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靶向CD19和BCMA的CAR-NK92MI细胞的构建及抗肿瘤活性研究

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现代肿瘤医学 2022年第5期30卷 785-791页

作者：余卓营李晓瑞尚凤琴李申王铁山王建勋北京中医药大学生命科学学院北京102488

目的:探讨嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)结构对CAR-NK细胞特异性杀伤能力的增强情况。方法:利用逆转录病毒载体分别构建出稳定表达靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen, BCMA)与分化群抗原19(cluster of diffe... 详细信息

目的:探讨嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)结构对CAR-NK细胞特异性杀伤能力的增强情况。方法:利用逆转录病毒载体分别构建出稳定表达靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen, BCMA)与分化群抗原19(cluster of differentiation 19,CD19)CAR的CAR-NK92MI细胞,随后使用流式细胞术检测经MYC-PE抗体染色的CAR-NK细胞的CAR阳性率。采用荧光素酶检测法、IncuCyte实时动态细胞成像分析系统、流式细胞术检测两种CAR-NK92MI细胞与只表达CD19或者只表达BCMA的肿瘤细胞共孵育一定时间后肿瘤细胞的凋亡情况。结果:成功构建出稳定高表达CAR的ANTI-CD19-CAR-NK92MI细胞系和ANTI-BCMA-CAR-NK92MI细胞系。体外杀伤实验结果显示,相比表达BCMA的肿瘤细胞,ANTI-CD19-CAR-NK92MI细胞对表达CD19的肿瘤细胞具有更高的杀伤活性;而相比表达CD19的肿瘤细胞,ANTI-BCMA-CAR-NK92MI细胞对表达BCMA的肿瘤细胞具有更高的杀伤活性。结论:CAR结构可以显著增强CAR-NK细胞的特异性杀伤能力。

关键词：嵌合抗原受体NK细胞特异性杀伤分化群抗原19 B细胞成熟抗原

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下级易被上级反感的行为表现与防避策略

领导科学 2021年第1期 28-30页

作者：张建营郑州升达经贸管理学院

下级易被上级反感的行为表现主要有爱与领导争风头、爱私下议论领导、爱向领导打报告、爱与领导搞亲近和爱煽风点火五种。下级可从转变工作理念、体悟领导感受、转变行为风格和强化自身本领等方面出发予以矫治和纠正。

关键词：上级领导下级员工行为反感

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率百姓造福一方——记河北省芦台农场场长刘进辉

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中国农垦 1990年第5期 18-20页

作者：孟宪营

在渤海之滨,人称京、津、唐金三角的腹地中,有一颗美丽的明珠——河北省国营芦台农场。这里风清水秀,物华天宝。这个与人民共和国同年诞生的国营农场,四十年来,几经磨难,苦辣酸甜……感触最深的是场长刘进辉。

关键词：农场芦台刘进河北省造福一方

TGF-β1通过TGF/SMAD和MEK/ERK通路对犬乳腺肿瘤细胞自噬的影响

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TGF-β1通过TGF/SMAD和MEK/ERK通路对犬乳腺肿瘤细胞自噬的影响

作者：范玉营东北农业大学

学位级别：硕士

犬乳腺肿瘤作为雌性犬常发的肿瘤性疾病,是人类乳腺肿瘤研究的良好模型。在犬乳腺肿瘤的诊断治疗中,细胞因子的作用已越来越受到重视。转化生长因子β1(Transforming growth factorβ1,TGF-β1)作为一种多功能的细胞因子,在肿瘤中发挥... 详细信息

犬乳腺肿瘤作为雌性犬常发的肿瘤性疾病,是人类乳腺肿瘤研究的良好模型。在犬乳腺肿瘤的诊断治疗中,细胞因子的作用已越来越受到重视。转化生长因子β1(Transforming growth factorβ1,TGF-β1)作为一种多功能的细胞因子,在肿瘤中发挥着多种作用,可能在癌症发生前或癌症早期通过促进细胞凋亡、细胞周期阻滞等机制发挥抑癌作用,也可能在癌症发生的晚期通过促进细胞侵袭迁移、肿瘤血管形成、免疫逃避等机制发挥促进癌症的作用,是人类肿瘤学研究的热点之一,然而目前在犬乳腺肿瘤中的研究较少。与TGF-β1作用相似,细胞自噬在肿瘤发生前能通过清除老化、变异细胞器等抑制细胞发生癌变,但是在细胞癌变后可以为细胞提供养分,促进癌症的发展,因此利用好自噬在肿瘤的治疗中起到重要的作用,但是TGF-β1对于犬乳腺肿瘤发生细胞自噬的影响尚不明确。本实验中,首先检测了犬乳腺肿瘤组织中TGF-β1的mRNA、蛋白的表达情况。之后的细胞实验中,用不同浓度TGF-β1处理犬乳腺肿瘤细胞CHMm细胞后,使用CCK-8法、平板克隆形成实验检测其对细胞增殖活性的影响。通过MDC染色实验,观察TGF-β1对CHMm细胞自噬的影响。再通过划痕愈合实验、Transwell小室实验,观察TGF-β1和抑制TGF-β1诱导的自噬对CHMm细胞侵袭迁移能力的影响。最后通过免疫荧光实验和Westren blot实验,分析TGF-β1对自噬相关蛋白、上皮间质间转化(Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白、TGF/SMAD通路、MEK/ERK通路蛋白的表达量的影响。结果显示,TGF-β1 mRNA和蛋白质在恶性犬乳腺肿瘤中的表达量明显高于良性乳腺肿瘤和正常癌旁组织。体外实验中,TGF-β1可以促进CHMm细胞的增殖活性和平板克隆形成能力。MDC染色显示,TGF-β1处理组中荧光显著增强,而使用Baf A1和TGF-β1共同处理细胞时荧光减弱。划痕愈合实验、Transwell小室实验显示,TGF-β1能明显促进CHMm细胞的侵袭、迁移能力,而加入自噬抑制剂后,侵袭迁移能力明显降低。在免疫荧光实验和Westren blot实验中TGF-β1能促进自噬相关蛋白、EMT相关蛋白的表达,促进SMAD2、SMAD3磷酸化,激活TGF/SMAD通路,促进MEK1/2、ERK1/2的磷酸化,激活MEK/ERK通路;加入自噬抑制剂Baf A1后,能缓解TGF-β1的促进作用;为了进行验证自噬对以上通路的作用,又使用了自噬促进剂RAPA和自噬抑制剂Baf A1分别处理CHMm细胞,结果显示,自噬的促进或抑制不能改变自分泌TGF-β1的表达量,但能促进SMAD2和SMAD3磷酸化,也可以激活MEK/ERK通路。综上所述,TGF-β1可以激活TGF/SMAD通路和MEK/ERK通路,诱导犬乳腺肿瘤CHMm细胞发生自噬;TGF-β1诱导的犬乳腺肿瘤CHMm发生的细胞自噬可以促进细胞增殖、侵袭迁移与EMT的发生。

关键词： TGF-β1 犬乳腺肿瘤 TGF/SMAD通路 MEK/ERK通路细胞自噬

介孔SiO2负载纳米ZnxCa((1-x))TiO3:yPr3+的电化学组装研究

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介孔SiO2负载纳米ZnxCa((1-x))TiO3:yPr3+的电化学组装研究

作者：韩丽营河北联合大学

学位级别：硕士

介孔分子筛的研制开发为主客体材料进行电化学组装奠定了新的主体材料基础，利用介孔材料的有序孔道，较大的孔表面积和壁厚，以及较高的热稳定性和水热稳定性等优点，负载不同发光材料的研究得到了广泛的发展。采用阴极电泳沉积法（C... 详细信息

介孔分子筛的研制开发为主客体材料进行电化学组装奠定了新的主体材料基础，利用介孔材料的有序孔道，较大的孔表面积和壁厚，以及较高的热稳定性和水热稳定性等优点，负载不同发光材料的研究得到了广泛的发展。采用阴极电泳沉积法（CEPD），以长余辉发光客体ZnxCa(1-x)TiO3:yPr3+（ZCT:yPr3+）溶胶为电泳液，成功合成了ZSM-5封装ZCT:yPr3+的复合发光材料。前期实验中，采用溶胶-凝胶法，以硝酸钙（Ca(NO3)24H2O）、硝酸锌（Zn(NO3)26H2O）和钛酸丁酯为主要原料来制备ZCT:yPr3+红色长余辉发光材料，确定x，y的最优值及其发光性能。采用x，y最优的长余辉发光客体溶胶进行电化学组装，探讨了电泳电压，沉积时间，不同方法制备的电极以及电泳液中激发离子Pr3+对组装效果及复合发光材料性能的影响。结果表明：采用凝胶注模成型法制备ZSM-5分子筛电极，Zn0.2Ca0.8TiO3:0.002Pr3+溶胶为电泳液，以电泳电压为10V，沉积时间为1h进行电化学组装时，所得复合发光材料的发光性能较好。采用XRD，TEM，荧光分光光度计和热释光计量仪等对复合发光材料进行分析和测试，显示长余辉发光客体成功进入到ZSM-5孔道中，组装样品激发光谱中，203nm和314nm处出现的较强的激发峰，分别来源于Pr3+离子的4f2—4f5d轨道的激发和组装客体Zn0.2Ca0.8TiO3基质的能带间隙激发;375nm处较弱的激发峰起因于Pr3+/Ti4+—Pr4+/Ti3+的电荷转移;在408nm，480nm和499nm处出现了非常弱的激发峰，分别对应于Pr3+离子的f—f轨道3H4—3PJ（J=2，1，0）的特征发射。与纯粹的长余辉发光材料相比，其激发光谱发生蓝移;而发射光谱中在615nm处出现了一个红光发射峰，这是源于Pr3+离子内部4f轨道的1D2—3H4的特征发射。热释光曲线表明，组装样品具有深于纯粹的长余辉发光材料的陷阱深度。依据复合发光材料的发光特点，建立了其红光发射过程及能量转换的简单模型。

关键词：组装电泳沉积长余辉发光材料介孔材料 ZSM-5

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网球两种基本击球技术教学顺序实验研究

网球两种基本击球技术教学顺序实验研究

作者：张立营武汉体育学院

学位级别：硕士

研究目的:网球运动是于十九世纪后期,由英、法、美等国的商人和传教士传入我国的。国内体育院校及各种高等院校开展网球课程的时间大约为十几年,网球底线正反手(双手反手)击球技术是网球技术中的核心和基本技术,是提高网球整体技术水平... 详细信息

研究目的:网球运动是于十九世纪后期,由英、法、美等国的商人和传教士传入我国的。国内体育院校及各种高等院校开展网球课程的时间大约为十几年,网球底线正反手(双手反手)击球技术是网球技术中的核心和基本技术,是提高网球整体技术水平的必备基石。为了达到较为快速、均衡的掌握正手及双手反手击球技术和综合发展学生身心的目的,我们有必要对网球技术课正反手击球技术的教学方法和手段进行一定的创新、尝试和改革。本研究将传统的正反手击球技术的顺向的教学顺序改变为,反常规的逆向的教学顺序;结合运用现代体育教学改革的成果(比如被实践证明了的教学方法、手段和教学模式等),使学生能够较为快速、均衡的掌握网球正手和双手反手击球技术。并且通过教学实验研究,来验证运用逆向的网球正手和双反手击球技术教学方法的教学效应和可行性。研究方法:本文运用文献资料法、专家访问法(又称专家问卷调查法)、教学实验法、数理统计法、对比分析法等多种方法相结合,对逆向的网球正手和双手反手击球技术教学方法的教学效应以及运用的可行性展开实验研究。主要结论: 1.采用常规的、顺向的教学顺序(先学习正手击球技术后学习双手反手击球技术)有利于有效的掌握正手击球技术,但不利于双手反手击球技术有效的掌握。 2.采用“先学习双手反手击球技术后学习正手击球技术”的教学方法,利于有效的掌握双手反手击球技术,对正手击球技术的有效掌握也会产生良性的影响。 3.通过对两种不同的网球正手和双手反手击球技术教学顺序的研究和对比分析,综合评价:“先学习双手反手击球技术后学习正手击球技术”的教学方法既有利于网球底线正手和双手反手击球技术的较为快速的平衡掌握,也有利于网球课教学目的的实现和学生的身心健康的发展。

关键词：网球运动双手反手击球正手击球教学顺序实验研究

“ 自营 ”之路──平顶山矿务局自营煤矿公司总经理张立江答记者问

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煤炭经济研究 1994年第6期 38-40页

作者：范宝营

“自营”之路──平顶山矿务局自营煤矿公司总经理张立江答记者问本刊记者范宝营平顶山矿务局自营煤矿公司是具有法人资格的集体企业，现辖２０个集体煤矿，主要从事国有重点煤矿的边角残煤、煤柱等资源的开采和销售，另有直属实业公司... 详细信息

“自营”之路──平顶山矿务局自营煤矿公司总经理张立江答记者问本刊记者范宝营平顶山矿务局自营煤矿公司是具有法人资格的集体企业，现辖２０个集体煤矿，主要从事国有重点煤矿的边角残煤、煤柱等资源的开采和销售，另有直属实业公司１个（法人企业），货运站台１个。１...

关键词：答记者问集体煤矿自营宣传思想工作平顶山矿务局总经理

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碳纤维增强复合材料注塑成型性能研究

碳纤维增强复合材料注塑成型性能研究

作者：杨崇营天津职业技术师范大学

学位级别：硕士

在当今,碳纤维增强复合材料在各个领域中起着无可替代的作用,面对环境污染的加剧,节能减排为研究重点,而热塑性塑料为增强基体,则材质轻,化学性能稳定,而且易加工成型,成本低,所以在各行各业中普遍应用。注塑成型不仅可以提高碳纤维复... 详细信息

在当今,碳纤维增强复合材料在各个领域中起着无可替代的作用,面对环境污染的加剧,节能减排为研究重点,而热塑性塑料为增强基体,则材质轻,化学性能稳定,而且易加工成型,成本低,所以在各行各业中普遍应用。注塑成型不仅可以提高碳纤维复合材料的生产效率和规模,而且注射成型过程中可以控制不同的工艺参数,有助于研究工艺参数对复合材料性能的影响规律。本论文以不同比例的碳纤维粉末增强结晶性材料聚丙烯(PP)和无定型材料丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物(ABS)为研究对象。首先用双螺杆挤出机制备碳纤维复合材料颗粒,然后采用微注塑成型机制备研究试验样品。研究了碳纤维粉末对复合材料机械性能、流变性能和热性能的影响规律;以四个工艺参数(熔体温度、模具温度、保压压力、注射压力)对复合材料的力学性能的影响规律,并通过金相显微镜分析,观察不同比例的碳纤维在基体中的分布,对其复合材料力学性能的影响,研究结果主要如下:(1)在力学性能测试中,CF粉末的加入对增强PP/CF复合材料的弹性模量以及增强ABS/CF复合材料的拉伸强度和弹性模量效果显著,但是CF粉末的加入,降低了CF增强结晶性PP和无定型ABS复合材料的断裂伸长率和冲击强度。(2)在工艺参数中,注射压力对结晶性PP材料的性能影响最大,注射压力为95MPa时比80MPa对PP/CF复合材料的弹性模量增大了8.75%。在增强无定型ABS/CF复合材料中,保压压力对提高其拉伸强度的影响最大,保压压力为150MPa时比120MPa对ABS/CF复合材料的拉伸强度增加了12.6%。(3)在流变性能测试中,碳纤维增强结晶性PP复合材料和无定型ABS复合材料随着CF含量的增加,熔体的剪切粘度逐渐增大。在低剪切速率下,温度对熔体的流动性影响最大;在高温度下,剪切速率对熔体材料的流动性影响最大。(4)CF的加入提升了PP材料的熔融温度,降低了结晶度。在PP/CF复合材料内,CF粉末部分和基体相结合,显微镜观察断面显示有部分团聚现象;CF的加入提高了ABS/CF复合材料的熔融温度,增加了复合材料的熔融热,增强了各相体系间的界面结合力。

关键词：碳纤维注塑成型工艺参数力学性能流动性能热性能

基于三维视角的农民工继续教育研究 ——以长三角地区为例

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基于三维视角的农民工继续教育研究 ——以长三角地区为例

作者：高福营扬州大学

学位级别：硕士

改革开放35年来,农民工在我国工业化、信息化、城镇化、农业现代化的进程中发挥了不可或缺的作用。据国家统计局的调查,2013年全国农民工总量为26894万人。为了提高农民工素质,国家大力加强对农民工的教育,举办了以技能培训为主要内容... 详细信息

改革开放35年来,农民工在我国工业化、信息化、城镇化、农业现代化的进程中发挥了不可或缺的作用。据国家统计局的调查,2013年全国农民工总量为26894万人。为了提高农民工素质,国家大力加强对农民工的教育,举办了以技能培训为主要内容的农民工继续教育。然而,农民工继续教育是不仅是面向农民工职业的教育,还是面向农民工生活、面向农民工终身发展的教育,农民工继续教育的内涵不仅要有职业技能培训等非学历教育、还要有公民道德、法律等教育,以及与之相接轨的各种学历教育。文章研究了当前农民工继续教育这一重要课题,首先界定了农民工继续教育的相关概念,以巴纳德(Barnard)提出的组织三要素(目标、沟通渠道、主体意愿与行为)为维度,并结合复杂科学理论、全面质量管理理论(TQM)以及终身教育理论等搭建了农民工继续教育的分析框架与分析思路。在既已确定的研究结构和思路的基础上,本研究以长三角地区为例,运用问卷调查法、访谈法、文献研究等多种手段,针对农民工继续教育的目标、沟通渠道(资金、知识和制度)和主体意愿与行为(政府、用人单位、培训机构、农民工)进行了现状调查。通过结合现状调查和文献分析,本研究认为当前农民工继续教育主要存在的问题有：一是目标取向片面化;二是沟通渠道凝固化;三是参与主体单极化。主要原因有：简单还原思维方法造成农民工继续教育的线性化,行政过度干预降低农民工继续教育系统自组织性;农民工继续教育自身封闭性影响了系统整体效用。最后,本研究以贯彻终身教育理念和建设和谐社会、维持农民工群体动态平衡、回归教育本质的内在需求为客观依据,提出了四点优化策略,分别是：一是理念创新：复杂与生成;二是目标选择：单维转向立体;三是信息传递：市场化环境中多向反馈;四是实施主体：政府主导转向协商互动。

关键词：农民工继续教育农民工继续教育