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大鲵DNA取样方法及有尾目线粒体基因组测序与进化研究

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大鲵DNA取样方法及有尾目线粒体基因组测序与进化研究

作者：王金秀吉首大学

学位级别：硕士

现生的两栖动物可分为3个类群:蚓螈目(Gymnophiona)、无尾目(Anura)和有尾目(Caudata)。与其他脊椎动物相比,两栖动物的体型整体偏小。但也有一些特例,如以大鲵为代表的隐鳃鲵科(Cryptobranchidae),其中中国大鲵(Andrias davidianus)的... 详细信息

现生的两栖动物可分为3个类群:蚓螈目(Gymnophiona)、无尾目(Anura)和有尾目(Caudata)。与其他脊椎动物相比,两栖动物的体型整体偏小。但也有一些特例,如以大鲵为代表的隐鳃鲵科(Cryptobranchidae),其中中国大鲵(Andrias davidianus)的体长可达2 m,体重超过50 kg,属于现生体型最大的两栖动物。但有关隐鳃鲵科巨大体型的适应性进化机制尚缺乏探究。能量是一切生命活动的基础,线粒体是生命体的能量工厂,其所包含的13个蛋白编码基因通过氧化还原反应与机体的能量代谢密切相关。在有尾类线粒体基因组蛋白编码基因的进化过程中,以大鲵为代表的隐鳃鲵科是否会受到独特的选择压力并使其朝着体型增大的方向演化或与其他某些独特的性状有关?为了系统性地回答这一科学问题,本研究首先从DNA非损害性取样和线粒体基因组测序组装等两个技术层面着手研究。随后,基于线粒体基因组的13个蛋白编码基因数据,构建了有尾类的系统发育关系。最后,通过经典的进化选择分析,非同义替代率和同义替代率的比值ω(d N/d S),探讨了大鲵为代表的隐鳃鲵科在有尾类进化过程中是否受到特定的选择压力。本研究具体结果如下:(1)以人工养殖的大鲵为研究对象,比较了口腔拭子、皮肤拭子、皮肤脱落物和尾静脉采血4种取样方式对DNA质量的影响。同时,基于皮肤拭子样品,进一步比较了试剂盒法、高盐法、苯酚氯仿法和磁珠法对DNA提取效果的影响。结果表明:4种非损害性取样方法均能获取目标物种的DNA,且均未对取样对象的行为或适合度产生明显影响,但在DNA质量和浓度方面存在一定差异,其中,效果最好的是尾静脉采血法,其次是口腔拭子法和皮肤拭子法,而皮肤脱落物法的取样效果较差。而基于皮肤拭子采用4种不同的DNA提取方法所获得的DNA质量整体上差异较小。(2)以人工养殖的大鲵为研究对象,通过传统测序和高通量测序测定了其线粒体全基因组,结果表明:高通量测序比传统测序获得的线粒体基因组完整度更高,性价比也更高,是当前的优选办法。以11种动物(含4种有尾类)的高通量测序数据为材料,系统比较了原始数据量和组装结果之间的关系,同时也对比了不同组装软件的组装效果。结果表明:组装数据量与物种基因组大小之间存在一定的关系,当组装数据量为物种基因组的0.4～1倍时,组装效果最好,并且NOVOPlasty组装效果整体优于Mito Z和MEANGS。(3)对本研究组装的4种有尾类线粒体基因组(其中3种疣螈属Tylototriton物种为第一次报道)特征进行了系统研究,结果表明:宽脊疣螈和茂兰疣螈完整的线粒体基因组长度都为16265 bp,高望界疣螈为16259 bp,而大鲵为16567 bp。4种有尾类线粒体都由13个蛋白编码基因、2个核糖体RNA基因、22个转运RNA基因和一个控制区所组成。大鲵的线粒体全基因组和蛋白基因的组成均偏向于T和C,而疣螈则偏向于A和C。大鲵和疣螈的线粒体基因组在多个方面特征上都表现出不同形式的演化模式。(4)基于NCBI上已发表的153条和本研究新测序的4条有尾类线粒体基因组序列,采用ML和BI法构建了有尾目的系统发育树。结果显示:蚓螈目是单系群,有尾目和无尾目为姐妹群。有尾目分为3个分支,最先分化的是鳗螈科(Sirenidae),然后是隐鳃鲵亚目(Cryptobranchoidea)和蝾螈亚目(Salamandroidea)。隐鳃鲵亚目由隐鳃鲵科(Cryptobranchidae)和小鲵科(Hynobiidae)组成。通过以隐鳃鲵亚目为研究数据集,以隐鳃鲵科为前景枝,小鲵科为背景枝,使用Easy Code ML软件进行选择压力分析,对检测出的正选择位点使用Datamonkey和Tree SAAP进行验证,并标记到相应蛋白的三维结构上。结果显示:Easy Code ML分析软件在ND1、ND2、ND3、ND4、ND5、ND6、ATP6、ATP8、COⅡ和CYTB中共检测到28个正选择位点,其中有18个位点发生了氨基酸激进性改变,有25个位点至少被2种方法检测到,有5个位点同时被3种方法检测到,且大部分位于α-螺旋区域或关键结构域。这些候选基因及位点可能在隐鳃鲵科体型增长或长寿等独特性状的进化过程中发挥了重要作用。综上,本研究过程中探索的非损害性DNA取样方法和线粒体基因组测序组装方法可为其他濒危两栖动物分子生态学研究提供参考。通过基于线粒体基因组的大鲵和其他有尾类中的系统进化研究,为性状演化与线粒体进化关系提供了新的视角。

关键词：线粒体全基因组体型大小系统发育分析中国大鲵正选择

晚期上皮性卵巢癌肠道转移患者的手术治疗对预后的影响

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晚期上皮性卵巢癌肠道转移患者的手术治疗对预后的影响

作者：王金秀河北医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究主要分析晚期上皮性卵巢癌肠道转移患者的手术治疗及预后。方法:本研究选取我院2015年1月至2020年12月期间Ⅲ-Ⅳ期上皮性卵巢癌肠道转移患者,进行回顾性分析。入组患者共255例,根据手术治疗方式分为2组,分别为研究组101例和... 详细信息

目的:本研究主要分析晚期上皮性卵巢癌肠道转移患者的手术治疗及预后。方法:本研究选取我院2015年1月至2020年12月期间Ⅲ-Ⅳ期上皮性卵巢癌肠道转移患者,进行回顾性分析。入组患者共255例,根据手术治疗方式分为2组,分别为研究组101例和对照组154例,研究组即转移肠段切除术治疗,对照组即肠道转移肿瘤剥除术治疗。收集的数据包括年龄、手术方式、手术时间、组织学、分期、住院时间、新辅助化疗周期、复发等,分析两组患者的临床疗效及术后并发症。结果:组间中位年龄、组织学、新辅助化疗均无显著差异。肠切除组Ⅳ期患者多于肿瘤剥除术组(P=0.021)。两组患者术后并发症的发生无显著性差异。在对术后不良事件单独分析中,肠切除组患者术中输注红细胞率、肺炎、胸腔积液的发生率较肿瘤剥除组患者显著增加。肠切除组中术后吻合口瘘的发生率为1.98%。多因素Cox回归分析结果得出,病理分期、是否行新辅助、病灶残留大小均影响患者预后。肠切除组和肿瘤剥除组患者总生存期、无进展生存期相似。亚组间生存分析中,在R0患者中,肠切除与肿瘤剥除两组间OS无显著差异(P=0.956)。同样,两组PFS之间也无统计学意义(P=0.795)。R1患者中两组间OS及PFS也相似。对于IDS达R0者,肠切除与肿瘤剥除组OS无统计学差异(P=0.550)。肠切除达R0者OS与R1组相似(P=0.07),但R0者PFS显著高于R1组(P=0.013)。仅肠壁残留病灶的肿瘤剥除组(R1)与肠切除(R0)组间OS相似(P=0.123)。肠切除(R0)组的PFS显著高于仅肠壁残留病灶的肿瘤剥除组(R1)(P=0.032)。此外,更广泛的肠切除范围并不能增加患者总生存率。结论:1.本研究结果显示,肠切除组术后并发症的发生率高于肿瘤剥除组,降低术后并发症的发生和保证术后生活质量,是妇科肿瘤医生应该关注的重点。2.与肠转移肿瘤剥除术相比,肠切除术并未改善晚期卵巢癌肠道转移患者的预后结局。3.对于晚期卵巢癌肠转移患者,特别是间歇性肿瘤减灭术患者,若手术需要肠切除以达到完全切除(R0),或者为了减轻、防止肠梗阻的发生,才应选择肠切除手术。

关键词：晚期卵巢癌肠转移手术治疗预后

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人大监督与地方政府债务规模扩张

统计与决策 2023年第14期39卷 137-141页

作者：王金秀张亮中南财经政法大学财政税务学院武汉430073

人大对地方政府债务进行预算审查监督已成为我国政府债务治理的重要手段。为约束债务规模无序扩张,文章以各地区省级预算审查监督条例修订作为准自然实验,利用多期双重差分法考察人大监督对地方政府债务规模在该条例修订前后的影响。研... 详细信息

人大对地方政府债务进行预算审查监督已成为我国政府债务治理的重要手段。为约束债务规模无序扩张,文章以各地区省级预算审查监督条例修订作为准自然实验,利用多期双重差分法考察人大监督对地方政府债务规模在该条例修订前后的影响。研究发现:人大预算审查监督条例修订后,能够显著降低地方政府债务规模,其中,显性债务规模下降约为0.217%,隐性债务规模下降约为0.121%。这一结论在考虑一系列稳健性检验和可能性解释后仍然成立。人大监督约束债务规模扩张的具体途径主要包括对债务预算软约束的治理以及对地方政府官员晋升激励的约束。进一步研究发现,在市场化水平越高的地区,人大监督约束效果越好;而人大监督与媒体监督相互补充,媒体关注度能影响债务的监督约束效果。

关键词：预算审查监督条例人大监督政府债务规模债务风险

双减政策背景下培养学生语文核心素养有效方法和途径探寻

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双减政策背景下培养学生语文核心素养有效方法和途径探寻

对接京津——行业企业基础教育

作者：王金秀河北省安次区调河头乡调河头小学

语文学科核心素养是指学生应的具有基本学科专业能力以及在文学方面表现出来的学识修养和人格魅力。语文核心素养是以语文能力为重心的综合素养,包括语言的积累和运用、思维的发展与提升、审美鉴赏与创新、文化的传承与理解等多个方面... 详细信息

语文学科核心素养是指学生应的具有基本学科专业能力以及在文学方面表现出来的学识修养和人格魅力。语文核心素养是以语文能力为重心的综合素养,包括语言的积累和运用、思维的发展与提升、审美鉴赏与创新、文化的传承与理解等多个方面。双减政策落地以来,语文学科教学既要减轻学生课外作业负担的前提下,又要追求最大限度的提升课堂教学效率,培养学生语文学科核心素养。

关键词：小学语文核心素养双减政策强化实践

来源： cnki会议评论

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基于语文核心素养的初中鲁迅作品教学研究

基于语文核心素养的初中鲁迅作品教学研究

作者：王金秀湖南师范大学

学位级别：硕士

鲁迅先生在我国现代文学史上创造的价值是不可磨灭的,他的作品意味深刻,发人深省。一直以来,鲁迅作品都是语文教学的重要材料,但从现实来看,鲁迅作品教学成效不高。语文核心素养的提出为鲁迅作品的教学打开了一个突破口,启发广大语文教... 详细信息

鲁迅先生在我国现代文学史上创造的价值是不可磨灭的,他的作品意味深刻,发人深省。一直以来,鲁迅作品都是语文教学的重要材料,但从现实来看,鲁迅作品教学成效不高。语文核心素养的提出为鲁迅作品的教学打开了一个突破口,启发广大语文教育工作者们从语文核心素养的角度来研究鲁迅作品的教学问题。本文以鲁迅作品教学为研究对象,进行研究,全文由以下几个部分组成。第一部分为引言与文献综述,说明了研究背景及意义,综述了相关论题的研究概况。第二部分界定了本论题中两个核心概念的意义,分析了两个概念之间的关系,并解读了本研究的理论依据。第三部分梳理了教材中鲁迅作品选文的状况,并从语文核心素养的角度分析了鲁迅作品的编选特点及价值。第四部分以问卷的方式调查了现今鲁迅作品的教学概况,并对结果进行了分析。第五部基于上述内容提出了细读文本品味语言、多方探索学思维、涵泳咀嚼悟美感、内外联动习文化四个方面的教学策略。最后一部分则在上述基础上进行了教学设计以及反思,以此来论证本文中所提策略的可行性。本文从语文核心素养这一新的研究视角出发,分析了现行教材中鲁迅作品类型、编选的特点及作品中蕴含的价值,然后通过问卷调查的方式了解了一线的教学实际情况,并对存在的问题进行归因,然后在此基础上提出了相应的教学策略,期望能为一线教学提供一定的参考价值。

关键词：语文核心素养初中鲁迅作品教学

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礼让原则在反垄断国际执法合作中的适用

礼让原则在反垄断国际执法合作中的适用

作者：王金秀北京外国语大学

学位级别：硕士

在当今经济全球化的发展背景下,跨越国界的垄断行为对各国产生影响,通常会涉及到多个国家对竞争行为的管辖权,反垄断执法主权以及法律适用的冲突由此产生。国际礼让原则作为阻却反垄断执法扩张的重要原则,为解决国家之间法律适用的冲突... 详细信息

在当今经济全球化的发展背景下,跨越国界的垄断行为对各国产生影响,通常会涉及到多个国家对竞争行为的管辖权,反垄断执法主权以及法律适用的冲突由此产生。国际礼让原则作为阻却反垄断执法扩张的重要原则,为解决国家之间法律适用的冲突提供了可行的方式,有利于促进市场有序发展、和谐解决问题。目前,在反垄断视角下,我国直接关于国际礼让原则的研究成果并不多见,而关于国际礼让原则在反垄断执法合作中的适用更是基本阙如。论文结合反垄断法的立法、执法情况以及国际礼让原则的发展及实践案例,分析国际礼让原则在反垄断执法合作中的意义,并提出完善建议,主要分为如下部分。第一部分介绍了“维生素C案”的案件背景和法院判决、争议焦点,以及涉及到的礼让问题的内涵和发展。内涵和发展是礼让原则理论基础性的部分,只有理解这部分内容,才能对礼让原则有更深刻的理解和认识。通过分析礼让原则的发展过程,分析国家间的立法实践,具体展示礼让原则在全球范围内的扩散和影响,进一步证明礼让原则在反垄断领域适用的合理性和必要性。第二部分探讨了礼让原则在反垄断国际执法合作中的适用,包括礼让原则适用的基础、适用的必要性和可行性,以及适用过程中存在的问题。通过着眼我国反垄断法改革的迫切需求以及应更加积极主动参与国际市场竞争的双重需要探究我国目前反垄断法执法合作中存在的问题,以及法域外适用的重要性。目前适用效果原则造成的过度管辖情况,可以利用礼让原则进行有效约束。基于目前国际礼让原则的适用现状,本文分别从适用的情况进行分析并指出当下存在的不足。礼让原则在实践中已运用已久,可适用于管辖阶段、审理阶段和执法阶段中,维生素C案是礼让原则在司法实践中的典型案例,本文结合该案分析反垄断合作中的礼让原则适用问题,并提出完善建议以及我国应对不礼让的措施。最后论述了在我国反垄断领域中如何完善礼让原则制度来促进良好的国际合作,并针对不礼让的相关问题提出相关的应对措施。我国首先应要完善《反垄断法》中域外适用的规定,通过引入礼让原则相关条款限制域外管辖的过度扩张问题;其次加强国际间的合作和交流,通过协定或细则细化礼让原则条款并建立制约保障机制;最后还要完善礼让原则适用中的信息共享制度,注意国家间的互通互联。

关键词：国际礼让原则法域外适用反垄断执法合作

健全现代预算制度推进中国式现代化伟大目标的实现

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财政监督 2022年第23期 9-16页

作者：王金秀中南财经政法大学

党的二十大提出中国式现代化,并明确到本世纪中叶全面实现社会主义现代化强国的伟大目标。中国式现代化是中国共产党百年来带领中国人民奋斗的根本目标,也是习近平新时代中国特色社会主义思想的主体内容。纵观人类社会发展历程,现代预... 详细信息

党的二十大提出中国式现代化,并明确到本世纪中叶全面实现社会主义现代化强国的伟大目标。中国式现代化是中国共产党百年来带领中国人民奋斗的根本目标,也是习近平新时代中国特色社会主义思想的主体内容。纵观人类社会发展历程,现代预算制度有效推进西方国家现代化发展,并先后成就了英美国家在世界上的霸主地位。中国式现代化既具有世界现代化的一般性,也与西方国家现代化具有本质差异。中国式现代化发展进程中,财政和预算管理在不同时期都发挥了基础性支撑作用。在当前中国式现代化建设步入第二个百年的新时期,需要进一步优化预算体制,以新发展观为指导、统筹财力保重点兜底民生,政府节支惠民惠企,大力支持科技创新,防控风险保安全,加强预算民主化和法治化,将制度和技术结合促进预算管理规范有效,量力而行、尽力而为,推进高质量发展,促进中国式现代化分阶段目标的实现,最终实现中华民族伟大复兴。

关键词：人民至上五位一体预算绩效政府节支裕民惠企科技兴国高质量发展

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商业综合体防排烟系统化设计分析

中文科技期刊数据库（文摘版）工程技术 2023年第1期 0144-0146页

作者：王金秀甘肃合筑建设工程有限公司甘肃张掖734000

大型商业综合体和一般的商业结构相比具有复杂性,主要包含内容和功能具有多样性,室内空间也较为复杂、人员非常密集、设备用电量较大,因此很容易引发火灾事故。火灾事故的出现会对社会造成负面影响,严重威胁人民的生命和国家财产安全。... 详细信息

大型商业综合体和一般的商业结构相比具有复杂性,主要包含内容和功能具有多样性,室内空间也较为复杂、人员非常密集、设备用电量较大,因此很容易引发火灾事故。火灾事故的出现会对社会造成负面影响,严重威胁人民的生命和国家财产安全。防排烟系统设计主要是对大型商业综合体的火灾进行有效防控,降低火灾事故所导致的负面影响。结合以上内容,本文主要是把商业综合体防排烟系统化设计作为重点来进行分析,希望可以给予相关人士一些帮助和借鉴。

关键词：商业综合体防排烟系统设计

2023年积极财政政策加力提效防控风险——近年来预算报告分析及财政政策解读

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财政监督 2023年第8期 24-28页

作者：王金秀中南财经政法大学

我国持续实行积极财政政策,政府节支、惠民利企,推进经济高质量发展,积极财政政策通过预算收支规模与结构、财政赤字、债务安排以及财税支持手段创新等多种政策工具组合加以落实。今年,面对疫后复杂的国际国内形势,为了恢复和发展经济,... 详细信息

我国持续实行积极财政政策,政府节支、惠民利企,推进经济高质量发展,积极财政政策通过预算收支规模与结构、财政赤字、债务安排以及财税支持手段创新等多种政策工具组合加以落实。今年,面对疫后复杂的国际国内形势,为了恢复和发展经济,预算报告提出积极财政政策加力提效,体现在保持财政支出强度、扩大专项债对投资拉动、推动财力下沉等方面加力,通过加强政策协调配合、优化政策工具组合、优化财政支出结构、创新财政支持方式、加强预算绩效监管等举措进行精准施策、有效调控,提升政策效能,推进经济整体好转,并助推中国式现代化建设进程行稳致远。

关键词：积极财政政策加力提效财政收支财政赤字地方专项债