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候选抑癌靶标FEN1在口腔鳞癌的表达验证及生物学特性研究

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候选抑癌靶标FEN1在口腔鳞癌的表达验证及生物学特性研究

2018年中华口腔医学会第十次全国口腔黏膜病学术大会暨第八次全国口腔中西医结合学术大会

作者：王翔剑孙珺周红梅口腔疾病研究国家重点实验室四川大学华西口腔医院口腔黏膜病科重庆医科大学口腔医院

目的:采用系统生物学预测的抑癌靶标瓣状核酸内切酶1(FEN1)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)中的表达及其生物学功能尚未明确。因此,本研究拟验证FEN1在OSCC细胞株中的表达,并探究其生物学功能及可能机制。方法:(1... 详细信息

目的:采用系统生物学预测的抑癌靶标瓣状核酸内切酶1(FEN1)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)中的表达及其生物学功能尚未明确。因此,本研究拟验证FEN1在OSCC细胞株中的表达,并探究其生物学功能及可能机制。方法:(1)采用qRT-PCR和WB分别检测FEN1在4株OSCC细胞和2株正常上皮细胞中的表达;(2)采用RNA干扰、慢病毒载体构建等技术研究Cal-27细胞FEN1基因沉默后细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期及裸鼠移植瘤增殖能力的变化;(3)采用RNA干扰等技术研究FEN1异常表达的可能分子机制。结果:(1)FEN1在OSCC细胞中的mRNA和蛋白表达水平均较对照组增高(P <0.05);(2)FEN1基因沉默后Cal-27细胞体外增殖抑制、细胞阻滞、凋亡增高、裸鼠体内的增殖能力下降(P <0.05);(3)bFGF基因沉默后FEN1的mRNA和蛋白表达水平均下调(P <0.05)。结论:FEN1可作为OSCC潜在的抑癌靶标。

关键词：瓣状核酸内切酶1 口腔鳞状细胞癌 RNA干扰慢病毒验证

FEN1基因沉默对口腔鳞癌细胞表面抗原和PD-L1表达的影响效应及机制研究

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FEN1基因沉默对口腔鳞癌细胞表面抗原和PD-L1表达的影响效应及机...

2018年中华口腔医学会第十次全国口腔黏膜病学术大会暨第八次全国口腔中西医结合学术大会

作者：王翔剑罗晶晶周红梅口腔疾病研究国家重点实验室四川大学华西口腔医院口腔黏膜病科

目的:本实验拟探究瓣状核酸内切酶1 (FEN1)基因沉默对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞表面抗原和PD-L1表达的影响效应,并阐明其调节机制。方法:(1)采用流式细胞术和qRT-PCR分别检测PD-L1在4株OSCC细胞和2株正常上皮细胞中的表达;(2)采用慢病... 详细信息

目的:本实验拟探究瓣状核酸内切酶1 (FEN1)基因沉默对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞表面抗原和PD-L1表达的影响效应,并阐明其调节机制。方法:(1)采用流式细胞术和qRT-PCR分别检测PD-L1在4株OSCC细胞和2株正常上皮细胞中的表达;(2)采用慢病毒载体构建、流式细胞术等技术探究FEN1基因沉默对Cal-27细胞表面HLA-DR和PD-L1表达的影响及调节机制。结果:(1)PDL1蛋白在OKF4、Cal-27、SCC-25三种细胞表面呈阳性表达,且PD-L1mRNA在Cal-27细胞表达最高;(2)FEN1基因沉默可诱导Cal-27细胞表面HLA-DR的表达、使其DNA双链断裂和上调CIITA mRNA的表达,并下调细胞表面PDL1蛋白和IRF1总蛋白的表达(P <0.05)。结论:FEN1基因沉默可通过诱导OSCC细胞出现DNA损伤以及上调CIITA基因的表达,诱导细胞表面抗原的表达;FEN1基因沉默可通过下调IRF1蛋白表达,从而抑制OSCC细胞表面PD-L1蛋白的表达。

关键词：瓣状核酸内切酶1 口腔鳞状细胞癌 PD-L1 DNA损伤表面抗原

他克莫司软膏治疗顽固性糜烂型口腔扁平苔藓的利弊分析

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实用医院临床杂志 2014年第3期11卷 11-14页

作者：王翔剑周红梅四川大学华西口腔医院口腔黏膜科

口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是一种常见的口腔黏膜慢性炎性疾病,部分糜烂型OLP对糖皮质激素治疗不敏感甚至无效。他克莫司软膏是一种免疫抑制类局部制剂,学者们用于治疗顽固性糜烂型OLP取得一定疗效,但同时也发现一些值得注... 详细信息

口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是一种常见的口腔黏膜慢性炎性疾病,部分糜烂型OLP对糖皮质激素治疗不敏感甚至无效。他克莫司软膏是一种免疫抑制类局部制剂,学者们用于治疗顽固性糜烂型OLP取得一定疗效,但同时也发现一些值得注意的问题。本文对他克莫司软膏用于治疗顽固性糜烂型OLP的利弊进行分析,为临床医师更合理地应用该类制剂提供参考。

关键词：口腔扁平苔藓他克莫司软膏糜烂型利弊

口服β-胡萝卜素对口腔扁平苔藓广泛白纹损害的消除效果观察

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口服β-胡萝卜素对口腔扁平苔藓广泛白纹损害的消除效果观察

2018年中华口腔医学会第十次全国口腔黏膜病学术大会暨第八次全国口腔中西医结合学术大会

作者：王翔剑史雪珂汪玉红周红梅四川大学华西口腔医院口腔黏膜病科口腔黏膜病国家临床重点专科空军军医大学口腔医学院

目的:口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)的广泛白色损害往往难自愈,患者有不同程度的粗糙、紧绷、刺激痛等症状。本研究拟观察口服β-胡萝卜素对OLP广泛白纹损害的消除效果和安全性。方法:采用随机、对照、盲法评估的临床试验设计,... 详细信息

目的:口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)的广泛白色损害往往难自愈,患者有不同程度的粗糙、紧绷、刺激痛等症状。本研究拟观察口服β-胡萝卜素对OLP广泛白纹损害的消除效果和安全性。方法:采用随机、对照、盲法评估的临床试验设计,根据纳入和排除标准共收集74例OLP,随机分配入试验组(口服β-胡萝卜素胶囊6个月)和对照组(口服维生素E软胶囊6个月),分别于治疗前、用药6月记录白纹面积、角化程度分值、疼痛指数及不良反应。结果:试验组与对照组相比,前者对OLP白纹面积、角化程度均有显著的改善作用(P0.05)。试验组有3例轻微不良反应,停药后可自行消退。结论:β-胡萝卜素可作为消除OLP广泛白色损害的安全有效的治疗药物选择。

关键词：口腔扁平苔藓 β-胡萝卜素白纹损害消斑安全性

口服β-胡萝卜素治疗非糜烂型口腔扁平苔藓的随机对照试验研究

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国际口腔医学杂志 2022年第6期49卷 633-640页

作者：张沈懿王翔剑石黎冉石佳鸿汪玉红周红梅口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心口腔医学+前沿医学创新中心四川大学华西口腔医院口腔黏膜病科成都610041 浙江大学医学院附属第二医院口腔内科杭州310009 空军军医大学口腔医院口腔黏膜病科西安710032

目的设计并实施一项随机对照临床试验,以明确口服β-胡萝卜素治疗非糜烂型口腔扁平苔藓(OLP)的疗效及安全性。方法将74例临床表现为广泛白色病损的非糜烂型OLP患者随机分为2组。试验组(38例)口服β-胡萝卜素软胶囊,每次6 mg,每天1次;对... 详细信息

目的设计并实施一项随机对照临床试验,以明确口服β-胡萝卜素治疗非糜烂型口腔扁平苔藓(OLP)的疗效及安全性。方法将74例临床表现为广泛白色病损的非糜烂型OLP患者随机分为2组。试验组(38例)口服β-胡萝卜素软胶囊,每次6 mg,每天1次;对照组(36例)口服维生素E软胶囊,每次100 mg,每天1次。2组的疗程均为6个月。于治疗前、用药3个月、用药6个月分别记录白色病损面积、角化程度、疼痛指数及不良反应。白色病损基本消退者进入复发观察阶段。结果用药3个月和6个月后,β-胡萝卜素组在改善白纹面积(3个月和6个月均P0.05)。2组均未发生严重不良反应。2组复发率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论β-胡萝卜素可以作为一种安全有效的替代药物治疗非糜烂型OLP。

关键词：口腔扁平苔藓 β-胡萝卜素维生素E 白纹病损非糜烂型

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候选抑癌靶标FEN1在口腔鳞癌的表达再验证及生物学特性研究

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候选抑癌靶标FEN1在口腔鳞癌的表达再验证及生物学特性研究

中华口腔医学会第十三次全国口腔粘膜病学暨第十一次全国口腔中西医结合学术大会

作者：曾庆祥王翔剑吴芳龙周红梅口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心口腔医学+前沿医学创新中心四川大学华西口腔医院口腔黏膜病科浙江大学医学院附属第二医院

目的:本课题组前期发现抑癌靶标瓣状核酸内切酶1(Flap endonuclease-1,FEN1)具有促进口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞体外增殖的作用。因此,本研究拟在前期研究基础上增加细胞株种类,对FEN1在OSCC细胞的表达水... 详细信息

目的:本课题组前期发现抑癌靶标瓣状核酸内切酶1(Flap endonuclease-1,FEN1)具有促进口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞体外增殖的作用。因此,本研究拟在前期研究基础上增加细胞株种类,对FEN1在OSCC细胞的表达水平进行再验证,初步探讨FEN1在OSCC细胞株表达的可能调控机制,并通过裸鼠移植瘤模型实验,研究FEN1对OSCC细胞体内增殖能力的影响,为FEN1作为OSCC潜在的治疗靶点提供理论依据和实验基础。方法:(1)采用Real-Time PCR和Western Blot分别检测FEN1在4株OSCC细胞和2株正常上皮细胞中的m RNA和蛋白表达水平;(2)采用RNA干扰技术实现OSCC细胞FEN1基因的转录后沉默,并研究细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期的变化;(3)采用RNA干扰、Real-Time PCR、Western Blot等技术研究OSCC细胞中FEN1异常表达的可能分子机制;(4)采用慢病毒载体构建稳定低表达FEN1的OSCC细胞株,并建立裸鼠移植瘤模型,观察实现FEN1基因沉默后对裸鼠移植瘤增殖能力的影响。结果:(1)FEN1在OSCC细胞中的mRNA和蛋白水平均较正常上皮细胞显著增高,与本课题组前期验证结果一致;(2)应用干扰RNA实现了Cal-27细胞中FEN1基因的转录后沉默,FEN1基因沉默后Cal-27细胞体外增殖受到抑制、细胞凋亡显著增高,细胞周期阻滞;(3)沉默bFGF基因可有效抑制FEN1在OSCC细胞中mRNA和蛋白的表达水平;(4)成功建立LV-FEN1-shRNA稳定表达的Cal-27细胞株,且沉默FEN1基因可有效抑制OSCC细胞在体内的增殖能力。结论:FEN1在OSCC细胞株中过表达,沉默FEN1基因可抑制细胞生长增殖并促进细胞凋亡;bFGF基因可能对FEN1的表达具有一定的调控作用,而沉默FEN1可有效抑制OSCC细胞体内增殖能力。因此,FEN1可作为OSCC潜在的抑癌靶标。

关键词：瓣状核酸内切酶1 口腔鳞状细胞癌表达水平细胞增殖裸鼠移植瘤模型

口服β-胡萝卜素对口腔扁平苔藓白纹损害的消除效果及安全性观察

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口服β-胡萝卜素对口腔扁平苔藓白纹损害的消除效果及安全性观察

中华口腔医学会第十三次全国口腔粘膜病学暨第十一次全国口腔中西医结合学术大会

作者：邓舒之史雪珂王翔剑汪玉红周红梅四川大学华西口腔医院口腔黏膜病科口腔黏膜病国家临床重点专科浙江大学医学院附属第二医院口腔内科第四军医大学口腔医学院口腔黏膜病科

目的:口腔扁平苔藓(OLP)常表现为口腔黏膜白纹角化病损。维甲酸类制剂虽能较好消除口腔黏膜角化病损,但有较大毒副作用且停药后病损易复发反跳。目前尚未见安全有效消除OLP白纹损害的相关报道。本研究首次评估了口服β-胡萝卜素对OLP白... 详细信息

目的:口腔扁平苔藓(OLP)常表现为口腔黏膜白纹角化病损。维甲酸类制剂虽能较好消除口腔黏膜角化病损,但有较大毒副作用且停药后病损易复发反跳。目前尚未见安全有效消除OLP白纹损害的相关报道。本研究首次评估了口服β-胡萝卜素对OLP白纹损害的消除效果和安全性。方法:采用随机、对照、盲法评估的临床试验设计,共收集74例斑纹型OLP,随机分配入试验组(口服β-胡萝卜素6个月)和对照组(口服维生素E 6个月),分别于治疗前、用药1月、3月、6月记录白纹面积、角化程度分值、疼痛指数及不良反应。结果:试验组与对照组相比,前者对OLP白纹面积、角化程度均有显著的改善作用(P=0.012*;P=0.002**),但两组在改善疼痛程度方面无显著差异(P>0.05)。试验组有3例轻微不良反应,停药后可自行消退。结论:通过多项指标对疗效进行观察,本研究结果表明,β-胡萝卜素可作为消除OLP白纹损害的安全药物选择之一。

关键词：口腔扁平苔藓 β-胡萝卜素白纹病损消斑安全性

舌腹顽固性糜烂癌变危险性的无创准确预测一例报道--浅析口腔潜在恶性病变的临床管理模式

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中国口腔医学继续教育杂志 2019年第6期22卷 331-334页

作者：王翔剑曾庆祥危常磊林梅周红梅四川大学华西口腔医院口腔黏膜病科浙江大学医学院附属第二医院口腔内科

目的:阐明对久治不愈的口腔黏膜病损进行癌变危险性无创预测的重要性.并介绍口腔潜在恶性病变的无创筛查流程及临床管理模式。材料与方法:接诊1例因舌腹发红溃烂长期辗转医治无效的病例.及时联用自体荧光光谱、甲苯胺蓝染色.细胞刷活检... 详细信息

目的:阐明对久治不愈的口腔黏膜病损进行癌变危险性无创预测的重要性.并介绍口腔潜在恶性病变的无创筛查流程及临床管理模式。材料与方法:接诊1例因舌腹发红溃烂长期辗转医治无效的病例.及时联用自体荧光光谱、甲苯胺蓝染色.细胞刷活检等无(微)创技术进行综合评估.结果提示其癌变危险性较高。遂会同颌面外科专家会诊,切取左舌腹红色及糜烂病损行组织活检.病理结果为原位癌。随后患者入院行扩大切除手术治疗。结果:术后对患者进行为期5年多的临床管理.采用无创技术实时监测其复发风险.从而有效控制了原病损的癌变进程.病情稳定无复发。

关键词：甲苯胺蓝染色口腔黏膜病专家会诊舌腹组织活检颌面外科细胞刷切除手术

FEN1在口腔癌相关成纤维细胞中的表达及其与PCNA的关系

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口腔疾病防治 2018年第6期26卷 354-359页

作者：吴杨梅颖颖高庆红李小玉王翔剑周红梅口腔疾病研究国家重点实验室四川大学华西口腔医院口腔黏膜病科四川成都610041 四川大学华西口腔医院口腔颌面外科四川成都610041 口腔疾病研究国家重点实验室四川大学华西口腔医院四川成都610041

目的检测瓣状核酸内切酶1(flap endonuclease-1,FEN1)及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在口腔癌相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)中的表达水平,并分析两者表达水平的相关性。方法选取新鲜的口腔鳞状细胞癌组织块和因口腔颌面部整形手术切除的正常口腔黏膜组织块,采用组织块贴壁法培养原代口腔CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)并行免疫细胞化学染色鉴定;并分成CAFs组和NFs组,分别采用Western blot和PCR检测口腔CAFs和NFs中FEN1、PCNA蛋白表达水平及m RNA水平,并对FEN1、PCNA的表达水平做相关性分析。结果成功培养并鉴定口腔CAFs和NFs各12株,FEN1、PCNA的m RNA和蛋白表达水平在口腔CAFs组均高于NFs组,但差异均无统计学意义(P>0.05);在口腔CAFs中,FEN1与PCNA在m RNA水平呈正向的强相关性(r=0.677,P=0.016),而两者的蛋白表达水平无相关性(P>0.05)。结论在口腔CAFs中FEN1和PCNA的m RNA和蛋白表达水平与NFs组相比均无统计学差异,但CAFs中的FEN1与PCNA二者在m RNA水平呈正向强相关,两种基因在口腔CAFs中的相互关系及调节机制尚需进一步研究。

关键词：癌相关成纤维细胞瓣状核酸内切酶1 增殖细胞核抗原表达水平口腔

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