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rBTI延长秀丽隐杆线虫寿命的研究

rBTI延长秀丽隐杆线虫寿命的研究

第四届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会

作者：李娇崔晓东王转花化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西大学生物技术研究所

rBTI(recombinant buckwheat trypsininhibitor,rBTI)是一种来源于荞麦的由69个氨基酸组成的PotatoⅠ型抑制剂,实验前期的研究表明,rBTI可以诱导细胞发生自噬,特异性地清除细胞内的损伤细胞器及聚集或变性的蛋白。已有研究表明细胞自噬...

rBTI(recombinant buckwheat trypsininhibitor,rBTI)是一种来源于荞麦的由69个氨基酸组成的PotatoⅠ型抑制剂,实验前期的研究表明,rBTI可以诱导细胞发生自噬,特异性地清除细胞内的损伤细胞器及聚集或变性的蛋白。已有研究表明细胞自噬与衰老及延长寿命之间有着重要的关联。本文将以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)为模型,研究rBTI对秀丽隐杆线虫寿命的影响及其分子机制。

关键词：

BTI基因转染诱导EC9706细胞凋亡及G_1阻滞

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中国生物化学与分子生物学报 2010年第4期26卷 362-368页

作者：李玉英田欣张政王转花山西大学生物技术研究所、化学生物学与分子工程教育部重点实验室太原030006

为了研究荞麦胰蛋白酶抑制剂(buckwheat trypsin inhibitor,BTI)对肿瘤细胞凋亡与细胞周期的影响,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与BTI融合蛋白真核表达质粒.将BTI基因成功克隆至pEGFP-N1中转染食管癌EC9706细胞后,激光共聚焦显微镜镜检... 详细信息

为了研究荞麦胰蛋白酶抑制剂(buckwheat trypsin inhibitor,BTI)对肿瘤细胞凋亡与细胞周期的影响,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与BTI融合蛋白真核表达质粒.将BTI基因成功克隆至pEGFP-N1中转染食管癌EC9706细胞后,激光共聚焦显微镜镜检显示,BTI-EGFP获得良好表达.表达的融合蛋白大部分分布于细胞核,在细胞质中有少量分布.Western印迹检测可见约27kD和36 kD的特异性条带.流式细胞术分析结果显示,BTI能够诱导EC9706细胞发生凋亡,并使细胞停滞于G0/G1期.

关键词：荞麦胰蛋白酶抑制剂绿色荧光蛋白食管癌EC9706细胞细胞周期凋亡

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rBTI-2的表达及其抗肿瘤活性研究

rBTI-2的表达及其抗肿瘤活性研究

泛环渤海地区九省市生物化学与分子生物学会——2011年...

作者：郭慧李玉英王转花山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室

为了将荞麦胰蛋白酶抑制剂开发为一种适合基因工程生产的抗肿瘤药物,本研究选用pExSecI作为表达载体,构建无标签的原核表达质粒pExSecI-BTI-2,表达纯化后得到高纯度rBTI-2蛋白,作用于肿瘤细胞。通过MTT,流式细胞术等检测,结果表明,rBTI-... 详细信息

为了将荞麦胰蛋白酶抑制剂开发为一种适合基因工程生产的抗肿瘤药物,本研究选用pExSecI作为表达载体,构建无标签的原核表达质粒pExSecI-BTI-2,表达纯化后得到高纯度rBTI-2蛋白,作用于肿瘤细胞。通过MTT,流式细胞术等检测,结果表明,rBTI-2能显著抑制人肝癌细胞株HepG2、人食管癌细胞株EC9706和胆管癌细胞株QBC-939的增殖,并

关键词： rBTI-2 抗肿瘤蛋白酶抑制剂 MTT检测细胞迁移

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rBTI的制备及其对果蝇寿命的影响

食品科学 2014年第7期35卷 202-205页

作者：李娇崔晓东李玉英冯思思王转花化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西大学生物技术研究所山西太原030006

构建含荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)表达质粒pExSecI-BTI的工程菌,在100 L发酵罐中放大发酵,发酵产物经热处理及离子交换层析纯化后,获得rBTI产品,其纯度达到95%以上。用含不同质量浓度rBTI(0、20、50μg/mL)的培养基饲养果蝇,并分别检测... 详细信息

构建含荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)表达质粒pExSecI-BTI的工程菌,在100 L发酵罐中放大发酵,发酵产物经热处理及离子交换层析纯化后,获得rBTI产品,其纯度达到95%以上。用含不同质量浓度rBTI(0、20、50μg/mL)的培养基饲养果蝇,并分别检测果蝇的最高寿命,平均寿命和半数死亡时间等。初步研究rBTI对果蝇寿命的影响。结果显示,rBTI能够显著延长果蝇的寿命。在实验剂量范围内,果蝇的寿命与rBTI质量浓度呈现正相关。抗氧化酶活性检测发现,实验组果蝇体内的SOD和CAT活性均显著升高。rBTI延缓果蝇衰老的作用可能是通过刺激机体的氧化应激能力来实现的。

关键词：荞麦胰蛋白酶抑制剂果蝇寿命抗氧化作用

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苦荞过敏原TBa的表位突变及免疫活性鉴定

食品科学 2010年第13期31卷 169-173页

作者：任晓霞张昕崔晓东李玉英王转花化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西大学生物技术研究所山西太原030006 山西大学环境科学与工程研究中心山西太原030006

前期研究曾分离获得一种纯度均一的天然苦荞过敏蛋白(tartary buckw heatallergena,TBa),免疫检测发现其为苦荞中的主要过敏原。本实验采用定点突变的方法对得分较高的表位E1的基因进行分子改造,构建5个突变体L39R、L42R、L47R、V52R、L... 详细信息

前期研究曾分离获得一种纯度均一的天然苦荞过敏蛋白(tartary buckw heatallergena,TBa),免疫检测发现其为苦荞中的主要过敏原。本实验采用定点突变的方法对得分较高的表位E1的基因进行分子改造,构建5个突变体L39R、L42R、L47R、V52R、L54R。在大肠杆菌BL21中分别进行表达,经Ni2+-NTA亲和纯化后得到纯度较高的重组突变体蛋白。ELISA和点杂交检测发现,与突变前的E1相比,突变体L42R、L47R、L54R的免疫活性明显降低,这表明Leu42、Leu47、Leu54在TBa的过敏性中起着至关重要的作用。

关键词：苦荞过敏原定点突变免疫活性

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食品加工条件下TBt结构及致敏性的变化

食品加工条件下TBt结构及致敏性的变化

第四届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会

作者：杨欢崔晓东王转花化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西大学生物技术研究所

苦荞,其营养价值和药用价值很高,现已用来制作成各类功能食品供"现代文明病"患者食用,并取得了良好的口碑。然而有报道称食用荞麦食品后会出现过敏症状,这是由于荞麦食品中含有过敏蛋白所引起的,因此研究低过敏性的苦荞食品显得十分必...

苦荞,其营养价值和药用价值很高,现已用来制作成各类功能食品供"现代文明病"患者食用,并取得了良好的口碑。然而有报道称食用荞麦食品后会出现过敏症状,这是由于荞麦食品中含有过敏蛋白所引起的,因此研究低过敏性的苦荞食品显得十分必要。目前常见的降低食物致敏性的方法有加热、辐照、高压处理等等。在日常的食品加工会对食物过敏原产生影响。本实验的目的是研究在食品加工条件下,

关键词：

苦荞过敏蛋白全长基因的克隆、表达及免疫学活性研究

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食品科学 2009年第1期30卷 203-206页

作者：张昕崔晓东李玉英张德梅王转花化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西大学生物技术研究所山西太原030006 太原市红十字血液中心山西太原030001

养麦属于一种常见的植物性过敏原。本实验在以往研究的基础上,以苦荞种子总RNA为模板,通过RT- PCR和5'-RACE等方法,扩增、克隆获得苦荞过敏蛋白全长cDNA序列。分析表明,该序列编码一个南515个氨基酸残基组成的功能蛋白,并与甜荞过敏性... 详细信息

养麦属于一种常见的植物性过敏原。本实验在以往研究的基础上,以苦荞种子总RNA为模板,通过RT- PCR和5'-RACE等方法,扩增、克隆获得苦荞过敏蛋白全长cDNA序列。分析表明,该序列编码一个南515个氨基酸残基组成的功能蛋白,并与甜荞过敏性贮藏蛋白的氨基酸序列同源性达到90%以上。经原核表达及一步亲和纯化后得到纯度较高的重组苦荞过敏蛋白(rTBt)。采用竞争性ELISA对其免疫活性分析显示,目的蛋白与荞麦过敏病人血清中的IgE抗体可以特异结合。

关键词：苫荞过敏蛋白克隆与表达免疫学活性

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TB过敏蛋白对小鼠体内几种酶活性的影响

山西大学学报(自然科学版) 2007年第1期30卷 95-97页

作者：李玉英张政白艳王转花山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西太原030006

研究了注射苦荞麦过敏蛋白TB前后小鼠体内的几种酶活性变化.以小鼠的心脏、肝脏、肾脏为实验材料,对其体内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及同工酶进行分析.测活结果显示:注射TB过敏蛋白后小鼠心脏和... 详细信息

研究了注射苦荞麦过敏蛋白TB前后小鼠体内的几种酶活性变化.以小鼠的心脏、肝脏、肾脏为实验材料,对其体内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及同工酶进行分析.测活结果显示:注射TB过敏蛋白后小鼠心脏和肝脏中SOD、POD、CAT的活性明显提高,而肾脏中几种酶活性均有所下降.电泳结果表明:SOD、POD的同工酶谱均发生了变化,谱带的酶活性不同程度的增加或减弱.

关键词：苦荞麦过敏蛋白抗氧化酶同工酶小鼠

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铅胁迫对乌麦种子萌发及幼苗生长的影响

山西大学学报(自然科学版) 2004年第2期27卷 202-204页

作者：马文丽金小弟王转花山西大学生命科学与技术学院山西大学生命科学与技术学院山西太原030006

研究不同浓度铅胁迫下乌麦及小麦种子萌发及幼苗生长状况 .结果表明 :铅胁迫对乌麦及小麦的种子萌发具有低浓度下的激活效应和高浓度下的抑制效应 ;对幼苗苗长具有胁迫初期低浓度下的激活效应 ,随着胁迫时间的延长 ,转而表现为抑制效应 ... 详细信息

研究不同浓度铅胁迫下乌麦及小麦种子萌发及幼苗生长状况 .结果表明 :铅胁迫对乌麦及小麦的种子萌发具有低浓度下的激活效应和高浓度下的抑制效应 ;对幼苗苗长具有胁迫初期低浓度下的激活效应 ,随着胁迫时间的延长 ,转而表现为抑制效应 ;对幼苗根长具有显著的抑制效应 .幼苗的生长状况比种子萌发更能体现铅毒性的大小 ,而根长的变化可作为植物受重金属毒性影响的一个重要指标

关键词：铅胁迫乌麦小麦种子萌发幼苗生长状况