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骨关节炎模型大鼠血清骨保护素及软骨下骨降钙素基因相关肽、神经生长因子表达及Mankin评分变化

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中国老年学杂志 2019年第4期39卷 909-913页

作者：常琦阮贞王宪伟王茂朋三峡大学附属仁和医院急诊科湖北宜昌443001 宜昌市中心医院心内科三峡大学附属仁和医院骨科

目的探讨大鼠膝关节骨关节炎(OA)软骨下骨神经因子表达及血清骨保护素(OPG)水平动态的变化。方法 40只SD大鼠随机分为实验组及对照组,实验组采用切断大鼠右后膝前交叉韧带方法建立OA模型,对照组仅切开关节囊,实验组根据造模至处死时间... 详细信息

目的探讨大鼠膝关节骨关节炎(OA)软骨下骨神经因子表达及血清骨保护素(OPG)水平动态的变化。方法 40只SD大鼠随机分为实验组及对照组,实验组采用切断大鼠右后膝前交叉韧带方法建立OA模型,对照组仅切开关节囊,实验组根据造模至处死时间再次分为2 w组,4 w组,8 w组,分别于术后2 w,4 w,8 w处死,对照组于术后8 w处死。采用心脏采血方法收取大鼠血清标本,处死动物后取膝关节标本,肉眼观察膝关节改变,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清OPG浓度值,膝关节标本脱钙后分别行HE染色、软骨下骨降钙素基因相关肽(CGRP)、神经生长因子(NGF)免疫组化染色,比较关节软骨Mankin评分及CGRP、NGF灰度值。结果大鼠造模后均存活,无死亡及伤口感染,对照组膝关节面光滑,有光泽,实验组膝关节软骨面破坏逐渐加重,2 w组膝关节面完整性开始遭到破坏,呈现颗粒感,表面晦涩、无光泽,关节滑液混浊;4 w组部分大鼠开始出现骨赘,8 w组关节磨损严重,骨赘明显,溃疡面积增大。HE染色显示对照组关节软骨结构清晰,软骨表面光滑、完整,实验组出现软骨细胞簇集现象,排列紊乱,细胞数目减少,后期发生部分区域软骨细胞缺损;血清OPG含量2 w、4 w呈下降趋势,8 w又逐渐上升,CGRP及NGF表达与前趋势相一致,各组间比较存在统计学差异(P<0. 01)。结论采用前交叉韧带切断法可成功建立大鼠OA模型,血清OPG及软骨下骨CGRP、NGF的表达随着OA的进展发生改变,是OA的重要参与因子。

关键词：骨关节炎软骨下骨降钙素基因相关肽神经生长因子

基于Caprini血栓风险模型评估膝关节镜手术患者深静脉血栓形成的风险性

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中国组织工程研究 2016年第17期20卷 2474-2480页

作者：徐留海曾勇黄卫王茂朋阙详勇易春艳三峡大学仁和医院骨科湖北省宜昌市443001

背景:膝关节镜手术后容易发生下肢深静脉血栓。而当前深静脉血栓缺乏特异性的临床表现,临床上急需一种快速、方便、可靠的风险评估工具来评估高危人群,以便预防和干预。国外Caprini血栓风险评估量表评估血栓发生风险的有效性已被大量研... 详细信息

背景:膝关节镜手术后容易发生下肢深静脉血栓。而当前深静脉血栓缺乏特异性的临床表现,临床上急需一种快速、方便、可靠的风险评估工具来评估高危人群,以便预防和干预。国外Caprini血栓风险评估量表评估血栓发生风险的有效性已被大量研究所证实,当前国内研究较少。目的:验证Caprini血栓风险评估模型预测膝关节镜手术患者下肢深静脉血栓形成风险的有效性,探讨膝关节镜手术患者预防深静脉血栓形成的有效策略。方法:采用随机对照研究设计,连续性收集2008年1月至2015年6月三峡大学仁和医院骨科膝关节镜手术患者中确诊的49例深静脉血栓形成患者作为病例组,随机选择同时期入院的98例未发生深静脉血栓形成的膝关节镜手术患者作为对照组。按照Caprini风险评估量对两组患者进行深静脉血栓形成风险评估、危险度分级,探讨危险度分级与深静脉血栓形成发病风险的相关关系。结果与结论:1基本情况比较:深静脉血栓形成组患者的术侧肢体止血带应用时间、吸烟者所占比例、深静脉血栓形成和(或)肺血栓栓塞症疾病史患者所占比例则高于对照组(P<0.05);2深静脉血栓形成组患者Caprini评分明显高于对照组(P<0.001);深静脉血栓形成组患者中极高危患者所占比例最高(53%),其次为高危(25%),高危及以上合计占78%,对照组中高危所占比例最多(32%),其次为低危(29%),两组患者危险度分级的构成之间差异有显著性意义(P<0.001);3深静脉血栓形成组及对照组中,均有患者深静脉血栓形成和(或)肺血栓栓塞症疾病史与Caprini评分呈的正相关关系(P<0.05);而深静脉血栓形成患者中Caprini评分还与术侧肢体止血带应用时间呈正相关关系(P<0.05)。4Caprini危险度分级与深静脉血栓形成发病风险的Logistic回归分析显示:随着Caprini危险度分级的升高患者深静脉血栓形成的发病风险也明显增高,高危和极高危重症患者深静脉血栓形成的发病风险分别是低危患者的2.130和11.786倍;5提示基于Caprini血栓风险评估模型可以较好的预测膝关节镜手术患者术后深静脉血栓形成的发病风险。

关键词：关节镜静脉血栓形成肺栓塞组织工程骨科植入物人工假体关节镜术后深静脉血栓形成风险评估随机对照研究

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干骺端全髋关节置换术13例临床效果分析

中国全科医学 2010年第32期13卷 3668-3670页

作者：陈剑锋陈安民郭风劲王江任晔王茂朋张帆华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科湖北省武汉市430030

目的评价干骺端全髋(METHA)短柄髋关节系统在髋关节置换中的临床效果。方法回顾性分析13例髋关节疾病患者行短柄髋关节假体置换术的手术时间、术中出血量、进行关节功能(Harris)评分和放射学评估。结果随访9～15个月,平均12个月。手术时... 详细信息

目的评价干骺端全髋(METHA)短柄髋关节系统在髋关节置换中的临床效果。方法回顾性分析13例髋关节疾病患者行短柄髋关节假体置换术的手术时间、术中出血量、进行关节功能(Harris)评分和放射学评估。结果随访9～15个月,平均12个月。手术时间120～180min,平均150min;术中出血量200～600ml,平均400ml。患者无一例发生伤口感染、术后脱位、双下肢不等长和假体松动等并发症。术前Harris评分(38.6±1.3)分,术后12个月Harris评分(89.4±3.0)分。结论应用METHA短柄髋关节系统置换髋关节具有创伤小、出血少、符合人体生物力学、假体稳定、假体易翻修的特点,具有较好的临床应用前景。

关键词：髋关节疾病关节成形术,置换,髋

Construction of Eukaryotic Expression Plasmid of hTGF-β3 and Its Inducing Effect on Differentiation of Precartilaginous Stem Cells into Chondroblasts

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Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2011年第4期31卷 524-529页

作者：游洪波陈安民刘铁王茂朋张国良 Department of Orthopaedics Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and Technology

This study examined the construction of eukaryotic expression plasmid of human transforming growth factor-β3（hTGF-β3） and its inducing effect on the differentiation of precartilaginous stem cells（PSCs） into ***-β3 gene was amplified by using polymerase chain reaction（PCR） and then inserted into the eukaryotic expression plasmid pcDNA3.1 to construct the eukaryotic expression plasmid pcDNA3.1（＋）-hTGF-β*** PSCs were isolated and purified by employing an immunomagnetic cell sorting ***3.1（＋）-hTGF-β3 was transfected into purified PSCs with the use of linear *** expression of TGF-β3 and cartilage-specific extracellular matrix（ECM） components was detected after transfection by real-time quantitative PCR,ELISA,immunochemistry and Western blotting,*** results showed that the eukaryotic expression plasmid pcDNA3.1（＋）-hTGF-β3 was successfully established as identified by enzyme digestion and DNA ***-time quantitative PCR and ELISA revealed that hTGF-β3 was strongly expressed in pcDNA3.1（＋）-hTGF-β3-transfected ***-time quantitative PCR,immunochemistry and Western blotting showed that the cartilage-specific ECM markers,i.e.,cartilage oligomeric matrix protein（COMP）,Aggrecan,collagen type Ⅹ and Ⅱ were intensely expressed in the pcDNA3.1（＋）-hTGF-β3transfected *** was concluded that hTGF-β3 could be stably expressed in pcDNA3.1（＋）-hTGFβ3-transfected PSCs and induce the differentiation of PSCs into chondroblasts.

关键词： TGF-β plasmid stem cell gene transfection cartilagenesis

肺癌肿瘤抑制物-1基因在肾腺癌伴骨转移组织的表达及临床意义

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中国全科医学 2011年第36期14卷 4167-4169页

作者：陈剑锋陈安民郭风劲赵文斌袁雪峰王茂朋张帆华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科湖北省武汉市430030

目的探讨肺癌肿瘤抑制物-1(TSLC1)基因在肾腺癌伴骨转移组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学(SP)法检测TSLC1在54例肾腺癌无骨转移患者的癌组织标本,10例肾腺癌伴骨转移患者的癌组织标本及10例正常肾组织中的... 详细信息

目的探讨肺癌肿瘤抑制物-1(TSLC1)基因在肾腺癌伴骨转移组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学(SP)法检测TSLC1在54例肾腺癌无骨转移患者的癌组织标本,10例肾腺癌伴骨转移患者的癌组织标本及10例正常肾组织中的表达。结果 TSLC1蛋白在肾腺癌无骨转移患者的癌组织中阳性表达率为53.7%(29/54),在肾腺癌伴骨转移患者的癌组织中阳性表达率为2/10,在正常肾组织中的阳性表达率为10/10,三组间差异有统计学意义(P<0.05)。TSLC1蛋白在肾腺癌病理分级Ⅰ～Ⅱ级中阳性表达率为54.0%,在Ⅲ级中阳性表达率为21.4%,差异有统计学意义(P<0.05);在肾腺癌伴发骨转移患者的癌组织中阳性表达率为20.0%,在无骨转移患者的癌组织中阳性表达率为61.1%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TSLC1基因可能与肾腺癌伴发骨转移的发生、发展有关,可能对肾腺癌伴发骨转移的早期诊断及预后评估具有重要意义。

关键词：肾腺癌肺癌肿瘤抑制物-1 免疫组织化学骨转移

转化生长因子-β诱导前软骨干细胞成软骨分化的研究

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中华创伤杂志 2010年第5期26卷 453-459页

作者：游洪波陈安民王国宾孙凯张国良王茂朋华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科武汉430030

目的探讨TGF-β诱导前软骨干细胞（precartilaginous stem cells,PSCs）成软骨分化的可行性及软骨细胞外基质的表达机制. 方法采用藻酸盐凝胶三维培养分别以TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3诱导PSCs向成软骨方向分化,应用免疫组化、RT-PCR... 详细信息

目的探讨TGF-β诱导前软骨干细胞（precartilaginous stem cells,PSCs）成软骨分化的可行性及软骨细胞外基质的表达机制. 方法采用藻酸盐凝胶三维培养分别以TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3诱导PSCs向成软骨方向分化,应用免疫组化、RT-PCR、免疫沉淀、Western blot和分光光度等技术测定分化过程中特异性软骨基质成分的表达. 结果 TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3在培养7,14,21 d均有Ⅱ型胶原表达,TGF-β3组Ⅱ型胶原表达较强;TGF-β3诱导21 d的PSCs免疫组化检测可见细胞及周围均有可聚蛋白聚糖、纤调蛋白、软骨寡聚基质蛋白表达;TGF-β3组RT-PCR检测显示在8 d内开始出现可聚蛋白聚糖、纤调蛋白、Ⅰ型胶原、X型胶原、软骨寡聚基质蛋白等的表达,8 d后开始出现Ⅱ型胶原表达.免疫沉淀及Western blot检测显示TGF-β3组7,14,21 d分别有软骨寡聚基质蛋白及X型胶原表达.分光光度检测显示TGF-β1组在14或21 d时氨基多糖含量及氨基多糖/DNA比率均低于TGF-β2组或TGF-β3组（P〈0.01）.结论 TGF-β能诱导PSCs向成软骨方向分化,此分化过程伴随特异性软骨细胞外基质成分的沉淀.可以通过分析关键性软骨基质成分的表达了解PSCs所处的分化阶段.

关键词：干细胞转化生长因子β 细胞外基质软骨细胞软骨形成

带线锚钉治疗外踝撕脱骨折合并外侧副韧带损伤的疗效分析

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骨科 2019年第1期10卷 72-75页

作者：王茂朋陈明亮李新志周游三峡大学附属仁和医院骨科湖北宜昌443001

目的探讨应用带线锚钉治疗外踝撕脱骨折合并外侧副韧带损伤的临床疗效。方法回顾性分析我院2013年5月至2015年9月应用带线锚钉治疗外踝撕脱骨折合并外侧副韧带损伤病人18例,其中男12例,女6例;平均年龄为25.7岁(19~40岁),均为闭合性损伤... 详细信息

目的探讨应用带线锚钉治疗外踝撕脱骨折合并外侧副韧带损伤的临床疗效。方法回顾性分析我院2013年5月至2015年9月应用带线锚钉治疗外踝撕脱骨折合并外侧副韧带损伤病人18例,其中男12例,女6例;平均年龄为25.7岁(19~40岁),均为闭合性损伤,受伤至手术时间平均为2.5 d(1~7 d),未合并其他部位骨折;均采用改良Brostr?m术式,应用美国足踝外科医师协会(American Orthopaedic Foot and Ankle Society, AOFAS)踝与后足功能评分系统评价其术前及术后6、18个月的踝关节功能。结果 18例病人的平均随访时间为15.6个月(12~24个月),随访期间未见骨折移位、关节不稳及距下关节活动范围受限,未发生皮肤坏死、切口感染及深静脉血栓形成,2例发生关节僵硬(2/18,11.1%)。术前及术后6、18个月的AOFAS评分分别为(57.05±5.91)分、(85.23±3.42)分、(92.73±2.79)分,术后6个月及18个月的AOFAS功能评分均较术前明显提高,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论带线锚钉治疗外踝撕脱骨折合并外侧副韧带损伤能够恢复踝关节解剖结构,提供生物力学支持,可早期进行功能锻炼。

关键词：踝关节外侧副韧带锚钉撕脱骨折

高效绿色荧光蛋白基因修饰前软骨干细胞与骨基质明胶复合体异位成软骨的研究

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中华实验外科杂志 2011年第7期28卷 1036-1038页

作者：游洪波陈安民孙凯王国宾王茂朋张国良华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科武汉430030

目的观察高效绿色荧光蛋白（EGFP）基因修饰前软骨干细胞（PSCs）与骨基质明胶（BMG）复合体的成软骨活性。方法EGFP基因转染PSCs得到EGFP基因修饰PSCs。将其与BMG的复合体体外培养后植入裸鼠右后肢肌袋中，左后肢植入BMG作对照。定期... 详细信息

目的观察高效绿色荧光蛋白（EGFP）基因修饰前软骨干细胞（PSCs）与骨基质明胶（BMG）复合体的成软骨活性。方法EGFP基因转染PSCs得到EGFP基因修饰PSCs。将其与BMG的复合体体外培养后植入裸鼠右后肢肌袋中，左后肢植入BMG作对照。定期取材测定移植物的重量、细胞数，观察GFP表达，免疫组织化学检测Ⅱ型胶原表达。结果EGFP基因修饰PSCs体外培养6周仍有较强GFP表达。移植后1～6周均有较强GFP表达，3～6周有较强Ⅱ型胶原表达。移植后2～6周复合体平均重量分别为（0．71±0．07）、（1．35±0．32）、（1．76±0．48）、（1．96±0．54）、（1．89±0．13）g，均比对照组重（P〈0．01）；1～6周时复合体平均所含细胞总数分别为（40．0±2．1）×10^6、（67．0±5．6）×10^6、（139．0±11．2）×10^6、（169．0±2．9）×10^6、（173．0±13．5）×10^6、（169．0±6．9）×10^6个，均大于对照组（P〈0．01）。结论EGFP基因修饰PSCs与BMG复合体能在异位形成软骨组织。

关键词：前软骨干细胞基因转染骨基质明胶

带蒂肌腱成形术联合缝线锚钉综合治疗青少年复发性髌骨脱位

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临床和实验医学杂志 2013年第17期12卷 1408-1409页

作者：袁雪峰游洪波赵文斌王茂朋张国良李文凯楚翔宇郭鑫华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科湖北武汉430074

目的探讨带蒂肌腱成形术联合缝线锚钉综合治疗青少年复发性髌骨脱位的手术方法和临床疗效。方法采用带蒂肌腱成形术联合锚钉技术综合治疗青少年复发性髌骨脱位22例24膝。结果所有患者均得到随访,无髌骨再脱位发生,恐惧试验阴性,髌骨倾... 详细信息

目的探讨带蒂肌腱成形术联合缝线锚钉综合治疗青少年复发性髌骨脱位的手术方法和临床疗效。方法采用带蒂肌腱成形术联合锚钉技术综合治疗青少年复发性髌骨脱位22例24膝。结果所有患者均得到随访,无髌骨再脱位发生,恐惧试验阴性,髌骨倾斜试验对称,膝关节屈伸功能正常。Lysholm评分术前(58.5±4.3)分,术后1年(92.6±3.7)分。术后疗效按Insall标准评价:优12例(13膝),良8例(8膝),可2例(3膝)。优良率为87.5%。结论采用带蒂肌腱成形术联合缝线锚钉综合治疗青少年复发性髌骨脱位,获得了有效的动力重建,疗效肯定,适用于术后早期功能锻炼,有并发症少、不易复发等优点。

关键词：青少年髌骨脱位复发性髌骨脱位缝线锚钉综合术式