理 2014年第3期 27-32页

作者：王青瑶马永双浙江农林大学法政学院

湿地生态保护以及湿地生态补偿是我国生态保护的重要内容。合理的湿地生态补偿方式直接关系到湿地生态补偿长效机制的建立。从输血型补偿和造血型补偿两种生态补偿方式出发,分析湿地生态补偿方式对湿地生态补偿的影响,探讨不同湿地保护... 详细信息

湿地生态保护以及湿地生态补偿是我国生态保护的重要内容。合理的湿地生态补偿方式直接关系到湿地生态补偿长效机制的建立。从输血型补偿和造血型补偿两种生态补偿方式出发,分析湿地生态补偿方式对湿地生态补偿的影响,探讨不同湿地保护模式下的湿地生态补偿方式。湿地生态补偿应加强造血型补偿方式的运用,并与当前以中央财政转移支付的输血型补偿方式相结合,实现湿地生态补偿方式多元化。

关键词：湿地生态补偿湿地生态补偿方式湿地保护方式

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我国自然遗产保护中的产权问题研究

中国环境管理干部学院学报 2013年第6期23卷 27-29,60页

作者：王青瑶浙江农林大学法政学院浙江杭州311300

从经济学角度看,自然遗产保护中必然涉及产权问题,建立合理的自然遗产产权制度是自然遗产保护的关键。我国目前的自然遗产产权制度暴露出许多弊端,如所有权基础上的自然遗产管理混乱,自然遗产经营权配置不合理,以及欠缺对自然遗产相邻... 详细信息

从经济学角度看,自然遗产保护中必然涉及产权问题,建立合理的自然遗产产权制度是自然遗产保护的关键。我国目前的自然遗产产权制度暴露出许多弊端,如所有权基础上的自然遗产管理混乱,自然遗产经营权配置不合理,以及欠缺对自然遗产相邻权的规定等。这些产权制度方面暴露的问题,对于自然遗产的保护无疑是不利的。通过对自然遗产保护中产权问题的探析和国外在自然遗产保护方面经验的借鉴,对我国自然遗产保护产权权利束中的所有权、经营权和相邻权的完善提出了几点建议。

关键词：自然遗产产权管理体系经营权相邻权

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自然遗产保护和开发中的社区参与机制研究

江西理工大学学报 2014年第2期35卷 24-28页

作者：王青瑶马永双浙江农林大学法政学院杭州311300

自然遗产保护和开发中存在着大量的矛盾和冲突,其中自然遗产保护和开发与当地原住居民间的利益冲突显得尤为突出。社区参与机制是解决这些冲突的最佳方式,同时也是自然遗产保护的真实性和完整性原则与环境保护公众参与原则的要求。2012... 详细信息

自然遗产保护和开发中存在着大量的矛盾和冲突,其中自然遗产保护和开发与当地原住居民间的利益冲突显得尤为突出。社区参与机制是解决这些冲突的最佳方式,同时也是自然遗产保护的真实性和完整性原则与环境保护公众参与原则的要求。2012年发布的《自然遗产保护法(征求意见稿)》的多个条款已涉及社区参与的内容,但其中仍存在缺陷,无法起到避免和化解矛盾冲突的作用。针对这些缺陷,从自然遗产地原住居民参与决策、参与利益分配以及建立社区管理专设机构三个方面提出了几点构想,旨在通过完善自然遗产保护和开发中的社区参与机制来避免和解决自然遗产保护和开发与当地原住居民之间的矛盾冲突。

关键词：自然遗产社区参与生态补偿机制

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YZ公司长短期偿债能力分析研究

现代商业 2019年第34期 93-94页

作者：唐玲玲王青瑶肖瑶南京审计大学江苏南京210000 江苏食品药品职业技术学院江苏淮安223003

在现今飞速发展的市场经济下,财务分析是公司不可或缺的部分,因为有数据的支撑,公司的管理者才能了解公司的发展情况.在财务分析中很重要的一个部分就是偿债能力,时常用来揭露公司在生产经营中存在的风险,也是公司偿还到期债务能力的衡... 详细信息

在现今飞速发展的市场经济下,财务分析是公司不可或缺的部分,因为有数据的支撑,公司的管理者才能了解公司的发展情况.在财务分析中很重要的一个部分就是偿债能力,时常用来揭露公司在生产经营中存在的风险,也是公司偿还到期债务能力的衡量与评价,其中包括了偿还长期债务以及短期债务的能力.本文通过对YZ公司偿债能力数据的分析研究,找出其中存在的风险因素,提出相应的解决措施,降低公司的财务风险,提升公司的财务管理能力,实现最优发展.

关键词： YZ公司长短期偿债能力财务风险

湛江地区患病对虾池塘中副溶血性弧菌的MLST分型和新型耐药毒株的分离鉴定

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大连海洋大学学报 2023年第1期38卷 59-67页

作者：吴俊敏王艺郝婧薇王青瑶张晋傅松哲刘鹰设施渔业教育部重点实验室(大连海洋大学) 辽宁大连116023 大连海洋大学海洋科技与环境学院辽宁大连116023 大连海洋大学水产与生命学院辽宁大连116023 浙江大学生物系统工程与食品科学学院浙江杭州310058

为研究湛江地区患病对虾养殖池塘中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的遗传多样性,选择副溶血性弧菌的7个管家基因对分离菌株进行MLST分型,采用PCR法检测tdh、trh、tlh、mam7、vcrD1、vcrD2和pirAB毒力基因的携带情况,用纸片扩散... 详细信息

为研究湛江地区患病对虾养殖池塘中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的遗传多样性,选择副溶血性弧菌的7个管家基因对分离菌株进行MLST分型,采用PCR法检测tdh、trh、tlh、mam7、vcrD1、vcrD2和pirAB毒力基因的携带情况,用纸片扩散法对所有菌株进行药敏试验,选择其中1株多重耐药菌株进行全基因组测序,并通过IslandPath-DIOMB分析其耐药基因岛来源。结果表明:从患病的对虾池塘水样中共分离出58株副溶血性弧菌,通过MLST分型共分为34个ST型;58株菌株均携带毒力基因tlh、mam7和vcrD1,未发现tdh、trh和vcrD2基因存在,其中,8株菌株携带引起急性肝胰腺坏死病(AHPND)的毒力基因pirAB;药敏试验显示,58株菌株对青霉素耐药率均为100%,对氨苄西林、克拉霉素和庆大霉素的耐药率较高,其中ST1740型的4株菌株均为多重耐药,从中选择ZJ20-3/2020菌株进行全基因组测序,发现该菌株含有8个耐药基因,分别为blaCARB-41、aadA16、aph(6)-Id、aph(3″)-Ib、tet(A)、sul1、dfrA27和ARR-3,并对青霉素、卡那霉素、四环素和利福平耐药;用IslandPath-DIOMB分析发现,ZJ20-3/2020菌株存在4个基因岛。研究表明,湛江地区患病对虾养殖池塘中的副溶血性弧菌具有丰富的遗传多样性,发现了一个携带pirAB的新ST型(ST1740)菌株,其携带4种来自希瓦氏菌的基因岛且为多重耐药菌株,本研究首次在副溶血性弧菌中发现来自希瓦氏菌属的基因水平转移,这些结果为防治急性肝胰腺坏死病提供了科学依据。

关键词：副溶血性弧菌凡纳滨对虾药敏试验多位点序列分型

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中国式现代化的三重逻辑

学校党建与思想教育 2024年第2期 91-93页

作者：莫天荣连君瑶王青山桂林理工大学思想政治教育研究所广西桂林541006 桂林理工大学广西桂林541006 桂林理工大学马克思主义学院广西桂林541006

中国式现代化是在中国共产党的领导下,将社会主义与现代化相融合,坚持以人为本,为实现共同富裕而努力奋斗的现代化。中国式现代化是经济、政治、文化、社会与生态共同发展的现代化。在其发展历程中,工业现代化、农业现代化、城镇化、信... 详细信息

中国式现代化是在中国共产党的领导下,将社会主义与现代化相融合,坚持以人为本,为实现共同富裕而努力奋斗的现代化。中国式现代化是经济、政治、文化、社会与生态共同发展的现代化。在其发展历程中,工业现代化、农业现代化、城镇化、信息化都取得了显著的成果,社会主义市场经济体制得到建立并不断完善。中国式现代化具有社会主义、现代化和民族复兴三重逻辑。

关键词：中国式现代化社会主义现代化中华民族伟大复兴

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时间约束三维超螺旋滑模制导控制一体化方法

宇航学报 2024年第2期45卷 283-294页

作者：李雪王青北京航空航天大学自动化科学与电气工程学院北京100191 北京航空航天大学国际创新学院杭州311115

针对飞行器时间约束制导问题,提出了一种新型三维制导控制一体化方法。为满足大前置角及大期望到达时间下时间约束制导的需要,提出了一种新型滑模面,并证明了滑模运动时前置角的渐近收敛特性。在该滑模面的基础上,基于超螺旋算法和反步... 详细信息

针对飞行器时间约束制导问题,提出了一种新型三维制导控制一体化方法。为满足大前置角及大期望到达时间下时间约束制导的需要,提出了一种新型滑模面,并证明了滑模运动时前置角的渐近收敛特性。在该滑模面的基础上,基于超螺旋算法和反步法,提出了有限时间稳定的制导控制一体化控制律,保证李普希茨有界扰动下的鲁棒,且控制量连续,其有限时间收敛特性通过李雅普诺夫稳定性理论得到证明,其有效性通过数值仿真得到了验证。

关键词：飞行器攻击时间控制制导制导控制一体化超螺旋算法反步法

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批判性思维导向的研究生生成教学模式研究

学位与研究生教育 2024年第9期 30-37页

作者：王青北京理工大学教育学院教育治理与教师教育研究所北京102488

以扎根理论研究方法研究了一门旨在提升批判性思维的研究生课程,以此构建了批判性思维导向的生成教学模式。这一模式基于“学生–教师–教学方法”三要素的互动,强调了通过创造具有混杂、转换和反思状态,以及知识和情感元素的空间,以促... 详细信息

以扎根理论研究方法研究了一门旨在提升批判性思维的研究生课程,以此构建了批判性思维导向的生成教学模式。这一模式基于“学生–教师–教学方法”三要素的互动,强调了通过创造具有混杂、转换和反思状态,以及知识和情感元素的空间,以促成目标生成、互动生成和拓展生成等多种生成教学活动。对于批判性思维导向的研究生教学来说,需将研究与教学同步进行,教学即是研究;注重教学中的生成性,正视不确定性,并最终由教授批判性思维知识的教学活动拓展为建立批判性思维的学习文化;教师也应不拘泥于获取既定成果的固化教学设计,而应转向预判学习过程中的可生成之处。

关键词：批判性思维研究生教学生成教学扎根理论教学学术