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贵州辣椒番茄斑萎病毒的分子鉴定

中国蔬菜 2024年第2期 51-57页

作者：田雨李淳李岩王莉爽贵州大学生命科学学院农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵州贵阳550025 贵州省农业科学院植物保护研究所贵州贵阳550006

用RT-PCR法对采自贵州6个地区的疑似辣椒病毒病样品进行了番茄斑萎病毒(TSWV)的鉴定,并用分子克隆方法扩增不同地区的感染TSWV的N基因序列。结果表明:贵州贵阳、安顺、瓮安、福泉、长顺和惠水的辣椒上均存在TSWV,经序列比对,贵州辣椒TSW... 详细信息

用RT-PCR法对采自贵州6个地区的疑似辣椒病毒病样品进行了番茄斑萎病毒(TSWV)的鉴定,并用分子克隆方法扩增不同地区的感染TSWV的N基因序列。结果表明:贵州贵阳、安顺、瓮安、福泉、长顺和惠水的辣椒上均存在TSWV,经序列比对,贵州辣椒TSWV分离物核苷酸一致性为95.6%~99.7%,氨基酸一致性为97.1%~100.0%;通过系统进化树分析,福泉、惠水和长顺辣椒TSWV分离物与云南、山东的番茄TSWV分离物亲缘关系较近,安顺、贵阳和瓮安辣椒TSWV分离物与云南的番茄、辣椒、烟草、芹菜和鬼针草TSWV分离物,以及江苏的莴苣TSWV分离物亲缘关系较近。表明贵州辣椒TSWV分离物有2种株系,与国内不同地区不同寄主的TSWV分离物具有一定的相关性。

关键词：辣椒番茄斑萎病毒 N基因病毒鉴定序列分析

贵州辣椒叶脉黄化病毒分离物检测及其P0、CP、MP基因进化分析

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园艺学报 2020年第12期47卷 2415-2426页

作者：王莉爽李淳杨学辉张松柏刘勇湖南农业大学植物保护学院长沙41012 贵州省农业科学院植物保护研究所贵阳550006 湖南省农业科学院植物保护研究所长沙410125

为明确辣椒叶脉黄化病毒(Pepper vein yellows virus,PeVYV)在贵州辣椒上的发生分布及其分子变异情况。用RT-PCR法对采自贵州省25个采样地点的548份辣椒疑似病毒病样品进行检测。结果表明:129份为阳性样品,检出率为23.54%。将获得的14... 详细信息

为明确辣椒叶脉黄化病毒(Pepper vein yellows virus,PeVYV)在贵州辣椒上的发生分布及其分子变异情况。用RT-PCR法对采自贵州省25个采样地点的548份辣椒疑似病毒病样品进行检测。结果表明:129份为阳性样品,检出率为23.54%。将获得的14个不同采样点PeVYV分离物和已报道的中国和其他国家PeVYV分离物进行序列比对,P0基因核苷酸同源性为90.9%~100.0%,氨基酸相似性为97.7%~100.0%;CP基因核苷酸同源性为93.7%~100.0%,氨基酸相似性为97.9%~100.0%;MP基因核苷酸同源性为94.7%~100.0%,氨基酸相似性均为100.0%。在系统进化树中,有13个采样点PeVYV分离物P0基因聚在一起,与中国分离物(KP326573)的亲缘关系较近,而遵义播州PeVYV分离物与澳大利亚分离物的亲缘关系较近。贵州所有PeVYV分离物CP基因与中国、澳大利亚、美国和西班牙分离物聚为一支,但不同采样点的PeVYV分离物又聚为两个不同的分支。而不同采样点MP基因全部聚在一起,且与其他地区PeVYV分离物的差异不明显。研究结果表明贵州辣椒上不同地区PeVYV分离物具有一定的分子差异,存在遗传分化现象。

关键词：辣椒辣椒叶脉黄化病毒 P0基因 CP基因 MP基因

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气管切开患者气道粘膜损伤的原因及护理对策

中国城乡企业卫生 2013年第5期28卷 62-63页

作者：王莉爽天津市职业病防治院外科监护室天津300011

目的探讨重症监护室气管切开患者气道粘膜损伤的原因及护理对策。方法收集76例重症监护室行气管切开患者的资料,其中12例出现气管粘膜严重损伤,64例出现轻度气管粘膜损伤,对其临床资料进行分析后,进行有针对性护理改进。结果 73例气管... 详细信息

目的探讨重症监护室气管切开患者气道粘膜损伤的原因及护理对策。方法收集76例重症监护室行气管切开患者的资料,其中12例出现气管粘膜严重损伤,64例出现轻度气管粘膜损伤,对其临床资料进行分析后,进行有针对性护理改进。结果 73例气管粘膜损伤得到明显改善,3例仍有间断出现痰中带血。结论给予重症监护室气管切开患者综合性护理措施,加强呼吸道管理,可以有效的避免或减少患者气管粘膜损伤程度,防止并发症的发生,提高患者的生存质量。

关键词：重症监护室气道粘膜损伤原因护理对策

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运用QCC持续改善护理品质的体会

黑龙江医学 2014年第9期38卷 1094-1095页

作者：王玥王莉爽天津市天津医院天津300210 天津市职业病防治院天津300020

通过QCC的自身实践,总结出其中几个步骤在实施过程中的经验和体会,为了更好的推广该活动,以期对下一期QCC有指导意义。

关键词：品管圈护理品质改进体会

侵染贵州甘蓝的芜菁花叶病毒CP基因序列分析

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广东农业科学 2020年第4期47卷 99-105页

作者：刘学辉李淳陈小均何海永王莉爽贵州省农业科学院植物保护研究所贵州贵阳550006

【目的】明确贵州省甘蓝芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的发生分布,为科学防控提供指导。【方法】在贵州省安顺市、威宁县和修文县采集甘蓝病毒病样品,采用酶联免疫吸附试验法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和RT-... 详细信息

【目的】明确贵州省甘蓝芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的发生分布,为科学防控提供指导。【方法】在贵州省安顺市、威宁县和修文县采集甘蓝病毒病样品,采用酶联免疫吸附试验法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和RT-PCR对病样进行TuMV检测,利用相关生物学软件分析TuMV CP基因序列的一致性,并构建系统进化树。【结果】152份甘蓝样品中66份检测出阳性,检出率为43.42%;测序的15个TuMV CP基因核苷酸同源性为88.70%~100%,与已报道TuMV 6个组的分离物构建系统进化树发现,14个分离物属于basal-BR,1个分离物属于world-B组。【结论】TuMV在贵州省甘蓝不同种植区普遍发生,且basal-BR为感染甘蓝的优势毒源。

关键词：甘蓝芜菁花叶病毒外壳蛋白(CP) 分子变异

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侵染贵州番茄的辣椒褪绿病毒分子鉴定与分析

病毒学报 2024年第2期40卷 402-411页

作者：田雨李淳吴石平黄露安星宇王莉爽贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究员院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵阳550025 贵州省农业科学院植物保护研究所贵阳550006

辣椒褪绿病毒(Capiscum chlorosis virus, CaCV)是正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)的重要成员,能够侵染辣椒、番茄等作物并造成严重危害。为明确贵州番茄CaCV分离物基因组分子结构特征及其进化起源,本研究通过RT-PCR技术扩增和测定了... 详细信息

辣椒褪绿病毒(Capiscum chlorosis virus, CaCV)是正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)的重要成员,能够侵染辣椒、番茄等作物并造成严重危害。为明确贵州番茄CaCV分离物基因组分子结构特征及其进化起源,本研究通过RT-PCR技术扩增和测定了CaCV的N、NSs和NSm基因的全长片段,分别获得长度约828bp、1 320bp和927bp的目标条带。经过序列比对和进化树构建等方法进行遗传进化分析发现,贵州番茄CaCV分离物的N、NSs和NSm基因与CaCV其他分离物核苷酸的相似性分别在85.5%~99.4%、82.7%~98.9%和83.1%~98.7%之间。根据系统发育树结果,贵州番茄CaCV分离物N基因和NSs基因与中国云南分离物的亲缘关系较近,NSm基因与中国海南和广州分离物的亲缘关系近,推测贵州CaCV可能是由于番茄、辣椒的品种引进,及蓟马带毒传播进入。这是贵州省CaCV侵染番茄的首次报道,对监测CaCV在我国的扩散具有重要意义。

关键词：番茄辣椒褪绿病毒病毒鉴定序列分析

猕猴桃溃疡病病原菌MLVA分型引物的筛选及验证

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果树学报 2024年第6期41卷 1188-1198页

作者：姚令王海黄露安星宇陈文王莉爽薛原吴石平贵州省农业科学院植物保护研究所·农业农村部喀斯特山区作物基因资源与种质创新重点实验室贵阳550006 贵州省农业科学院农业科技信息研究所贵阳550006 贵州省烟草公司安顺市公司贵州安顺561000

【目的】筛选出一组可精准快速地对丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae ***,Psa)进行分型的引物组合。【方法】针对前期文献已报道的34对引物,采用PCR技术验证该34对引物对中国Psa菌株的扩增效率及准确性;利用模拟PCR获... 详细信息

【目的】筛选出一组可精准快速地对丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae ***,Psa)进行分型的引物组合。【方法】针对前期文献已报道的34对引物,采用PCR技术验证该34对引物对中国Psa菌株的扩增效率及准确性;利用模拟PCR获取菌株串联重复(TR)数;以辛普森指数(Simpson’s index,SI)作为筛选引物组合的标准,基于R软件平台,筛选最优引物组合。【结果】34对引物对中国Psa扩增效果均良好,其中TR14与TR11II、TR19与Psa-01引物序列相同;TR8与Psa-08、TR39II与Psa-10、GM-1834与TR10I、GM-1553与TR64II、TR19Psa-01与TR19II扩增同一TR;Psa-09扩增产物串联重复单元长度不唯一,TR2II扩增产物侧翼变异较大,不能通过电泳确定串联重复数;最终确定SI值与全部引物组合相同的最低引物数量为9对,使用该9对引物的组合可将Psa已知的5种生物型准确分开。【结论】TR23/Psa-04、Psa-03、Psa-05、Psa-06、TR10IGM-1834、TR30I、TR1II、Psa-10TR39II、TR64IIGM-1553等9对引物可代表当前文献报道的34对引物,进行Psa分型研究,探索猕猴桃溃疡病的传播和流行规律,为病害防控策略的制定提供科学依据。

关键词：丁香假单胞菌猕猴桃致病变种多位点串联重复序列分析群体遗传结构引物筛选

深度测序发现贵阳发生的辣椒病毒病由多种病毒复合侵染所致

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植物病理学报 2017年第5期47卷 591-597页

作者：冯耿辛敏曹孟籍王莉爽李莉王锡锋中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 西南大学柑橘研究所国家柑橘工程技术研究中心重庆400712 贵州省植物保护研究所贵阳550006

2016年9月贵州省贵阳市发生严重的辣椒病毒病,症状复杂,主要表现为植株矮化,叶片黄化、花叶、皱缩、畸形以及枯死斑,果实有坏死斑等,根据症状难以判断病毒种类。本文采用小RNA深度测序技术对田间自然发病的2株辣椒标样进行了毒源鉴定,... 详细信息

2016年9月贵州省贵阳市发生严重的辣椒病毒病,症状复杂,主要表现为植株矮化,叶片黄化、花叶、皱缩、畸形以及枯死斑,果实有坏死斑等,根据症状难以判断病毒种类。本文采用小RNA深度测序技术对田间自然发病的2株辣椒标样进行了毒源鉴定,发现样品1由蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus2,BBWV2)、辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和辣椒内源RNA病毒(Bell pepper endornavirus,BPEV)4种病原复合侵染;样品2中除鉴定到上述4种病毒外,还检测到马铃薯Y病毒(Potato virusY,PVY)。进一步通过反转录PCR(RT-PCR)对深度测序结果进行了验证,证明其准确可靠。其中4个辣椒标样中均有的辣椒内源RNA病毒(BPEV)为贵州省首次报道。多种病毒复合侵染是辣椒产量和品质的重要限制因素之一,是辣椒生产的主要威胁。

关键词：辣椒病毒病深度测序复合侵染

菟丝子寄生后紫茎泽兰的叶绿素及酶类活性变化研究

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贵州农业科学 2009年第12期37卷 106-108页

作者：张秀伟桑维钧谢鑫王莉爽邱波贵州山地农业病虫害重点实验室贵州大学贵州贵阳550025

为寻找防治紫茎泽兰的新方法,利用菟丝子对紫茎泽兰的寄生作用,对寄生后紫茎泽兰的叶绿素、POD、SOD和PAL酶的OD值及其MDA含量的变化进行了测定,结果表明:紫茎泽兰被菟丝子寄生后其叶绿素含量下降,POD和SOD酶活性下降,PAL酶活性则上升,... 详细信息

为寻找防治紫茎泽兰的新方法,利用菟丝子对紫茎泽兰的寄生作用,对寄生后紫茎泽兰的叶绿素、POD、SOD和PAL酶的OD值及其MDA含量的变化进行了测定,结果表明:紫茎泽兰被菟丝子寄生后其叶绿素含量下降,POD和SOD酶活性下降,PAL酶活性则上升,菟丝子防控紫茎泽兰具有一定的可行性。

关键词：菟丝子寄生防控紫茎泽兰