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作者：王翠喆石河子大学

学位级别：硕士

目的本研究在建立人体肥胖网膜脂肪组织研究队列、构建高脂饮食诱导肥胖大鼠模型以及体外培养脂肪细胞的基础上,观察高水平FFA对脂肪细胞TLR9/KLF4及NF-κB炎症信号通路关键因子表达的影响,探讨TLR9/KLF4在FFA诱发的脂肪细胞炎症反应过... 详细信息

目的本研究在建立人体肥胖网膜脂肪组织研究队列、构建高脂饮食诱导肥胖大鼠模型以及体外培养脂肪细胞的基础上,观察高水平FFA对脂肪细胞TLR9/KLF4及NF-κB炎症信号通路关键因子表达的影响,探讨TLR9/KLF4在FFA诱发的脂肪细胞炎症反应过程中的作用及可能的机制。方法选取受试个体正常组(Normal Control,NC)50例、肥胖组(Obese,OB)45例,检测一般资料和生化指标。Wistar健康雄性大鼠32只,分别正常饮食和高脂饮食喂养,诱导肥胖模型。高脂饮食喂养至第4、10周检测大鼠血脂、血糖水平。在体外培养3T3-L1前脂肪细胞,诱导分化为成熟的脂肪细胞后用油红O染色鉴定。不同浓度棕榈酸PA(0μM、0.2μM、2μM、20μM、100μM、200μM)刺激脂肪细胞,同时运用si-RNA技术下调TLR9/KLF4、p IRES2-KLF4-Zs Green1上调KLF4、慢病毒感染脂肪细胞上调TLR9。q RT-PCR和Western Blot技术检测动物、人体网膜脂肪组织及脂肪细胞中TLR9、KLF4及NF-κB炎症信号通路关键因子m RNA和蛋白表达水平,Elisa法检测血浆及上清液中炎症因子释放水平。BSP技术检测肥胖个体网膜脂肪组织KLF4基因DNA甲基化情况。结果1.人体组织实验(1)受试个体一般资料、血脂及血浆炎症因子水平比较OB组体质量、WC、HC、WHR、BMI、TG、LDL和TNF-α水平显著高于NC组,而APN水平显著低于NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)受试个体网膜脂肪组织关键因子m RNA及蛋白表达水平OB组TLR9和KLF4 m RNA及蛋白表达水平显著低于NC组(P<0.05),APN m RNA及蛋白表达水平低于NC组。OB组P65(NF-κB活性亚单位)、TNF-α和IL-6 m RNA及蛋白表达水平显著高于NC组(P<0.05)。(3)TLR9/KLF4表达与血脂水平及炎症信号通路关键因子表达相关性分析TLR9 m RNA表达水平与HDL、MYD88、SRC和KLF4显著正相关(P<0.05);KLF4m RNA表达水平与BMI、TG和TNF-α显著负相关(P<0.05),而与NF-κB显著正相关(P<0.05)。(4)正常和肥胖个体网膜脂肪组织DNA甲基转移酶(DNA Methyltranseferase,DNMTs)表达及KLF4基因甲基化阳性率比较OB组(n=45)DNMT1、DNMT3a和DNMT3b m RNA表达水平显著高于NC组(n=50)(P<0.05)。OB组KLF4基因启动子区甲基化阳性率(n=20,10.429%)显著高于正常个体(n=20,5.714%)(P<0.01)。OB组KLF4基因启动子区Cp G3和Cp G4位点甲基化阳性率显著高于NC组(P<0.01)。2.动物实验(1)成功构建肥胖大鼠模型高脂饮食喂养至第4周,实验组大鼠体重开始显著高于对照组(P<0.05)。高脂饮食喂养至第10周实验组大鼠体重进入平台期,但仍显著高于对照组(P<0.01)。此时,实验组大鼠体重(403.00±50.38)g已经超过对照组大鼠(318.50±38.07)g的20%;且实验组大鼠Lee’s指数(337.10±4.72)显著高于对照组大鼠(323.42±4.72)(P<0.01)。实验组大鼠腰围显著高于正常组大鼠(19.88±0.48 vs 17.58±0.30,P<0.01)。实验组大鼠网膜脂肪组织含量多于正常组大鼠,并且伴有脂肪肝的形成。(2)两组大鼠血糖、血脂、脂肪细胞因子及炎症因子水平比较高脂饮食喂养至第4周,实验组大鼠FFA、TG、TC和LDL水平显著高于对照组(P<0.05);高脂饮食喂养至第10周,实验组大鼠Glu、TG、FFA和炎症因子TNF-α水平显著高于对照组,而抗炎因子LPT和APN水平显著低于对照组(P<0.05)。(3)网膜脂肪组织炎症信号通路关键因子m RNA表达差异实验组大鼠网膜脂肪组织TLR9、MYD88、KLF4和NF-κB m RNA表达水平低于对照组;SRC和IL-6 m RNA表达水平高于对照组。(4)网膜脂肪组织炎症信号通路关键因子相关性分析血浆FFA水平与TLR9 m RNA表达水平负相关,与TNF-α水平显著正相关(P<0.05);KLF4与TLR9 m RNA表达水平显著正相关(P<0.05)。3.体外细胞实验(1)3T3-L1脂肪细胞的培养及分化未诱导分化的3T3-L1细胞呈梭形,胞浆中无脂滴;诱导分化至第8天,90%以上细胞均分化成熟,有较多的脂滴聚集。油红O染色结果显示,脂肪细胞中的脂滴染成红色,成功诱导3T3-L1细胞分化为脂肪细胞。(2)检测KLF4对下游炎症因子的调控作用下调KLF4后

关键词：肥胖脂肪细胞游离脂肪酸 TLR9/KLF4 炎症

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KLF9和KLF15在维吾尔族网膜脂肪中的表达及其与炎症相关性分析

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中国免疫学杂志 2016年第11期32卷 1653-1656,1660页

作者：王翠喆哈晓丹谢建新许彭李伟张君石河子大学医学院新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院检验科石河子832000

目的:检测维吾尔族网膜脂肪组织KLF9及KLF15 m RNA表达水平,分析KLF9、KLF15与炎症信号通路关键因子的相关性。方法:选取维吾尔族个体NC组50例、OB组45例,检测一般资料和生化指标。采集网膜脂肪组织,RT-PCR法检测KLF9、KLF15及NF-κB炎... 详细信息

目的:检测维吾尔族网膜脂肪组织KLF9及KLF15 m RNA表达水平,分析KLF9、KLF15与炎症信号通路关键因子的相关性。方法:选取维吾尔族个体NC组50例、OB组45例,检测一般资料和生化指标。采集网膜脂肪组织,RT-PCR法检测KLF9、KLF15及NF-κB炎症信号通路关键因子m RNA表达水平。结果:OB组BMI、WC、HC、WHR、TG和LDL显著高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。维吾尔族网膜脂肪组织中,OB组NF-κB、TNF-α和IL-6 m RNA表达水平显著高于NC组(P<0.05),NF-κB m RNA表达与体重和TG显著正相关(P<0.05),TNF-αm RNA表达与TG和TC显著正相关(P<0.05),IL-6 m RNA表达与HC、TG和LDL显著正相关(P<0.05);OB组网膜脂肪组织KLF15 m RNA表达水平显著低于NC组(P<0.05),与BMI、WC、WHR显著负相关(P<0.05),与HDL正相关,与TG负相关。KLF9 m RNA表达水平高于NC组,与NF-κB显著正相关(P<0.01),与IL-6正相关。结论:KLF15可能通过调控脂代谢发挥抗炎作用;肥胖状态下脂代谢紊乱可能间接上调KLF9的表达,而KLF9作为转录激活因子可能通过调控下游炎症因子的转录活性,从而促进炎症因子的表达和释放。

关键词：维吾尔族网膜脂肪组织 KLF9 KLF15 炎症

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KLF4、KLF7在大鼠网膜脂肪组织中的表达与炎症的相关性研究

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免疫学杂志 2016年第3期32卷 204-209页

作者：王翠喆哈晓丹李伟许彭顾雅娟王淼谢建新张君石河子大学医学院新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室 832000 第一附属医院检验科

目的检测肥胖大鼠网膜脂肪组织KLF4及KLF7 m RNA表达水平,分析其与炎症的相关性。方法 Wistar健康雄性大鼠高脂喂养,诱导肥胖模型。高脂喂养后第4、10周检测大鼠血脂、血糖水平;ELISA法测定血浆中TNF-α、LPT、APN水平;10周后,q RT-PCR... 详细信息

目的检测肥胖大鼠网膜脂肪组织KLF4及KLF7 m RNA表达水平,分析其与炎症的相关性。方法 Wistar健康雄性大鼠高脂喂养,诱导肥胖模型。高脂喂养后第4、10周检测大鼠血脂、血糖水平;ELISA法测定血浆中TNF-α、LPT、APN水平;10周后,q RT-PCR法检测网膜脂肪组织KLF4、KLF7及NF-κB炎症信号通路关键因子m RNA表达水平。结果高脂喂养4周后,实验组大鼠体质量开始显著高于对照组,第10周实验组大鼠体质量进入平台期,但仍高于对照组(P<0.05)。高脂喂养第4及第10周,实验组大鼠血浆FFA、Glu、TG、TC、LDL、TNF-α水平高于对照组,LPT、APN水平低于对照组(P<0.05)。网膜脂肪组织中,实验组TLR9、KLF4 m RNA表达水平低于对照组,KLF7、SRC和IL-6 m RNA表达水平高于对照组;TLR9与血浆FFA负相关,与KLF4正相关;KLF4与SRC、NF-κB负相关;KLF7与TLR4、SRC、NF-κB和IL-6正相关,与KLF4负相关(P<0.05)。结论肥胖状态下,高水平的FFA一方面可与TLR4结合上调KLF7表达,促进炎症因子表达,导致释放组织发生炎症;同时,可抑制TLR9水平而下调KLF4表达,减弱KLF4对炎症信号通路关键因子的抑制作用,从而促进炎症反应。

关键词：肥胖大鼠网膜脂肪组织 KLF4 KLF7 炎症

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基于生物信息学对SLC25A21下游靶基因的筛选及验证

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遗传 2024年第12期46卷 1055-1065页

作者：陈瑶温馨袁芳媛彭钞灵王翠喆张君孟平平石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子832000

溶质载体家族25成员21(solute carrier 25 member 21,SLC25A21)是氧代二羧酸盐载体,其主要功能是通过反向交换机制将胞浆内的2-氧代己二酸转运至线粒体。前期研究发现,在过表达SLC25A21的3T3-L1细胞中葡萄糖消耗能力显著增加。为进一步... 详细信息

溶质载体家族25成员21(solute carrier 25 member 21,SLC25A21)是氧代二羧酸盐载体,其主要功能是通过反向交换机制将胞浆内的2-氧代己二酸转运至线粒体。前期研究发现,在过表达SLC25A21的3T3-L1细胞中葡萄糖消耗能力显著增加。为进一步挖掘SLC25A21下游关键代谢基因,本研究在3T3-L1细胞中上调SLC25A21表达,利用高通量测序结合生物信息学分析获得差异表达基因,并通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证关键基因表达。结果显示:(1)过表达SLC25A21的脂肪细胞中有26个上调基因,66个下调基因;(2)基因本体论(gene ontology,GO)分析表明,差异表达基因的生物学功能主要涉及脂质合成和代谢过程;京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)和基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)表明,差异表达基因主要富集在鞘脂代谢、胰岛素和胰高血糖素样肽1分泌和合成等信号通路;(3)CytoHubba筛选出GRB2、SOS1、SHC1、CBL、HRAS、SOS2、EGFR、MET、PLCG2和KRAS等10个评分最高的关键基因,主要参与了细胞的糖、脂代谢过程;(4)在脂肪细胞中过表达SLC25A21,qRT-PCR验证结果表明除KRAS表达无明显变化外,其余基因的mRNA表达水平均出现相应的增高。本研究结果将为今后深入研究SLC25A21在糖、脂代谢过程中的作用及机制提供理论依据。

关键词： SLC25A21 生物信息学差异表达基因筛选及验证

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多元化教学方法对《临床基础检验学技术》教学中的探索与实践

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教育现代化 2019年第86期 229-230页

作者：李伟张君王翠喆石河子大学医学院第一附属医院检验科

《临床基础检验学技术》作为一门实践性和技能性很强的学科,要求学生在掌握扎实的医学基本理论、基础知识、基本技能的同时,熟练掌握医学检验的专业理论和操作技能。我们引入多元化教学模式,激发该专业教学热情、巩固学生理论知识、提... 详细信息

《临床基础检验学技术》作为一门实践性和技能性很强的学科,要求学生在掌握扎实的医学基本理论、基础知识、基本技能的同时,熟练掌握医学检验的专业理论和操作技能。我们引入多元化教学模式,激发该专业教学热情、巩固学生理论知识、提高学生技能水平和团队意识、提高教师教学质量,从而引导教学模式和方法的创新改革,从而培养符合当今社会需求的高素质医学检验专业人才。

关键词：多元化教学模式临床基础检验学影响

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医学遗传学课程教学内容整合初探

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西部素质教育 2019年第6期5卷 172-173页

作者：张君王翠喆李伟石河子大学医学院医学遗传学教研室新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院检验科新疆石河子832002

文章探讨了医学遗传学课程教学内容的整合,首先分析了医学遗传学课程教学内容存在的问题,然后提出了教学内容整合方案,最后阐述了医学遗传学课程教学内容整合后的效果,包括课程体系更加系统化;基础与临床的结合更加紧密;最大限度激发学... 详细信息

文章探讨了医学遗传学课程教学内容的整合,首先分析了医学遗传学课程教学内容存在的问题,然后提出了教学内容整合方案,最后阐述了医学遗传学课程教学内容整合后的效果,包括课程体系更加系统化;基础与临床的结合更加紧密;最大限度激发学生的学习兴趣。

关键词：医学遗传学课程教学内容课程体系

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《医学遗传学》一类课程建设体会

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农垦医学 2018年第6期40卷 567-568页

作者：王翠喆张君李伟石河子大学医学院医学遗传学教研室新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院检验科新疆石河子832008

《医学遗传学》是生命科学领域重要课程之一,课程建设是搞好教学的必备条件。石河子大学《医学遗传学》一类课程建设项目取得了较好的成效。本文就《医学遗传学》课程建设中的个人体会进行总结。

关键词：医学遗传学一类课程建设体会

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浅析压力对研究生教育的科学道德与学风建设的影响

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教育现代化 2019年第17期 194-196页

作者：张君王翠喆李伟石河子大学医学院

近年来,我国提出了"建设世界一流大学"的目标,高校也采取了相应的措施来提升自身的科研学术水平,高校科研工作者的压力也不断增大,尤其对研究生的要求越来越高。在中国教育背景下,明确科研压力对高校研究生教育的科学道德与学风建设的... 详细信息

近年来,我国提出了"建设世界一流大学"的目标,高校也采取了相应的措施来提升自身的科研学术水平,高校科研工作者的压力也不断增大,尤其对研究生的要求越来越高。在中国教育背景下,明确科研压力对高校研究生教育的科学道德与学风建设的影响有着重要的意义。本文旨在综述高校教师和在校研究生如何把控高强度压力下研究生教育的科学道德与学风建设问题。

关键词：高校教师在校研究生压力研究生教育科学道德学风建设

来源：博看期刊

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《医学遗传学》课程评价构成比例变化对学生成绩影响的分析

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教育现代化 2019年第13期 191-193页

作者：王翠喆张君李伟石河子大学医学院医学遗传学教研室

医学遗传学是生命科学领域重要的基础学科,但我院医学生由于种种原因,基础参差不齐、课时设置不同等对医学遗传学的掌握并不理想,学生不能有效地巩固所学知识,导致知识点遗忘。因此,本教研室在《医学遗传学》课程终末评价中,增加了10%... 详细信息

医学遗传学是生命科学领域重要的基础学科,但我院医学生由于种种原因,基础参差不齐、课时设置不同等对医学遗传学的掌握并不理想,学生不能有效地巩固所学知识,导致知识点遗忘。因此,本教研室在《医学遗传学》课程终末评价中,增加了10%的平时成绩。本文就成绩构成改革是否能够提升学生成绩作出评价与探讨。成绩构成改革提高了学生的主观能动性,使学生成绩的平均分、优秀率和及格率均有所提升。

关键词：医学遗传学成绩构成变化成绩分析

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多元化考核方式在《医学遗传学》教学中的应用及思考

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农垦医学 2018年第6期40卷 561-562页

作者：张君李伟王翠喆石河子大学医学院医学遗传学教研室新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院检验科新疆石河子832008

多元化考核方式应用于《医学遗传学》,可以评价学生学习效果,进而反映教师的教学水平。通过多元化考核既可提高学生学习效率,又能拓宽教师专业知识面,从而推动师资建设,促进教学质量提高;教师根据学生反馈,不断优化考核方式,激励学生主... 详细信息

多元化考核方式应用于《医学遗传学》,可以评价学生学习效果,进而反映教师的教学水平。通过多元化考核既可提高学生学习效率,又能拓宽教师专业知识面,从而推动师资建设,促进教学质量提高;教师根据学生反馈,不断优化考核方式,激励学生主动学习。如何建立更完善的考核方式是《医学遗传学》教学者不断努力探索的方向。

关键词：多元化考核医学遗传学教学质量

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